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MANUAL DE OBTENCIÓN DE MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLOGICOS

MANUAL DE OBTENCION DE MUESTRAS PARA EXÁMENES BACTERIOLÓGICOS Carlos A. Javier-Zepeda

Médico Patólogo Subespecialidad, Microbiología Clínica Director, Laboratorios Médicos

er Zepeda, Carlos A.     Carlos A. Javier-Zepeda

BN: 97899992698846

- BACTERIAS.

Tegucigalpa, Honduras 2014

2.- ENFERMEDADES BACTERIA

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616.014 Javier Zepeda, Carlos A. J41  C.H.    ISBN: 97899992698846 1.- BACTERIAS.

2.- ENFERMEDADES BACTERIANAS

2014   Reservados todos los derechos

NAS

Ninguna parte de este Manual o su totalidad puede ser reproducida, transmitida o almacenada por cualquier medio electrónico o mecánico, fotocopia, grabación u otro sistema de reproducción de información sin el permiso previo por escrito del autor titular del Copyright. Impresión: Impresión: LITHOCOM,Tegucigalpa, Honduras

iii PRÓLOGO En todas las áreas de laboratorio de diagnóstico existe muy poca comunicación entre el personal médico, de enfermería, estudiantes de medicina (que se desempeñan en las instituciones académicas) y el personal técnico y profesional de los laboratorios. Se conoce muy poco sobre la debida preparación del paciente previo a la obtención de muestras para diversos estudios y casi es nulo el adiestramiento en las técnicas apropiadas para obtener las mismas para su respectivo análisis. Aunque es más fácil generalizar y hacer recomendaciones breves para los estudios químicos, inmunológicos y hematológicos, el problema es considerablemente más complejo cuando se trata de muestras para estudios microbiológicos que en muchos de los casos solo se pueden obtener una vez. Esta falta de comunicación y conocimiento a quien afecta directamente es al paciente, quien no va a recibir el beneficio de un estudio apropiado si la muestra no es seleccionada, obtenida, preservada, transportada y procesada siguiendo las recomendaciones de cada caso particular. La información sobre este tema se encuentra dispersa en la literatura y existen algunas monografías y manuales al respecto. Este Manual tiene como objetivo condensar información práctica sobre la obtención de muestras para estudios bacteriológicos, acompañándola de un razonamiento clínico y anatómico cuando son pertinentes para comprender la forma de obtener dichas muestras. Al final de cada capítulo se incluyen algunas referencias generales y específicas que permiten al interesado ampliar la información resumida.

Carlos A. Javier-Zepeda

iv

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Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacterio

CONTENIDO

1

apítulo 1:

Conceptos generales.

apítulo 2:

Muestras de sangre (método tradicional en frascos de medio líquido).

1 1

CONCEPTOS GENERALES CONCEPTOS GENERALES o botellas

8

paso para hacer diagnóstico paso para etiológico hacerde el las diagnóstico enfermedades etiológico de las 13 apítulo 3: El primer Muestras de médula ósea. Elelprimer

infecciosas es la correctainfecciosas selección, obtención, es la correcta preservación, selección, transporte obtención, preservac

apítulo 4: y manejo Muestrasinicial de líquido céfalo-raquídeo. de las muestras y manejo clínicas inicialque de las se muestras envían al 15 clínicas laboratorio. que Si se envían a

no se presta atención a estas no se recomendaciones, presta atención a estas aunque recomendaciones, el laboratorio aunque Muestras de líquidos pericárdico, pleural, peritoneal y articular. 21 haga un trabajo esmerado, haga pueden un trabajo obtenerse esmerado, resultados pueden clínicamente obtenerse resultado Esto es un inadecuados. problema mayor Esto cuando es un problema se trata23demayor muestras cuando se tra apítulo 6: inadecuados. Muestras de orina. que están contaminadas con que organismos están contaminadas de la microbiota con organismos normal, como de la microbiota 30 heces, secreciones esputo,genitales, heces, secreciones etc., donde genitales, los agentes etc., donde apítulo 7: esputo, Muestras de heces. patógenos pueden estar ocultados patógenospor pueden otras estar bacterias, ocultados si la muestra por otrasno bacterias, s 34 apítulo 8: es Muestras de exudados (pus), úlceras cutáneas, heridas manejada adecuadamente. es manejada adecuadamente.

apítulo 5:

operatorias y fístulas.

recomendaciones para Laslasuperior. recomendaciones obtención adecuada paradelamuestras obtención deben adecuada de m 38 apítulo 9: LasMuestras del tracto respiratorio

ser del conocimiento de todas ser del lasconocimiento personas involucradas de todas las enpersonas la atención involucradas 45 como los pacientes, el demédico los pacientes, como cabeza desde del el médico equipo de trabajo, cabeza del equ pítulo 10: de Muestras del tractodesde respiratorio inferior. enfermeras, estudiantes de enfermeras, medicina,estudiantes personal ende losmedicina, laboratorios personal y el en los la pítulo 11: paciente Muestras de los oídos. mismo. En particular, paciente el personal mismo. En de Bacteriología particular, el49 personal debe ejercer de Bacteriolog su responsabilidad asegurando su responsabilidad la calidad de asegurando las muestras la calidad recibidas, de las mues 52 pítulo 12: Muestras de los ojos. solicitando un nuevo espécimen solicitando cuando un nuevo no se espécimen cumple concuando los requisitos no se cumple co La evaluación establecidos. de la calidad La evaluación de las muestras de 58 la calidad clínicas de es las muest pítulo 13: establecidos. Muestras de Secreción seminal (semen). uno de los procedimientos uno dede control los procedimientos de calidad másdeimportantes control de calidad en el más im 60 pítulo 14: laboratorio Muestras de secreciones, exudados y úlceras genitales. bacteriológico. laboratorio bacteriológico.

67en cuenta pítulo 15: La Muestras deytejidos. selección manejo deLa lasselección muestrasyclínicas manejodebe de lastomar muestras clínicas el debe tom

examen que se va a hacer examen con las quemismas. se va aEn hacer la mayor con las parte mismas. de losEn la may casos el médico está interesado casos elen médico la búsqueda está interesado de agentes en patógenos la búsqueda de agen que pueden observarse directamente que pueden observarse o cultivarse directamente en medios comunes o cultivarse y en med que sobreviven en unaque atmósfera sobreviven expuesta en una al atmósfera aire, pero expuesta existen al aire, situaciones donde los organismos situaciones que donde se pretende los organismos demostrar que requieren se pretende demo de un manejo especial dedelaun muestra manejoo especial de la preparación de la muestra anticipada o de ladepreparación procedimientos y medios procedimientos de cultivo especiales. y medios Un de caso cultivo particular especiales. es el Un caso interés en demostrar bacterias interésanaeróbicas en demostrar estrictas, bacterias donde anaeróbicas la muestra estrictas, do debe ser protegida de contacto debe sercon protegida el aire de ambiental, contactodesde con elque aireseambiental,

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2 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

ue se procesa en el laboratorio. En los casos no son En los casos que no son obtiene hasta que se procesa en el que laboratorio. ario, es necesario establecer comunicación estrecha del trabajo rutinario,una es necesario establecer una comunicación estrecha io. con el laboratorio.

ias comunes quebacterias causan enfermedad soportan Muchas comunes que causan las enfermedad soportan las bientales condiciones por un tiempo prudencial,por otras ser ambientales un necesitan tiempo prudencial, otras necesitan ser iante el uso de medios de transporte, todo de aquellas protegidas mediante el uso sobre de medios transporte, sobre todo aquellas aminadas muestras con organismos de la microbiota normal;delo la microbiota normal; lo contaminadas con organismos s prontamente al laboratorio. El calor excesivo tiende aEl calor excesivo tiende a ideal es llevarlas prontamente al laboratorio. eso no dañarlas, quiere decir muestradecir debeque sertoda muestra debe ser pero que eso toda no quiere es algunasrefrigerada, bacterias también puedenbacterias perder su vitalidad pues algunas también pueden perder su vitalidad puestas al cuando frío. son expuestas al frío.

formaciónExiste acerca de la forma en queacerca debende obtenerse mucha información la forma yen que deben obtenerse y muestras manejarse para estudios bacteriológicos. Entre menos las muestras para estudios bacteriológicos. Entre menos ay, mejor se conservan.hay, mejor se conservan. manipulación

ble aspirarCuando la muestra con una jeringa, debe usarse estejeringa, debe usarse este es posible aspirar la muestra con una ma jeringa puede servir como recipiente de transporte, método. La misma jeringa puede servir como recipiente de transporte, dado de tapar la aguja con el protector y dejarlo puesto. teniendo el cuidado de tapar la aguja con el protector y dejarlo puesto. tratar de doblar enviarla expuesta. Estenies el Nunca la seaguja debenitratar de doblar la aguja enviarla expuesta. Este es el usual para obtener pususual de abscesos y líquidos procedimiento para obtener pus dedeabscesos y líquidos de rrames. cavidades o derrames.

®, alginato os con diversos de fibracon (algodón, Dacron El usotipos de hisopos diversos tipos de fibra (algodón, Dacron®, alginato , es un método de calcio, usado etc.),frecuentemente es un método para usado obtener frecuentemente para obtener ucosas y lesiones muestrassuperficiales de mucosasde y lesiones la piel que superficiales no pueden de la piel que no pueden con una jeringa, ser aspiradas con la con desventaja una jeringa, de que conellahisopo desventaja de que el hisopo de la muestra absorbe y siparte esta de es la escasa, muestra se ycompromete si esta es escasa, la se compromete la men. Cuando calidad se usan del examen. hisopos Cuando de algodón, se usan el contenido hisopos de algodón, el contenido os en estade fibra ácidos natural, grasos puede en afectar esta fibra algunas natural, bacterias puede afectar algunas bacterias se deben sensibles. usar hisopos No sesideben se pretende usar hisopos investigar si se pretende investigar tuberculosis. Mycobacterium tuberculosis.

os estériles El uso de boca de frascos ancha estériles con tapadera de boca de rosca ancha es con tapadera de rosca es ra diversos conveniente tipos de muestras, para diversos comotipos la orina. de muestras, Es muy como la orina. Es muy estos frascos, importante además que deestos estériles, frascos, estén además perfectamente de estériles, estén perfectamente presencialimpios, de bacterias, pues laaún presencia muertas, decausa bacterias, confusión, aún muertas, causa confusión,

ϯ ϯ

Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos Manual de Toma de Muestras para Exámenes Bacteriológicos Manual de Toma de Muestras para Exámenes Bacteriológicos porque pueden verse en en laslas coloraciones directas de de la muestra, pero el el porque pueden verse coloraciones directas la muestra, pero cultivo resulta negativo. LasLas muestras de de heces para cultivo no no requieren cultivo resulta negativo. muestras heces para cultivo requieren de de un un recipiente estéril, pero es es importante queque esté limpio y bien recipiente estéril, pero importante esté limpio y bien tapado. tapado. Algunos exámenes bacteriológicos queque la la muestra seasea Algunos exámenes bacteriológicosnecesitan necesitan muestra inoculada directamente en en loslos medios de de cultivo, como es es el caso de de loslos inoculada directamente medios cultivo, como el caso cultivos de de sangre y médula ósea, algunos líquidos de de cavidades cultivos sangre y médula ósea, algunos líquidos cavidades internas o ciertas muestras queque sonson escasas, porpor ejemplo algunas internas o ciertas muestras escasas, ejemplo algunas secreciones de de loslos ojos. También cuando se se pretende recuperar secreciones ojos. También cuando pretende recuperar bacterias queque sonson muy lábiles a las condiciones ambientales, como bacterias muy lábiles a las condiciones ambientales, como Bordetella. EnEn esta forma se se aprovecha al máximo el espécimen y se Bordetella. esta forma aprovecha al máximo el espécimen y se disminuyen loslos riesgos de de contaminación. disminuyen riesgos contaminación. LasLas muestras queque se se envían al laboratorio deben acompañarse de de unauna muestras envían al laboratorio deben acompañarse solicitud solicitudde deexamen examen(mal (malllamada llamadaorden ordenmédica) médica)quequeincluya incluya información deldel paciente (Cuadro 1.1). información paciente (Cuadro 1.1).

