Actividades del Centro / Activities of the Centre 1. Organización y estructura / Organisation and structure

El CISA-INIA es Laboratorio de Referencia de la Unión Europea para la Peste Porcina Africana (EURL) y desde noviembre de 2013, también de la Organización de Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO), lo que requiere una gran capacidad de respuesta ante brotes de esta enfermedad para lo que cuenta con expertos mundiales en la investigación y lucha contra esta devastadora enfermedad. CISA-INIA es, asimismo, Laboratorio Nacional de Referencia para la Fiebre del Valle del Rift (RVF).

Misión / Mission El Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA-INIA), situado en Valdeolmos (Madrid), es un centro dedicado a la investigación y vigilancia para la prevención, el diagnóstico y control de enfermedades transmisibles animales. Se ocupa esencialmente de las enfermedades infecciosas emergentes, re-emergentes y transfronterizas de impacto económico y sanitario, incluyendo las zoonosis, y que pueden causar tanto restricciones en el comercio ganadero como repercusión en la salud pública o la seguridad alimentaria. Su misión principal es promover la investigación, el desarrollo tecnológico más avanzado, la cooperación con organismos nacionales e internacionales y la transferencia de tecnología en el área de la sanidad animal, siguiendo las prioridades estratégicas marcadas por organizaciones y foros nacionales e internacionales relevantes en su área.

Grupos de investigación y/o áreas temáticas de investigación / Research Groups Para llevar a cabo estas actividades el CISA-INIA se organiza en siete grupos de investigación, con dos áreas principales: i) la epidemiología y el diagnóstico y ii) la patogenia, inmunología y control, con ámbitos de trabajo obviamente relacionados entre sí. 1. Enfermedades Emergentes y Transfronterizas 2. Nuevas Estrategias de Control de Patógenos Relevantes en Sanidad Animal 3. Epidemiología y Sanidad Ambiental 4. Inmunología y Patología de Peces 5. Biología Molecular y Celular de Priones 6. Inmunoprofilaxis de Enfermedades Víricas Transmitidas por Vectores 7. Parasitología Animal

Entre sus actividades a nivel nacional destacan las relaciones que mantiene con el Ministerio de Agricultura, Alimentación y Medio Ambiente, dando apoyo a sus Laboratorios Nacionales de Referencia. El CISA-INIA también forma parte de la Red de Laboratorios de Alerta Biológica (RELAB), dependiente de Presidencia del Gobierno de España, dedicada a hacer frente a enfermedades producidas por agentes biológicos. Posee una importante experiencia en materia de respuesta a alertas sanitarias. Participa en simulacros de alerta biológica, así como en la resolución real de crisis sanitarias, sean asociadas a la Salud pública (crisis del “ántrax”, Encefalopatía Espongiforme Bovina (EEB), Síndrome Agudo Respiratorio Severo (SARS), Influenza Aviar) como a Sanidad Animal (Fiebre Aftosa, Lengua Azul, Enfermedad Vesicular Porcina).

Laboratorios y redes experimentales / Laboratorios and experimental netwoork El CISA-INIA es una Infraestructura CientíficoTécnica Singular (ICTS) única en su género a nivel nacional, dotada de una instalación de Alta Seguridad Biológica de 10.824 m2, con 40 laboratorios y un animalario de nivel de contención biológica NCB3 (OMS), así como 2 141

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laboratorios NCB4 (OIE), donde se llevan a cabo los estudios especializados y la asistencia técnica necesaria con los máximos estándares de calidad para una constante mejora de la prevención y el control de enfermedades. Los Laboratorios NCB4 están diseñados para estudios con agentes infecciosos que pudieran afectar a los seres humanos; los trabajos se realizan utilizando trajes especiales, que aseguran el aislamiento y seguridad del personal.

Debido a la singularidad de esta instalación, el CISA-INIA es uno de los principales centros de referencia en España para trabajar en la experimentación in vivo con agentes de alto riesgo biológico. Investigadores de otros centros públicos de investigación y empresas biotecnológicas y farmacéuticas hacen uso del animalario para desarrollar experimentos que necesitan de esta gran instalación de alta seguridad biológica para llevarlos a cabo.

El CISA dispone de los siguientes Servicios y Unidades de apoyo: Animalario (con la sección de Anatomía Patológica), Seguridad Biológica, Secuenciación y la Unidad de Cultivos Celulares.

El Servicio de Seguridad Biológica constituye un eje central en la labor diaria del centro, ya que se encarga de la gestión y supervisión de la bioseguridad y la biocontención, elaboración de procedimientos de trabajo, gestión de equipos de protección individual, biodescontaminaciones, validaciones microbiológicas, control de mecanismos de doble frontera, filtración de aire, tratamiento de efluentes, tratamiento interno de residuos, muestreos de contaminantes físicos, químicos y biológicos, envíos y recepciones de muestras biológicas infecciosas, controles de accesos, mantenimiento de la biocontención, control de calidad para el laboratorio de Peste Porcina Africana, y participa así mismo en actividades de formación, en el asesoramiento técnico nacional e internacional y en el diseño de nuevas instalaciones.

El Animalario del CISA es el área más compleja y exigente, y está constituido por 19 estancias individuales y polivalentes, diseñadas para albergar distintas especies animales, desde peces hasta grandes animales, con medidas de bioseguridad que garantizan el trabajo in vivo incluso con patógenos transmisibles por aerosol. El CISA es una de las dos únicas instalaciones españolas autorizadas para manipular virus vivo de la Fiebre Aftosa. En esta área se localiza la sección de Anatomía Patológica, encargada de realizar las necropsias y procesamiento de tejidos de los animales sacrificados.

El Servicio de Secuenciación realiza dos tipos de actividades principales, la secuenciación automática de DNA y el análisis de fragmentos de DNA. Incluidas en ambas técnicas está la obtención, purificación y cuantificación de DNA. Durante el año 2013 se han realizado 222 registros que comprenden 6581 trabajos (3249 reacciones de secuenciación de ADN, 256 determinaciones de la concentración y pureza del ADN, 1092 purificación de productos de PCR y 1984 análisis de fragmentos).

Durante el año 2013, a través de proyectos de I+D+I, convenios y contratos de colaboración se han realizado con éxito 27 experimentos in vivo en especies animales terrestres como cerdos, roedores, terneros, ovejas, perdices y conejos y acuáticas como pez cebra y trucha. El objetivo de estos experimentos ha sido ampliar el conocimiento de distintas enfermedades infecciosas animales, entre ellas, Fiebre Aftosa, Peste Porcina Africana, Lengua Azul, Enfermedades Vesiculares, Peste Pequeños Rumiantes, zoonosis como Fiebre del Valle del Rift, SARS, West Nile y otros flavivirus, Influenza y parasitosis como la causada por Tricostrongílidos. Los estudios han estado dirigidos a las áreas de clínica, patología, patogenia, transmisión y control, evaluando diseños experimentales vacunales o nuevos adyuvantes.

La Unidad de Cultivos Celulares y Anticuerpos Monoclonales ofrece al personal investigador del centro y a colaboradores externos un servicio de mantenimiento en cultivo, congelación y descongelación, y control de contaminación de las líneas celulares disponibles en el banco de células; 142

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United Nations (FAO), which requires a great capacity to respond to outbreaks associated to this disease, on the basis of worldwide renown expertise of its personnel. It is also home of the National Reference Laboratory for Rift Valley Fever (RVF).

así como el mantenimiento de hibridomas ya establecidos y la producción de los correspondientes anticuerpos monoclonales, bien como sobrenadante de cultivo o como líquido ascítico. Por otro lado también colabora con los grupos de investigación, según su requerimiento, en la obtención y caracterización preliminar de nuevos anticuerpos monoclonales, incluyendo lo relacionado con manejo de ratones (inmunizaciones y toma de muestras).

CISA-INIA is organised into seven research groups, with two main areas of interest: i) epidemiology and diagnosis and ii) pathogenesis, immunology and control, with obvious relationships within both areas:

Located in Valdeolmos, Madrid, CISA-INIA is a centre for research and surveillance in the prevention, diagnosis and control of animal transmissible diseases. It is particularly focused on emerging, re-emerging and transboundary infectious diseases of livestock causing economical and sanitary impact, including zoonoses that may cause restrictions in trade and a serious effect on public health and food security. Its primary mission is to promote advanced research, technology development, cooperation with national and international bodies and technology transfer in the area of animal health, following the strategic priorities agreed by national and international forums and organizations of relevance in the area.

1. Emerging and Transboundary Diseases 2. New Strategies In Relevant Pathogen Control Animal Health 3. Epidemiology and Environmental Health 4. Inmunology and Pathology of Fish 5. Cellular and Molecular Biology of Prions 6. Immunoprofilaxis of Vector-Borne Viral Diseases 7. Animal Parasitology The CISA-INIA is a Singular Scientific-Technical Infrastructure (ICTS), unique of its kind nationwide, equipped with a High Biological Security facility. Nearly 10,824 m2 in extension, with laboratories (40) and animal facilities (19 boxes) of biological containment level BSL3 plus 2 BSL4 (OIE) laboratories. In here, specialized studies and technical assistance are performed under the highest quality standards for the continuous improvement of prevention and control of diseases. The BSL4 Laboratories are designed to work with infectious agents that could affect humans, and it is performed using special suits that ensure the isolation and security of staff.

Among the CISA-INIA activities, it is important to point out the active collaboration with the Ministry of Agriculture, Food and Environment, giving support in certain tasks of the National Reference Laboratories. CISA-INIA takes part of the national Network of Laboratories for Biological Emergencies (RELAB), under the Presidency of the Government of Spain dedicated to address emergencies caused by biological agents. CISA has proved experience in response to health crises, having taken part in simulated biological alert and on the actual resolution of health crises, both associated to Public Health (“Anthrax” crisis, Bovine Spongiform Encephalopathy (BSE), Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS), Avian Influenza ...) as Animal Health (FMD, Bluetongue, Swine Vesicular Disease ...)

The CISA has the following Services and units: Animal Facility with a Pathology Section, Biosafety, Sequencing and Cell Cultures Unit BSL3 Animal facility at CISA-INIA is the more complex and demanding area, integrated by 19 individual, multi-species and polyvalent rooms with the capability to shelter fish, small and large animals. They are contained through three depression levels which allow working with aerosol

CISA-INIA is Reference Laboratory for African Swine Fever in the EU and since November 2013, also for Food and Agriculture Organization of the 143

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transmissible agents, such as Foot and Mouth disease, avoiding the risk of spreading to other areas. A Pathology section,, where necropsies are conducted and tissues of animals are processed is also allocated within these premises. In 2013, by means of a number of projects and collaborative agreements and contracts, 27 in vivo experiments have been carried out both in terrestrial and aquatic animal species such as partridges, calves, sheep, pig, rabbit, hamster, zebra fish and trout. The aim of these experiments was to improve knowledge of various infectious diseases, African swine fever, Bluetongue, Vesicular Diseases, Peste des Petits Ruminants and zoonosis such as Influenza, Rift Valley Fever, SARS, West Nile and other flavivirosis and parasitisms by trichostrongyle, in the areas of pathology, pathogenesis, transmission, diagnosis and control, as well as studies on experimental vaccines or new adjuvants. CISA BSL3 animal facility is a major reference in Spain to work with high risk biological agents. Researchers from other research institutions as well as from biotechnological and pharmaceutical companies make use of the animal facility to develop in vivo experiments.

quantification. During 2013 this Sequencing service has made 244 records that included 6581 works (3249 sequencing reactions, 256 determinations of the concentration and purity, 1092 purifications of PCR’s products and 1984 analyses of fragments). The Unit of Cell Culture and Monoclonal Antibodies of CISA provides the researchers with the cell lines available in our collection (freezing, thawing, growing, contamination checking services) , as well as growing already established hybridomes to produce the corresponding monoclonal antibody, as culture supernatant or ascitic fluid. Besides, depending on the requirements of the research groups, is also involved in the production and preliminary characterization of new monoclonal antibodies, including animal immunization and sampling.

The Biosafety Service is an essential part of the centre, as it is responsible for the management and monitoring of biosafety and biocontainment, this including: preparation of working procedures, management of personal protective equipment, biodecontaminations, microbiological validations, control of double border mechanisms, air filtration, effluent treatment, indoor waste treatment, sampling of physical, chemical and biological contaminants, shipping and receiving of infectious biological samples, access controls, biocontainment maintenance, control quality to the African Swine Fever laboratory, training, national and international technical advice and design of new facilities.

