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REGISTRO DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL

k ES 2 001 660 kN´umero de solicitud: 8601630 kInt. Cl. : C07K 15/10

11 N.◦ de publicaci´ on: 21

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˜ ESPANA

A23J 3/00

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PATENTE DE INVENCION

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22 Fecha de presentaci´ on: 04.09.86

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73 Titular/es: Bristol-Myers Company

345 Park Avenue, New York, New York 10154, US

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30 Prioridad: 06.09.85 US 773481

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72 Inventor/es: Puski, Gabor

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74 Agente: Herrero Antol´ın, Julio

45 Fecha de anuncio de la concesi´ on: 01.06.88

46 Fecha de publicaci´ on del folleto de patente:

01.06.88

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Hartman Jr., Grant H. y Talbott, D. Robert

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k kResumen:

54 T´ıtulo: Un procedimiento para la preparaci´ on de un aislado de prote´ına de soja. 57

Se prepara un aislado de prote´ına de soja de gran calidad, con un contenido en aluminio significativamente reducido y sustancialmente libre de ´acido f´ıtico y complejos de fitato por extracci´on acuosa de habas de soja particuladas desgrasadas a pH 8-10, y a una temperatura superior a 65◦C, separaci´on del extracto y despu´es precipitaci´on de la prote´ına de la soluci´on a un pH ligeramente superior a su punto isoel´ectrico, es decir pH 5,3.

Venta de fasc´ ıculos: Registro de la Propiedad Industrial. C/Panam´ a, 1 – 28036 Madrid

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DESCRIPCION Esta invenci´on se refiere al aislamiento de prote´ına de soja adaptada para uso alimenticio. Con anterioridad se ha tratado extensamente el tema del aislamiento, purificaci´ on y mejora de la calidad nutritiva y del sabor de la prote´ına de soja. La prote´ına de soja en su estado nativo es incomible y presenta una calidad nutritiva menoscabada debido a la presencia de complejos de a´cido f´ıtico que interfieren con la absorci´on de los minerales por los mam´ıferos y a la presenciade factores anti-nutritivos que incluyen inhibidores de la tripsina que interfieren con la digesti´on de las prote´ınas en los mam´ıferos. En la t´ecnica anterior se ha tratado de la destrucci´ on de los inhibidores de tripsina por tratamiento t´ermico y de la remoci´on del a´cido f´ıtico. Tambi´en se ha tratado de aumentar los rendimientos de prote´ınagarantizados como aislado purificado respecto a la contenida enla materia prima de soja. McKinney y col., J.Biol. Chem., vol. 178, p´ ags. 117-132 (1949) se˜ nalan que la fitina se disocia lentamente de la prote´ına de soja en dispersiones alcalinas a pH. 11,0-11,5 y puede ser separada por centrifugaci´ on. Iacobucci y col., patente estadounidense n◦ 3.736.147 describen un proceso de ultrafiltraci´ on para la preparaci´ on de aislado de prote´ına de soja con un menor contenido de a´cido f´ıtico, que implica varios tratamientos qu´ımicos en combinaci´on con ultrafiltraci´ on intensiva. El tratamiento qu´ımico implica la hidr´ olisis enzim´atica del a´cido f´ıtico por el enzima fitasa a pH neutro antes de la ultrafiltraci´ on, ultrafiltraci´ on en presencia de ion calcio a pH bajo o el uso de ´acido etilendiaminotetraac´etico a un pH alto. Bolley y col., patente estadounidense n◦ 2.732.395, describen un m´etodo de separaci´on de fitina de diversas semillas oleaginosas. El m´etodo implica la extracci´on con a´cido de una harina de semilla libre de aceite con un ´acido acuoso a un pH dentro aproximadamente de la regi´ on isoel´ectrica de la prote´ına de la semilla particular, generalmente a pH alrededor de 4,5. La fitina se recupera de la fracci´ on soluble y la prote´ına se recupera del coagulado por extracci´ on a un pH superior a 8, con separaci´ on de las materias insolubles, y subsiguiente coagulaci´ on de la prote´ına en el extracto alcalino clarificado por acidulaci´on, de nuevo dentro de la regi´ on isoel´ectrica de la prote´ına. El m´etodo se aplica a diversas semillas oleaginosas que incluyen la harina de soja desgrasada para obtener una prote´ına purificada que, seg´ un se alega, est´a sustancialmente libre de compuestos de f´ osforo org´anico. Sair, patente estadounidense n◦ 3.001.875, utiliza la extraci´on acuosa de copos de soja desgrasados a pH 6-10,5 para formar una soluci´ on de la prote´ına de soja, separaci´ on de las materias insolubles, precipitaci´on de la prote´ına extraida a pH 4,5, redisoluci´ on del coagulado a pH 6 y secado. Johnson, patente estadounidense n◦ 3.397.991, forma un aislado de prote´ına a partir de una mezcla de harinas vegetales extraidas con disolventes, que incluyen la harina de soja, para obtener la composici´ on de amino´ acidos deseada en el aislado 2