Cuadro 1.11.1 Cuadro INFORMACION QUE DEBE ACOMPAÑAR LALA SOLICITUD INFORMACION QUE DEBE ACOMPAÑAR SOLICITUD PARA EXAMEN BACTERIOLOGICO PARA EXAMEN BACTERIOLOGICO completo deldel paciente ƒ Nombre Nombre completo paciente y género ƒ Edad Edad y género en en queque se obtuvo la muestra ƒ Fecha Fecha se obtuvo la muestra de de muestra ƒ Tipo Tipo muestra de de donde se obtuvo la muestra ƒ Sitio Sitio donde se obtuvo la muestra en en queque se obtuvo la muestra (si es ƒ Forma Forma se obtuvo la muestra (si pertinente) es pertinente) deseado (anotar lo que se se desea investigar, no no indicar ƒ Examen Examen deseado (anotar lo que desea investigar, indicar métodos de de trabajo, a menos queque se se trate de de algún procedimiento métodos trabajo, a menos trate algún procedimiento especial). especial). ƒ ƒ Nombre completo deldel médico Nombre completo médico ƒ ƒ Teléfono deldel médico Teléfono médico ƒ ƒ Ubicación deldel paciente (si está hospitalizado) Ubicación paciente (si está hospitalizado) ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ

LosLos recipientes en en loslos queque se se envían laslas muestras deben identificarse recipientes envían muestras deben identificarse concon la siguiente información (Cuadro 1.2). la siguiente información (Cuadro 1.2).

3

muestras muy pequeñas comprometen la eficiencia de de loslos exámenes muestras muy pequeñas comprometen la eficiencia exámenes bacteriológicos. Esto es es importante, sobre todo si en el mismo material bacteriológicos. Esto importante, sobre todo si en el mismo material se se desea investigar otros agentes microbianos además de de bacterias. Si Si desea investigar otros agentes además bacterias. ϰmicrobianos ϰ 4esCarlos A. Javier Zepeda no no posible obtener suficiente material, deberán escogerse loslos es posible obtener suficiente material, deberán escogerse Manual de Toma de Muestras para Exámenes Bacteriológicos Manual de Toma dese Muestras para Exámenes Bacteriológicos exámenes prioritarios que se necesitan. exámenes prioritarios que necesitan.

  enviarse Debe al al laboratorio suficiente de de muestra. LasLas Debe enviarse laboratorio suficiente cantidad muestra. Cuadro 1.21.2 cantidad Cuadro muestras muy pequeñas comprometen la eficiencia de de loslos exámenes muestras muy pequeñas comprometen la eficiencia exámenes bacteriológicos. Esto es es importante, sobre todo si en el mismo bacteriológicos. Esto importante, sobre todo si en elEL mismo material INFORMACIÓN QUE SESE DEBE ESCRIBIR EN INFORMACIÓN QUE DEBE ESCRIBIR EN EL material RECIPIENTE DE LA MUESTRA RECIPIENTE DE LA MUESTRA se se desea investigar otros agentes microbianos además de de bacterias. Si Si desea investigar otros agentes microbianos además bacterias. no no es es posible obtener suficiente material, deberán escogerse loslos posible obtener suficiente material, deberán escogerse exámenes prioritarios queque se se necesitan. exámenes prioritarios necesitan. ƒ ƒ Nombre deldel paciente Nombre paciente de de muestra muestra  ƒ ƒ TipoTipo Cuadro 1.21.2 Cuadro

ƒ ƒ Fecha en en queque se obtuvo la muestra Fecha se obtuvo la muestra ƒ ƒ Numerar recipientes siQUE hay más de de uno (A, (A, B, C… o EN 1, Numerar recipientes siSE hay más uno B, C… o 2, 1, INFORMACIÓN QUE DEBE ESCRIBIR EN EL INFORMACIÓN SE DEBE ESCRIBIR EL2,

DEDE LALA MUESTRA RECIPIENTE MUESTRA 3…)* 3…)* RECIPIENTE

*Si*es de de un un recipiente, indicar si desea queque las las muestras Si más es más recipiente, indicar si desea muestras

ƒsean Nombre deldel paciente ƒsean Nombre trabajadas porpaciente separado, algunas veces se usan trabajadas por separado, ya que algunas veces se usan ϰyaϰque recipientes porque estos sonson muy pequeños y lay la recipientes porque estos muy pequeños ƒvarios Tipo de muestra ƒvarios Tipo de muestra muestra noToma cabe en uno solo. muestra no cabe solo. Manual de de en Muestras para Exámenes Bacteriológicos Manual de Toma de uno Muestras para Exámenes Bacteriológicos ƒ ƒ Fecha en en queque se obtuvo la muestra Fecha se obtuvo la muestra ƒ ƒ Numerar recipientes si hay más de de unouno (A, (A, B, C… o 1, Numerar recipientes si hay más B, C… o 2, 1, 2,

Debe enviarse al al laboratorio cantidad de muestra. LasLas Debe enviarse laboratorio cantidad de muestra. En condiciones ideales, lassuficiente para exámenes En condiciones ideales,suficiente las muestras muestras para exámenes 3…)* 3…)* muestras muy pequeñas comprometen lade eficiencia de de los exámenes muestras muy pequeñas comprometen lade eficiencia bacteriológicos deben obtenerse antes administrar allos paciente bacteriológicos deben obtenerse antes administrar al exámenes paciente bacteriológicos. Esto esun importante, sobre todo si el mismo material bacteriológicos. Esto es importante, sobre todo si en elmuestras mismo agentes antimicrobianos. EnEn unindicar medio el en nuestro este esmaterial un un agentes antimicrobianos. un medio como ellas nuestro este es *Si más de un recipiente, si como desea que muestras *es Si es más de recipiente, indicar si desea que las seproblema desea investigar otros agentes microbianos además de bacterias. Si Si se desea investigar otros agentes microbianos además de bacterias. problema muy difícil de controlar, pues hasta losalgunas pacientes, por iniciativa muy difícil de controlar, pues hasta los pacientes, por iniciativa sean trabajadas por separado, ya que algunas veces se usan sean trabajadas por separado, ya que veces se usan varios recipientes porque estos son muy pequeños ylibremente la varios recipientes porque estos son muy pequeños y la nopropia, es es posible obtener suficiente material, deberán escogerse loslas posible obtener suficiente material, deberán escogerse los no propia, comienzan a usar antibióticos, disponibles libremente en en las comienzan a usar antibióticos, disponibles muestra no cabe en uno solo. muestra cabe en uno solo. exámenes prioritarios que se necesitan. exámenes prioritarios que necesitan. farmacias, antes deno pensar ense un estudio formal deldel problema clínico. farmacias, antes de pensar en un estudio formal problema clínico. También es es común queque loslos médicos inicien tratamientos empíricos en en También común médicos inicien tratamientos empíricos base a su razonamiento clínico y hasta queque no no hayhay unauna respuesta base a su razonamiento clínico y hasta respuesta  condiciones  condiciones Enadecuada lasbacteriológico. muestras para exámenes En ideales, las1.2 muestras para exámenes Cuadro Cuadro 1.2 adecuada deciden bacteriológico. PorPor esta razón, decidenunideales, unestudio estudio esta razón,el el bacteriológicos deben obtenerse antes de administrar al paciente bacteriológicos deben obtenerse antes de administrar al paciente antecedente deldel usouso de de antimicrobianos es es muy importante para evaluar antecedente antimicrobianos muy importante para evaluar INFORMACIÓN QUE SEun DEBE ESCRIBIR ELeste INFORMACIÓN QUE SE DEBE ESCRIBIR EN ELeste agentes antimicrobianos. En un medio como el nuestro es es un un agentes antimicrobianos. En medio como el EN nuestro los resultados de de loslos exámenes. los resultados exámenes. RECIPIENTE DEpues LA MUESTRA DE LA MUESTRA problema muy difícil deRECIPIENTE controlar, pues hasta loslos pacientes, porpor iniciativa problema muy difícil de controlar, hasta pacientes, iniciativa propia, comienzan a usar antibióticos, disponibles libremente en en laslas propia, comienzan a usar antibióticos, disponibles libremente farmacias, antes de de pensar en en un un estudio formal deldel problema clínico. farmacias, antes pensar estudio formal problema clínico. También común que loslos médicos inicien tratamientos empíricos en en También es común que médicos inicien tratamientos empíricos ƒ es del paciente ƒ Nombre Nombre del paciente base aƒ su razonamiento clínico y hasta que no hay una respuesta base aƒ Tipo su razonamiento clínico y hasta que no hay una respuesta Tipo muestra de de muestra adecuada deciden un un estudio bacteriológico. adecuada deciden estudio bacteriológico.PorPoresta estarazón, razón,el el Fecha se obtuvo la muestra ƒ ƒ Fecha en en queque se obtuvo la muestra antecedente deldel usouso de de antimicrobianos es es muy importante para evaluar antecedente antimicrobianos muy importante para evaluar Numerar recipientes si hay más B, C… o 2, 1, 2, ƒ ƒ Numerar recipientes si hay más de de unouno (A, (A, B, C… o 1, loslos resultados de de loslos exámenes. resultados exámenes. 3…)* 3…)*

*Si*es de de un un recipiente, indicar si desea queque las las muestras Si más es más recipiente, indicar si desea muestras

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 5 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteri

El laboratorio bacteriológico El laboratorio puede rechazar bacteriológico muestraspuede que no rechazar han sido muestras q debidamente tomadas odebidamente manejadas, tomadas esto se hace o manejadas, en beneficio estodel se hace en paciente y forma parte del paciente control ydeforma calidad parte en del el laboratorio. control de calidad Aunqueen el labo el médico generalmenteelinicia médico el proceso generalmente de indicar iniciaunel estudio, proceso no de indicar siempre es quien obtienesiempre la muestra es quien o la lleva obtiene al laboratorio, la muestra pero o la lleva es al labor quien debe dar las instrucciones quien debeal dar paciente las instrucciones o al personal al bajo paciente su o al pe responsabilidad. Algunasresponsabilidad. de las razones para Algunas el rechazo de las razones de muestras para el rechaz son las siguientes:(Cuadroson 1.3):las siguientes: Cuadro 1.3

Cuadro 1.3

RAZONES PARA RECHAZAR RAZONES MUESTRAS PARA RECHAZAR MUESTR PARA ESTUDIO BACTERIOLÓGICO PARA ESTUDIO BACTERIOLÓGICO ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ

ƒ ƒ

Muestras enviadas en ƒrecipientes Muestrasno-estériles enviadas en (excepto recipientes muestras no-estériles de (exce heces) heces) Muestras de tejido enviadas ƒ Muestras en formalina de tejido enviadas en formalina Muestras mal identificadas ƒ Muestras mal identificadas Muestras que se han derramado ƒ Muestras en tránsito que se han derramado en tránsito Hemocultivos que se hanƒ refrigerado Hemocultivos antesque de se llevarlos han refrigerado al laboratorio antes de llevarlos Muestras que han sido ƒ transportadas Muestras que inadecuadamente, han sido transportadas Ej.: orina inadecuadam expuesta al calor por más de expuesta una hora, al calor muestras por más de heces de unarefrigeradas hora, muestras de h (excepto si el propósito es cultivar (excepto Campylobacter) si el propósito es o muestras cultivar Campylobacter) en tubos om destapados destapados Muestras de heces envueltas ƒ Muestras en papel, desecas hecesoenvueltas duras en papel, secas o duras Muestras que no son representativas ƒ Muestras que de lo noque son se representativas desea estudiar, de Ej.: lo que se de saliva en lugar de esputo. saliva en lugar de esputo.

Nota: el coprocultivo está indicado Nota: elen coprocultivo casos agudos estáde indicado diarreaen o casos agudos de d disentería (heces con moco disentería y sangre), (heces raramente con moco cuando y sangre), el paciente raramente cuando expulsa heces formadas o duras. expulsa heces formadas o duras.