Director: Víctor Briones Dieste Technical Director: Mª Luisa Arias Neira Address: Carretera de Algete a El Casar km 8,1 – 28130 Madrid Phone: +34 916202300 Fax: + 34 916202247 Correo electrónico: [email protected]

Sequencing service: CISA-INIA offers an internal and external sequencing service, carrying out two types of activities: Automatic sequencing of DNA and Analysis of DNA’s fragments. Both technologies include obtaining, purification and DNA’s 144

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2. Recursos humanos / Human resources El gráfico 24 muestra la distribución del personal del Centro de Investigación en Sanidad Animal

Gráfico 24 Personal del Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA) / Staff of the Animal Health Research Centre (2013) Investigadores / Researchers | 19

Contratados / On contract | 47

Técnicos / Technologists | 10

Otro personal de apoyo / Support | 9 Formación / Training | 4

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3. Resultados de I+D+I / R&D&i results

han publicado 13 artículos en otras revistas, 5 técnicas (no SCI) y 8 de divulgación, así como 7 capítulos de libros.

Publicaciones / Publications A total of 58 SCI articles have been published most of them in the first quartile of food and veterinary science, epidemiology, transboundary and emerging diseases, virology, immunology, microbiology, technology and environmental health areas. Another 5 articles (non SCI) and 8 extension, plus 7 books chapter have been also published. (chart 25).

Se han publicado 58 artículos en revistas recogidas en el SCI, de las que un alto porcentaje corresponden al primer cuartil de su categoría, en las áreas de ciencias veterinarias, epidemiología, enfermedades emergentes y transfronterizas, virología, inmunología, microbiología y sanidad ambiental. Asimismo, se

Gráfico 25 Publicaciones del Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA) / Publications of the Animal Health Research Centre.

Divulgación / Extension | 8

Libros y capítulos / Books and chapters | 7

Artículos científicos no SCI / Non SCI scientific articles | 5

Artículos científicos SCI / SCI scientific articles | 58

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Proyectos / Projects

complementarias del INIA, los convenios con empresas, estudios específicos y servicios por facturación comercial. (gráfico 26).

Durante 2013 el CISA ha trabajado en la ejecución de 39 actividades correspondientes a proyectos de convocatorias competitivas, convenios de colaboración y contratos, por un importe total de aproximadamente 2,9 millones de euros. Son de destacar las aportaciones recibidas de la UE a través de seis Proyectos del Séptimo Programa Marco y del proyecto como Laboratorio de Referencia de PPA de la UE, que han ascendido a un total de 1,2 millones de euros. También merecen detallarse los proyectos del Plan Nacional de I+D+I, tanto del INIA como de MINECO, con una aportación total aproximada de 1 millón de euros. Una parte importante de los fondos recibidos provienen de los trabajos realizados a través de la encomienda de gestión con el Ministerio de Agricultura, Alimentación y Medio Ambiente por una cantidad de unos 450.000 euros. Otras fuentes de financiación provienen de la Comunidad de Madrid, las acciones

In 2013 CISA-INIA has been working in 39 activities including competitive call projects, agreements and contracts with companies and Institutions, providing an income of around 2,9 million Euros. It should be remarked the contributions received from the EU through the Seventh Framework Programme projects (six) and the EU Reference Laboratory, with a total of 1.2 million Euros. It is also important the contribution of projects of public funding from the National R&D&i Plan (six). A significant income from the work carried out through the specific agreement with the Ministry of Agriculture, Food and Environment, around 450 thousand euro, must also be noted. Other sources of funding come from agreements with instituitons companies, specific studies and commercial billing services (chart 26).

Gráfico 26 Financiación Proyectos del Centro de Investigación en Sanidad Animal (2013) / Projects of the Animal Health Research Centre (2013). Encomiendas, convenios y contratos / Agreements and contracts with public and private sector | 446.000 €

Otros internacionales / Other international | 230.000 €

Plan Nacional I+D+i / National R&D&i Plan | 1.002.000 €

EU / EU | 1.235.000 €

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Cooperación internacional / International cooperation

animal infectious diseases, APHAEA.EMIDA about harmonised approaches in monitoring wildlife population health, ecology and abundance, and Global African Swine Fever Research Alliance GARA.CISA- INIA participates in the Campus of International Excellence, Campus Moncloa and in its network EPICONTROL

Además de las colaboraciones activas que mantiene el CISA a través de proyectos de investigación con multitud de Institutos europeos y de otros continentes, el CISA participa en un número importante de redes de excelencia, destacando EPIZONE (RWG), para enfermedades epizoóticas, su diagnóstico y control; ARBOZOONET para el control de enfermedades zoonóticas emergentes vectoriales y NADIR, red de instalaciones de investigación de enfermedades infecciosas animales. También interviene activamente en la Eranet APHAEA. EMIDA sobre sanidad animal y ecología de especies silvestres y en la Alianza Global para Investigación en Peste Porcina Africana, GARA. CISA-INIA también participa en el Campus de Excelencia Internacional, Campus Moncloa y en su red EPICONTROL.

Some important collaborative activities of technical assistance in procedures, protocols and reference material, have been performed with more than 50 countries worldwide through DG SANCO (EC) and FAO, as Reference Laboratory for African swine fever, the active collaboration with the OIE and FAO in certain infectious diseases, the join studies with the International Livestock Research Institute (ILRI, Kenya) and advising in biosafety topics through EU agencies and FAO. It should also be noted the scientific collaborations we maintain regularly with the National Institute of Agricultural Technology of Argentina (INTA-INIA).

Actividades de asesoramiento y servicios / Advisory activities and services

Se han mantenido actividades de asistencia y colaboración técnica con más de 50 países de todos los continentes sobre procedimientos, nuevas tecnologías, protocolos y material de referencia a través de los trabajos para la DG SANCO (EC) y la FAO como Laboratorio de Referencia para Peste Porcina Africana, los trabajos con el International Livestock Research Institute (ILRI, Kenya), la colaboración activa con la OIE y con la FAO en ciertas enfermedades infecciosas, y las asesorías en materia de bioseguridad a través de agencias de la UE y la FAO. Destacan también las colaboraciones científicas que se mantienen regularmente con el Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria de Argentina (Convenio INIA-INTA).

Investigadores del centro participan como miembros expertos en distintos comités científicotécnicos nacionales e internacionales y grupos de trabajo. Entre ellos, el comité especial de investigación EuFMD de la FAO (RWG) para la identificación de necesidades y el control de la Fiebre Aftosa; diversos comités internacionales y grupos de trabajo de expertos, impulsados por la DG SANCO (EC) y la FAO para Peste Porcina Africana, principalmente en los temas de epidemiología, diagnóstico y control; y los grupos de trabajo promovidos por la DG SANCO (EC) sobre planes de control de Peste Porcina Clásica en países europeos. También se ha participado activamente en los comités científicos de congresos internacionales como el de la Sociedad Europea de Virología Veterinaria (ESVV) y el Colegio Europeo de Parasitólogos Veterinarios (EVPC).

In addition to the active collaboration as partner through research projects with many European institutes and others worldwide, CISA actively participates in a number of networks of excellence, emphasizing EPIZONE for epizootic diseases, diagnosis and control, ARBO-ZOONET for the control of emerging zoonotic vector-borne diseases and NADIR, network of facilities for research on

A nivel nacional cabe destacar la participación de un número importante de los investigadores del 148

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CISA-INIA researchers participate as expert members in a number of national and international committees and working groups. Among them, the EuFMD special committee on research (RWG) for the identification on the needs and control of foot-and-mouth disease; several international committees and working groups promoted by DG SANCO (EC) and FAO on African Swine Fever in the areas of epidemiology, diagnosis and control and the participation in the working group launched by DG SANCO (EC) for control programmes of Classical Swine Fever in European countries. They have also participated in scientific committees of international congresses for the European Society for Veterinary Virology (ESVV) and the European Veterinary Parasitology College (EVPC).

CISA-INIA como expertos evaluadores de proyectos del Plan Nacional de Investigación Científica, Desarrollo e Innovación Tecnológica de España, la participación en comités y grupos de trabajo de la Agencia Española del Medicamento y del Fondo de Investigaciones Sanitarias, (Ministerio de Sanidad), de la Asociación Española de Toxicología, de la Plataforma Tecnológica Vet+i, y la participación en los comités de ANAPORC. Otros trabajos de asesoramiento están relacionados con la evaluación de riesgo ambiental de medicamentos veterinarios para laboratorios farmacéuticos de sanidad animal y las asesorías científico técnicas externas sobre actividades del Ministerio de Agricultura, Alimentación y Medio Ambiente (MAGRAMA).

In reference to activities of researchers for evaluating projects at national level, it is worth to point out the participation of a significant number of CISA-INIA experts as project evaluators for the Plan for Scientific Research, Development and Technological Innovation of Spain, also the participation in committees and working groups of the Spanish Drug Agency and Health Research Foundation (Ministry of Health), in the Spanish Association of Toxicology, the Technology Platform Vet+i and in ANAPORC.

La mayoría de los investigadores realizan actividades de revisión de artículos de revistas SCI, destacando en 2013 las realizadas para las revistas Environmental Science & Technology, Veterinary Microbiology, Clinical Microbiology and Infection, Journal of Experimental Medicine, Journal of Virology, Developmental and Comparative Immunology, Journal of Virology Methods, Journal of Immunology, Viral Research, Molecular Immunology, Fish and Shellfish Immunology, Journal of Hazardous Materials, Acta Veterinaria Scandinavica, Infection genetics and Evolution, Epidemiology of Infection, Revue d’élevage et de médecine vétérinaire des pays tropicaux, Emerging Infectious Diseases.

Other consultative work is related to environmental risk assessment for veterinary drugs for animal health pharmaceutical laboratories and scientific and technical external advising for the activities of the Ministry of Agriculture Food and Environment (MAGRAMA).

Durante el 2013, el servicio de Seguridad Biológica ha prestado asesoramiento técnico en diseño y mejora de instalaciones de nivel 3 y 4 de biocontención al Banco Nacional de ADN (ISS Carlos III); Centro de Investigación del Cáncer (Universidad de Salamanca); Acciona; Zoetis; Ministerio de Agricultura y Ganadería de la República de Costa Rica; Laboratório Nacional Agropecuário – LANAGRO/MG (Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, Brasil); Centro de Instrumentación Científica y Centro de Investigaciones Biomédicas (Universidad de Granada); Laboratorio Central de Veterinaria (MAGRAMA).

Most CISA-INIA researchers perform activities as reviewer/referees for SCI journal articles, including in 2013 the journals of Environmental Science & Technology, Veterinary Microbiology, Clinical Microbiology and Infection, Journal of Experimental Medicine, Journal of Virology; Developmental and Comparative Immunology; Journal of Virology Methods, Journal of Immunology; Viral Research, Molecular Immunology; Fish and Shelfish Immunology, Journal of Hazardous Materials, Acta Veterinaria Scandinavica, Infection Genetics and Evolution, 149

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Epidemiology & Infection, Revue d’Elevage et de Medecine des pays tropicaux, Emerging Infectious Diseases.

In 2013 there has been a significant participation in dissemination activities, with a total of 70 activities, including more than 15 invited lectures, of them in international forums and 30 conferences and congress papers and workshops, of them at international level.

During 2013, the Biosafety service has provided technical advice on design and improvement of facilities for biocontainment levels 3 and 4 to: the National DNA Bank (ISS Carlos III); Center for Cancer Research (University of Salamanca); Acciona; Zoetis; Ministry of Agriculture of the Republic of Costa Rica; National Agricultural Laboratory - LANAGRO / MG. (Ministry of Agriculture, Livestock and Supply of Brazil); Center for Scientific Instrumentation and Center for Biomedical Research (University of Granada); and Central Veterinary Laboratory (MAGRAMA).

Likewise, we have organised meetings and dissemination activities performing a state of the art and latest advances in animal disease research most of them with representatives from animal health laboratories in more than 40 countries, a large number of these activities as a reference laboratory in the EU and / or FAO. CISA-INIA researchers have actively been involved in teaching in a number of graduate MS programmes including Virology, Toxicology, Crisis Management and Emerging Threats in a Globalised World, and Animal Health and Science. Also it has been performed a large number of seminars and lectures in some subjects of Spanish colleges belonging to UCM, UAM, CEU San Pablo University and UAX.

Actividades de difusión / Dissemination activities Durante 2013 se ha realizado una importante participación en actividades de difusión en foros nacionales y principalmente internacionales, con más de 70 actividades, de ellas más de 15 ponencias invitadas, además de unas 30 comunicaciones a congresos y workshops. Asimismo, se han organizado reuniones de trabajo y difusión de avances en la investigación de enfermedades, con representantes de los laboratorios de sanidad animal de más de 40 países, un gran número de ellas como Laboratorio de Referencia de la UE y/o de la FAO.

CISA-INIA has very actively participated in the “Science week”, with lectures and two open days for citizens.

Patentes / Patents Dos aislados de hongos entomopatógenos se han registrado en la Colección Nacional de Cultivos Tipo de Valencia (CECT 20829 y CECT 20830).

