CONGRESO EVELAM 2013 DICIEMBRE DE 2013 CANCÚN, Q.R.

BIOPSIA MUSCULAR Dr. Luis A. Ruano Calderón Clínica Neurológica Hospital General de Durango Secretaria de Salud de Durango Durango, México

BIOPSIA MUSCULAR • Es uno de los procedimientos diagnósticos más frecuentemente utilizado en la evaluación de miopatias.

• La utilidad y campo diagnóstico varia de 36% a 69% de casos.

BIOPSIA MUSCULAR • Estudio necesario para establecer diagnóstico definitivo en miopatías • Es indispensable que sea precedida por una historia clínica completa, y estudios neurofisiológicos cuando sea necesario • Poco útil en enfermedades de placa neuromuscular, salvo síndromes miasténicos y en miotonias • El estudio histopatológico puede ser complementado con estudios bioquímicos o genéticos.

Diagnóstico de miopatias Pacientes con diagnóstico de miopatía

Datos epidemiológicos Historia Clínica

Examen físico detallado EMG+CPK

BIOPSIA MUSCULAR

Biopsia muscular • Indicaciones. – Presencia de síntomas negativos y/o positivos. – CPK elevada. – EMG: patrón miopático. – Enf. sistémica que involucra al músculo.

Biopsia muscular: utilidad Inflamatorias • Polimiositis • Dermatomiositis • Miositis por cuerpos de inclusión • Vasculitis • Miofascitis • Mialgia eosinofilia • HIV • HTLV-I • Triquinosis • Toxoplasma • Cisticercosis /equinococosis /tripanosomiasis.

No inflamatorias • Distrofia muscular • Mitocondrial • MCI • Miotónica proximal • Congénita • Metabólica.

Biopsia muscular: NO indicada • Diagnóstico por neurofisiología. – MG, trastornos miotónicos.

• Diagnóstico por estudio genético. FSH

• Neuropatía periférica. – Excepto en enfermedades sistémicas que produzca neuropatía y miopatía.

Biopsia muscular • Buena realización y preparación. – Evita una 2a Bx.

• Conocer las indicaciones. – Evita Biopsias innecesarias. • EMG previa ayuda.

BIOPSIA MUSCULAR • Selección del músculo a biopsiar: - Enfermedad crónica  afección moderada

- Enfermedad aguda o subaguda  afección moderada o severa - Específicos: bíceps, deltoides, quadriceps - Estudios de imagen: TAC, RM - Evitar: EMG, inyecciones, trauma.

BIOPSIA MUSCULAR

BIOPSIA MUSCULAR • • • • •

Abierta Invasiva Costosa Necesidad de infraestructura Necesidad de personal entrenado (procesamiento e interpretación)

BIOPSIA MUSCULAR

BIOPSIA MUSCULAR

BIOPSIA MUSCULAR

• Técnica abierta • Proceso inmediato de montaje y congelación • Muestras para: – Tinciones histológicas – Bioquímica – Estudios inmunogenéticos – Parafina – Microscopía electrónica

BIOPSIA MUSCULAR • Técnica: - Tinciones  cortes en frío (isopentano) - Reacciones enzimáticas  cortes en frío - Inmunohistoquímica  cortes en frío o parafina - Estudios bioquímicos e inmunogenéticos  congelado en N

- Microscopia electrónica  glutaraldheido - Inflamación  parafina

BIOPSIA MUSCULAR

BIOPSIA MUSCULAR Tinciones histológicas

H/E

TG

PAS

ORO

Biopsia muscular • Lesiones morfológicas: - modificación de tamaño de fibras - aumento y/o centralización nuclear

- necrosis - regeneración

BIOPSIA MUSCULAR Datos a Valorar: - Alteración del tamaño de las fibras: atrofia, hipertrofia - Forma de las fibras: redondeadas, anguladas - Centralización nuclear ( > 3% sugiere miopatía) - Imagen de necrosis, fagocitosis, regeneración - Cambios crónicos distróficos: fibrosis, infiltración grasa - Presencia de vacuolas - Depósitos anormales: glucógeno, lípidos, amiloide - Infiltrados inflamatorios: tipo celular y localización