Las muestras clínicas Las que muestras más comúnmente clínicas que se estudian más comúnmente en el se e laboratorio bacteriológicolaboratorio son las siguientes: bacteriológico son (Cuadro 1.4)las siguientes:

6 Carlos A. Javier Zepeda

ϲ

ϲ

e Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos Cuadro 1.4

Cuadro 1.4

MUESTRAS CLÍNICAS MÁS FRECUENTEMENTE TRAS CLÍNICAS MÁS FRECUENTEMENTE SOMETIDAS A ESTUDIO BACTERIOLÓGICO METIDAS A ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

ƒ Sangre a ƒ Médula ósea lorraquídeo ƒ Líquido cefalorraquídeo ural, pericárdico, ƒ Líquidos peritoneal pleural, y articular pericárdico, peritoneal y articular ƒ Orina ƒ Heces urulentos (pus), ƒ Exudados úlceras cutáneas, purulentos heridas (pus),operatorias úlceras cutáneas, y heridas operatorias y fístulas. s respiratorias ƒ Secreciones altas (faringerespiratorias y amígdalas, altas nasal, (faringe y amígdalas, nasal, y senos paranasales) nasofaringe y senos paranasales) s respiratorias ƒ Secreciones bajas (traqueal, respiratorias bronquial, bajas lavado (traqueal, bronquial, lavado veolar) bronquio-alveolar) e los oídos ƒ Exudados de los oídos e los ojos ƒ Exudados de los ojos eminal (semen) ƒ Secreción seminal (semen) s, exudados yƒ úlceras Secreciones, genitales exudados y úlceras genitales psias) ƒ Tejidos (biopsias)

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 7 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteri

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8 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

MUESTRAS DE SANGRE MUESTRAS DE SANGRE A EXAMEN BACTERIOLÓGICO PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO do tradicional en frascos o botellas (Método tradicional en frascos o botellas con medio líquido)con medio líquido)

senta unaLamuestra sangre normalmente representa una estéril, muestra en condiciones normalmente estéril, en condiciones as bacterias normales logranalgunas entrar abacterias la sangre logran por vía entrar de ala la sangre por vía de la tica, perocirculación rápidamente linfática, son eliminadas pero rápidamente por el sistema son eliminadas por el sistema nuclear (“sistema fagocítico-mononuclear retículo-endotelial”). (“sistema La retículo-endotelial”). verdadera La verdadera cterias enpresencia la sangre de se bacterias denominaen bacteriemia la sangre sey denomina cuando bacteriemia y cuando de sintomatología se acompaña clínicadeinfecciosa, sintomatología formaclínica parte infecciosa, del forma parte del o llamado síndrome septicemia clínico o sepsis. llamado septicemia o sepsis.

frecuenteEldeorigen infecciones más frecuente de la sangre de infecciones es el uso de de la sangre es el uso de ravasculares dispositivos (catéteres), intravasculares le siguen una (catéteres), variedadledesiguen una variedad de lizadas eninfecciones otros sitios,localizadas como las del entracto otros sitios, genitourinario, como las del tracto genitourinario, rio, colon,tracto peritoneo, respiratorio, piel, vías colon, biliares, peritoneo, abscesos piel, intra vías biliares, abscesos intra otros sitios, abdominales en ese orden. y otros sitios, en ese orden.

puede ser La constante bacteriemiao puede intermitente, ser constante de baja oo intermitente, alta de baja o alta onada pormagnitud, una o másocasionada especies de por bacterias, una o más que especies pueden de bacterias, que pueden ento rápido ser odelento. crecimiento Por estas rápido y otras o lento. razones, Por estas es y otras razones, es en el proceso necesario de investigar que en elbacteriemia proceso deseinvestigar tenga que bacteriemia se tenga que tivos (hemocultivos). tomar varios cultivos (hemocultivos).

ivo en adultos Cada hemocultivo representa laenobtención adultos representa de suficiente la obtención de suficiente mbrar dossangre frascospara con sembrar medio dedos cultivo, frascos unocon de medio ellos sede cultivo, uno de ellos se ción anaeróbica incuba para en condición permitir el anaeróbica crecimiento para de permitir bacterias el crecimiento de bacterias trictas y el anaeróbicas otro en condición estrictasaeróbica y el otropara en condición permitir elaeróbica para permitir el bacterias aeróbicas. crecimientoLas de bacterias bacterias facultativas aeróbicas. Las crecen bacterias en facultativas crecen en s, a menos ambos. que esté En indicado, niños, a menos se puede queobviar esté indicado, el cultivose puede obviar el cultivo bre todoanaeróbico, en niños pequeños, sobre todo enen quienes niños pequeños, no es en quienes no es omar mucha recomendable sangre. tomar mucha sangre.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 9 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteri

La mayor parte de los La laboratorios mayor parteclínicos de losutilizan laboratorios el método clínicos utiliza tradicional para efectuartradicional hemocultivos, para que efectuar consiste hemocultivos, en la siembra que deconsiste e un medio de cultivo líquido un medio (caldode decultivo cultivo)líquido contenido (caldoendefrascos cultivo) conten (botellas). La muestra (botellas). de sangre,Launa muestra vez obtenida, de sangre, se una inocula vez obtenid directamente en estos directamente frascos. Existen en otros estos sistemas, frascos. Existen incluyendo otros sistem algunos automatizados, algunos para el cultivo automatizados, de la sangre, para el suscultivo ventajas de la y sangre, desventajas en comparación desventajas con elenmétodo comparación tradicional con no el serán método tradici discutidas en esta ocasión, discutidas pero en pueden esta ser ocasión, consultadas pero pueden en lasser consu referencias anotadas al final. referencias anotadas al final.

Se han usado distintos caldos Se hanpara usado los distintos cultivos de caldos sangre, paracasi los todos cultivos de san ellos con resultados similares. ellos con Losresultados caldos sesimilares. pueden preparar Los caldos en se el pueden laboratorio o se puedenlaboratorio adquirir comercialmente. o se pueden adquirir Existencomercialmente. diversas Ex presentaciones (Fig, 2.1). presentaciones El caldo debe (Fig, contener 2.1). Elanticoagulante caldo debe contener y an agentes anti complemento agentes y anti anti efecto complemento lisosómico ydeanti los efecto leucocitos, lisosómico de para proteger las bacterias paraque proteger se quieren las bacterias cultivar. que Paraseesto quieren se hacultivar. P usado polianetol sulfonato usado de polianetol sodio (SPS) sulfonato como de aditivo, sodiopero (SPS) su como ad concentración debe ser controlada concentración puesdebe si esser mayor controlada de 0.05% puespuede si es mayor de ser inhibitoria para algunas ser inhibitoria bacterias. para Normalmente algunas bacterias. se usa 0.025%. Normalmente s Cuando se quiere cultivar Cuando bacterias se quiere exigentes, cultivar se bacterias pueden agregar exigentes, se p nutrientes especiales al caldo nutrientes de cultivo. especiales al caldo de cultivo.

En 1947 Castañeda describió En 1947 el uso Castañeda de un medio describió bifásico, el uso sólido de un (agar) medio bifásic y líquido (caldo) en el mismo y líquido frasco, (caldo) paraenel elcultivo mismo defrasco, Brucella. paraPor el cultivo de mucho tiempo este sistema mucho fue tiempo recomendado este sistema como un fue procedimiento recomendado como un estándar para el cultivo estándar de sangrepara parael aislar cultivoeste de sangre agente. para Estudios aislar este ag comparativos más recientes comparativos han demostrado más recientes que este han sistema demostrado no es que este superior al método tradicional superior usando al método un medio tradicional apropiado usando y más un bien medio apropia con el uso de ese métodocon se observa el uso deuna esetasa método mayor sede observa contaminación. una tasa mayor de Comercialmente es difícilComercialmente obtenerlo, pero es si difícil se quiere obtenerlo, usar se pero puede si se quiere preparar en el laboratorio.preparar en el laboratorio.

El volumen de sangre cultivado El volumen es de la variable sangre cultivado más importante es la variable que más i determina la sensibilidad determina del hemocultivo la sensibilidad para detectar del hemocultivo bacteriemia. para El detectar volumen de sangre necesario volumen parade hacer sangre un hemocultivo necesario para dependerá hacer undel hemocultivo número de frascos que senúmero van a usar de frascos y del contenido que se van de acaldo usar de y del cultivo contenido de en los mismos. En general ense los recomienda mismos. Enmantener general se unarecomienda relación demantener 1:5 una

10 CarlosϭϬ A. Javier Zepeda ϭϬ de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

volumen de sangre y elelvolumen Para a 1:10 entre volumende decaldo. sangre y eladultos, volumen de caldo. Para adultos, omendados 90 mL de caldo y cada uno debe loscontienen frascos recomendados contienen 90 mL de caldo y cada uno debe on 10 mL ser de sangre. inoculado con 10 mL de sangre.

empo se Por había considerado que había en los niños las que en los niños las mucho tiempo se considerado eran de bacteriemias mayor intensidad, lo cual usarlo cual permitiría usar eran de mayorpermitiría intensidad, nores de sangre en los cultivosde para mantener misma para mantener la misma volúmenes menores sangre en loslacultivos omparadosensibilidad, con los volúmenes para comparadorecomendados con los volúmenes recomendados para mente se recomienda para los niños, cultivar unpara volumen adultos. Actualmente se recomienda los niños, cultivar un volumen ngre para suficiente lograr la mayor sensibilidad posible. Utilizando de sangre para lograr la mayor sensibilidad posible. Utilizando volumen de mediocon entre 5 y 50 mL, pueden inocular frascos un volumen dese medio entre 5 y 50 mL, se pueden inocular sangre entre 1 y 5 mL, dependiendo edaddependiendo y el volúmenes de sangre entre 1dey la 5 mL, de la edad y el del niño. Esta muestra sedel coloca un muestra solo frasco. tamaño (peso) niño.en Esta se coloca en un solo frasco.

nsideración es el número importante de cultivos es que Laimportante segunda consideración el se número de cultivos que se ar. Cuando sospecha endocarditis, un solo endocarditis, un solo vannoa se sembrar. Cuando no se sospecha el métodohemocultivo tradicional detecta aproximadamente 80% deaproximadamente 80% de por el método tradicional detecta dos hemocultivos 88% ydos treshemocultivos hemocultivos88% 99%. En hemocultivos 99%. En los episodios, y tres endocarditis el primer hemocultivo el es primer positivohemocultivo en pacientes con endocarditis es positivo en nte 90% de los casos. Lo anterior se los refiere a muestras aproximadamente 90% de casos. Lo anterior se refiere a muestras mismo período de 24 tomadas enhoras. el mismo período de 24 horas.

han evaluado forma sistemática la periodicidad con Pocosenestudios han evaluado en forma sistemática la periodicidad con omarse laslamuestras, aunque no las cabe duda que debidono cabe duda que debido cual deben tomarse muestras, aunque de algunas formas de bacteriemia, esformas necesario separar a la fluctuación de algunas de bacteriemia, es necesario separar a toma deellas muestras. formadepráctica, las muestras tiempo entre De la toma las muestras. De forma práctica, las muestras en obtenerse un pocodeben antesobtenerse o inmediatamente después de sangre un poco antes o inmediatamente después riles. Algunos han recomendado tiempos derecomendado 30 de losautores picos febriles. Algunos autores han tiempos de 30 entre una muestra y laentre siguiente antes dey iniciar o 60 minutos una muestra la siguiente antes de iniciar ro otros consideran no otros hay mayor diferencia si se antibióticos,que pero consideran que no hay mayor diferencia si se eamente. toman Es la condición del paciente lo condición que determina simultáneamente. Es la del paciente lo que determina pararse lascómo tomas. En situaciones urgentes, el uso urgentes, donde el uso deben separarse las tomas. donde En situaciones es de necesidad inmediata, pueden obtener las se pueden obtener las de antibióticos es desenecesidad inmediata, táneamente de distintos sitios (venas). situaciones muestras simultáneamente de En distintos sitios (venas). En situaciones s, las tomas se pueden espaciar entrese 30pueden minutosespaciar y dos entre 30 minutos y dos menos urgentes, las tomas caso, no es necesario obtener tres hemocultivos horas. En todo caso, más no esdenecesario obtener más de tres hemocultivos e 24 horas. en un período de 24 horas.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 11 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteri

La importancia de tomar más La importancia de un hemocultivo de tomarpara másevaluar de un hemocultivo sospecha para ev de bacteriemia no es solamente de bacteriemia porquenoaumenta es solamente la sensibilidad porque aumenta del la s procedimiento, sino porque procedimiento, ayuda a interpretar sino porque los resultados ayuda a interpretar positivos los resu para diferenciar si se para trata diferenciar de verdadera si se bacteriemia trata de o verdadera es una bacteriem contaminación. Cuando contaminación. se trata de verdadera Cuando sebacteriemia, trata de verdadera hay ba crecimiento en ambos frascos crecimiento de cada en ambos toma ofrascos en los de de cada los otros toma o en lo hemocultivos; cuando sehemocultivos; trata de un contaminante, cuando se trata generalmente de un contaminante, sólo gen crece en uno de los frascos crece en uno de los frascos

Figura 2.1 Frascos para hemocultivo Figura 2.1 Frascos para hemocultivo

Obtención de la muestra. Obtención de la muestra.