Investigadores del CISA-INIA participan muy activamente en la impartición de distintos Másteres de post-grado entre ellos los de Virología, Toxicología, Gestión de Crisis y Amenazas Emergentes en un Mundo Globalizado, y Producción y Sanidad Animal, así como en la impartición de un importante número de jornadas, seminarios y conferencias en algunas asignaturas, todo ello para diversas facultades pertenecientes a la UCM, UAM, Universidad San Pablo CEU y UAX.

La Patente de invención “Peptide vaccines for the prevention of foot-and-mouth disease”, (PCT/ EP2013/056843) ha sido concedida y se ha firmado un acuerdo de licencia exclusiva con Virbac para su comercialización en China. Se ha firmado un contrato de explotación comercial con el título “Elaboración y explotación comercial de la proteína recombinante de la cápsida del calicivirus felino y de los anticuerpos monoclonales específicos frente a dicha proteína (CON12-061)” con la empresa INGENASA

CISA-INIA ha participado activamente en la Semana de la Ciencia, impartiendo charlas sobre sus actividades y manteniendo dos días de puertas abiertas. 150

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Pascual Álvarez, Gonzalo. 2013. Procedures for Biosafety Level 3 Facility Biological Containment. Directors: Dr. M ª Rosario Artigao Barquero, Dr. Domingo Marquina. Faculty of Health Sciences Department of Veterinary Medicine, University Alfonso X El Sabio

We have obtained three patents. Two isolates of Entomopathogenic Fungi have been reported in the National Type Culture Collection Valencia (CECT 20829 and CECT 20830). Patent entitled “Peptide vaccines for the prevention of foot-and-mouth disease”, (PCT/EP2013/056843)” has been approved, and an agreement for the exclusive licensing in China has been signed with the company Virbac.

Premios y distinciones / Prizes and awards

A commercial contract for exploitation has been signed “Development and commercial exploitation of the recombinant capsid protein of feline calicivirus and specific monoclonal antibodies against this protein (CON12-061) with the company INGENASA

El CISA ha recibido dos premios: • “Virólogo Joven 2013” por parte de la Sociedad Española de Virología. • IX Premio “Madri+d de comunicación científica” por el blog de divulgación “Virus emergentes y Cambio Global” (http://www.madrimasd.org/ blogs/virusemergentes/).

Tesis doctorales / PhD theses Villalonga Vázquez, David. 2013. Study of the etiology and the economic impact of seizures sheep in a slaughterhouse. Director: Félix Valcárcel Sancho. Faculty of Veterinary Medicine, University of Extremadura.

CISA has received two awards: • “Young Virologist 2013” award from the Spanish Society of Virology • IX “Madri + d scientific communication” Award for blog outreach “Emerging Viruses and Global Change” (http://www.madrimasd.org/blogs/ virusemergentes/).

Cano Gómez, Cristina. 2013. Epidemiological and molecular studies of porcine enteric viruses in Spain: application to diagnosis of Swine Vesicular Disease Virus. Director: Miguel Angel Jimenez Clavero. Veterinary Faculty, Complutense University of Madrid

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Grupos de investigación o áreas temáticas: descripción / Research groups

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Enfermedades Emergentes y Transfronterizas / Emerging and Transboundary Diseases

Componentes / Members Arias Neira, Marisa Jiménez Clavero, Miguel Ángel Del Pozo Vegas, Mateo Fernández Pinero, Jovita Gallardo Frontaura, Carmina Llorente de Gracia, Francisco Cano Gómez, Cristina Elizalde Samperio, Maia Fernández-Pacheco López-Amor, Paloma Nieto Martínez, Raquel Pelayo Rincón, Virginia Pérez Ramírez, Elisa Soler Sánchez, Alejandro Jesús Sánchez-Arévalo, Ana García Casado, MªAna García Castey, Teresa Martín Martín, Elena Neves Martín, Elena Pérez Gómez, Covadonga Robles Suárez, Ana Simón Delgado,Alicia Villalba Villodre, Amalia

Científica Titular OPIs. Directora Técnica Tec. Fac. Sup. OOAA. MAPA Científica Titular OPIs Científica Titular OPIs Técnico Superior I+D+I Técnico Superior I+D+I Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Sup.Act.Téc.Prof. Tit.Med.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof.

Contacto: [email protected]

Objetivos / Objectives

la Unión Europea y de la FAO de PPA y del Laboratorio Nacional de Referencia de Fiebre del Valle del Rift (RVF). Realiza labores de asistencia científico-técnica a los Laboratorios Nacionales de Referencia (LNR) de España y una intensa actividad de cooperación internacional.

Nuestro ámbito de trabajo es la I+D+I en enfermedades infecciosas emergentes y transfronterizas con graves repercusiones para la sanidad animal, como: Peste Porcina Africana (PPA), Peste Porcina Clásica (PPC), Enfermedad Vesicular Porcina (EVP), Lengua Azul (LA), Peste de Pequeños Rumiantes (PPR) y fiebre/encefalitis por virus West Nile (WN), entre otras. El equipo es responsable de los Laboratorios de Referencia de

Palabras clave: sanidad animal, diagnóstico, vigilancia, enfermedad emergente, enfermedad transfronteriza. 152

Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA) / Animal Health Research Centre

Our field of work is R&D&i in emerging and transboundary diseases representing serious threats to animal health, such as: African swine fever (ASF), classical swine fever (CSF), swine vesicular disease (SVD), bluetongue (BT), pestedes-petits ruminants (PPR) and West Nile fever (WN), among others. The team is in charge of the European Union and FAO Reference Laboratory for ASF and for the National Reference Laboratory for Rift Valley Fever, as well as scientific and technical assistance to National Reference Laboratories (NRL) for many other diseases. They implements tasks on scientific and technical support and international cooperation.

S2009/AGR-1489 (2010-2013). Vigilancia Sanitaria. Contrato de colaboración INIA-CGIAR. Consultive Group for Internacional Animal Research a través del International Livestock Research Institute (ILRI). (2011-2013) Surveillance, molecular epidemiology and evaluation of diagnostic methods for monitoring and control of African swine fever in Sub-Saharan Africa.

Keywords: animal health; diagnostic; surveillance; emerging disease; transboundary diseases.

EG13-020 (2013-2014). Encomienda de gestión para la realización de actividades de I+D en Sanidad Animal y apoyo a los Laboratorios Nacionales de Referencia del Ministerio de Agricultura, Alimentación y Medio Ambiente con especial atención al diagnóstico de la Peste porcina africana (PPA).

Proyectos de investigación / R&D&i projects

Actividades de I+D+I / R&D&i activities

7 PM EU KBBE 311931 (2012-2015). ASFORCE: Targeted research effort on African swine fever.

Se han estudiado experimentalmente la infección por virus de PPA en cerdos, así como las infecciones con flavivirus (WN y Bagaza) en aves silvestres y ratones, para estudiar su patogenicidad y transmisión. Se han detectado aislados atenuados de virus de PPA asociados a la aparición de animales portadores inaparentes, hecho de especial relevancia en la epidemiología de esta enfermedad. Se han desarrollado y mejorado métodos diagnósticos para virus de PPA, virus WN y otros flavivirus y virus de PPR y se han validado kits comerciales para diagnóstico de PPA.

UE-LRPPA-03 (desde 2003). Laboratorio Europeo de Referencia de peste porcina africana. FP7-HEALTH 261391 (2011-2014). EuroWestNile: European West Nile collaborative research project. RTA 2011-00072-00-00 (2011-2014). Avances en el diagnóstico y la caracterización de enfermedades víricas emergentes de rumiantes de riesgo para España: Peste de pequeños rumiantes y orbivirosis.

Hemos demostrado la equivalencia del virus Bagaza que afectó recientemente a especies cinegéticas en España con el virus de la meningoencefalomielitis del pavo de Israel, ambos causantes de una alta mortalidad.

RTA 2011-00060-C02-01 (2011-2014). Caracterización inmunológica y genética de poblaciones porcinas frente a la infección con nuevas variantes del virus de la peste porcina africana.

Como Laboratorio de Referencia para PPA de la UE y la FAO, se ha realizado una extensa tarea de asistencia científico-técnica a los países de la región del Cáucaso y del Este de Europa afectados por la enfermedad o en alto riesgo. Finalmente, se

AGL2011-13634-E (2011-2012, prorrogado a 2013). Estudio de la virulencia del virus Bagaza, un nuevo flavivirus en España y desarrollo de métodos para su diagnóstico. 153

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ha trabajado en la valoración de un diluyente de dosis seminales, que incluye un nuevo aditivo para evitar la transmisión venérea de Brucelosis en el ganado porcino.

Del Amo J, Sotelo E, Fernández-Pinero J, Gallardo C, Llorente F, Agüero M, Jiménez-Clavero MA (2013). A novel quantitative multiplex real-time RT-PCR for the simultaneous detection and differentiation of West Nile virus lineages 1 and 2, and of Usutu virus. J. Virol. Methods 189, 321327.

During 2013, we have experimentally studied the ASF virus infection in pigs and flavivirus infections (WN and Bagaza) in wild birds and mice, in order to study their pathogenicity and transmission. We highlight the finding of attenuated ASFV isolates that led to the emergence of unapparent carrier animals, something especially relevant in the epidemiology of this disease. We worked on the development and improvement of diagnostic methods for ASF virus, WN virus and other flavivirus, and PPR virus, as well as in the validation of commercial kits for diagnosis of ASF. We have demonstrated the equivalence of Bagaza virus that recently affected game bird species in Spain with the Israel turkey encephalomyelitis virus, both causing high mortalities in the species concerned. As EU and FAO Reference Laboratory for ASF, we performed an extensive task of scientific and technical assistance to the countries of the Caucasus and Eastern Europe affected by the disease or at high risk. Finally, we worked in the evaluation of a diluent of seminal doses, which includes a new additive to prevent venereal transmission of brucellosis in swine.

Elizalde M, Agüero M, Buitrago D, Yuste M, Arias ML, Muñoz MJ, Lelli D, Pérez-Ramírez E, MorenoMartin AM, Fernández-Pinero J (2013). Rapid molecular haemagglutinin subtyping of avian influenza isolates by specific real-time RT-PCR tests. J. Virol. Methods, doi: 10.1016/j. jviromet.2013.10.031. Fernández-Pinero J, Gallardo C, Elizalde M, Robles A, Gómez C, Bishop R, Heath L, Couacy-Hymann E, Fasina FO, Pelayo V, Soler A, Arias M (2013). Molecular Diagnosis of African Swine Fever by a New Real-Time PCR Using Universal Probe Library. Transbound Emerg Dis. 60, 48-58. Gallardo C, Soler A, Nieto R, Carrascosa AL, De Mia GM, Bishop RP, Martins C, Fasina FO, Couacy-Hymman E, Heath L, Pelayo V, Martín E, Simón A, Martín R, Okurut AR, Lekolol I, Okoth E, Arias M (2013) Comparative evaluation of novel African swine fever virus (ASF) antibody detection techniques derived from specific ASF viral genotypes with the OIE internationally prescribed serological tests. Vet Microbiol 162, 32–43.

Artículos científicos SCI / Scientific papers SCI

Leblanc N, Cortey M, Fernandez Pinero J, Gallardo C, Masembe C, Okurut AR, Heath L, van Heerden J, Sánchez-Vizcaino JM, Ståhl K, Belák S (2013). Development of a Suspension Microarray for the Genotyping of African Swine Fever Virus Targeting the SNPs in the C-Terminal End of the p72 Gene Region of the Genome. Transbound Emerg Dis. 60, 378-383.

Beck C, Jiménez-Clavero MA, Leblond A, Durand B, Nowotny N, Leparc-Goffart I, Zientara S, Jourdain E, Lecollinet S (2013). Flaviviruses in Europe: complex circulation patterns and their consequences for the diagnosis and control of West Nile disease. International Journal of Environmental Research and Public Health 10(11), 6049-6083.

Llorente F, Pérez-Ramírez E, Fernández-Pinero J, Soriguer R, Figuerola J, Jiménez-Clavero MA (2013). Flaviviruses in game birds, southern Spain, 2011-2012. Emerg. Infect Dis., 19, 1023-1025.

Cano-Gómez C, García-Casado MA, Soriguer R, Palero F, Jiménez-Clavero MA (2013). Teschoviruses and sapeloviruses in faecal samples from wild boar in Spain. Vet Microbiol. 165(1-2), 115-122. 154

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Scientific and technical assistance, transfer of reference materials, reagents and/or technical protocols developed by our group for the diagnosis of diseases like ASF, CSF and WNF, among others, required by institutions and laboratories for animal diagnosis in EU and non-EU countries

Mur L, Gallardo C, Soler A, Zimmermman J, Pelayo V, Nieto R, Sánchez-Vizcaíno JM, Arias M (2013) Potential use of oral fluid samples for serological diagnosis of African swine fever. Vet. Microbiol. 165(1-2),135-139. Okoth E, Gallardo C,Macharia JM, Omore A, Pelayo V, Bulimo DW, Arias M, Kitala P, Baboon K, Lekolol I, Mijele D, Bishop RP (2013) Comparison of African swine fever virus prevalence and risk in two contrasting pig-farming systems in Southwest and Central Kenya. Prev. Vet. Med. 110(2), 198-205.