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proteico resultante por solubilizaci´ on coloidal de la prote´ına en agua a 65,5-93◦C (150-200◦F) y a pH 9-12, separaci´ on de las materias insolubles y recuperaci´on de la prote´ına solubilizada de la soluci´on acuosa por secado o por precipitaci´on con ´acido dentro de la regi´ on isoel´ectrica. Robbins y col., patente estadounidense n◦ 3.261.822, ilustran la preparaci´ on de aislado de prote´ına de soja por extracci´ on de harina de soja desgrasada con agua a un pH a´cido de 3,5-5,5, eliminaci´ on de la materia soluble y redisoluci´on del coagulado proteico en agua a pH 6-11. Godnight, Jr. y col., patente estadounidense n◦ 4.072.670, describe un defecto b´asico en los procedimientos de la t´ecnica anterior para la preparaci´on de aislado de prote´ına de soja precipitado con a´cido, como los ilustrados en las patentes de Bolley y col. y Robbins y col., citadas antes. En la t´ecnica anterior la prote´ına de soja precipita en los copos con un ´acido en presencia de a´cido f´ıtico. Godnight y col. hallaron que en estas circunstancias se forma un complejo estable a ´alcalis entre la prote´ına y el ´acido f´ıtico que impide la disociaci´on de la fitina de la prote´ına de soja a pH alcalino, como describen McKinney y col. en el art´ıculo citado antes. Godnight y col. resolvieron algunos de los problemas de la t´ecnica anterior insolubilizando el fitato a un pH de 10,6 a 14 y separ´andolo de las prote´ınas antes de la precipitacin de las mismas en su punto isoel´ectrico, es decir, pH 4,5. Los inconvenientes del procedimiento descrito por Godnight y col. son que la exposici´ on de las proteinas a un pH extremadamente alcalino afecta adversamente a su valor nutritivo y que las centr´ıfugas continuas comerciales son incapaces de separar el liger´ısimo precipitado de fitato en suspensi´on formado al pH alcalino alto. Los procedimientos de la t´ecnica anterior tuvieron cierto ´exito en la reducci´on del contenido de fitato de los aislados de soja a escala peque˜ na de laboratorio. Sin embargo, ninguno de los procedimientos anteriores permite la producci´ on de prote´ına de soja baja en fitato a escala industrial econ´omica. Esta invenci´on proporciona un procedimiento para la preparaci´on de una prote´ına de soja purificada mejorada con un contenido excepcionalmente bajo en ´acido f´ıtico, un sabor sustancialmente mejorado, mayor funcionalidad, gran calidad nutritiva y bajo contenido en cenizas. Adem´as, este procedimiento reduce sustancialmente la cantidad de aluminio en el producto de soja obtenido. El aluminio contenido en las f´ ormulas para lactantes a base de soja es considerablemente m´as alto que el contenido hallado en la leche de la madre. As´ı, las f´ ormulas para lactantes preparadas a partir de este aislado de prote´ına de soja son m´as aceptables desde el punto de vista nutricional ya que la reducci´ on del contenido de aluminio proporciona composiciones de soja m´ as similares a la leche materna. La expresi´on “aislado de prote´ına de soja con bajo contenido en fitato”, en el sentido utilizado aqu´ı, se refiere a un producto de prote´ına de soja que contiene alrededor de 88 % en peso o m´as de prote´ına de soja y menos de alrededor de 0,3 % en peso de fitatos (expresado como equivalente de