La muestra de sangre, enLa el muestra método tradicional, de sangre, en se el obtiene método portradicional, punción se obtie venosa usando jeringa. Cada venosa hemocultivo usando jeringa. incluyeCada la inoculación hemocultivo de dos incluye la inoc frascos. Debe tenerse mucho frascos. cuidado Debepara tenerse evitar mucho la contaminación cuidado paracon evitar la con bacterias de la piel, para bacterias ello de se la deben piel, seguir para ello las siguientes se deben seguir instrucciones, Cuadro 2.1.instrucciones, Cuadro 2.1.

varios recipientes porque estos sonson muy pequeños y lay la varios recipientes porque estos muy pequeños muestra no no cabe en en unouno solo. muestra cabe solo.

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Carlos A. Javier Zepeda En12 ideales, En condiciones condiciones ideales, laslas muestras muestras para para exámenes exámenes de Toma de Muestras Manual paradeben Exámenes dedeben Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos bacteriológicos obtenerse antes de administrar al paciente bacteriológicos obtenerse antes de administrar al paciente agentes antimicrobianos. EnEn un un medio como el nuestro este es es un un agentes antimicrobianos. medio como el nuestro este problema muy difícil de de controlar, pues hasta loslos pacientes, porpor iniciativa problema muy difícil controlar, pues hasta pacientes, iniciativa Cuadro 2.1 Cuadro 2.1 propia, comienzan a usar antibióticos, disponibles libremente en en laslas propia, comienzan a usar antibióticos, disponibles libremente farmacias, antes de pensar en un estudio formal del problema clínico. farmacias, antes de pensar en un estudio formal del problema clínico. INSTRUCCIONES PARA NSTRUCCIONES PARALA LATOMA TOMADE DE NSTRUCCIONES PARA LA TOMA DE También esPARA común que loslos médicos inicien tratamientos empíricos en en También es común que médicos inicien tratamientos empíricos MUESTRAS PARA HEMOCULTIVO MUESTRAS PARA HEMOCULTIVO MUESTRAS HEMOCULTIVO base a su razonamiento clínico y hasta queque no no hayhay unauna respuesta base a su razonamiento clínico y hasta respuesta es estériles durante 1. Usar el guantes procedimiento. estériles durante elbacteriológico. procedimiento. adecuada deciden un unestudio bacteriológico. PorPoresta adecuada deciden estudio estarazón, razón,el el la piel en el 2. sitio Desinfectar de la punción la piel con en alcohol el sitio etílico de la o punción isopropílico con alcohol 70%, etílico o isopropílico antecedente deldel usouso de de antimicrobianos es es muy importante para evaluar antecedente antimicrobianos muy importante para evaluar 70%, tuar porlos lo menos dejando durante actuar 30 segundos. por lo menos durante 30 segundos. resultados de de loslos exámenes. los resultados exámenes.

una torunda3. estéril Aplicar solución con de unayodo torunda 1 o 2% estéril (unsolución minuto) odePovidone– yodo 1 o 2% (un minuto) o Povidone– dos minutos) en yodo forma10% concéntrica (dos minutos) en la zona en forma de punción. concéntrica Si existe en la zona de punción. Si existe ilidad conocida hipersensibilidad al yodo, se puede conocida substituir al yodo, por gluconato se puededesubstituir por gluconato de a 2%. clorhexidina 2%. mpiar la zona4.de Volver puncióna con limpiar alcohol la zona etílico de opunción isopropílico con alcohol 70% para etílico o isopropílico 70% para ceso de yodo, dejando retirar el actuar exceso un de minuto. yodo, dejando actuar un minuto. en la misma5.forma Desinfectar el tapón de en hule la misma de los forma frascos el tapón de cultivo. de hule de los frascos de cultivo. e la zona de6.la piel Esperar en que que selavazona a efectuar de la piel la punción en que se haya va secado a efectuar la punción haya secado troducir la aguja. antes de introducir la aguja. nción venosa 7.y obtener Hacer la20punción mL de sangre venosaen y obtener adultos 20 y entre mL de 1 mL sangre y 5 en adultos y entre 1 mL y 5 s, según su edadmL y peso. en niños, según su edad y peso. da frasco con 8. elInocular volumencada de sangre frasco con establecido el volumen (ver de la discusión sangre establecido (ver la discusión umen de la muestra). sobre el volumen de la muestra). esario cambiar 9. la(No aguja es necesario de la jeringa cambiar antesladeaguja inocular de lalosjeringa frascos, antes de inocular los frascos, omendaba anteriormente esto se recomendaba para evitar contaminación anteriormentedel para cultivo, evitarpero contaminación del cultivo, pero ostrado que usando se ha dosdemostrado agujas la tasa quede usando contaminación dos agujas nolaes tasa muy de contaminación no es muy más bien se trata diferente de proteger y más bien al personal se trata de de salud proteger evitando al personal de salud evitando ones innecesariasmanipulaciones con el cambio de innecesarias agujas). con el cambio de agujas). os frascos a 10. temperatura Mantenerambiente los frascos y llevarlos a temperatura pronto ambiente al laboratorio. y llevarlos pronto al laboratorio.

A.

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nstein MP,Baron Dune WM, EJ, Weinstein et al. Blood MP, Cultures Dune WM, IV, Cumitech et al. Blood Cultures IV, Cumitech Press. Washington, 1C, 2005, ASM D. C.Press. Washington, D. C.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos

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14 Carlos A. Javier Zepeda

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MUESTRAS DE LÍQUIDO CEFALORRAQ MUESTRAS DE LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO PARA EXAMEN BACTERIOLÓGIC PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO

El sistema nervioso central El sistema (SNC) nervioso comprende central diversas (SNC) estructuras comprende diversas anatómicas Fig. 4.1, incluyendo: anatómicas el cerebro, Fig. 4.1,elincluyendo: cerebelo, el el puente, cerebro,elel cerebelo, e tallo cerebral, la médula tallo espinal cerebral, y las membranas la médula espinal que losy cubren las membranas (las que los meninges: duramadre, aracnoides meninges:yduramadre, pía madre),aracnoides Fig. 4.2 El diagnóstico y pía madre), Fig. 4.2 El de las infecciones del sistema de lasnervioso infecciones central del es sistema de importancia nervioso central crítica es de import para poder hacer un tratamiento para poder oportuno. hacer un tratamiento oportuno.

En el interior del cerebro En se el encuentran interior del los cerebro ventrículos se encuentran cerebrales, los ventrículos dentro de los cuales haydentro un plexo de los vascular cuales llamado hay un plexo plexo coroideo, vascular llamado plex donde es producido el donde líquido escefalorraquídeo producido el líquido (LCR), cefalorraquídeo que de los (LCR), ventrículos laterales pasa ventrículos al tercer laterales ventrículopasa y luego al tercer a través ventrículo del y luego a acueducto de Sylvius emerge acueducto del tallo de Sylvius cerebral emerge a la cisterna del tallo magna cerebral y a la cistern circula en el espacio subaracnoideo, circula en el donde espacio essubaracnoideo, reabsorbido hacia donde el es reabsorb sistema venoso. La obstrucción sistema venoso. a la circulación La obstrucción del LCR a lacausa circulación del hipertensión intracraneal;hipertensión esta obstrucción intracraneal; puede deberse esta obstrucción entre otras puede deberse cosas a infecciones. cosas a infecciones.

La infección del parénquima La infección cerebral se deldenomina parénquima encefalitis, cerebralase menudo denomina encefaliti se asocia con infección se del asocia espacio con subaracnoideo infección del espacio (meningitis), subaracnoideo ( designándose en este designándose caso meningoencefalitis. en este caso La meningoencefalitis. formación de La fo abscesos cerebrales es otra abscesos forma de cerebrales infecciónesdel otra parénquima. forma de infección del parénqu

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4.1 Vías de circulación Figura del 4.1 Vías de circulación del uido cefalorraquídeo líquido cefalorraquídeo

Cerebro

Cerebro

Figura 4.2. Corte sagital del Figura cráneo4.2. Corte sagital del cráneo mostrando las meninges mostrando las meninges

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 17 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacter Hay dos formas principales Hay dedos meningitis: formas principales de meningitis:

1) La forma “aséptica”, 1) llamada La forma así “aséptica”, en forma errónea llamada(pero así en el forma e término se sigue usandotérmino por costumbre), se sigue usando porque por los cultivos costumbre), por para bacterias comunes para resultan bacterias negativos, comunes es producida resultan negativos, por e diversos agentes patógenos, diversos generalmente agentes patógenos, virus y a veces generalmente por viru M. tuberculosis, hongosM.y tuberculosis, espiroquetas hongos como Treponema, y espiroquetas com Leptospira y Borrelia. Los Leptospira cultivos rutinarios y Borrelia.para Losbacterias cultivos rutinarios no p detectan estos organismos. detectan estos organismos.

2) La forma purulenta, 2) causada La formageneralmente purulenta, causada por bacterias generalmente piogénicas como Streptococcus piogénicaspneumoniae, como Streptococcus Haemophilus pneumoniae influenzae, Neisseria meningitidis, influenzae, Escherichia Neisseria meningitidis, coli, ListeriaEscherich monocytogenes, Nocardia, monocytogenes, otras bacterias Nocardia, y ocasionalmente otras bacterias y por protozoos. por protozoos.

La infección de la sustancia La infección de la médula de laespinal sustancia se denomina de la médula mielitis. espinal se de Menos frecuentemente Menos se encuentran frecuentemente infecciones se encuentran de las partes infecciones anatómicas adyacentes del anatómicas SNC como adyacentes absceso epidural, del SNC osteomielitis como absceso epidu del cráneo o infecciones del de cráneo los nervios o infecciones periféricos de los (borreliosis, nervios periféric tuberculosis y lepra). tuberculosis y lepra).

La gran mayoría de las infecciones La gran mayoría del SNC deson las de infecciones origen hematógeno, del SNC son de orig los organismos que llegan lospor organismos vía sanguínea que llegan debenpor vencer vía sanguínea la “barrera deben ve hemato-encefálica”; que es hemato-encefálica”; un sistema de protección que es un vascular sistema deldeSNC. protección va Otras vías de acceso sonOtras trauma, víascirugía de acceso previa son deltrauma, cráneo,cirugía punciones previa del crá del espacio subaracnoideo delo espacio raramente subaracnoideo por vía neural o retrógrada raramente por (rabia, vía neural re herpes zoster, varicela y algunos herpes zoster, arbovirus). varicela y algunos arbovirus).