Actividades de asesoramiento y servicios / Advisory activities and services Participación de miembros del grupo como expertos en comités y grupos de trabajo / Contributions of group members in expert groups and commitees:

Cooperación internacional / International cooperation

–– Evaluation of food, feed and animal health EURLs, como Laboratorio Europeo de Referencia de peste porcina africana. DG SANCO, UE. –– Coordinación del Grupo de trabajo de Diagnóstico de la Global Alliance for Research in African swine fever (GARA), como expertos en Peste Porcina Africana. –– Grupo de trabajo de la Global Platform for African swine fever and other pig diseases, de la GF-TADS, de la FAO y OIE. –– EKE-expert of knowledge de la EFSA, como expertos en Peste Porcina Africana. –– Punto focal de la RELAB. –– Comité de Seguridad y Farmacovigilancia. Seguridad y Farmacovigilancia de medicamentos veterinarios. Agencia del Medicamento Española (AGEMED). Ministerio de Sanidad y Consumo. –– Grupo 1 de trabajo, subgrupo de porcino. Detección de prioridades y necesidades en Sanidad Animal. Plataforma Tecnológica Española de Sanidad Animal Vet+i. –– Equipo de emergencia veterinaria comunitario. Emergency and risk situations in epizootic diseases. DG SANCO. Unión Europea. –– Evaluador de Proyectos de Investigación FP7-KBBE2013-7-single-stage. European Commission, Directorate General for Research & Innovation. UE.

Participación en redes de excelencia Global Alliance for Research in African swine fever (GARA). Cooperación bilateral España-Marruecos: Identificación de temas de investigación para la colaboración conjunta en distintas áreas de la agricultura, ganadería, energías, alimentación. Secretaría de Estado del MINECO. Asistencia científico-técnica y transferencia de materiales de referencia, reactivos y/o procedimientos desarrollados por nuestro grupo para el diagnóstico de enfermedades víricas como PPA, PPC o WN, entre otras, requeridas por instituciones y laboratorios de diagnóstico animal de países de la UE (Bélgica, Eslovenia, España, Francia, Grecia, Italia, Letonia, Lituania, Polonia, Portugal, Reino Unido) y terceros países (Bielorrusia, Chad, Kazajstán, Rusia, Ucrania).

Participation in networks of excellence: Global Alliance for Research in African swine fever (GARA) Spain-Morocco bilateral cooperation: Identification of research topics for joint collaboration in different areas of agriculture, livestock, energy, and feed. State Secretariat of MINECO. 155

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Actividades de difusión / Dissemination activities

–– Evaluación y emisión de informes para programas frente a PPA, PPC y EVP. European Commission, Health and Consumers Directorate General (DG SANCO). UE. –– Evaluador de proyectos de la Royal Society del Reino Unido, en las propuestas para el Levrhulme Royal Society Africa Award, y la Biotechnology and Biological Sciences Research Council Research Grant Application. –– Evaluador de proyectos de I+D para la ANR (Agencie Nationale pour la Rècherche, Francia). –– Evaluador de proyectos de I+D para la Agencia Nacional de Evaluación y Prospectiva. –– Experto en enfermedades transmitidas por vector en España, a petición del Instituto de Salud Carlos III. –– Miembro del Comité de Ética del Laboratorio Central de Veterinaria del MAGRAMA. –– Miembro del Comité de Ética del INIA. –– Miembro del Comité de Ética de los OPIs.

9 Ponencias invitadas en congresos y reuniones nacionales e internacionales / Invited keynotes in national and international congresses and meetings: –– Global Alliance for African swine fever. NY, PIADC, USA. –– Workshop: Global Platform for African swine fever and other pig diseases. FAO, Roma, Italia. –– Symposium AVEDILA, Madrid. –– 5th Workshop of the EURL for equine diseases ANSES, Maisons-Alfort,Francia. –– 5th European Virology Congress, Lyon,Francia. –– Vectorie final meeting, Consorcio Europeo Vectorie (UE-FP/ HEALTH Project), Rotterdam, Holanda. –– EpisouthPlus Training: West Nile and Biosafety II in the lab. Instituto de Salud Carlos III, Madrid. –– Jornadas “La malattia di Aujeszky può minacciare la suinicoltura italiana”. VeronaBrescia, Italia.

Revisor de publicaciones científicas en revistas SCI Referee of scientific publications in SCI journals: PLoS One, J Virol Methods, Eurosurveillance, Anal Biochem, Rev Esp Salud Pública, Sci Total Environm, Transbound Emerg Dis, Vet Microbiol, Virus Res.

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Organización de congresos y reuniones nacionales e internacionales / Organisation of national and international congresses and meetings:

defensa y patógenos de interés. Facultad de Veterinaria, UCM. Divulgación científica / Scientific dissemination:

–– Annual Meeting of the EU National Reference Laboratories of African Swine Fever and Classical Swine Fever, en calidad de Laboratorio Europeo de Referencia de PPA. Bruselas, Bélgica. –– XXXIV Symposium de ANAPORC. Ámbito: Internacional. Actividad Científico-Tecnológica de la Producción Porcina. Madrid.

–– IX Premio “Madri+d de comunicación científica” por el blog de divulgación “Virus emergentes y Cambio Global” (http://www. madrimasd.org/blogs/virusemergentes/) –– Charla invitada en Tertulia de las tres tertulias, Ateneo de Madrid. –– 2 artículos de divulgación

12 Comunicaciones en congresos y reuniones internacionales / Contributions to international congresses and meetings:

Actividades de transferencia / Technology transfer activities

–– 16th International Symposium of the World Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians (WAVLD), Berlín, Alemania. –– 7th Annual Meeting of Epizone, Bruselas, Bélgica. –– 5th European Congress of Virology,Lyon, Francia. –– Annual Meeting of the EU National Reference Laboratories of African Swine Fever and Classical Swine Fever, Bruselas, Bélgica.

Organización e impartición de 6 cursos y estancias individuales de formación internacionales / Organisation and teaching of 6 international courses and short-term trainings: –– Training course on African Swine Fever Laboratory Diagnosis. Transferencia tecnológica y asistencia científico-técnica en materia de diagnóstico de laboratorio de peste porcina africana. –– Episouth Plus Training: West Nile and Biosafety II in the laboratory. Transferencia tecnológica y asistencia científico-técnica en materia de epidemiología, diagnóstico de laboratorio y caracterización molecular de virus West Nile.

8 Comunicaciones en congresos y reuniones nacionales / Contributions to national congresses and meetings: –– XII Congreso Nacional de Virología, Burgos. –– Reunión de los laboratorios de Sanidad Animal de las CCAA para el diagnóstico de la Peste Porcina Clásica, Peste Porcina Africana y Enfermedad Vesicular Porcina. MAGRAMA, Madrid.

Tesis doctorales / PhD theses Cano Gómez, Cristina. 2013. Estudios epidemiológicos y moleculares sobre virus entéricos porcinos en España: aplicaciones al diagnóstico del virus de la enfermedad vesicular del cerdo. Director: Miguel Ángel Jiménez Clavero. Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid.

Cursos y Másters / Masters and courses: –– Master en gestión de crisis y amenazas emergentes en un mundo globalizado. Universidad San Pablo CEU, Madrid. –– Asignatura de segundo ciclo, ponencia sobre La Seguridad Biológica desde la perspectiva de

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uevas Estrategias de Control de Patógenos Relevantes 2 Nen Sanidad Animal / New Strategies for the Control of Relevant Pathogens in Animal Health Componentes/ Members Sevilla Hidalgo, Noemí Blanco Lavilla, Esther Bárcena del Riego, Juan Alejo Herberg, Alí Martín García, Verónica Rojas Carrasco, José Manuel Pascual vega, Elena Gómez Rodríguez, Yolanda Guerra Sánchez, Beatriz Moreno Borrego, Héctor Moreno Mogedano, Noelia

Científica Titular OPIs Científica Titular OPIs Científico Titular OPIs Científico Titular OPIs Investigadora Ramón y Cajal Titulado Superior Contratado Titulada Superior Contratada Téc. Sup. Act. Tec. Prof. Téc. Sup. Act. Tec. Prof. Téc. Sup. Act. Tec. Prof. Personal contratado en formación

Objetivos / Objectives

identify and characterize viral epitopes for vaccine development. To analyze the immune response to the pathogens in natural hosts. To characterize new viral isolates. To generate Calicivus VLPs as a platform for antigen presentation. To develop new vaccines based on recombinant adenovirus and immunogenic peptides.

El objetivo es el desarrollo de estrategias de control de patógenos de interés en sanidad animal: Fiebre Aftosa (VFA), virus de la Gripe, Peste de Pequeños Rumiantes (PPRV) y virus de la Lengua Azul (BTV), entre otros. Identificación y caracterización de epítopos para su formulación en nuevas vacunas y métodos de diagnóstico. Análisis y determinación de los parámetros de respuesta inmune frente al patógeno en los animales hospedadores. Identificación de los mecanismos inmunes relevantes en protección. Caracterización biológica y molecular de aislados víricos. Caracterización estructural e inmunogénica de VLPs de Calicivirus como plataformas de presentación de antígenos. Desarrollo de nuevas vacunas basadas en péptidos sintéticos y vectores adenovirales.

Key words: Vaccine, Immune response, Virus-like particles ,adenovirus, peptides

Proyectos de Investigación / R&D projects UE-228394 NADIR (2009-2013) The Network of Animal Disease Infectiology and Research Facilities

Palabras clave: Vacunas, respuesta inmune, Virus-like particles, adenovirus, péptidos

AGL2010-22200-C02-02 (2011-2013). Caracterización de la respuesta inmune inducida por cepas del virus de la gripe porcina circulantes en España. Desarrollo de vacunas basadas en VLPs quiméricas

The main objective is the development of new control strategies of different pathogens in Animal Health: Foot-and-mouth disease virus (FMDV), Influenza, Peste de petites ruminants (PPRV), Bluetongue virus (BTV), among others. To

AGL 2009-08711(2010-2013). Patogenia de las infecciones iridovirales de peces: modulación viral del sistema inmune 158

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Role of IFN-I in the in vivo infection by BTV of hematopoietic cells.

AGL2011-25025 (2012-2014). Adenovirus recombinantes como una nueva estrategia para la expresión de inmumoduladores y vacunas contra el virus de la peste de los pequeños rumiantes

Mapping of B cell epitopes in the subdomain 2 of the VP60 protein of RHDV; identification of new targets for vaccine development.

AGL2012-33289 Mecanismos de modulación de la respuesta a IFN-I por el virus de la lengua azul (BTV) y su relevancia en el diseño de nuevas estrategias vacunales

Generation of VLPs from RHDV that carry antigenic proteins on the capsid, able to induce a potent humoral response against heterologous epitopes; identification of optimal sites of insertion of heterologous epitopes.

Actividad de I+D / R&D activities

Optimization of a dendrimeric peptide vaccine against FMDV in porcine.

Desarrollo de una vacuna frente a PPRV basada en adenovirus recombinantes que expresan las proteínas H y F del virus.

Artículos científicos / Scientific papers

Descripción y caracterización de epítopos T de la proteína NS1 de BTV.

Cubillos C, Gómez-Sebastian S, Moreno N, Nuñez M, Mulumba-Mfumu L, Quembo C, Heath L, Etter E, Jori F, Escribano J, Blanco E (2013). African swine fever virus serodiagnosis: a general review with a focus on the analyses of African serum samples. Virus Research, ASFV special issue Virus Res. 173(1), 159-67.

Papel del IFN-I en la infección in vivo de células de origen hematopoyético con BTV. Mapeo de epítopos B en el subdominio P2 de la proteína VP60 del virus de la enfermedad hemorrágica del conejo (RHDV); identificación de posibles nuevas dianas de protección.

Monsó M, De la Torre BG, Blanco E, Moreno N, Andreu D (2013). Influence of Conjugation Chemistry and B Epitope Orientation on the Immune Response of Branched Peptide Antigens. Bioconjug Chem. 24(4), 578-85.

Obtención de cápsidas vacias (VLPs) del RHDV capaces de inducir respuesta humoral potente frente a epítopos heterólogos insertos en la cápsida; identificación de sitios de inserción y tamaño de epitopos heterólogos óptimos.

Blanco E, Cubillos C, Moreno N, Bárcena J, de la Torre BG, Andreu D, Sobrino F (2013). B Epitope Multiplicity and B/T Epitope Orientation Influence Immunogenicity of Foot-And-Mouth Disease Peptide Vaccines. Clinical and Developmental Immunology doi: 10.1155/2013/475960.

Optimización de vacuna peptídica dendrimérica para protección frente al virus de la Fiebre aftosa, en ganado porcino.