- Alteraciones de la arquitectura intrafibrilar (reacciones enzimáticas): alteraciones mitocondriales, cuerpos centrales, fibras en diana, fibras borradas, fibras lobuladas, cuerpos citoplasmáticos - Predominio o atrofia selectiva de un tipo de fibras

Hematoxilina/eosina

Morfología general Núcleo.- posición y número Citoplasma

Tricrómico modificado

Morfología Agregados Mitocondrias Agregados tubulates Fibras rojas rasgadas

BIOPSIA MUSCULAR Tinciones histológicas

H/E

Fibras hipertrofiadas

Distrofia muscular

H/E

Tamaño de las fibras (atrofia musculare espinal)

H/E

Vacuolas

Vacuolas bordeadas

H/E

Fibras en diana

Fibras anguladas

NEUROPATIA

H/E

Miofascitis

Polimiositis

H/E

Centralización nuclear

Necrosis de fibra

Tricrómico modificado

Normal

Acúmulos anormales (Bastones) Fibras rojas rasgadas

PAS

Cuerpos de Lafora

Rojo Oleoso (ORO)

Biopsia muscular • Reacciones enzimáticas: - diferenciación del tipo de fibras - demostración de acúmulos anormales intrafibrilares - ausencia de reacción focal o completa

BIOPSIA MUSCULAR Reacciones enzimáticas:

DPNH

SDH

DPNH

Refleja concentración de mitocondrias Tipo de fibras (I.- obscuras / II.- claras)

SDH

Tiñe mitocondrias

MENADION

Tiñe túbulos

FOSFORILASA

Enzima metabólica

ATPasa ATPasa 4.35

Tipo I.- obscuras Tipo II.- claras

ATPasa 4.63

Tipo I.- obscuras Tipo II.- claras

ATPasa 9.4

Tipo I.- claras Tipo II.- obscuras

COX

Enzima mitocondrial

SDH

DPNH

fibras rojas rasgadas (fibras azules rasgadas)

Central core Lobuladas

En diana

ATPasa 9.4

Diferencia en tamaño por atrofia II

MIOPATIAS • Congénitas: - Centronuclear - Central core - Nemelínica

MIOPATIAS • Metabólicas: - Mitocondriales - Lípidosis - Glucogenopatías

MIOPATIAS • Inflamatorias: - Polimiositis - Dermatomiositis - Miositis por cuerpos de inclusión

MIOPATIAS • Distrofias: - Cinturas - FSH - Miotónica - Distales

BIOPSIA MUSCULAR

Distrofia

Mitocondriopatía

Inflamatoria

Inmunohistoquímica de proteínas Estudios bioquímicos de cadena respiratoria Inmunohistoquímica de células inflamatorias

BIOPSIA MUSCULAR

Distrofia de cinturas Inmunohistoquímica de proteínas musculares

BIOPSIA MUSCULAR (Inmunohistoquímica)

BIOPSIA MUSCULAR (Inmunohistoquímica)

Biopsia muscular: Inmunoensayos comerciales. • • • • • • • • • • •

LG 2D LG 2E LG 2C LG 2F LG 2B Miyoshi LG 2A Miofibrilar Distrofia congénita Emery-Dreifuss LG 1B

a-sarcoglicano b-sarcoglicano g-sarcoglicano d-sarcoglicano Disferlina Disferlina Calpaina Desmina Merosina Emerina Laminina A/C

Biopsia muscular • Estudios bioquímicos: - deficiencia o ausencia de enzimas específicas - cuantificación de complejos de cadena respiratoria - cuantificación de proteínas estructurales de la fibra muscular.

BIOPSIA MUSCULAR • Microscopia electrónica: - características ultraestructurales - NO siempre indicada - Miopatías congénitas - Enfermedades mitocondriales - Apoyo: miositis por cuerpos de inclusión

BIOPSIA MUSCULAR Microscopia electrónica

BIOPSIA MUSCULAR

Bastones

BIOPSIA MUSCULAR • • • • • •

Utilidad diagnóstica Según sospecha clínica Indicación precisa Toma adecuada Proceso adecuado e inmediato Panel de técnicas completo (mínimo indispensable)

GRACIAS [email protected]