Debido a la frecuencia con Debido que se a la encuentra frecuencia comprometido con que se encuentra el espaciocomprom subaracnoideo en infecciones subaracnoideo del SNC, el enestudio infecciones del LCR del SNC, es de el suma estudio del L importancia en el manejo importancia de estos pacientes. en el manejo En otros de estos casos,pacientes. sobre todo En otros c cuando se trata de abscesos cuando cerebrales, se trata es de necesario abscesos obtener cerebrales, muestras es necesario o directamente de las lesiones. directamente En estos de pacientes, las lesiones. la aspiración En estos pacientes, del la absceso y el manejoabsceso del material y el manejo se hacedelsiguiendo material las se hace recomendaciones de muestras recomendaciones de exudadosdepurulentos muestras (ver de exudados adelante).purulentos

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18 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

 HV GH DVSHFWR FULVWDOLQR WLHQH  FpOXODVȝ/ EO /&5 QRUPDO HV GHPHQRVGH DVSHFWR FULVWDOLQR WLHQH PHQRVGH  FpOXODVȝ/ mg/dL de proteínas y entre 50 yde 80proteínas mg/dL deyglucosa. menos de 50 mg/dL entre 50En y 80 mg/dL de glucosa. En meningitis pacientes “aséptica”con o no-purulenta, el líquidoosuele ser meningitis “aséptica” no-purulenta, el líquido suele ser ente turbioclaro (opalescente), se encuentra un aumentose entre o ligeramente turbio (opalescente), encuentra un aumento entre DVȝ/ XVXDOPHQWH GH DVSHFWR OLQIRLGH   \ PRQRQXFOHDUHV FpOXODVȝ/ XVXDOPHQWH PRQRQXFOHDUHV GH DVSHFWR OLQIRLGH  nto entreligero 55 y incremento 80 mg/dL entre de proteínas glucosade proteínas y glucosa 55 y 80y mg/dL normal o ligeramente disminuida. generalmente normal o ligeramente disminuida.

con meningitis purulenta con muestran un LCR de aspecto Los pacientes meningitis purulenta muestran un LCR de aspecto umento del número célulasdel (predominantemente turbio, con de aumento número de células (predominantemente morfonucleares neutrófilos) en un rangoneutrófilos) entre 3,000eny un rango entre 3,000 y leucocitos polimorfonucleares PHQWRGHSURWHtQDVPD\RUGHPJG/\GLVPLQXFLyQGH ȝ/DXPHQWRGHSURWHtQDVPD\RUGHPJG/\GLVPLQXFLyQGH lores menores de 10 amg/ dL. menores de 10 mg/ dL. la glucosa valores

s intermedias estos extremos, ejemplo: el Hay entre situaciones intermediaspor entre estos en extremos, por ejemplo: en el gitis tuberculosa, aumento de células esel moderado caso deelmeningitis tuberculosa, aumento en de células es moderado en 000 a 2,000/ ȝ/ \ PL[WR FRQa SUHGRPLQLR GH OHXFRFLWRV el rango de 1,000 2,000/ ȝ/ \ PL[WR FRQ SUHGRPLQLR GH OHXFRFLWRV , pero conmononucleares, presencia substancial de presencia polimorfonucleares, pero con substancial de polimorfonucleares, tante de proteínas más de 100 mg/dL y disminución aumento de importante de proteínas de más de 100 mg/dL y disminución ción de glucosa (entre 15 y 30de mg/dL). de la concentración glucosa (entre 15 y 30 mg/dL).

la muestra: Obtención de la muestra:

rcunstancias Exceptuando muy poco frecuentes, circunstancias el LCR muyse poco obtiene frecuentes, por el LCR se obtiene por r (PL) (Fig.punción 4.3). Lalumbar PL es un (PL) procedimiento (Fig. 4.3). Lainvasivo PL es unque procedimiento invasivo que uado en forma debe ser aséptica efectuado estricta, en forma por un aséptica médicoestricta, con por un médico con en esta técnica. adiestramiento en esta técnica.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 19 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológ

Se recomienda obtener Se recomien la muestra en tres tubos la muestra en estériles, el primero para estériles, el p examen histoquímico, el examen histo segundo para estudio segundo pa bacteriológico ba (coloración de Gram y (coloración d cultivo) y el tercero para cultivo) y el te estudios inmunológicos estudios inm que sean requeridos. El que sean req volumen mínimo en volumen m cada tubo debe ser 2 cada tubo d mL, nunca menos de 1 mL, nunca m   mL. mL. Figura 4.3: Punción lumbar Figura 4.3: Punción lumbar Las muestras de LCR Las muestra deber ser procesadas lo más deberpronto ser procesadas posible después lo másde pronto ser obtenidas. posible después de ser No deben refrigerarse. SiNo solamente deben refrigerarse. se obtiene un Si solamente tubo, el mismo se obtiene debe un tubo, el m ser enviado al laboratorioser de enviado Bacteriología al laboratorio antes dede ser Bacteriología manipulado antes en de ser man otras secciones. otras secciones.

La sensibilidad de los métodos La sensibilidad de laboratorio de lospara métodos detectar de bacterias laboratorioenpara detectar b el LCR depende en gran el medida LCR depende del volumen en gran de lamedida muestra. delEste volumen temade la muestra ha sido motivo de muchaha discusión sido motivo entrede losmucha médicos discusión y los expertos entre losenmédicos y los e el laboratorio, pero no hay el laboratorio, forma de contrarrestar pero no hayelforma concepto de contrarrestar de que el conce entre menos muestra se recibe entre menos en el laboratorio, muestra semenos recibe probabilidades en el laboratorio, menos pro hay de detectar la causa hay del problema. de detectar la causa del problema. BIBLIOGRAFIA.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 21 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacterio

MUESTRAS DE LÍQUIDOS PERICÁR MUESTRAS DE LÍQUIDOS PERICÁRDICO, PLEURAL, PERITONEAL Y ARTICULA PLEURAL, PERITONEAL Y ARTICULAR PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO EXAMEN BACTERIOLÓGICO

Aunque las infecciones de Aunque los espacios las infecciones pericárdico, de los pleural, espacios peritoneal pericárdico, y pleu articular tienen diferentesarticular causas,tienen el procedimiento diferentes causas, de obtención el procedimiento de las de o muestras de estos líquidos muestras se lleva de a cabo estosen líquidos la mayor se parte lleva a decabo los casos en la mayor pa por aspiración de las cavidades por aspiración correspondientes de las cavidades con unacorrespondientes jeringa. Estos con un son procedimientos invasivos son procedimientos y deben ser efectuados invasivos ypor deben un médico ser efectuados adiestrado en las técnicas adiestrado respectivas. en las Nunca técnicas se deben respectivas. enviar Nunca estas se debe muestras en hisopos. muestras en hisopos. Obtención de las muestras: Obtención de las muestras:

ideal es separadas obtener tres separadas Lo ideal es obtener tresLomuestras en muestras tubos estériles con en tubo deuno cierre seguro (Fig.cito-químico, 5.1), uno paraotro el estudio ci tapadera de cierre segurotapadera (Fig. 5.1), para el estudio para estudio bacteriológico y el adicionales tercero paraque exámenes para estudio bacteriológico y el tercero para exámenes seanse requeridos. En general trata de aspirar derrames que p sean requeridos. En general trata de derrames quesepermiten para al laboratorio, suficiente cantidad para suficiente enviar al cantidad laboratorio, porenviar ejemplo 50 mL; sin por ejem embargo, el envía derrame es escaso, se envía el mayor v embargo, si el derrame es escaso,sise el mayor volumen que se pueda aspirar. pueda aspirar.

Mucha veces estos que derrames son exudados Mucha veces estos derrames son exudados contienen fibrinógenoque contien tienden a coagular,agregar por elloun esanticoagulante conveniente agregar un a y tienden a coagular, por yello es conveniente estéril a lainhibitorio muestra, para que no sea inhibitorio estéril a la muestra, que no sea el crecimiento de para el c bacterias, por ejemplo, o citrato sódico 3.8%. bacterias, por ejemplo, heparina o citrato sódico heparina 3.8%.

Algunos autores recomiendan Algunos la inoculación autores recomiendan directa de la estos inoculación líquidos directa (2 de e a 10 mL) en frascos con acaldo 10 mL) de cultivo en frascos como con loscaldo usados de para cultivo obtener como los usado hemocultivos, en esta hemocultivos, forma se logra en una estamejor formarecuperación se logra una de mejor re bacterias. bacterias.

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22 Carlos A. Javier Zepeda e Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos





Figura 5.1 Ejemplos de tubos Figura para 5.1 Ejemplos de tubos para obtención de líquidos obtención de líquidos



dejarse Siempre aparte una porción de aparte la muestra para lade la muestra para la debe dejarse una porción frotes para las coloraciones directas. preferible que preparación de frotes para lasEscoloraciones directas. Es preferible que s sean procesadas con prontitud una vez con que prontitud son estas muestras sean procesadas una vez que son la exigencia es menor con las muestras deque líquido obtenidas, peroque la exigencia es menor con las muestras de líquido y si se mantienen refrigeradas, serrefrigeradas, sembradas pueden ser sembradas cefalorraquídeo y si se pueden mantienen después hasta sin mayor compromiso la recuperación de para la recuperación de 24 horas despuéspara sin mayor compromiso patógenos excepción es el caso los comunes; organismosuna patógenos comunes; una de excepción es el caso de rtritis gonocócica, por logonocócica, lábil que esque Neisseria sospecha que de artritis por lo lábil que es Neisseria aspiradogonorrhoeae, articular debeel ser sembrado tan pronto como aspirado articular debe ser sembrado tan pronto como un medio apropiado. sea posible en un medio apropiado.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 23 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

DE ORIN MUESTRAS DEMUESTRAS ORINA EXAMEN BACTERIOL PARA EXAMENPARA BACTERIOLÓGICO

Las infecciones de la vía Las urinaria son comunes de la vía en urinaria la población son comunes general, en la po infecciones afectan a personas de todas afectan las edades, a personas tanto deaquellas todas lasque edades, tienentanto una aquella   salud normal como a pacientes salud normal debilitados, como son a pacientes más frecuentes debilitados, en elson más género femenino. Los cuadros género clínicos femenino. van Los desde cuadros formasclínicos asintomáticas van desde form (bacteriuria asintomática), (bacteriuria uretritis yasintomática), cistitis, hastauretritis pielonefritis y cistitis, e hasta infecciones complicadas.infecciones complicadas.

Los cultivos de la orina Los para cultivos bacterias de la posiblemente orina para bacterias son los posible procedimientos más comunes procedimientos en los laboratorios más comunes de en Bacteriología los laboratorios d Clínica. A través de los Clínica. años no Ahatravés habido decambio los años significativo no ha habido en lacambio s frecuencia de los agentesfrecuencia que causan de infecciones los agentes urinarias, que causan pero infecciones si ha urin cambiado el comportamiento cambiado de estas el comportamiento especies antedelosestas agentes especies an antimicrobianos. El cultivo antimicrobianos. es necesario para El cultivo poder es aislar necesario la bacteria paraypoder ai efectuar los estudios de sensibilidad efectuar los aestudios los antibióticos. de sensibilidad a los antibióticos.

El examen general de la El orina examen indica general una posible de la orina infección indicaurinaria una posible in cuando se observan leucocitos cuando ense cantidad observan mayor leucocitos que lo en normal cantidad (piuria), mayor que l eritrocitos (hematuria), presencia eritrocitosde(hematuria), nitritos y esterasa presencia leucocitaria, de nitritosasí y esterasa como un aumento evidente como delun número aumento de bacterias evidente del en el número examen de del bacterias e sedimento urinario. Todo sedimento lo anterior urinario. asumiendo Todo quelolaanterior muestra asumiendo de orina que la ha sido obtenida debidamente. ha sido Siobtenida no se toman debidamente. las precauciones Si no sedebidas toman las preca para obtener la muestra,para la contaminación obtener la muestra, con secreciones la contaminación de origen con secrec genital altera los resultados, genital esto altera es más los resultados, frecuente en esto mujeres es más y en frecuente e personas en los extremos personas de edaden(niños los extremos muy pequeños de edady (niños personas muy peque mayores de 60 años). La mayores sensibilidad de 60 delaños). examen La general sensibilidad de orina del examen para gene predecir infección urinaria predecir varía por infección diversas urinaria razones varía y lapor correlación diversas razones con la presencia de bacteriuria con la presencia significativa dedemostrada bacteriuria significativa por cultivo no demostrad es absoluta. es absoluta.