Pontejo SM, Sánchez C, Martín R, Mulero V, Alcami A, Alejo A (2013). An orphan viral TNF receptor superfamily member identified in lymphocystis disease virus. Virol J. 10, 188.

Development of a vaccine against PPRV based on recombinant adenovirus expressing the H and F proteins.

Crisci E, Bárcena J, Montoya M (2013). Virus-like particle-based vaccines for animal viral infections. Inmunología 32,102-116.

Description and characterization of T cell epitopes on the NS1 protein from BTV. 159

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Cooperación internacional / International cooperation

proteínas alternativas, que incluyen la obtención de pseudoparticulas virales (VLPs).

Colaboración con los grupos de los Dres. Charleston (IAH, UK) y Jungersen (DTU-VET, DK), en la identificación de nuevos epítopos del virus Influenza y su aplicación al desarrollo de nuevas vacunas.

International cooperation with: Dr. Charleston (IAH, UK) and Jungersen (DTUVET, DK) groups: identification of new influenza virus epitopes and development of new vaccines.

Colaboración con el grupo de la Dra. Zamorano (INTA, Argentina), en el desarrollo de vacunas peptídicas para el control de la Fiebre aftosa en ganado bovino.

Dr. Zamorano (INTA, Argentina): development of peptidic vaccines for the control of FMD in cattle.

Colaboración con el grupo del Dr. Dekker (CVI, Lelystad, Holanda), en la evaluación en cerdo de la capacidad protectora de diferentes construcciones dendriméricas frente al virus de la Fiebre aftosa.

Dekker group (CVI, Lelystad, Holland): determination of the protective efficacy in swine of dedrimeric constructs against FMDV. Dr. de Jong (Research and Development department in Express2ion, DK): use of alternative expression platforms for the production of virus like particles.

Colaboración con el grupo del Dr. de Jong (Research and Development department in Expres2sion, DK), en la evaluación de plataformas de producción de

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Actividades de asesoramiento / Advisory activities and services

Patentes La Patente de invención “Peptide vaccines for the prevention of foot-and-mouth disease”, (PCT/EP2013/056843) ha sido concedida y se ha firmado un acuerdo de licencia exclusiva con Virbac para su comercialización en China.

Asesoramiento en diagnóstico serológico del virus de la peste porcina africana. Colaboración con el Dr. Mulumba (Laboratorio Veterinario de Brazzaville, República Democrática del Congo).

Se ha firmado un contrato de explotación comercial con el título “Elaboración y explotación comercial de la proteína recombinante de la cápsida del calicivirus felino y de los anticuerpos monoclonales específicos frente a dicha proteína (CON12-061)” con la empresa INGENASA.

Serodiagnosis of african swine fever virus (collaboration with Dr. Mulumba (Brazzaville Veterinary Laboratory, DRC).

Actividades de difusión / Dissemination activites Se ha participado en 2 congresos: 5th International conference on Caliciviruses Beijing, China, Octubre 2013 y EPIZONE, 7th Annual Meeting “Nothing permanent except change”. Bruselas, Bélgica, Octubre 2013.

Patent entitled “Peptide vaccines for the prevention of foot-and-mouth disease”, (PCT/ EP2013/056843)” has been approved, and an agreement for the exclusive licensing in China has been signed with the company Virbac.

We have participated in the next meeting: 5th International conference on Caliciviruses Beijing, China, Octubre 2013 and EPIZONE, 7th Annual Meeting “Nothing permanent except change”. Bruselas, Bélgica, Octubre 2013.

A commercial contract for exploitation has been signed “Development and commercial exploitation of the recombinant capsid protein of feline calicivirus and specific monoclonal antibodies against this protein (CON12-061) with the company INGENASA.

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y Sanidad Ambiental / Epidemiology and 3 Epidemiología Environmental Health Componentes / Members Muñoz Reoyo, Mª Jesús Carballo Santaolalla, Matilde De la Torre Reoyo, Ana Esperón Fajardo, Fernando González Notario, Miguel Iglesias Marín, Irene Bosh Lópe, Jaime Asensio Domínguez, Irene Neves Martín, Elena Nogal Ballesteros, Verónica

Científica Titular OPIs Científica Titular OPIs Científica Titular OPIs Tecnólogo I+D+I Colaborador I+D+I Tit. Sup. Act. Téc. Prof. Tit. Sup. Act. Téc. Prof. Tit. Sup. Act. Téc. Prof. Personal Técnico de Apoyo Técnica Superior de Laboratorio

Contacto: [email protected]

Objetivos / Objectives

S2009/AGR-1489. (2009-2014). “Programa sobre Vigilancia Sanitaria”.

Análisis espacio temporal de la introducción y difusión de enfermedades de interés prioritario para la ganadería y zoonóticas, destacando el papel de la fauna silvestre y los factores de riesgo ambientales. Evaluación sanitario-ambiental de los antimicrobianos de uso veterinario.

RTA2010-00066C02 (2010-2012). Estudio de los niveles de residuos de antimicrobianos y resistencias bacterianas en excretas animales y lodos de depuradora empleados en agricultura”.

Palabras clave: ecoepidemiología, sanidad ambiental, antimicrobianos, análisis de riesgo.

219235-FP7-ERA-NET-EMIDA (2012). Harmonized Approaches in monitoring wildlife population health, and ecology and abundance (APHAEA).

Spatiotemporal analysis of introduction and spread of significant livestock diseases and zoonotic diseases, highlighting the role of wildlife and environmental risk factors. Environmental-health assessment of veterinary antimicrobials.

ASFORCE 311931 (2012). Targeted research effort on African swine fever.

Actividades de I+D / R&D Activities

Keywords: ecoepidemiology, environmental health, antimicrobials, risk analysis.

Identificación de las zonas de riesgo de contacto infeccioso de Enfermedad de Aujeszky (EA) entre jabalí y cerdo doméstico en extensivo en Andalucía y Extremadura. Identificación de la Tasa de transmisión de EA en jabalí en ambas comunidades. Modelo de dinámica de poblaciones de jabalí para su posterior incorporación al Modelo SIR de la EA en poblaciones de jabali y cerdo extensivo.

Proyectos de investigación / R&D projects CGL2009-08125 (2009). Avances en virología de cetáceos. Implicaciones sanitarias en el Archipiélago Canario. 162

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Identifying risk areas of infectious contact between wild boar and extensive domestic pig in Andalusia and Extremadura. Identification of transmission rate of AD in wild boar. Modellization of population dynamics of wild boar, which will be included in AD SIR model in wild boar and extensive domestic pig populations

Identificación de la Tasa de transmisión inicial (Ro) en jabalí para la Peste Porcina Africana (PPA) en la actual epidemia de Rusia (2007-2013) mediante análisis espaciotemporal, que mejora los planes de vigilancia y control. Se ha evaluado la distribución y abundancia del jabalí en Eurasia focalizándolo en las áreas de riesgo. Nueva PCR a tiempo real para la detección del morbillivirus del cetáceo (CeMV), que permitió diagnosticar un brote atípico de CeMV en las costas mediterráneas españolas en 2012. Detección y caracterización molecular de nuevos poxvirus y papillomavirus en cetáceos varados en España.

Estimation of Reproductive ratio of ASF in Russia (2007-2013) in wild boars using a Spatial-temporal analysis, which represents an improvement for the design of surveillance and control plans of ASF in wild boar. Evaluation of distribution and abundance of wild boar in Eurasia focusing on risk areas. Design of a new real-time PCR for detection of cetacean morbillivirus (CeMV), which cause several significant epizooties, sensibility of results allowed to diagnose an atypical CeMV outbreak in Spanish Mediterranean coast in 2012. First molecular detection and characterization of new papillomavirus poxvirus in stranded cetaceans in Spain.

Armonización y estandarización de métodos de diagnóstico, censo y abundancia poblacional en aves silvestres. Importancia de las poblaciones de aves sinantrópicas como reservorios de cepas enteropatógenas de E. coli y de cepas multirresistentes relevantes para la Sanidad Animal y Salud Pública. Valoración de residuos de tetraciclinas en excretas de aves y purines de cerdo, y determinación de antibiorresistencias en excretas y en suelos abonados con ellas. Elaboración de un mapa local de vulnerabilidad de suelos a la contaminación por tetraciclinas.

Collaboration in harmonized approaches in monitoring wildlife population health, and ecology and abundance in wild birds, in a EU network. Importance of synanthropic birds populations as reservoirs of enteropathogenic strains of E. coli

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and multiresistant strains significant to Animal and Public Health. Evaluation of tetracyclines residues in poultry manure and slurry pig and determination of antibiotic resistances in manure and soils fertilized with manure. Mapping vulnerability soil to contamination by tetracyclines.

Sánchez-Vizcaíno JM. Pfeiffer DU, Wieland B (2013). Introduction of African swine fever into the European Union through illegal importation of pork and pork products. PloS One 8(4), e61104. Esperón F, Martín M.P, Lopes F, Orejas P, Carrero L, Muñoz MJ, Alonso R (2013). Gongylonema sp. infection in the scops owl (Otus scops). Parasitology International 62(6), 502-504.

Artículos Científicos / Scientific papers Carballo M, Esperón F, Carlos S, González M, Vázquez B, Aguayo S, de la Torre A (2013). Occurrence of tetracycline residues and antimicrobial resistance in gram negative bacteria isolates from cattle farms in Spain. Advances in Bioscience and Biotechnology 4, 295-303.

Cabello J, Esperón F, Napolitano C, Hidalgo E, Dávila JA, Millan J (2013). Molecular identification of a novel gamma-herpes virus in the endangered Darwin’s fox (Lycalopex fulvipes). Journal Gen . Virology 94, 2745–2749. Crespo JL, García-Párraga D, Giménez I, RubioGuerri C, Melero M, Sánchez-Vizcaíno JM, Muñoz MJ (2013). Description of two cases of pseudohermaphroditism in loggerhead sea turtles (Caretta caretta). Diseases of Aquatic organisms 105, 183-191.

De la Torre A, Iglesias I, Camuñas LM, Muñoz MJ, Carballo M (2013). Comparison of a soil vulnerability map for tetracycline soil contamination at a global and local scale. Journal of Environmental Protection 4, 595-601. De la Torre A, Bosch J, Iglesias I, Muñoz MJ, Mur L, Martínez-López B, Martínez M, Sánchez-Vizcaíno JM (2013). Assessing the risk of African Swine Fever introduction into the European Union by wild boar. Transboundary and Emerging Diseases doi: 10.1111/tbed.12129.

Cooperacion Internacional / International Cooperation –– FCM meeting of the ASFORCE Project. Madrid, España. –– FCM meeting of the ASFORCE Project. Cagliari, Sardinia.

Rubio-Guerri C, Melero M, Esperón F, Bellière EN, Arbelo M, Crespo JL, Sierra E, García-Párraga D, Sánchez-Vizcaíno JM.(2013). Unusual striped dolphin mass mortality episode related to cetacean morbillivirus in the Spanish Mediterranean sea. BMC Veterinary Research 9, 106.

Actividades de asesoramiento y servicio /Advisory activities and services

Rubio-Guerri C, Melero M, Rivera-Arroyo B, Bellière EN, Crespo JL, García-Párraga D, Esperón F, SánchezVizcaíno JM (2013). Simultaneous diagnosis of Cetacean morbillivirus infection in dolphins stranded in the Spanish Mediterranean sea in 2011 using a novel Universal Probe Library (UPL) RT-PCR assay. Veterinary Microbiology 165, 109-114.

Informe Técnico Científico sobre: “Análisis de los factores relacionados con el riesgo de transmisión de ciertas enfermedades de interés en ganadería. Informe Técnico Científico sobre: “Estudio epidemiológico y sanitario para el desarrollo de un modelo de transmisión entre fauna silvestre y explotaciones ganaderas de ciertas enfermedades de interés en ganadería”.

Costard S, Jones BA, Martínez López B, Mur L, de la Torre A, Martínez M, Sánchez-Vizcaíno F, 164

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Informe Técnico Científico sobre: “Sistemas de visualización y/o tratamiento compatibles con los sistemas operativos utilizados por el MAGRAMA relativos a los estudios mencionados anteriormente”.

–– OIE Global Conference on the Responsible and Prudent Use of Antimicrobial Agents for Animals.París, Francia. –– XX Congreso Español de Toxicología y IV Congreso Iberoamericano. Salamanca. –– Conferencia Environmental System Research Institute (ESRI) Madrid, España. –– 1° Meeting of the WildLife Diseases Association (WDA Latin America Section). Sao Paulo, Brasil. –– First Consultation Workshop on “APHAEA harmonized Approaches in monitoring wildlife Population Health, And Ecology and Abundance”, EMIDA ERANet Project. Brescia, Italia.

Informe Técnico Científico sobre: “Resultados, discusión y conclusiones del estudio epidemiológico de transmisión entre jabalí y explotaciones de cerdo extensivo para ciertas enfermedades de interés en ganadería”.

Technical Scientific Report: “Analysis of the factors related to the risk of transmission of disease”.

Se ha participado en los siguientes Cursos y Másters/Master’s and Courses: –– V Jornadas de Toxicología Ambiental. Residuos de Medicamento y Medioambiente. “Problemática ambiental de residuos de medicamentos. Relevancia de medicamentos veterinarios”. Facultad de Farmacia. Universidad de Alcalá de Henares. Madrid –– “Patología Clínica y Medicina de Laboratorio” Módulo 8. General Practitioner Certificate in Exotic Animal Practice, Madrid. –– Seminario en la Asignatura de “Terapéutica de Animales Exóticos”, Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense Madrid. –– Map gallery. Conferencia ESRI España. “Análisis de daños en fauna silvestre: Estudio espacial de los atropellos de rapaces nocturnas en Badajoz.” Madrid. –– Map gallery. Conferencia ESRI España. “Los movimientos migratorios de las aves silvestres en la dinámica espacio- temporal de las enfermedades.” Madrid –– Sesiones Sectoriales. Medio Ambiente y Agricultura. Conferencia ESRI España. “Identificación de áreas de riesgo para rapaces nocturnas mediante análisis espacial”. Madrid –– Sesiones Sectoriales. Medio Ambiente y Agricultura. Conferencia ESRI España. “Uso de SIG para el análisis del riesgo de introducción de enfermedades a través de movimientos de fauna silvestre”. Madrid.

Technical Scientific Report: “Epidemiological Study on the health and development of a model about AD disease transmission between wildlife and livestock”. Technical Scientific Report: “Visualization Systems and / or treatment compatible with the operating systems used by MAGRAMA relating to the above studies”. Technical Scientific Report: “Results, discussion and conclusions of the epidemiological study of AD transmission between boar and pig farms extensive.” Members of the Spanish Toxicology Association. Environmental Toxicology Section.

Actividades de difusión / Dissemination activities Se ha participado en los siguientes congresos / meetings: –– Annual conference of the Society for Veterinary Epidemiology and Preventive Medicine (SVEPM). Madrid

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y Patología de Peces / Inmunology and 4 Inmunología Fish Pathology Componentes / Members Tafalla Piñeiro, Carolina Castro Sequeiro, Rosario González Granja, Aitor González Torres, Lucia Abós Gracia, Beatriz Pignatelli Garrigos, Jaime Aquilino Amez, Carolina Leal Cebrián, Esther Lugo González, Joana Rodríguez González, Begoña

Investigadora Titular OPIs Tit. Sup. Act. Téc. Prof. Tit. Sup. Act. Téc. Prof. Téc. Sup. Act. Téc. Prof. Tit. Med. Act. Tec. Prof. Tit. Med. Act. Tec. Prof. Personal contratado en formación Tit. Med. Act. Tec. Prof. Estudiante con estancias breves Estudiante con estancias breves

Objetivos / Objectives

of B lymphocytes, responsible for antibody production; and chemokines as mediators of leukocyte mobilization.

El objetivo principal del grupo es comprender los mecanismos de regulación de la respuesta inmune en peces, principalmente la expresada frente a virus. Asimismo, nuestra investigación pretende utilizar este mejor conocimiento de los mecanismos de resistencia en peces para diseñar vacunas antivirales más eficaces, así como nuevos adyuvantes moleculares. Específicamente, estudiamos la regulación de los linfocitos B, responsables de la producción de anticuerpos; y las quimioquinas, moléculas que median la movilización leucocitaria.

Key words: fish, virus, B lymphocytes, chemokines, vaccines

Proyectos de investigación / R&D&i projects AGL2011-29676 (2011-2014). Papel inmunomodulador y microbicida de las quimioquinas en trucha arco-iris.

Palabras clave: peces, virus, linfocitos B, quimioquinas, vacunas

280469SP2-IDEASERC Starting grant (2011-2016). Teleost B lymphocytes, the equivalent of mammalian B1 lymphocytes?

The main objective of our group is to understand the regulation mechanisms of the immune response in fish, specially the one triggered in response to viral infections. Our research pretends to use this increased knowledge of the antiviral resistance mechanisms in fish to design more effective antiviral vaccines, as well as novel molecular adjuvants. Specifically, we study the regulation

311933KBBE 2012.1.2-10 (311993) (2012-2017). Targeted disease prophylaxis in European fish farming. CON13-012. Convenio con el Skretting Aquaculture Research Center (ARC) para el estudio de posibles antivirales como complementos en dietas para peces cultivados.

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Actividades de I+D / R&D Activities Hemos demostrado que los ciegos pilóricos juegan un papel fundamental en la respuesta inmune del tracto digestivo en peces. En ellos se produce un reclutamiento de distintos tipos linfocitarios en respuesta tanto a la infección con IPNV como a la vacunación oral. Se ha caracterizado la respuesta transcripcional de distintas subpoblaciones de linfocitos B en trucha. Abós B, Castro R, Pignatelli J, Luque A, González L, Tafalla C (2013). Transcriptional heterogeneity of IgM+ cells in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) tissues. PLoS One 8(12), e82737.

A través de la caracterización de las células que se infiltran en músculo en respuesta a una vacuna DNA, hemos demostrado que en peces, los linfocitos B son una de las principales células que se movilizan a músculo, al contrario de lo que ocurre en mamíferos.

Castro R, Martínez-Alonso S, Fischer U, Haro NA, Soto-Lampe V, Wang T, Secombes CJ, Lorenzen N, Lorenzen E, Tafalla C (2013). DNA vaccination against a fish rhabdovirus promotes an early chemokine-related recruitment of B cells to the muscle. Vaccine doi: 10.1016/j. vaccine.2013.11.062.

We have demonstrated that the pyloric caeca play a key role in the immune response of the trout digestive tract. Upon IPNV infection or oral vaccination, a recruitment of different lymphocyte subtypes can be observed in this area.

Aquilino C, Castro R, Fischer U, Tafalla C (2013). Transcriptomic responses in rainbow trout gills upon infection with viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV). Developmental and Comparative Immunology 44(1), 12-20.

We have characterized the transcriptomic response of different B cell subpopulations in trout. Through the characterization of the cells that are mobilized to the muscle in response to DNA vaccination, we have revealed that, in fish, B cells are one of the main cell types mobilized to the muscle, on the contrary to what occurs in mammals.

Ballesteros NA, Castro R, Abos B, Rodríguez SaintJean SS, Pérez-Prieto SI, Tafalla C (2013). The pyloric caeca area is a major site for IgM(+) and IgT(+) B cell recruitment in response to oral vaccination in rainbow trout. PLoS One 8(6), e66118. Tafalla C, Bøgwald J, Dalmo RA (2013). Adjuvants and immunostimulants in fish vaccines: current knowledge and future perspectives. Fish & Shellfish Immunology 35(6), 1740-50.

Artículos Científicos / Scientific papers Ballesteros NA, Rodríguez Saint-Jean S, PérezPrieto SI, Aquilino C, Tafalla C (2013). Modulation of genes related to the recruitment of immune cells in the digestive tract of trout experimentally infected with infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) or orally vaccinated. Developmental and Comparative Immunology 44(1), 195-205.

Pham PH, Lumsden JS, Tafalla C, Dixon B, Bols NC (2013). Differential effects of viral hemorrhagic septicaemia virus (VHSV) genotypes IVa and IVb on gill epithelial and spleen macrophage cell lines from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Fish & Shellfish Immunology 34(2). 632-40 167

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Actividades de asesoramiento y servicios / Advisory activities and services

Dixon B, Luque A, Abós B, Castro R, GonzálezTorres L, Tafalla C (2013). Molecular characterization of three novel chemokine receptors in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Fish & Shellfish Immunology 34(2), 641-51.

Revisión de artículos para las siguientes revistas científicas: Journal of Immunology, Vaccine, Molecular Immunology, PlosOne, Plos Pathogens, Fish & Shellfish Immunology, Developmental and Comparative Immunology.

Cooperación Internacional / International cooperation Participación en redes de excelencia de la UE.

The group has reviewed papers for these SCI journals: Journal of Immunology, Vaccine, Molecular Immunology, PlosOne, Plos Pathogens, Fish & Shellfish Immunology, Developmental and Comparative Immunology.

–– NADIR-Integrating activities. The network of animal disease infectiology research facilities. –– Hemos colaborado con los grupos del Profesor Secombes (Universidad de Aberdeen, Reino Unido), del Dr. Lorenzen (Universidad de Aarhus, Dinamarca) y el Dr. Fischer (FLI, Alemania) para caracterizar las células que se infiltran en el músculo tras una vacunación DNA. –– La Dr. Lugo del Centro de Biotecnología de La Habana (Cuba) efectuó una estancia de siete semanas en nuestro laboratorio para entender los efectos del neuropéptido PACAP en la funcionalidad de los linfocitos B de trucha. –– Hemos colaborado con el Dr. Bols (Universidad de Waterloo, Canadá) para determinar los efectos de distintos genotipos de VHSV en las células de trucha RTS11.

Actividades de difusión / Dissemination activities Ponencias invitadas en congresos y reuniones internacionales / Invited keynotes in international congresses and meetings –– Fish Immunology Workshop, Wageningen, Netherlands. –– XII Congreso Nacional de Virología, Burgos, España.

Participation in EU networks of excellence

Comunicaciones en congresos y reuniones científicas / Contributions to international congresses and meetings

–– NADIR-Integrating activities. The network of animal disease infectiology research facilities. –– We have collaborated with Professor Secombes (Aberdeen University, United Kingdom), Dr. Lorenzen (Aarhus University, Denmark) and Dr. Fischer (FLI, Germany) to characterize the cells that are infiltrated in the muscle after DNA vaccination. –– Dr. Lugo from the Biotechnology Center in La Habana (Cuba) stayed for 7 weeks in our laboratory to characterize the effects of the neuropeptide PACAP on the B cell function. –– We have collaborated with Dr. Bols (Waterloo University, Canada) to determine the effects of different VHSV genotypes on the trout RTS11 cell line.

–– 1st International Conference of Fish and Shellfish Immunology. Vigo, Spain. –– 16th International Conference on Diseases of Fish and Shellfish.Tampere, Finland.

Premios / Awards “Virólogo Joven 2013” por parte de la Sociedad Española de Virología. “Young Virologist 2013” by the Spanish Virology Society. 168

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Molecular y Celular de Priones / Cellular and 5 Biología Molecular Biology of Prions Componentes / Members

Torres Trillo, Juan Mª Espinosa Martín, Juan Carlos Villa Díaz, Ana Lorenzo Balboa, Patricia Prieto Puntero, Irene Esteban Martín, Ana Piquer Benítez, Juan Aguilar Calvo, Patricia Leao Barragán, Sherezade

Investigador Titular OPIS Investigador Titular OPIS Técnica I+D+I Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Téc.Sup.Act.Téc.Prof. Oficial de Act. Téc. y Profesionales. Personal contratado en formación Estudiante de grado de Veterinaria

Contacto: [email protected]

Objetivos / Objectives

different species and its capability of transmission to human.

El objetivo general del grupo es avanzar en el conocimiento de las encefalopatías espongiformes transmisibles (EETs) y sus agentes causantes. Para ello, se siguen tres líneas de investigación: i) desarrollo de bioensayos para la detección y el diagnóstico de estas enfermedades; ii) estudio de los elementos implicados en la replicación y en la patogénesis de los priones y iii) estudio de las diferentes cepas de priones en especies ganaderas y su capacidad de transmisión a humanos.

Keywords: PrP, prion, transmision barrier, prion strains.

Proyectos de investigación / R&D& projects AGL2012-37988-C04-04. (2013-2016) Disección in vitro e in vivo de los mecanismos moleculares implicados en la replicación de los priones superando barreras de transmisión existentes en la naturaleza.

Palabras clave: PrP, prion, barrera de transmisión, cepas de priones.

RTA2012-00004-00-00. (2013-2016). Evaluación del potencial zoonótico de la diversidad de cepas de priones circulantes en las especies ganaderas.

The general objective of the group is to advance in the knowledge of the Transmissible Spongiform Encephalopathies (TSEs) and the agents causing these diseases. Three lines of work are being developed: i) development of bioassay of high sensitivity for prion detection and diagnosis; ii) study of the elements involved in prion replication and pathogenesis and iii) study of the different prion strains in the

EU FP7-2009 CT-228394 (2009). The Network of Animal Disease Infectiology and Research Facilities. EU-FP7-2009 CT-222887 (2009). Protecting the food chain from prions: shaping European priorities through basic and applied research. 169

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EMIDA 219235 FP7 ERA-NET. Towards breeding of goats for genetically determined TSEs resistance. CC010-067. Estimación por bioensayo de la eliminación causada por Priones en los procesos de obtención de hemoderivados. CON012-034. Evaluación de la capacidad de eliminación de la infectividad de los agentes causantes de EETs de la etapa de nanofiltración en el proceso de producción de fibrinógeno.

Actividades de I+D+I / R&D&i activities La contribución más importante ha sido la generación espontánea de priones infecciosos mediante la introducción de una mutación puntual (113L) de la PrPC bovina en ratón transgénico. Este resultado demuestra que los priones se pueden originar por un mecanismo de mutación al azar de la PrPC, que este mecanismo pudo ser el responsable de la epidemia de Encefalopatía Espongiforme Bovina (EEB) y que podría dar lugar a la emergencia de nuevas cepas de priones en otras especies.

The most important contribution has been the spontaneous generation of infectious prion disease in transgenic mice expressing bovine PrPC with a single point mutation (113L). This result shows that TSE prions could originate by a random genetic mutation that can induce de novo generation of infectious prions. This mechanism could be the responsible of the Bovine Spongiform Encephalopathy (BSE) epidemic and constitute a source of prion diversity in cattle and others species.

Nuestros modelos de ratón transgénico que expresan diferentes variantes polimórficas de la PrPC de cabra nos han permitido avanzar en la comprensión del papel de estas variantes en la susceptibilidad/resistencia a la infección con priones. En particular, la variante PrP-222K protege contra la infección con scrapie y con EEB. Esto nos permite proponer el alelo 222K como un buen candidato para incluirlo en los programas de selección genética para inducir resistencia a priones en la cabaña caprina.

Our transgenic mouse models expressing polymorphic variants of goat PrPC allowed us to improve our understanding of the role of these variants in the susceptibility/resistance of small ruminants to prion infection. Particularly, we have shown that the K222 variant of goat PrPC provides strong resistance against a wide classical scrapie and BSE and reinforce the view that the K222 allele is a good candidate for the development of breeding programs for resistance against scrapie in farming goats (article 2-3). In collaboration with other groups, we ha have contributed to better understand the transmission capability of BSE to others species.

En colaboración con otros grupos, hemos contribuido a un mejor conocimiento de la capacidad de transmisión de la EEB a otras especies (artículos 4-6) y a la comprensión de la patogénesis de estas enfermedades y del papel que juega la PrP en diferentes procesos fisiológicos y/o patológicos.

Others contribution allowed to understanding some aspects of the pathogenesis of prion diseases and the potential role of the PrP in several physiologic and pathologic process. 170

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Artículos científicos / Scientific papers

encephalopathy to nonhuman primates. Emerg Infect Dis. 190(5), 712-20.

Torres JM, Castilla J, Pintado B, Gutiérrez-Adan A, Andréoletti O, Aguilar-Calvo P, Arroba AI, ParraArrondo B, Ferrer I, Manzanares J, Espinosa JC (2013) Spontaneous generation of infectious prion disease in transgenic mice. Emerg Infect Dis. 19(12),1938-47.

Vidal E, Fernández-Borges N, Pintado B, Ordóñez M, Márquez M, Fondevila D, Torres JM, Pumarola M, Castilla J (2013). Bovine spongiform encephalopathy induces misfolding of alleged prion-resistant species cellular prion protein without altering its pathobiological features. J Neurosci. 23(18), 7778-86.

Aguilar-Calvo P, Espinosa JC, Pintado B, Gutiérrez-Adán A, Alamillo E, Miranda A, Prieto I, Bossers A, Andreoletti O, Torres JM (2013). Role of the goat K222-PrPC polymorphic variant in prion infection resistance. J Virol. 88(5), 2670-6.

Ordóñez-Gutiérrez L, Torres JM, Gavín R, Antón M, Arroba-Espinosa AI, Espinosa JC, Vergara C, Del Río JA, Wandosell F (2013). Cellular prion protein modulates 8. ß-amyloid deposition in aged APP/ PS1 transgenic mice. Neurobiol Aging. 34(12), 2793-804.

Lacroux C, Perrin-Chauvineau C, Corbière F, Aron N, Aguilar-Calvo P, Torres JM, Costes P, Brémaud I, Lugan S, Schelcher F, Barillet F, Andréoletti O (2013). Genetic resistance to Scrapie infection in experimentally challenged goats. J Virol. PubMed PMID: 24284317.

Simon D, Herva ME, Benitez MJ, Garrido JJ, Rojo AI, Cuadrado A, Torres JM, Wandosell F(2013). Dysfunction of the PI3K-Akt-GSK-3 pathway is a common feature in cell culture and in vivo models of prion disease. Neuropathol Appl Neurobiol. doi: 10.1111/nan.12066.

Vidal E, Fernández-Borges N, Pintado B, Ordóñez M, Márquez M, Fondevila D, Eraña H, Torres JM, Pumarola M, Castilla J (2013). Exploring the risks of a putative transmission of BSE to new species. Prion 1,7(6).

Llorens F, Carulla P, Villa A, Torres JM, Fortes P, Ferrer I, del Río JA (2013). PrP(C) regulates epidermal growth factor receptor function and cell shape dynamics in Neuro2a cells. J Neurochem. 127(1), 124-38.

Holznagel E, Yutzy B, Schulz-Schaeffer W, Kruip C, Hahmann U, Bierke P, Torres JM, Kim YS, Thomzig A, Beekes M, Hunsmann G, Loewer J (2013). Foodborne transmission of bovine spongiform

Marco-Salazar P, Márquez M, Fondevila D, Rabanal RM, Torres JM, Pumarola M,Vidal E (2013). Mapping of Neurotrophins and their Receptors in the Adult Mouse Brain and their Role in the Pathogenesis of a Transgenic Murine Model of Bovine Spongiform Encephalopathy. J Comp Pathol. doi: 10.1016/j. jcpa.2013.11.209.

Cooperación internacional / International cooperation Participación en redes de excelencia de la UE / Participation in EU networks of excellence: NADIR-Integrating activities (The network of 171

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animal disease infectiology research facilities- 228394).

Friedrich -Loeffler -Institut. Dr. M. Groschup. German . Instituto Superiore Sanita. Dr. U Agrim , Italy

Estancia del Dr. Andreolleti (UMR959 INRA-ENVT Toulouse-France): Estudio de la infectividad de priones en diferentes fracciones de sangre / Blood TSE Infectivity (Transnational Access project within NADIR Access).

Actividades de difusión / Dissemination activities Congresos / Meetings

Estancia de Patricia Aguilar en INRA-ENVT Toulouse-France.

–– Second Iberian Congress on Prions. Faro (Portugal). –– Prion 2013. Conquering frontiers. Banff (Canadá).

Colaboraciones con distintos grupos europeos como: Central Veterinary Institute of Wagenimen UR. Dr. J Langeveld, Holanda. Instituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle D`Aosta. Dr. P.L. Acutis, Italia. Animal Helth and Veterinary Laboratoru. Dr. O Windl, Reino Unido (AHVLA). INRA Ecole Nationales Veterinarie de Touluse. Dr. O Andreoletti, Francia. Friedrich-Loeffler-Institut. Dr. M. Groschup. Alemania. Instituto Superiore Sanita. Dr. U Agrimi, Italia

Cursos y Master / Master’s and Courses –– Máster de Virología de la Universidad Complutense de Madrid.

Actividades de asesoramiento y servicios / Advisory activities and services

Collaboration with European groups like distitntos : Central Veterinary Institute of Wagenimen UR. Dr. J Langeveld, Netherlands. Zooprofilattico Sperimentale Institute del Piemonte, Liguria e Valle D`Aosta. PL Acutis, Italy. Veterinary and Animal Helth Laboratoru. Dr. O Windl, United Kingdom (AHVLA). INRA Ecole Nationales Veterinarie Toulus. Dr. O Andreoletti, France.

Participación como evaluadores de proyectos de convocatorias nacionales e internacionales y de artículos científicos de revistas científicas internacionales. Participation as reviewers of projects from national and international calls and scientific articles from international journals.

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nmunoprofilaxis de Enfermedades Víricas Transmitidas 6 Ipor Vectores / Immunoprofilaxis of Vector-Borne Viral Deseases Componentes / Members Brun Torres, Alejandro. Ortego Alonso, Francisco Javier Gema Lorenzo Alguacil Francisco de la Poza García López Gil, Mª Elena

Científico Titular OPIS Científico Titular OPIS Tit. Sup. Act. Téc. Prof. Téc. Sup. Act. Téc. Prof. Personal contratado en formación

Contacto: [email protected]

Objetivos / Objectives

Proyectos de investigación / R&D&i projects

El principal objetivo del grupo es la generación de conocimiento sobre virus transmitidos por vectores, principalmente bunyavirus y orbivirus, para su empleo en diagnóstico, nuevas vacunas y estudios de patogenia. El grupo trabaja en el desarrollo y validación de métodos diagnósticos inmunoenzimáticos y moleculares así como en el estudio de la respuesta inmunológica y la capacidad de protección inducida por vacunas marcadoras de nueva generación en modelos de infección murinos y ovinos.

AGL-2011-23506 (2012-2014). Desarrollo de vacunas DIVA de nueva generación que confieran protección cruzada frente a distintos serotipos de los orbivirus lengua azul y peste equina africana. AGL-2011-22485 (2012-2014). Vacunas frente al virus de la fiebre del Valle del Rift: identificación de determinantes antigénicos críticos y mecanismos de protección. 228394 (2009-2013). The Network of Animal Disease Infectology Research facilities (NADIR).

Palabras clave: bunyavirus, orbivirus, vacunas marcadoras, patogénesis.

Actividades de I+D+I / R&D&i activities

The main objective of the group is the generation of knowledge in vector borne viral diseases, focusing on bunyavirus and orbivirus, to be applied in diagnostics, design of novel vaccines and pathogenesis studies. Specifically we pursue the following objectives: development and validation of molecular and immunoenzymatic diagnostic tools and the study of the immune response induced by new generation marker vaccines in murine and ovine models of infection.

Se ha establecido un modelo animal basado en ratones deficientes en el receptor de interferón alfa/beta (IFNAR) para evaluar estrategias de vacunación desarrolladas frente a los orbivirus Lengua Azul (BTV) y Peste Equina Africana (AHSV). Estos ratones adultos IFNAR(-/-) son susceptibles a la infección por BTV y AHSV. Utilizando este modelo de infección se han desarrollado: (i) una estrategia de vacunación heteróloga prime-boost frente a BTV usando DNA/rMVA que expresan las proteínas VP2, VP7 y NS1 de BTV-4 y (ii) una estrategia de

Keywords: bunyavirus, orbivirus, marker vaccines, pathogenesis. 173

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Regarding strategies for bunyavirus control we have identified several immune-relevant glycoprotein epitopes for a more rational design of novel vaccines against RVFV and for establishing correlates of protective immune responses in both murine and ovine models. We have confirmed the immunogenicity and efficacy of adenovirus vectors (HuAd5 and ChadOx) and poxvirus rMVA after RVFV challenge in mice and sheep. We have also tested DNA/MVA primeboost strategies for efficacy assessment in lambs. Finally, several epitopes related to nucleoprotein N antigenicity and or immunogenicity have been identified. These might be key for understanding the role in protection of anti-N antibody responses as well as for improving the differentiation between infected and vaccinated animals.

vacunación homóloga prime-boost frente a AHSV basado en rMVAs que expresan VP2 y NS1 de AHSV-4. Estas estrategias de vacunación protegieron a los ratones IFNAR(-/-) frente al desafío con dosis letales de distintos serotipos de BTV o AHSV y podrían ser unas prometedoras vacunas marcadoras multiserotipo. Se han identificado varios epitopos inmunorelevantes de gran utilidad para el diseño de nuevas vacunas frente al virus de la FVR y para su posible correlación con respuestas inmunológicas protectoras en el modelo ovino. Se ha comprobado la inmunogenicidad y eficacia de vectores adenovirus (HuAd5 y ChAdOx) y poxvirus MVA recombinantes tras la infección experimental con el virus FVR, en modelos murino y ovino. Se ha ensayado también estrategias de vacunación prime-boost con ADN y rMVA para comprobar la eficacia de la protección en ovejas. Finalmente, se han localizado epitopos implicados en la antigenicidad de la nucleoproteína N del virus que podrían ser clave en la respuesta de anticuerpos anti-N en la protección y para mejorar la discriminación entre animales infectados y vacunados.

Artículos científicos / Scientific papers Jabbar TK, Calvo-Pinilla E, Mateos F, Gubbins S, Bin-Tarif A, Bachanek-Bankowska K, Alpar O, Ortego J, Takamatsu HH, Mertens PP, CastilloOlivares J (2013). Protection of IFNAR (-/-) mice against bluetongue virus serotype 8, by heterologous (DNA/rMVA) and homologous (rMVA/rMVA) vaccination, expressing outercapsid protein VP2. PLoS One, 12, 8(4): e60574.

Adult mice can not support the BTV and AHSV infection. For this reason, we have established in our laboratory an small animal model based on mice that are deficient in the alpha/beta interferon receptor (IFNAR) to evaluate vaccination strategies. Adult IFNAR(-/-) mice support the in vivo growth of BTV and AHSV after inoculation. Furthermore, we have described: (i) an heterologous prime boost vaccination strategy against BTV using DNA/rMVA expressing VP2, VP7, and NS1 BTV-4 proteins and (ii) an homologous prime boost vaccination strategy against AHSV using rMVAs expressing VP2 and NS1 AHSV-4 proteins. Vaccination with these two strategies showed that adult IFNAR(-/-) mice were protected against lethal challenge with several serotypes of BTV or AHSV suggesting that this marker vaccines are a promising multiserotype vaccine against these Orbiviruses.

de la Poza F, Calvo-Pinilla E, López-Gil E, Marín-López A, Mateos F, Castillo-Olivares J, Lorenzo G, Ortego J (2013). NS1 is a key protein in the vaccine composition to protect IFNAR(-/-) mice against infection with multiple serotypes of African horse sickness virus. PLoS One, 23;8(7):e70197. Ortego J, de la Poza F, Marín-López A. (2013). Interferon a/ß receptor knockout mice as a model to study bluetongue virus infection. Virus Res. doi: 10.1016/j.virusres.2013.09.038 Calvo-Pinilla E, Castillo-Olivares J, Jabbar T, Ortego J, de la Poza F, Marín-López A (2013). Recombinant 174

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vaccines against bluetongue virus. Virus Res. doi: 10.1016/j.virusres.2013.11.013.

H. Groschup (Friedrich-Loeffler Institute en InselReims, Alemania) en la caracterización de anticuerpos monoclonales frente a las glicoproteínas del virus de la FVR y, por último, con el profesor Friedemann Weber (Philips University, Marburg, Alemania) en la utilización de virus de la FVR recombinantes generados a partir de cDNA para su aplicación en ensayos de sero-neutralización. Fruto de un convenio de colaboración con el Instituto Jenner de la Universidad de Oxford (Reino Unido) se han generado una serie de poxvirus y adenovirus recombinantes con el objeto de ensayar su eficacia vacunal en modelos animales.

Kortekaas J, Kant J, Vloet R, Cêtre-Sossah C, Marianneau P, Lacote S, Banyard AC, Jeffries C, Eiden M, Groschup M, Jäckel S, Hevia E, Brun A (2013). European ring trial to evaluate ELISAs for the diagnosis of infection with Rift Valley fever virus. J Virol Methods.187(1), 177-81 López Gil E, Lorenzo G, Hevia E, Borrego B, Eiden M, Groschup M, C. Gilbert S, Brun A (2013). A single immunization with MVA expressing GnGc glycoproteins promotes epitope-specific CD8+-T cell activation and protects immune-competent mice against a lethal RVFV infection. PLoS Neglected Tropical Diseases 17(7) e2309.

Cooperation with Professor Mertens, from the Institute of Animal Health-Pirbright Laboratory, UK, for the design and characterisation of multiserotype marker vaccines against AHSV, funded by the EU projects Epizone and NADIR.

Jäckel S, Eiden M, Dauber M, Balkema-Buschmann A, Brun A, Groschup MH (2013). Generation and application of monoclonal antibodies against Rift Valley fever virus nucleocapsid protein NP and glycoproteins Gn and Gc. Arch Virol. doi.1007/ s00705-013-1867-4.

Regarding RVFV research, several scientific collaborations were established through participation in the EU-funded projects, Epizone, NADIR and Arbozoonet. In particular we collaborated with Dr Martin H. Groschup from the Friedrich-Loeffler Institute at Insel-Reims (Germany) on the characterisation of novel monoclonal antibodies against RVFV and, finally with Dr. Friedemann Weber from the University Philips at Marburg (Germany) on the use of rescued recombinant RVFV virus for sero-neutralisation assays. As a result of a collaboration agreement between CISA and the Jenner Institute at Oxford University we have generated several poxvirus and adenovirus recombinants for vaccine efficacy testing in mouse models.

George M Warimwe, Lorenzo G., Lopez-Gil E., Reyes-Sandoval A., G Cottingham M., Spencer A J., A Collins K., DJ Dicks M., Milicic A., Lall A., Furze J., V Turner A., VS Hill A., Brun A., C Gilbert S (2013). Immunogenicity and efficacy of a chimpanzee adenovirus-vectored Rift Valley Fever vaccine in mice. Virology Journal, 10: 349.

Cooperación internacional / International cooperation Colaboración científica con el laboratorio del Profesor Mertens, Institute of Animal HealthPirbright Laboratory, Reino Unido, en el desarrollo de vacunas marcadoras multiserotipo frente a AHSV, financiado por los proyectos Epizone y NADIR.

Actividades de difusión / Dissemination activities Conferencias / lectures:

Relacionado con la investigación en el virus de la fiebre del Valle del Rift se mantienen varias colaboraciones científicas gracias a la participación en las redes Epizone, NADIR y Arbozoonet. En concreto colaboramos con el laboratorio del profesor Martin

–– CIQUS-USC, Santiago de Compostela. –– II Jornadas sobre zoonosis y enfermedades emergentes: enfermedades virales transmitidas por mosquitos. Barcelona. 175

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Comunicaciones orales / oral presentations: –– XII Congreso Nacional de Virología, Burgos. –– 7th Epizone Annual Meeting Bruselas (Bélgica).. –– Reunión NADIR. Tours (Francia).

Actividades de transferencia / Technology transfer activities Transferencia a Zoetis de vacunas recombinantes frente a BTV para estudios de protección en ovejas y de proteínas recombinantes de BTV para desarrollo de nuevos test de diagnóstico.

Colaboración científica con Jenner Institute (Oxford),  Ingenasa, CIC-Biogune, CReSA, FLI (Insel-Reims); Leibniz Institut für Experimentelle Virologie, Pirbright Laboratory, Universidad de Santiago de Compostela, Zoetis.

Transference of recombinant vaccines against BTV to Zoetis for evaluation of protection in sheep. Transference of recombinant BTV proteins for the development of new diagnostic test.

Members of the Ethics and Animal Experimentation and Biosafety INIA. Member of the Regulatory Body of the Ethics of Animal Experimentation and Biosafety INIA (ORCEEA).

Actividades de asesoramiento y servicios / Advisory activities and services

Members of the Committee on Occupational Safety and Health INIA.

Miembros de los Comités de Ética y Experimentación Animal y de Seguridad Biológica del INIA.

Wellcome Trust project evaluator. Vocal del Órgano Regulador de los Comités de Ética de Experimentación Animal y Bioseguridad del INIA (ORCEEA).

Reviewers of the usual SCI journals: PLoS ONE , Vaccine , Arch Virology , Res Vet Sci, Vet Mic , Antiviral Research, J. Virol Meth. Virus Research, journal Theriogenology SNRI Virology.

Miembros del Comité de Seguridad y Salud Laboral del INIA.

Member of the editorial board of the journal Virology SNRI ( Hindawi Publishing Corporation).

Evaluador de proyectos Wellcome Trust. Revisores habituales de las revistas PLOS ONE, Vaccine, Arch. Virol, Res Vet Sci, Vet Mic., Antiviral Research, J. Virol Meth. Virus Research, Theriogenology journal, ISRN Virology.

Guest Editor of the special issue dedicated to bluetongue virus in Virus Research. Scientific collaboration with Jenner Institute (Oxford ), Ingenasa, CIC- Biogune, CReSA, FLI (Insel -Reims), Leibniz Institut für Experimentelle Virologie, Pirbright Laboratory, University of Santiago de Compostela, Zoetis.

Miembro del editorial board de la revista ISRN Virology (Hindawi Publishing Corporation). Editor Invitado del número especial dedicado al virus de la lengua azul en la revista Virus Research. 176

Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA) / Animal Health Research Centre

7 Parasitología animal / parasitic diseases Componentes / Members Valcárcel Sancho, Félix Aguilar Palacios, Ana David Vilallonga Julia González José Luis Pérez María Sánchez Daniel Pousada Angela Ivascu

Científico Titular OPIS Jefa de Sección de Epizootiología y Diagnóstico P3 Personal contratado en formación Personal contratado en formación Estancia postdoctoral Estancia de formación en investigación Estudiante Grado en Veterinaria Estudiante de Grado en Veterinaria

Contacto: [email protected]

Objetivos/ Objectives

anthelmintic resistance and epidemiology and control of work on the in vitro study of arthropod vectors.

Realización de estudios epidemiológicos de las enfermedades parasitarias, para el desarrollo de nuevas técnicas de diagnóstico y la evaluación de los sistemas de control antiparasitario. Diseño de nuevos programas de control de las enfermedades parasitarias, (zoonósicas o no) y de los artrópodos vectores de diversos patógenos.

Keywords: parasitic diseases, epidemiology, helminths, arthropods, vectors

Proyectos de investigación / R&D projects

Tres líneas de trabajo: epidemiología y control de helmintos digestivos, caracterización de la resistencia antihelmíntica; estrategias de control frente a resistencias antihelmínticas, y epidemiología y control de garrapatas. Se está iniciando el estudio in vitro de artrópodos vectores.

RTA2010-00094-C03-03. (2010-2013) Caracterización de la resistencia a los antihelmínticos y desarrollo de estrategias para el control antiparasitario en el marco del cambio climático.

Palabras clave: enfermedades parasitarias, epidemiología, helmintos, artrópodos, vectores

Actividades de I+D / R&D Activities

Epidemiological studies on parasitic diseases, for the development of new diagnostic techniques as well as evaluation of systems of parasite control. Design of control programmes against parasitic diseases, (zoonotic or not) and arthropod vectors.

Los resultados sobre nematodos gastrointestinales que afectan a pequeños rumiantes permiten desarrollar nuevos protocolos de control de estos nematodos, pudiéndose reducir el número de aplicaciones antiparasitarias y mejorar los resultados de su aplicación. Así, se obtendrían productos de origen animal más sanos y de mayor calidad; disminuiría drásticamente la eliminación de

Work in progress include: epidemiology and control of gastrointestinal worms, characterisation of anthelmintic resistance; control strategies of 177

Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA) / Animal Health Research Centre

residuos farmacológicos;  los antihelmínticos alargarían su vida útil. Hemos diseñado un nuevo protocolo frente a garrapatas de tres hospedadores con excelentes resultados en condiciones reales de campo. Igualmente, estamos trabajando en nuevos productos acaricidas y estamos desarrollando técnicas de cultivo in vitro de vectores.

The results of RTA project about gastrointestinal nematodes of small ruminants to develop new protocols to control these nematodes. So it is possible to reduce the annual number of treatments maintaining performances. So the livestock sector would reduce operating costs, getting healthy and higher quality animal products; pharmacological waste disposal will decrease drastically in the environment, finally, the efficacy of the drugs will be extend.

Bartonella henselae variants in patients, reservoir hosts and vectors in Spain. PlosOne 8(7): e68248. Martínez-Valladares M; Valcárcel F; ÁlvarezSánchez MA, Cordero-Pérez C; Fernández-Pato N; Frontera E; Meana A; Rojo-Vázquez FA (2013). Efficacy of moxidectin long-acting injectable formulation (1 mg/kg body weight) against first instar larvae of Oestrus ovis in naturally infected sheep. Veterinary Parasitology. 193, 320 - 324.

We have successfully applied a new integrated model to control three host ticks under field conditions. We are also working in the discovering of new acaricides and in the developing of in vitro techniques to let us improve the study of vectors.

Patentes / Patents Dos aislados de hongos entomopatógenos se han registrado en la Colección Nacional de Cultivos Tipo de Valencia (CECT 20829 y CECT 20830).

Artículos científicos / Scientific papers Martínez-Pérez JM, Robles-Pérez D, ValcárcelSancho F, González-Guirado AM, de Castro IC; Nieto-Martínez JM, Rojo-Vázquez FA, MartínezValladares M. (2013). Effect of lipopolysaccharide (LPS) from Ochrobactrum intermedium on sheep experimentally infected with Fasciola hepatica. Parasitology Research 112(8): 2913-2923. doi: 10.1007/s00436-013-3463-7

Two isolates of Entomopathogenic Fungi have been reported in the National Type Culture Collection Valencia (CECT 20829 and CECT 20830).

Tesis doctorales / PhD theses Villalonga Vázquez, David. 11/10/2013. Study of the etiology and the economic impact of seizures sheep in a slaughterhouse. Director: Félix Valcárcel Sancho. Faculty of Veterinary Medicine, University of Extremadura.

Gil H, Escudero R, Pons I, Rodríguez Vargas M, García Esteban C, Rodríguez Moreno I, García Amil C, Lobo B, Valcárcel F, Pérez A, Jiménez S, Jado I, Juste R, Segura F, Anda P (2013). Distribution of

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