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´acido f´ıtico), preferiblemente menos de 0,2 g de fitatos por 100 g de prote´ına. El a´cido f´ıtico, que es el ´ester hexaortomonofosf´ orico del mio-inositol, se presenta en niveles bastante altos en los granos y las semillas oleaginosas en forma de la sal c´alcica-magn´esica fitina. En la harina de soja, alrededor del 70 % del f´ osforo total est´ a constituido por la fitina. Bas´ andose en un contenido de f´ osforo del 0,6 %en la harina de soja desgrasada, se calcula que hay presente en dicha harina de soja desgrasada alrededor del 2 % en peso de fitina. El a´cido f´ıtico formar´ a un complejo de fitato-mineral-prote´ına durante el proceso y se ha demostrado que reduce la biodisponibilidad de diversos minerales tales como cinc, magnesio, calcio, hierro, etc. Durante la preparaci´ on de aislados, gran cantidad del a´cido f´ıtico y de los fitatos permanece asociada a la prote´ına en forma de complejos. Cuando se utilizan aqu´ı los t´erminos fitato o fitatos, se pretende incluir las sales de ´acido f´ıtico y los complejos moleculares de ´acido f´ıtico con otros constituyentes de la soja. En el caso de los aislados de prote´ına de soja comerciales actualmente existentes en el mercado, tales como Edi-Pro A (Ralston Purina) y Ardex F (Archer Daniel Midland), hasta el 2-2,5 % del peso del aislado es fitato. La eliminaci´on del fitato del aislado de prote´ına de soja es deseable porque el f´ osforo del fitato no es asequible como entidad nutritiva a los seres humanos e interfiere con la absorci´ on de cationes polivalentes nutritivamente esenciales tales como calcio, hierro y cinc. Los lactantes no pueden utilizar el f´osforo del fitato y la presencia de una cantidad relativamente alta de este f´osforo no asequible puede conducir a una mineralizaci´on inadecuada de los huesos. Por lo tanto, es conveniente eliminar o reducir el contenido en fitato de las f´ ormulas para lactantes a base de soja. En su aspecto m´ as amplio, esta invenci´on implica la formaci´ on de una soluci´ on acuosa de prote´ına de soja a pH 8,0-10,0 y a una temperatura on acuosa de una superior a 65◦C, por extracci´ materia prima de soja que contiene prote´ınas de la soja. Una fuente preferida de prote´ınas de soja es la soja particulada desgrasada, tal como harina de soja, moyuelo o copos desgrasados. El contacto previo del material de soja nativo con ´acido produce la formaci´ on de un enlace entre el fitato y la prote´ına y hace que las materias primas de prote´ınas de soja isoel´ectricas o tratadas con ´acido sean inapropiadas para esta invenci´ on. Las condiciones de extraci´on citadas reducen al m´ınimo la extracci´on de fitatos y la formaci´on de complejos de prote´ına-fitato. Tambi´en sensibiliza a las prote´ınas para la precipitaci´ on a un pH algo superior a su punto isoel´ectrico. El extracto de prote´ına de soja anterior se clarifica por centrifugaci´ on, filtraci´ on o por otros medios y despu´es la prote´ına de soja se precipita por acidulaci´on a pH 5,0-5,5 y se recupera el precipitado. A es pH, el fitato ser´ a separado en el suero. En un procedimiento comercial t´ıpico, las prote´ınas de soja se extraen a un pH ligeramente alcalino de la harina de soja o de copos de soja. Despu´es la fracci´on proteica principal es precipitada del extracto clarificado ajustando el pH al punto isoel´ectrico de las prote´ınas (pH 4,5).

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Como las prote´ınas son insolubles a este pH, la prote´ına puede ser separada de los az´ ucares, sales, etc., solubles por centrifugaci´on. Para completar la purificaci´ on, el coagulado proteico se lava con agua por lo menos una vez a este pH isoel´ectrico y despu´es la prote´ına se seca por atomizaci´on tal como est´a o despu´es de haberla resolubilizado a pH neutro. Bajo estas condiciones, una proporci´ on importante del fitato presente en los copos de soja se compleja con la prote´ına y est´a presente en el aislado de soja. T´ıpicamente, los aislados de soja comerciales contienen de 2,0 a 2,5 % de fitato y en algunos casos hasta un 3 %en peso. El tratamiento de las prote´ınas de soja a alcalinidad elevada (pH 11,6) puede afectar adversamente al valor nutritivo o a la seguridad de estas prote´ınas. Durante muchos de los procesos comerciales para la preparaci´ on de aislados de prote´ına de soja, las prote´ınas son precipitadas a pH aproximadamente 4,5. Sin embargo, a este pH, tiene lugar una intensa interacci´on fitatoprote´ına y la mayor parte del fitato precipita con la prote´ına, produciendo un aislado de prote´ına de soja que contiene m´as de 2 % de fitato. Esta invenci´on proporciona nuevas mejoras en el procedimiento comercial de la t´ecnica anterior, por eliminaci´on de la exposici´ on a alcalinidades extremas y, lo que es m´as importante, proporciona por primera vez un procedimiento econ´omico para la producci´on de aislados de soja con buen rendimiento y con concentraciones de fitato del 0,3 % en peso o m´as bajas. La materia prima de prote´ına de soja para el procedimiento es soja desgrasada particulada, preferiblemente harina de soja desgrasada o copos de soja desgrasados. El procedimiento implica la formaci´ on de una soluci´ on acuosa de prote´ına de soja a un pH alcalino a partir de la materia prima que contiene la prote´ına de soja. No se pretende limitar la invenci´on a ning´ un tipo de materia prima ni se pretende limitar la invenci´ on a ningunna forma espec´ıfica de preparaci´ on de este extracto de soja inicial ya que pueden introducirse numerosas modificaciones dependiendo de los diversos objetivos del procedimiento. La suspensi´on de extracci´on inicial se forma agregando, con agitaci´ on, una parte en peso de materia prima conteniendo prote´ına de soja a 1020 partes en peso de un medio acuoso de suspensi´ on, a un pH comprendido entre 8 y 10 y a una temperatura superior a 65◦C. Aunque pueden emplearse valores m´as altos del pH, se ha hallado que a estos pHs m´as altos, existe tendencia a aumentar la formaci´ on indeseable de lisinoalanina. Preferiblemente, el pH se mantiene entre 8,5 y 9,5, a una temperatura de 70-85◦C y especialmente de 75-80◦C. Aunque pueden emplearse satisfactoriamente durante la extracci´ on temperaturas superiores a 85◦C, se ha hallado que a estas temperaturas m´as altas existe tendencia a aumentar la formaci´ on indeseable de lisinoalanina. La suspensi´ on se mantiene al pH y a la temperatura deseados durante 1 a 15 minutos aproximadamente, preferiblemente 2 a 5 minutos. Despu´es la temperatura se desciende r´ apidamente a 25-65◦C, preferiblemente 50-60◦C y to3

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dav´ıa mejor 55-60◦ y la suspensi´on se mantiene a esta temperatura durante 10 a 60 minutos adicionales y preferiblemente 10 a 30 minutos, para proseguir la extracci´on de la prote´ına de soja de la materia prima. La fracci´on insoluble que contiene una parte sustancial de los fitatos e hidratos de carbono se separa de la fracci´on de prote´ına solubilizada por procesos unitarios convencionales de separaci´on de s´olidos tales como filtraci´on o centrifugaci´ on. Los intervalos de temperatura mencionados antes son los valores ´optimos para la disociaci´ on de la prote´ına de soja soluble del complejo de ´acido f´ıtico y para mantener los fitatos y los derivados de a´cido f´ıtico sustancialmente insolubles. Sin embargo, bajo ciertas condiciones de manufactura, otros intervalos de temperatura pueden resultar m´as adecuados ya que la temperatura a la cual se consigue la solubilidad del fitato ejerce un efecto sobre la naturaleza f´ısica del mismo que afecta a sus caracter´ısticas de filtraci´on y centrifugaci´ on. Naturalmente, es conveniente seleccionar emp´ıricamente la temperatura o´ptima de solubilizaci´on del fitato para cualquier sistema de manufactura dado. El pH de la fracci´ on proteica solubilizada se ajusta a 5,0-5,5 y preferiblemente a 5,2-5,4 y todav´ıa mejor a 5,3 con 5,3 con un ´acido no t´ oxico soluble en agua, tal como ´acido clorh´ıdrico, para precipitar la prote´ına de soja solubilizada. Aunque pueden emplearse valores del pH superiores a 5,5, estos valores del pH suelen disminuir el rendimiento de prote´ına de soja. La prote´ına es precipitada de la fracci´on proteica solubilizada a una temperatura de 25 a 65◦C, preferiblemente de 50 a 60◦ C. La prote´ına precipitada se separa de los az´ ucares, fitatos solubles, etc. por centrifugaci´ on u otros medios convencionales. El pH seleccionado precipitar´ a las prote´ınas termosensibilizadas pero permitir´ a que el fitato soluble sea arrastrado en el suero. No se formar´a el complejo de prote´ınafitato ya que a este pH tanto las prote´ınas como los fitatos est´ an cargados negativamente. Este complejo se formar´ıa a un pH igual o inferior a 4,5. La prote´ına precipitada y separada puede ser lavada con agua, despu´es puede ser resuspendida en agua, la suspensi´on molida en mojado y despu´es secada por atamizaci´on o liofilizada. Alternativamente, el coagulado proteico puede ser redisuelto en una soluci´ on acuosa diluida a un pH superior s la regi´on isoel´ectrica y la soluci´on resultante puede ser secada por atomizaci´on como es conocido para la producci´ on de los llamados proteinatos de soja. Finalmente, en lugar de secar por atomizaci´on, la prote´ına precipitada y separada puede ser redisuelta a un pH superior a la regi´ on isoel´ectrica y la soluci´on de proteinato de soja resultante puede ser entonces formulada sin secarla para formar productos diet´eticos por combinaci´ on con el hidrato de carbono deseado y los ingredientes grasos adecuados y, si se desea, vitaminas, minerales, saborizantes, etc. Esta forma de operar no s´ olo

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es conveniente desde el punto de vista de la combinaci´ on de los diversos ingredientes sino tambi´en porque proporciona un producto diet´etico l´ıquido con caracter´ısticas funcionales mejoradas tales como solubilidad, suspensibilidad, viscosidad, sensaci´on en la boca y estabilidad de la emulsi´ on. Para poner en pr´ actica el procedimiento de esta invenci´on, se ha ha hallado que la temperatura de extracci´ on, el pH de precipitaci´ on, la temperatura de precipitaci´on y el grado de lavado son importantes para obtener los resultados deseados. El rendimiento tambi´en est´a influido por la duraci´ on de la extracci´on y por el n´ umero de veces que la harina de soja es reextraida. Ejemplo 1 Se suspende 1 kg de harina de soja desgrasada con 16 kg de agua a pH 9 y se mantiene a 75◦C durante 2 minutos. Despu´es la suspensi´on se enfr´ıa r´ apidamente a 50 y 60◦C y se extrae durante 10-30 minutos m´ as. La fracci´ on insoluble se separa por centrifugaci´on. El pH del l´ıquido que sobrenada se ajusta a 5,3 con a´cido clorh´ıdrico y el coagulado proteico insolubilizado que precipita se separa por centrifugaci´ on. Despu´es el coagulado puede ser lavado una vez resuspendi´endolo en 10-16 kg de agua a pH 5,3-5,4 y a una temperatura de 50 a 60◦C y despu´es recentrifugado. El coagulado lavado se recoge y puede ser secado por atomizaci´ on tal como est´a o puede ser primero neutralizado con un a´lcali apropiado y despu´es secado por atomatizaci´ on. Ejemplo 2 Se repiti´ o seis veces el procedimiento del Ejemplo 1 con los siguientes resultados: Porcentaje de fitato y rendimiento de aislados de soja preparados por el procedimiento de la invenci´ on

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Fitatoa, %

B

0,02 0,03 0,05 0,05 0,11 0,07

31,3 28,9 30,5 30,9 29,9 30,4

Siendo: 55

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B:

Rendimiento, % (g de aislado de soja/100 g de harina de soja)

a:

Los aislados de soja comerciales contienen 2-2,5 5 %de fitato y las cifras de la tabla anterior demuestran que el aislado de soja de esta invenci´on contiene solamente alrededor del 1,5 % del fitato encontrado en los aislados comerciales.

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Comparaci´ on del contenido en aluminio de los aislados de soja preparados por el procedimiento de esta invenci´ on y de un aislado de soja comercial (EdiPro A) 5

Muestra 1

Muestra 2

EdiPro A 10

Aluminio (mcg/g) Fitato, %

7,5 0,11

6,2 0,13

24,40 2

Los datos anteriores demuestran claramente la capacidad del procedimiento de esta invenci´on para producir aislados de soja que pr´ acticamente no contienen fitatos, a rendimientos relativamente buenos, con una reducci´ on importante del contenido de aluminio. Ejemplo 3 Se prepararon muestras de aislado de soja por los procedimientos del Ejemplo 1, variando la temperatura y el pH de extracci´on y el pH de precipitaci´on en la forma indicada en la siguiente tabla. Tambi´en se incluye el porcentaje de fitato en el aislado de soja acabado y el rendimiento.

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Siendo: X: Extracci´ on A: Muestra n◦ B: Temperatura ◦ C C: pH D: pH de precipitaci´ on E: Fitato % F: Rendimiento, % Como se ha demostrado anteriormente, puede conseguirse un contenido muy bajo de fitato cuando el aislado de soja se prepara bajo las condiciones experimentales descritas en esta solicitud de patente. Puede conseguirse un contenido de fitato medio si se aplican algunas de las ense˜ nanzas de esta solicitud, por ejemplo cuando las condiciones de extracci´on comerciales se combinan con las condiciones de precipitaci´on con a´cido de esta solicitud (muestra 8) o cuando las condiciones de extracci´on de la prote´ına de esta solicitud se combinan con el pH t´ıpico de precipitaci´on (muestra 9). La muestra 10 describe condiciones t´ıpicas de preparaci´ on de un aislado de soja comercial con su elevado contenido en fitato.

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X A

B

C

D

E

F

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

75 65 88 75 75 75 75 40 75 40

9,0 9,0 9,0 8,0 10,0 9,0 9,0 8,0 9,0 8,0

5,3 5,3 5,3 5,3 5,3 5,2 5,5 5,3 4,5 4,5

0,02 0,46 0,04 0,20 0,08 0,06 0,02 0,41 0,54 1,96

31,3 32,7 29,9 28,6 32,5 31,4 29,4 28,0 31,3 32,9

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REIVINDICACIONES 1. Un procecimiento para la preparaci´ on de un aislado de prote´ına de soja con un contenido en aluminio significativamente reducido y sustancialmente libre de fitato, que consiste en tratar una materia prima de soja desgrasada contiene prote´ına de soja por formaci´ on de una suspensi´ on con un medio acuoso a un pH comprendido entre 8 y 10 y a una temperatura superior a 65◦ C, durante un per´ıodo de tiempo suficiente para solubilizar la prote´ına de soja pero reducir la extracci´on de fitato; separar dicha suspensi´ on en una fracci´ on insoluble que contiene una fracci´ on sustancial de los polisac´ aridos y fitatos insolubles y una fracci´ on soluble que incluye la prote´ına de soja solubilizada; ajustar el pH de dicha fracci´ on soluble a 5,0-5,5 aproximadamente para precipitar la prote´ına de soja y producir as´ı una fracci´ on de suero qu contiene fitato soluble y una fracci´ on de s´olidos de prote´ına de soja con una concentraci´on de fitato inferior a 0,3 %, donde la citada fracci´on de s´ olidos de prote´ına de soja puede ser lavada en un medio acuoso; y separar la citada fracci´on de s´ olidos de prote´ına de soja suspendidos del citado medio de lavado. 2. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 1, donde la citada fracci´ on de prote´ına de soja es secada. 3. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 1, donde la citada fracci´ on de prote´ına de soja se forma en una soluci´on acuosa a un pH superior a la regi´on isoel´ectrica de la citada prote´ına de soja. 4. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 3, donde la citada fracci´ on de prote´ına de soja es secada. 5. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 1, donde el citado medio acuoso es agua y la citada materia prima conteniendo prote´ına de soja se suspende en el agua en una relaci´on de una parte de materia prima a 10-20 partes en peso de agua. 6. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 5, donde se suspende una parte en peso de la citada materia prima conteniendo prote´ına de soja en 16 partes en peso de agua. 7. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 1, donde la citada materia prima de prote´ına de soja se mantiene en la citada suspensi´on a 70-85◦C durante 1 a 15 minutos y durante 10 a 60 minutos m´as despu´es de haber ajustado la temperatura de la citada suspensi´on a 50-60◦C. 8. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 7, donde el pH de la citada fracci´ on soluble se ajusta a 5,2-5,4 despu´es de separarla de los citados s´olidos agotados a una temperatura de 50-60◦C aproximadamente. 9. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 8, donde el pH de los citados s´ olidos de prote´ına de soja solubilizados se ajusta a 5,3. 10. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 1,

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donde la citada materia prima de soja desgrasada est´a formada por copos de soja desgrasados. 11. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 10, donde se suspende una parte en peso de la citada materia prima en 16 partes en peso de agua ajustada a pH 9 y a una temperatura de 75◦C durante 2 minutos, despu´es la citada suspensi´on se enfr´ıa as; a cona 60◦C y se agita durante 10 minutos m´ tinuaci´ on la citada suspensi´on se separa en una fracci´on insoluble y una fracci´ on soluble, despreciando la citada fracci´ on insoluble y ajustando el pH de la citada fracci´on soluble a 5,3 para precipitar un coagulado de prote´ına de dicha suspensi´ on; se separa el citado coagulado de prota´ına se lava dicho coagulado de prote´ına con 10 partes en peso de agua a pH 5,3 y se separa dicho coagulado de prote´ına lavado del agua de lavado mencionada. 12. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 11, donde el citado coagulado de prote´ına lavado es secado. 13. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 11, donde el citadocoagulado de prote´ına lavado se pasa a soluci´ on acuosa a un pH superior a la regi´on isoel´ectrica de la citada prote´ına de soja. 14. Un procedimiento para la preparaci´ on de un aislado de prote´ına de soja sustancialmente libre de fitato y con un contenido en aluminio significativamente reducido, cuyo procedimiento comprende las siguientes etapas sucesivas: a) formar una suspensi´ on acuosa de una materia prima de soja desgrasada a un pH comprendido entre 8 y 10, a una temperatura superior a 65◦C y durante un per´ıodo de 1 a 15 minutos para solubilizar la prote´ına de soja. b) reducir la temperatura a 25-65◦C durante un per´ıodo de 10-60 minutos.

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c) separar dicha suspensi´ on en una fracci´ on insoluble y una fracci´ on soluble que incluye la prote´ına de soja solubilizada. d) ajustar el pH de dicha fracci´ on soluble a 5,0-5,5 con un ´acido no t´ oxico soluble en agua, a una temperatura de 25-65◦C, precipitando con ello y separando el citado aislado de prote´ına de soja sustancialmente libre de fitato y con un contenido de aluminio significativamente reducido. 15. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 14, donde la etapa (a) se lleva a cabo a un pH de 8,5 a 9,5 a 70-85◦C, durante 1-15 minutos; la etapa (b) se lleva a cabo a 50-60 minutos y la etapa (d) se lleva a cabo a pH 5,2-5,4 a 50-60◦C. 16. El procedimiento de la Reivindicaci´ on 14, donde la etapa (a) se lleva a cabo a un pH de 8,59,5 a 75-80◦C, durante 2-5 minutos; la etapa (b) se lleva a cabo a 55-60◦C durante 10-30 minutos y la etapa (d) se lleva a cabo a pH 5,3 a 50-60◦C.