El marcador de laboratorio El marcador definitivo para de laboratorio establecerdefinitivo el diagnóstico para establecer de e infección bacteriana de la infección vía urinaria bacteriana es el cultivo de la vía de la urinaria orina. es Desde el cultivo de

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2 4 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

. XX se llevaron a cabo que demostraron que que demostraron que mediados del s.estudios XX se llevaron a cabo estudios cifra de 10 unidadesuna formadoras de5 unidades colonia (UFC)/mL formadoras de orina de colonia es (UFC)/mL de orina es nfección urinaria. indicativaAde dicha infección cifra se urinaria. le considera A dichauna cifra se le considera una nificativa”, “bacteriuria pero estudios significativa”, más recientes perohan estudios demostrado más recientes han demostrado 5 UFC/mL formaran que los cultivos si solo se con informaran más de 10los cultivos se conestaría más de 105 UFC/mL se estaría nosticar un dejando buen número de diagnosticar de infecciones un buen que número se asocian de infecciones que se asocian nores. con cuentas menores.

e recomienda Actualmente que losselaboratorios recomiendadeben que los informar laboratorios deben informar 2 2 ros mayores crecimientos de 10 UFC/mL puros mayores de 10mayores y sobre todo UFC/mL dey sobre todo mayores de 4 UFC/mL.demuestran Algunos 10estudios Algunos estudios que en mujeres demuestran que en mujeres gunos cultivos sintomáticas, con cuentas algunos bajas cultivos iniciales conse cuentas vuelven bajas iniciales se vuelven 8 horas sin negativos necesidad en de 48 tratamiento, horas sin necesidad pero un número de tratamiento, pero un número nas progresa mayor a cuentas de personas más progresa altas en ela mismo cuentastiempo. más altas en el mismo tiempo. médico hacer Corresponde la correlación al médico clínica hacer de estos la correlación resultados clínica de estos resultados ma de tratamiento, y decidir lapues forma en de general tratamiento, las personas pues en con general las personas con tomática bacteriuria no ameritan asintomática el uso de no antimicrobianos. ameritan el uso En de antimicrobianos. En 3/mL son as mayores varones, de 10cuentas mayores de 10 predictivas de3/mL infección son predictivas de infección lto porcentaje urinaria de pacientes. en un alto porcentaje de pacientes.

con infección Las personas urinaria baja con (uretritis) infección tienden urinaria abaja tener (uretritis) tienden a tener omparadas cuentas con las bajas quecomparadas padecen cistitis con olas pielonefritis, que padecen cistitis o pielonefritis, e tienen cuentas que casimayores siemprede tienen 104 UFC/mL. cuentas mayores de 104 UFC/mL.

ables queHay afectan ciertas los variables resultados que deafectan un urocultivo, los resultados como de un urocultivo, como de hidratación son eldeestado la persona, de hidratación el excesodedela ingesta persona,o el exceso de ingesta o idos, la posibilidad infusión dede líquidos, contaminación la posibilidad externa, de el contaminación uso externa, el uso crobianos,previo la relación de antimicrobianos, temporal para la obtener relación la muestra, temporal para obtener la muestra, n que se laprocesa prontitud la muestra con que después se procesa de la haber muestra sido después de haber sido Por eso, aobtenida, veces esetc. necesario Por eso, hacer a veces más es de necesario un cultivo hacer más de un cultivo tuación real para deldefinir paciente, la situación sobre todo real cuando del paciente, se trata sobre de todo cuando se trata de niños.

entes queCuando han tenido los pacientes infección urinaria que hanson tenido tratados infección con urinaria son tratados con , se recomienda antimicrobianos, efectuar cultivos se recomienda de control efectuar entre 1cultivos y2 de control entre 1 y 2 és de finalizado semanas el después tratamiento, de finalizado aun cuando el tratamiento, el paciente aun cuando el paciente síntomas.ya no presente síntomas.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 25 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

Por razones anatómicas, Por la posibilidad razones anatómicas, de contaminación la posibilidad de la orina de contaminaci es alta. Por eso, deben tomarse alta. Por precauciones eso, deben extremas tomarse precauciones para obtener extrema de calidad. instancia es el méd muestras de calidad. En muestras primera instancia esEn el primera médico que solicita el examen el responsable de indicar a su pac el examen el responsable de indicar a su paciente, o a los responsables del paciente, lasdeben precauciones responsables del paciente, las precauciones que se tomar que s obtener la muestra de orina. para obtener la muestrapara de orina.

Hay diversas formas obtener es orina, en la práctic Hay diversas formas de obtener orina, pero en de la práctica máspero común muestras durantede la orinar) micciónen (al momen obtener dichas muestras obtener durante dichas la micción (al momento un Menos frasco estéril (Fig. 6.1). se Menos se un frasco estéril (Fig. 6.1). frecuentemente hace frecuentemente mediante sondas urinarias bolsas colectoras punción sondas urinarias bolsas colectoras o punción suprapúbica deo la vejiga. suprapúb





Figura 6.1: frasco estéril para Figura 6.1: frasco estéril para muestras de orina muestras de orina

los niños pequeños esen difícil obtener la orina en En los niños pequeños En es difícil obtener la orina la forma antes descrita es necesario utilizar un son colector de orina. Es descrita y es necesario utilizar unycolector de orina. Estos bolsitas plásticas estériles (Fig. 6.2). plásticas especiales estériles (Fig. especiales 6.2).

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26 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos





Figura 6.2: colector de orina Figura 6.2: colector de orina para niños pequeños. para niños pequeños.

onda urinaria para orina, utilizada con ese único El uso deobtener una sonda urinaria para obtener orina, utilizada con ese único erización de entrada(cateterización y salida), se utiliza cuandoy el cultivose utiliza cuando el cultivo propósito de entrada salida), da por micción noobtenida da resultados confiables o cuando de orina por micción no da resultados confiables o cuando muestra contaminación forma contaminación repetida, así como en repetida, así como en dicho examenen muestra en forma acitadas personas o que tienen problemaso neurológicos. Para incapacitadas que tienen problemas neurológicos. Para os de contaminación se deben tomar precauciones evitar los riesgos de contaminación se deben tomar precauciones pieza y antisepsia región ygenital externa de genital externa antes de extremas de de la limpieza antisepsia de antes la región da. introducir la sonda.

es que yaEn tienen una sonda urinaria, las muestras los pacientes que ya tienen una sondaseurinaria, las muestras se r usando pueden una técnica aséptica cuidadosa a través del cuidadosa a través del obtener usando una técnica aséptica ción, desinfectando diafragma y aspirando la con y aspirando la orina con puerto de el colección, desinfectando el orina diafragma a sondauna no jeringa. debe desconectarse, decir, debe La sonda no esdebe desconectarse, es decir, debe sistema cerrado. mantenerse un sistema cerrado.

e orina para NUNCA deben obtenerse de la bolsa Lascultivo muestras de orina para cultivo NUNCA deben obtenerse de la bolsa e orina endepersonas sondas permanentes, colecciónque de tienen orina en personas que tienen sondas permanentes, siempre está Tampoco recomendable puescontaminada. esa orina siempre está es contaminada. Tampoco es recomendable de la hacer sonda punción misma, de ya que su contenido no es la sonda misma, ya que su contenido no es

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 27 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteri

representativo de orina vesical. representativo Los organismos de orinaque vesical. colonizan Los organismos el catéter que colo están asociados con la formación están asociados de “biofilm” con lay raramente formación de invaden “biofilm” la y raram vejiga. Si se presenta la vejiga. necesidad Si se de presenta hacer la un necesidad cultivo en de estos hacer un cu pacientes, es mejor retirarpacientes, el catéter es permanente mejor retirar e introducir el catéteruna permanente sonda e introd nueva después de un cuidadoso nueva después procedimiento de un cuidadoso de antisepsia procedimiento local. de antis

El sondas cultivo urinarias de puntasnodeestá sondas urinarias El cultivo de puntas de indicado bajo no está ninguna circunstancia para investigación ninguna circunstancia para investigación de infección urinaria, lade infecc mayor parteladel tiempo sólo indican la presencia de con mayor parte del tiempo sólo indican presencia de contaminantes. Obtención de la muestra. Obtención de la muestra. Cuadro 6.1

Cuadro 6.1

INSTRUCCIONES PARA LA INSTRUCCIONES TOMA DE MUESTRAS PARA LA DE TOMA ORINADE MUESTRAS EN ADULTOS Y NIÑOS MAYORES EN ADULTOS Y NIÑOS MAYORES  1.

2. 3. 4.

5. 6.



Preferiblemente obtenga la1.primera Preferiblemente orina de la mañana. obtenga la Si primera no es posible, orina de la mañana. Si no espere al menos dos horas después espere de al la menos última dos vez horas que orinó, después paradeobtener la última la vez que orinó, muestra. (No abra el frasco estéril muestra. para(No colectar abralaelmuestra frasco estéril hasta completar para colectar la muestra h el paso 2). el paso 2). Repita tres veces un lavado 2. cuidadoso Repita tres de laveces región un genital lavado con cuidadoso agua y de jabón. la región genital con Seque la zona lavada con una toalla Sequelimpia la zona y seca. lavada con una toalla limpia y seca. Abra el frasco estéril, téngalo 3. listo Abraa el la frasco mano. estéril, téngalo listo a la mano. Comience a orinar en el servicio 4. Comience sanitarioayorinar a media en micción, el servicio introduzca sanitario el y a media micción, frasco en el chorro de orina y obtenga frasco en una el porción chorro de deorina la misma. y obtenga Retireuna el porción de la mism frasco y termine de orinar en elfrasco servicio. y termine de orinar en el servicio. Cierre el frasco, rotule con5.el nombre Cierre el delfrasco, paciente rotule y lacon horaelen nombre que sedel obtuvo paciente y la hora en la muestra. la muestra. Lleve al laboratorio antes 6. de que Lleve pasealuna laboratorio hora o mantenga antes de la que muestra pase una hora o mantenga la refrigerada hasta el momento de refrigerada llevarla alhasta laboratorio. el momento de llevarla al laboratorio.

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Cuadro 6.2

Cuadro 6.2

28 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

CCIONES PARA LA INSTRUCCIONES TOMA DE MUESTRAS PARA LA DE TOMA ORINADE MUESTRAS DE ORINA EN NIÑOS PEQUEÑOS EN NIÑOS PEQUEÑOS

es veces un lavado 1. Repita cuidadoso tres de veces la región un lavado genital cuidadoso con aguade la región genital con agua y jabón. a zona lavada con 2. una Seque toalla la limpia zona lavada y seca.con una toalla limpia y seca. el colector según 3. Coloque las instrucciones el colector que según lo acompañan las instrucciones y que lo acompañan y uesto. déjelo puesto. el niño haya orinado, 4. Cuando retireelelniño colector, haya adhiera orinado,las retire partes el colector, adhiera las partes para cerrarlo y llévelo laterales prontamente para cerrarlo al laboratorio. y llévelo La prontamente orina al laboratorio. La orina ebe pasar a otro recipiente. no se debe Si pasar hay atraso a otro enrecipiente. llevar la orina, Si hay atraso en llevar la orina, ga la muestra refrigerada. mantenga la muestra refrigerada.

ación suprapúbica Aunque la(ASP) aspiración de orina suprapúbica vesical (Fig. (ASP) 6.3)deseorina vesical (Fig. 6.3) se todo idealconsidera para obtener el método la orinaideal con para el mínimo obtener riesgo la orina de con el mínimo riesgo de sobre todo contaminación, en niños pequeños sobre(lactantes) todo en niños cuando pequeños tienen(lactantes) cuando tienen psis, en laun práctica cuadrono dese sepsis, lleva a encabo la práctica en adultos no se o lleva niñosa cabo en adultos o niños La ASP esmás un grandes. procedimiento La ASP hospitalario es un procedimiento y siendo unahospitalario y siendo una va sólo debe maniobra ser efectuada invasiva por sóloun debe médico ser efectuada adiestrado.por un médico adiestrado.

Figura 6.3: Punción suprapúbica Figura 6.3: Punción suprapúbica

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 29 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacter BIBLIOGRAFIA.

BIBLIOGRAFIA.

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30 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

MUESTRAS DE HECES MUESTRAS DE HECES PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO RA EXAMEN BACTERIOLÓGICO

ía Clínica, En el estudio Bacteriología de lasClínica, infecciones el estudio gastrointestinales de las infecciones gastrointestinales de los panoramas representa más uno complejos, de los panoramas lo cual nomás es apreciado complejos, lo cual no es apreciado por la forma en en su magnitud que generalmente por la forma se hacen en quelas generalmente solicitudes se hacen las solicitudes n las muestras y se transportan para cultivo las de muestras las heces.para cultivo de las heces.

n clínica más La presentación común de infección clínica intestinal más común es diarrea, de infección que intestinal es diarrea, que e definir enaunque términos difícil cuantitativos, de definir en usualmente términos cuantitativos, se expresa usualmente se expresa nto del número como un de aumento evacuaciones del número o cuando de las evacuaciones heces se o cuando las heces se suaves ovuelven líquidas. más Haysuaves cuadros o líquidas. clínicos donde Hay cuadros las clínicos donde las son enteramente evacuaciones líquidas.son Enenteramente muchos casos líquidas. la diarrea En muchos de casos la diarrea de so se acompaña origen de infeccioso dolor abdominal se acompaña y en ciertos de dolor casos abdominal de y en ciertos casos de . Cuando fiebre la diarrea y vómito. se acompaña Cuando la dediarrea dolor en seforma acompaña de de dolor en forma de ay tenesmoretortijones (dolor al defecar) y hay tenesmo y las heces (dolor presentan al defecar) sangre y las heces presentan sangre la de disentería. y moco, se habla de disentería.

des etiológicas Las posibilidades de la diarreaetiológicas infecciosadeincluyen la diarrea virus, infecciosa incluyen virus, en bacteriano, toxinas bacterias de origen y protozoos. bacteriano, Las bacterias muestras y protozoos. deben Las muestras deben s con diversos ser examinadas métodos ya con que diversos no existemétodos un procedimiento ya que no existe un procedimiento ncluya todas las causas posibles, de allí la solicitud universal que incluya todas las que causas posibles, de allí que la solicitud tivo” sindeespecificar los agentes que se los quiere “coprocultivo” sin especificar agentes que se quiere inaceptable. El médico orientar al en orientar la investigar, es debe inaceptable. El laboratorio médico debe al laboratorio en la os agentesbúsqueda más probables acuerdo al análisis clínico y de losde agentes más probables de acuerdo al análisis clínico y del caso, epidemiológico ver (Cuadro 7.1). del caso, ver (Cuadro 7.1).

os laboratorios Por otro generalmente lado, los laboratorios no pueden generalmente efectuar todosno lospueden efectuar todos los enes para posibles investigar exámenes la etiología para deinvestigar la diarrealainfecciosa, etiología de la diarrea infecciosa, dico debe así estar que familiarizado el médico debe o llamar estar anticipadamente familiarizado o al llamar anticipadamente al a informarse laboratorio de lo quepara se puede informarse hacer.de lo que se puede hacer.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 31 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

El laboratorio puede rechazar El laboratorio muestras puedesecas rechazar que hayan muestras sidosecas transportadas en recipientes transportadas de cartón, en papel recipientes o pañales, de ya cartón, que procesar papel o pañales este tipo de muestras no estebeneficia tipo de al muestras paciente. no En beneficia igual forma al paciente. las En muestras insuficientes muestras no debeninsuficientes ser procesadas. no deben ser procesada Tampoco es recomendado someter a recomendado cultivo heces formadas someter aocultivo duras ya heces queformadas es obvio o dura que no existe diarrea. Salvo queraras no existe excepciones, diarrea. Salvo no seraras recomienda excepciones, el uso no se de hisopos para obtenerdematerial hisoposrectal. para obtener material Únicamente si hay rectal. infección Únicamente activa en lactantes o enactiva niños en pequeños lactantesy onoenseniños puede pequeños obtener yuna no se pu muestra de heces evacuada muestra naturalmente. de heces evacuada Una vez que naturalmente. se obtieneUna la vez muestra debe ser llevada muestra prontamente debe ser al laboratorio llevada prontamente manteniéndola al laboratorio a temperatura ambiente, idealmente la muestra debe se temperatura ambiente, idealmente la muestra debe ser sembrada antes que pase una hora desde ya de que pase una horade desde su obtención, ya que su el obtención, atraso en procesar la compromete los resultados. Una procesar la muestra compromete losmuestra resultados. Una alternativa si se anticipa un atraso, es usar como un medio dede transporte, com anticipa un atraso, es usar un medio de transporte, medio Cary Blair, que la mayorintestinales. parte de los patógenos inte Blair, que protege la mayor parte deprotege los patógenos Obtención de la muestra: Obtención de la muestra:

Sólo se recomienda cultivar Sólo semuestras recomienda de cultivar diarrea o muestras disentería, de diarr preferentemente lo más pronto preferentemente después del lo más iniciopronto del cuadro después clínico. del No inicio del se recomienda cultivar heces se recomienda formadas ocultivar duras. heces formadas o duras.

Las muestras de heces Las deben muestras obtenerse al momento obtenerse de a defecar en un recipiente seco defecar de en un material no absorbente, material n preferentemente de plástico, preferentemen que tenga una boca ancha que tenga y un tapadera segura (Fig. 7,1). tapadera La segu muestra debe ser representativa muestra debe y de suficiente volumen (30 y de a 50 suficiente mL) para poder seleccionar mL) las para pod porciones más adecuadas porciones (Ej.: má   mucosidad) para hacer mucosidad) el Figura 7.1: recipiente para Figura 7.1: recipiente para examen. examen. Muestras de heces

Muestras de heces

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32 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos Cuadro 7.1

Cuadro 7.1

AGENTES BACTERIANOSAGENTES COMUNESBACTERIANOS COMUNES EN INFECCIOSO LA DIARREA DE ORIGEN INFECCIOSO EN LA DIARREA DE ORIGEN

ológicos uentes

oxina)

le (toxina)

Agentes Fuente etiológicos o condición más predisponente frecuentes Aeromonas Agua

Agua

Bacillus Carnes, cereus vegetales, (toxina)arroz

Carnes, 1-6 horas: vegetales, vómito arroz 6-24 horas: diarrea frito

frito

?

1-6 horas: vómito 6-24 horas: diarrea 3-11 días

Clostridium Tratamiento difficile con (toxina)

Tratamiento 4-9 días con

4-9 días

antibióticos

antibióticos Carne, 8-6productos horas de carne, salsas Agua, 4-24 comidas horas

4-24 horas

8-6 horas

Comidas 8-24 horas

8-24 horas

Leche,3-5 carne días

3-5 días 1-2 días

(enterotoxigénica) Escherichia Comidascoli (enteroinvasiva)

elloides

Plesiomonas Agua, mariscos shigelloides de concha

Agua,1-2 mariscos días de concha

ica

Salmonella Alimentos, entérica huevos, leche en polvo, productos de animales.

Alimentos, 8-72 horas huevos, leche en polvo, productos de animales.

iae

Shigella Agua dysenteriae

Agua 3-5 días

-dysenteriae) Shigella Agua,spp. alimentos (no-dysenteriae)

olyticus

?

Agua,3-11 leche, días aves, cerdo y contacto con animales

verocitotóxica)Escherichia Leche, carne coli (verocitotóxica)

ureus

Período de incubación

Campylobacter Agua, leche, aves, cerdo y contacto con animales

ngens (toxina)Clostridium Carne, productos perfringens de (toxina) carne, salsas Escherichia Agua, comidas coli

)

Fuente Períodoode condición incubación predisponente

8-72 horas

3-5 días

Agua, 8-72 alimentos horas

8-72 horas

Staphylococcus Salsas, carne, aureus productos lácteos, arroz. (toxina)

Salsas, 1-6carne, horas productos lácteos, arroz.

1-6 horas

Vibrio Agua, cholerae mariscos

Agua,1-5 mariscos días

1-5 días

Vibrio Mariscos parahaemolyticus

Mariscos 14 -15 horas

14 -15 horas

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 33 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

BIBLIOGRAFIA.

BIBLIOGRAFIA.

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34 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

AS DE EXUDADOS ÚLCERAS(PUS), ÚLCERAS MUESTRAS(PUS), DE EXUDADOS NEAS, HERIDAS OPERATORIAS CUTÁNEAS, HERIDASYOPERATORIAS Y S, PARAFÍSTULAS, EXAMEN BACTERIOLÓGICO PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO

un material Unque exudado se forma es en un un material tejido que o cavidad se forma corporal, en un tejido o cavidad corporal, do y células contiene como líquido consecuencia y células decomo un proceso consecuencia de un proceso caracteriza inflamatorio, por tener se unacaracteriza concentración por tener de proteínas una concentración de proteínas dL, pH alcalino mayor de o ligeramente 3 g/dL, pH ácido alcalino y presencia o ligeramente de ácido y presencia de ualmente leucocitos, con predominio usualmente de polimorfonucleares con predominio de polimorfonucleares den ser de neutrófilos. evolución Pueden aguda oser crónica. de evolución Generalmente aguda olacrónica. Generalmente la riana da lugar infección a la formación bacteriana de da exudados lugar a la que formación puedende exudados que pueden rulentos (pus), ser serosos, hemorrágicos, purulentos fibrinosos (pus), hemorrágicos, o pútridos. fibrinosos o pútridos.

físico o laTanto cirugía, el trauma como algunas físico o enfermedades, la cirugía, comopueden algunas enfermedades, pueden ormación ocasionar de lesiones la abiertas formaciónendeforma lesiones de heridas, abiertas en forma de heridas, úlceras, laceraciones, quemaduras, úlceras, mordeduras quemaduras, de animales mordeduras o de animales o duras, fracturas humanos, expuestas, picaduras, abrasiones, fracturascontusiones, expuestas, abrasiones, etc. contusiones, etc. er infectadas que por pueden bacterias, ser infectadas ya sea procedentes por bacterias, de ya la sea procedentes de la mal de lamicrobiota persona, organismos normal de ladelpersona, ambiente organismos u otras del ambiente u otras minadas, Ej.: fuentes secreciones contaminadas, de animales Ej.: secreciones (mordeduras). de animales (mordeduras). se acompañan Estasde lesiones la formación se acompañan de exudados. de la formación de exudados.

de rutina En no los afecta cultivos exponer de rutina la muestra no afecta del exudado exponer al la muestra del exudado al pero cuando aire se ambiental sospecha pero unacuando infección se sospecha por bacterias una infección por bacterias trictas, seanaeróbicas deben tomarestrictas, precauciones se deben extremas tomarpara precauciones no extremas para no el materialexponer obtenido. al aire No se el material deben tomar obtenido. muestras No separa deben tomar muestras para robios de estudio sitios o materiales de anaerobios quede normalmente sitios o materiales contienen que normalmente contienen os, como las estos mucosas organismos, de la faringe como las y nasofaringe, mucosas deesputo la faringe y nasofaringe, esputo secreciones expectorado, obtenidas secreciones por broncoscopia, obtenidas contenido por broncoscopia, contenido tinal, heces, gástrico orina eobtenida intestinal, porheces, micción orina o cateterismo obtenida por y micción o cateterismo y nitales. secreciones genitales.

los laboratorios La mayoría no tienen de los lalaboratorios capacidad no de tienen efectuar la capacidad de efectuar bicos, que cultivos implicaanaeróbicos, no solamente quehacer implica crecer no solamente estos hacer crecer estos un medio organismos adecuado,ensino un identificarlos medio adecuado, y hacer sinolasidentificarlos y hacer las

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 35 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

pruebas de sensibilidad apruebas los antimicrobianos. de sensibilidad Pora esta los antimicrobianos. razón el médico Por esta debe estar bien seguro que debeseestar pueden bienhacer seguro dichos que se cultivos pueden antes hacer de dichos c hacer la solicitud correspondiente; hacer la solicitud sin embargo, correspondiente; al menos lossin exámenes embargo, al men directos (coloración de Gram) directos pueden (coloración ser orientadores. de Gram) pueden ser orientadores

Son muy variadas las lesiones Son muy causadas variadaspor las bacterias lesiones causadas anaeróbicas, por bacter entre las más importantes entre se las pueden más mencionar: importantes absceso se pueden cerebral, mencionar: ab empiema subdural, absceso empiema epidural, subdural, trombosis absceso séptica epidural, del seno trombosis sé venoso de la duramadre, venosoinfecciones de la duramadre, odontogénicas, infecciones sinusitis,odontogé infecciones relacionadasinfecciones a trauma yrelacionadas cirugía, bacteriemia a traumaanaeróbica, y cirugía, bacterie abscesos pulmonares, infecciones abscesos intraperitoneales, pulmonares, infecciones absceso intraperitoneales, hepático, ab actinomicosis, osteomielitis actinomicosis, anaeróbica, osteomielitis mordeduras humanas, anaeróbica, fasceítis mordeduras hu y miositis anaeróbica, gangrena y miositis poranaeróbica, Clostridium,gangrena tétanos, por etc.Clostridium, tétano Obtención de la muestra: Obtención de la muestra:

Cuando se trata de un exudado Cuando que seforma trata de una uncolección exudado fluida, que forma en forma una colección de absceso o derrame cerrado, de absceso la mejor o derrame forma de cerrado, obtenerlalamejor muestra forma es de obten mediante aspiración con jeringa mediante usando aspiración una aguja con jeringa gruesausando (18G). El una sitio aguja grue de la punción debe ser desinfectado de la punción previamente. debe ser desinfectado Una vez obtenido, previamente. el Una material aspirado se transfiere material a un aspirado frasco se o tubo transfiere estérilacon un frasco tapadera o tubo esté hermética. Si no se cuenta hermética. con un frasco Si no osetubo cuenta estéril conpara un frasco transferir o tubo el estéril material al momento de obtener material la al muestra, momento se de puede obtener enviar la muestra, en la misma se puede en jeringa, teniendo el cuidado jeringa, de cubrir teniendo la aguja el cuidado con el protector de cubrir yladejarla aguja con el p bien sujeta a laenviar jeringa. Nunca se debe bien sujeta a la jeringa. Nunca se debe una jeringa con laenviar agujauna jerin expuesta. Algunos no autores expuesta. Algunos autores recomiendan enviarrecomiendan jeringas al no env laboratorio para evitar accidentes. laboratorio para evitar accidentes.

