PLATELIA™ TOXO IgM 96 PRUEBAS

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DETECCIÓN CUALITATIVA DE ANTICUERPOS IgM ANTI-TOXOPLASMA GONDII, EN SUERO O PLASMA HUMANO, POR MÉTODO INMUNOENZIMÁTICO

1. CAMPO DE APLICACIÓN Platelia™ Toxo IgM es una prueba inmunoenzimática por inmunocaptura para la detección cualitativa de anticuerpos IgM dirigidos contra T. gondii en suero o plasma humano.

2. INTERÉS CLÍNICO T. gondii es un protozoario capaz de infectar a numerosas especies de mamíferos y pájaros. Estas infecciones, habituales en el hombre y en los animales, se desarrollan generalmente de forma inapreciable desde el punto de vista clínico. La prevalencia de esta infección en la población, detectada por la presencia de anticuerpos específicos en el suero, varía en función de la región y de la edad. En caso de una primoinfección de la madre durante el embarazo, esta infección puede provocar graves secuelas en el feto (en especial, una alteración de las funciones cerebrales) o un aborto. La inmunidad antigua de la madre, demostrada mediante la presencia de anticuerpos IgG al inicio del embarazo, protege al feto de la infección por este parásito. La segunda población sensible a esta infección está representada por lospacientes inmunodeprimidos, como los enfermos afectados de SIDA. Estas infecciones se deben, casi exclusivamente, a una infección a partir de un foco parasitario (quiste) quiescente del paciente, cuya existencia es previa a la infección por el virus HIV. El diagnóstico de la infección toxoplásmica se confirma con la demostración de la presencia del parásito, pero su búsqueda mediante el examen directo es difícil, por no decir aleatorio. La serología representa la base del diagnóstico y del seguimiento de la toxoplasmosis. La presencia de anticuerpos específicos permite confirmar una contaminación por T. gondii; el estudio combinado de los anticuerpos pertenecientes a diferentes isotipos permite, generalmente, fechar la infección y orientar la terapéutica en caso de infección reciente, o establecer medidas profilácticas adecuadas al riesgo de aparición de una toxoplasmosis: medidas higiénico-dietéticas en mujeres embarazadas que no presenten anticuerpos, quimiofilaxia en los sujetos inmunodeprimidos seropositivos para T. gondii.

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3. PRINCIPIO Platelia™ Toxo IgM es una prueba que permite la detección cualitativa de los anticuerpos IgM anti-T. gondii en suero o plasma humano mediante un método inmunoenzimático por inmunocaptura de las IgM en fase sólida. Se utilizan anticuerpos anti-cadena µ humana para sensibilizar la microplaca. Se utiliza como conjugado una mezcla de antígeno T. gondii y anticuerpo monoclonal anti-antígeno T. gondii marcado con peroxidasa. La aplicación de la prueba consta de las etapas siguientes:

• Etapa 1 Las muestras a estudiar y los controles se diluyen en proporción 1/21 y se depositan en los pocillos de la microplaca. Durante la incubación de 1 hora a 37ºC, las IgM son captadas por los anticuerpos anti-µ fijados a las cúpulas de los pocillos de la microplaca. Las IgG y el resto de las proteínas séricas son eliminadas mediante lavados al final de la incubación.

• Etapa 2 Se coloca el conjugado (mezcla de antígeno T. gondii y de anticuerpo antiT. gondii marcado con la peroxidasa) en todos los pocillos de la microplaca. Durante esta incubación de 1 hora a 37°C, si la muestra probada contiene anticuerpos IgM específicos de T. gondii, éstos se fijarán al conjugado. El conjugado sobrante que no se une es eliminado mediante lavados al final de la incubación.

• Etapa 3 La presencia de los complejos inmunes (anti-cadena µ humana / IgM antiT. gondii / Antígeno T. gondii / Anticuerpo monoclonal anti-T. gondii marcado con peroxidasa) que se forman eventualmente es revelada mediante la adición de una solución enzimática de revelado en cada pocillo.

• Etapa 4 Tras incubación a temperatura ambiente (+18-30ºC) la reacción enzimática se detiene mediante la adición de una solución de ácido sulfúrico 1N. La densidad óptica leída a 450/620 nm, interpretada en relación con un valor umbral, permite confirmar o informar de la presencia de IgM anti-T. gondii en la muestra probada.

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4. COMPOSICIÓN DEL KIT Los reactivos son suministrados en cantidad suficiente para realizar 96 determinaciones. Todos los reactivos están destinados para utilizarse únicamente en el diagnóstico in vitro. Etiquetado R1

R2

Microplate

Naturaleza de los reactivos

Presentación

Microplaca : (lista para usar) : 12 tiras de 8 pocillos separables, sensibilizadas con anticuerpos anti-cadenas µ humanas

1

Concentrated Solución de lavado (20x) : Washing Tampón TRIS-NaCl (pH 7,4), 2% Tween® 20. Solution (20x) Conservante: < 1,5% ProClin™ 300

1 x 70 mL

R3

Negative Control

Control Negativo : Suero humano negativo a IgM anti-T. gondii, a antígeno HBs y a anticuerpos anti-VIH1, anti-VIH2 y anti-VHC Conservante: < 1,5% ProClin™ 300

1 x 0,75 mL

R4

Calibrator

Calibrador : Suero humano reactivo a las IgM anti-T. gondii, y negativo al antígeno HBs y a anticuerpos anti-VIH1, anti-VIH2 y anti-VHC Conservante: