¿CÓMO... Tomar Muestras de Tejido para Histopatología

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¿Por qué se deben tomar muestras de tejido para histopatología?

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¿Por qué se deben tomar muestras de tejido para histopatología?

• El tomar muestras de tejido para histopatología es una manera barata y rápida de obtener información adicional importante relacionada con la identificación de la enfermedad. • La histopatología (recolección y examen microscópico de tejido con el fin de identificar una enfermedad), debe ser parte de cualquier investigación de una enfermedad, particularmente cuando en la necropsia no se identifica la causa de muerte, o se requiere de su confirmación.

¿CÓMO... Tomar Muestras de Tejido para Histopatología

Procedimiento Factores que afectan la calidad de la muestra • Si el muestreo se realiza de manera incorrecta, se puede retrasar la identificación de la enfermedad. • El tejido debe provenir de aves recién muertas y no debe estar congelado, ya que esto puede afectar la calidad de la muestra. • Recolecte muestras de tejido que contengan tanto áreas sanas como enfermas. • Las muestras de tejido deben ser sumergidas en una solución conservadora especial (formol buffer) para “fijarlas” (preservarlas lo más cercano posible a su estado natural). Esto previene el deterioro post mortem (autolisis y putrefacción). • El tamaño de la muestra de tejido afecta qué tan rápida es su fijación.

Equipo necesario para el muestreo •

Guantes para necropsia

•

Tijeras con buen filo

•

Bisturí

• Fórceps •

Frasco hermético con tapa de rosca

•

Formol buffer al 10%

•

Regla (para medir el tamaño de la muestra) (opcional)

•

Caja de Petri pequeña (opcional)

Equipo de muestreo

Procedimiento

Ejemplo de un frasco hermético con tapa de rosca y formol buffer al 10%

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Nota - Si el formol buffer comercial no está disponible, se puede hacer utilizando el siguiente método: (los ingredientes y las cantidades se mencionan en la tabla) Ingredientes para preparar el formol buffer al 10% Químico

Cantidad

Formol (37%)

100 ml (3.38 oz)

Agua destilada (o agua de la llave)

900 ml (30.43 oz)

Ortofosfato monosódico, monohidrato (H4NaO5P)

4.0 g (0.009 lb)

Fosfato disódico de hidrógeno, anhidro (Na2HPO4)

6.5 g (0.01 lb)

Colóquelo en un recipiente seguro para sustancias químicas con la etiqueta “Precaución Veneno – Formol Buffer al 10%”. •

Si no tiene disponibles estos componentes, una parte de formaldehído al 37% mezclado con 9 partes de agua puede ser utilizada como solución, pero por favor note que esto puede afectar la calidad de la fijación del tejido, así como los resultados.

•

El grosor del tejido no deberá sobrepasar los 5 mm (0.2 pulg.).

•

La solución fijadora (Formol Buffer) deberá ser 10 veces el volumen de la muestra de tejido. Por ejemplo, si el tejido mide 5 x 10 x 20 mm, entonces tendrá un volumen de 1 cm3 (ó 1 ml), y se necesitarán 10 cm3 (ó 10 ml) de la solución fijadora para fijar este tejido.

•

El tejido deberá mantenerse inmerso en la solución fijadora por lo menos 48 horas antes de enviarlo al laboratorio.

•

Podría ser necesario cambiar la solución fijadora. Los tejidos que sangran como el bazo, el hígado o las muestras grandes de tejido podrían contener cantidades considerables de sangre al momento del muestreo. Si la solución fijadora se vuelve turbia, deberá ser reemplazada con solución fresca.

•

Asegúrese que los frascos estén correctamente etiquetados para evitar confusiones.

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Procedimiento

Puntos a recordar antes del muestreo

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03 Procedimiento para el muestreo histopatológico Paso 1

Utilizando un bisturí y fórceps para tejidos, retire una pieza de tejido de 5 mm (0.2 pulg.) de un ave recién muerta, incluyendo tejido tanto sano como enfermo en la muestra.



Ejemplo del grosor correcto del tejido para el muestreo.

Paso 2

Coloque la muestra de tejido en un frasco con solución fijadora que contenga información sobre la muestra asegurándose que el volumen de la solución sea 10 veces mayor que la muestra.



Ejemplo de una muestra de tejido conservada en una solución fijadora 10 veces el volumen de la muestra.

Paso 1

Paso 2

Nota - Se pueden colocar varias muestras en el mismo frasco con solución fijadora, siempre y cuando se etiqueten correctamente con la descripción de cada muestra para evitar confusiones.

Procedimiento

Ejemplo de varias muestras en el mismo frasco con solución fijadora.

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Transporte de las muestras al laboratorio • Después de 48 horas, retire la mayor parte de la solución fijadora del frasco con la muestra, dejando lo necesario para cubrir las muestras. •

Vuelva a sellar el frasco con la muestra con la ayuda de algún elemento que lo haga hermético como parafina (disponible comercialmente a través de algún proveedor de suministros químicos) o cera para asegurarse que el frasco no se derrame durante el envío.

• Contacte al laboratorio de destino por adelantado para asegurarse de haber incluido toda la documentación necesaria. Si el envío es internacional, asegúrese de cumplir con los requisitos legales y obtener los permisos de envío adecuados. • Asegúrese de que todos los formularios de envío hayan sido llenados de manera adecuada con la información correcta (nombre, granja, país, fecha, etc.).

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Transporte de las muestras al laboratorio

• Incluya un resumen de los síntomas y los hallazgos post mortem.