Cuando no es posible la muestra, sobre Cuando no es posible aspirar la muestra, sobre aspirar todo cuando se trata de todo cu lesionesúlceras expuestas, mucosas, úlceras o material es lesiones expuestas, mucosas, o material escaso, se puede un obtenida hisopo estéril. Una vez utilizar un hisopo estéril.utilizar Una vez la muestra, el obtenida hisopo sela muest introduce tubo en transporte un tubo con med introduce en un tubo estéril o en en un un tubo conestéril medioo de son producidos comercialmente). Generalme (algunos son producidos(algunos comercialmente). Generalmente los hisopos fabricados comercialmente vienen enoun fabricados comercialmente vienen en un tubo con un líquido geltubo de con un trasporte(Fig. que8.1). protege muestra 8.1). Los hisopos trasporte que protege la muestra Los la hisopos no(Fig. son la mejor forma de absorben obtener muestras absorben parte del forma de obtener muestras pues parte delpues material, pero a

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36 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

alternativa. Estas se dejan a temperatura veces no muestras hay alternativa. Estas muestras se dejan a temperatura levan prontamente laboratorio. ambiente al y se llevan prontamente al laboratorio.

Figura 8.1: tubo para obtención Figura 8.1: tubo para obtención de exudados de exudados

de heridasLos abiertas y úlceras deben abiertas tomarse ydel sitio de exudados de heridas úlceras deben tomarse del sitio de car la piel la adyacente. úlceras (más deúlceras seis crónicas (más de seis lesión sinLas tocar la pielcrónicas adyacente. Las volución) de la piel de extremidades inferiores, semanas delas evolución) de la piel de las como extremidades inferiores, como diabético las o por venosa, un venosa, representan un de insuficiencia origen diabético o porrepresentan insuficiencia a su evaluación pues estas lesiones pues estas lesiones problemabacteriológica, para su evaluación bacteriológica, e están colonizadas superficialmente por diferentes frecuentemente están colonizadas superficialmente por diferentes cual haceorganismos, difícil interpretar el resultado lo cual hace difícildeinterpretar el yresultado de los cultivos y los cultivos a de colonizantes definir siuse organismos trata de colonizantes invasivos. Para u organismos resolver invasivos. Para resolver ace necesario el dilema hacer se unahace limpieza necesario superficial hacerde una la limpieza lesión superficial de la lesión ada o solución con agua salinadestilada estérilesopara solución eliminar salina al máximo estérileselpara eliminar al máximo el pués se obtiene exudado una y después biopsia de se la obtiene base ouna se biopsia hace unade la base o se hace una guja para punción cultivar el con tejido aguja subyacente. para cultivar Loselcultivos tejido subyacente. de Los cultivos de madas desuperficies la piel se manejan quemadas conde criterios la piel similares. se manejan con criterios similares.

xudados expulsados El cultivo de a través exudados de una expulsados fístula requiere a travésde de una fístula requiere de antisepsiauna externa, cuidadosa luego antisepsia se presiona externa, el tejidoluego adyacente se presiona el tejido adyacente xpulsión del para exudado lograr la y se expulsión toma la del muestra exudado con yunsehisopo toma la muestra con un hisopo amente conestéril un asa o directamente de cultivo si se contienen un asa a la demano cultivolos si se tienen a la mano los embrar la medios muestrapara y hacer sembrar un extendido la muestra paray coloración hacer un extendido para coloración

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 37 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacter

de Gram. La ventaja de de hacer Gram. las siembras La ventajadirectamente de hacer lases siembras que si eldirectame material es escaso, comomaterial suele suceder, es escaso, no se como pierde suele ensuceder, el hisopo. noSise pierde se sospecha Nocardia se o Actinomyces, sospecha Nocardia se deben o Actinomyces, usar los medios se deben u apropiados para el cultivoapropiados de estos organismos. para el cultivo de estos organismos. BIBLIOGRAFIA.

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38 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

RAS DEL MUESTRAS TRACTO RESPIRATORIO DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR SUPERIOR RA EXAMEN BACTERIOLÓGICO PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO

ratorio superior El tracto (Fig. respiratorio 9.1) incluye superior la cavidad (Fig. nasal, 9.1) incluye la la cavidad nasal, la glotis y losfaringe, tejidoslavecinos epiglotis dey laloslaringe. tejidosElvecinos epiteliodeo la laringe. El epitelio o ucosa quemembrana recubre elmucosa tracto respiratorio que recubresuperior el tracto se respiratorio superior se de los senos continúa para con nasales, el de la lostrompa senosde para Eustaquio nasales,ylaeltrompa de Eustaquio y el a parte superior oído medio y conen el la departe la laringe superior en lay parte con elinferior. de la laringe en la parte inferior.

gura 9.1: Anatomía de la vía Figura respiratoria 9.1: Anatomía superior de la vía respiratoria superior

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 39 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

Cada una de las distintasCada regiones una de las la vía distintas respiratoria regiones superior de la vía estárespirato colonizada por una amplia colonizada variedadpor de una bacterias ampliaque variedad constituyen de bacterias la qu microbiota local normal. Entre microbiota estoslocal habitantes normal.microbianos Entre estosnormales, habitantes microb se encuentran algunos se queencuentran bajo ciertas algunos circunstancias que bajoseciertas pueden circunstan comportar como agentescomportar patógenoscomo si logran agentes superar patógenos los mecanismos si logran superar de defensa normal, invadir de defensa la mucosa normal, y desencadenar invadir la mucosa un proceso y desencade inflamatorio y hasta penetrar inflamatorio a las vías y hasta linfáticas penetrar y hemáticas, a las víasolinfáticas por y h continuidad para llegar acontinuidad otros sitios para distantes. llegar Entre a otros estos sitios patógenos distantes. Entre potenciales están: Staphylococcus potenciales aureus, están: Streptococcus Staphylococcus pneumoniae, aureus, Streptococc Streptococcus pyogenes, Streptococcus Neisseria pyogenes, meningitidis, Neisseria Haemophilus meningitidis influenzae y Moraxella catarrhalis. influenzae y Moraxella catarrhalis.

Hay una variedad de cuadros Hay una clínicos variedad asociados de cuadros con infecciones clínicos asociados por con estos organismos, entreestos los más organismos, comunesentre o importantes: los más comunes faringitis o impor aguda, amigdalitis aguda,aguda, epiglotitis, amigdalitis laringitis, aguda, laringotraqueobronquitis, epiglotitis, laringitis, laringotr absceso peri tonsilar y sinusitis absceso aguda peri tonsilar y crónica. y sinusitis Hay otros aguda cuadros y crónica. Ha clínicos ocasionados porclínicos bacterias ocasionados que no sonpor parte bacterias de la microbiota que no son parte normal como Bordetella normal pertussis, como Mycoplasma Bordetella pertussis, pneumoniae Mycoplasma y Chlamydophila pneumoniae. Chlamydophila pneumoniae.

Obtención de muestras:Obtención de muestras: Cavidad Nasal y Nasofaringe. Cavidad Nasal y Nasofaringe.

Ordinariamente no está indicada Ordinariamente la obtención no está de muestras indicada la deobtención la cavidadde muest nasal y nasofaringe para nasal estudios y nasofaringe bacteriológicos, para estudios salvo algunas bacteriológicos, excepciones, por ejemplo: excepciones, cuando existe poralguna ejemplo: lesión cuando localizada existe en alguna el lesión epitelio nasal, cuando se epitelio desea investigar nasal, cuando si la persona se deseaesinvestigar portadoraside la persona un agente particular, un Ej.: agente Staphylococcus particular, aureus Ej.: Staphylococcus o Neisseria aureu meningitidis, cuando se meningitidis, sospecha tosferina cuando (causada se sospecha por Bordetella tosferina (causada pertussis) o difteria. Los pertussis) cultivos para o difteria. Chlamydiophila Los cultivos pneumoniae para Chlamydiophil y Mycoplasma pneumoniaeMycoplasma no se llevan pneumoniae a cabo en muchos no se llevan laboratorios a caboyen much estas infecciones usualmente estas se infecciones investiganusualmente mediante la sedetección investigandemediante anticuerpos en el suero del anticuerpos paciente. en el suero del paciente.

Nunca deben hacerse cultivos Nunca de deben nasofaringe hacerse para cultivos determinar de nasofaringe si las para d bacterias allí presentes bacterias son las mismas allí presentes que causan son las otitis mismas mediaque o causa

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40 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

investigar estas Para infecciones deben seguirse las sinusitis. investigar estas infecciones deben seguirse las es específicas (ver adelante). Recuerde(ver queadelante). es normalRecuerde que es normal recomendaciones específicas ren en laque nasofaringe diversos potenciales se encuentren en patógenos la nasofaringe diversos patógenos potenciales su microbiota normal. como parte de su microbiota normal.

s muestrasPara paraobtener cultivo las de Bordetella se utiliza unde hisopo muestras para cultivo Bordetella se utiliza un hisopo e introduce por elque pisosedeintroduce la cavidad hasta delgado pornasal el piso de la cavidad nasal hasta la rota en su interior y sese retira que seen la misma forma que se nasofaringe, rotaen en lasumisma interiorforma y se retira eben usarse hisopos fibra usarse de algodón porque los de algodón porque los introdujo. No de deben hisopos de fibra el algodón dañan la bacteria e impiden su crecimiento, ácidos grasos del algodón dañan la bacteria e impiden su crecimiento, s hisopos alginatolosde hisopos calcio. La debe se de prefieren de muestra alginato de calcio. La muestra debe ediatamente o colocarse en un medio de transporte sembrarse inmediatamente o colocarse en un medio de transporte te con el laboratorio ya que hay alternativas). especial (consulte con varias el laboratorio ya queAun hay varias alternativas). Aun oque en cuando un medio transporte, muestra se de coloque en un lamedio de debe transporte, la muestra debe prontitud. sembrarse con prontitud.

opo es una formael práctica y fácil obtener estasy fácil de obtener estas Aunque hisopo es una de forma práctica ejores muestras de las secreción nasofaríngea cultivonasofaríngea para cultivo muestras, mejores muestras depara secreción e obtienende por aspiración la secreción o por lavado Bordetella sede obtienen por aspiración de lay secreción o por lavado y una sonda delgada.con El aspirado debe tratarse la aspiración una sonda delgada. El en aspirado debe tratarse en la ue el hisopado. misma forma que el hisopado.

dalas.

Faringe y amígdalas.

prende la La parte faringe superior comprende ubicadalapor parte arriba superior del paladar ubicada por arriba del paladar ringe), lablando parte (nasofaringe), media que incluye la parte las media amígdalas que incluye las amígdalas parte inferior (orofaringe) que es lay región la partepor inferior debajo que deeslalaepiglotis, región por debajo de la epiglotis, n la laringe que ytermina en la en apertura la laringe superior y endella esófago apertura superior del esófago (hipofaringe).

s de la Las faringe infecciones y estructuras de la adyacentes faringe y estructuras tienen adyacentes tienen clínicaspresentaciones variadas. El clínicas cuadro variadas. de faringitis El cuadro o de faringitis o is aguda faringoamigdalitis (Fig. 9.2) es uno de aguda los más (Fig. frecuentes 9.2) es unoy de se los más frecuentes y se dolor encaracteriza la garganta, porfiebre, dolor eritema en la garganta, y edemafiebre, de la eritema y edema de la ea, a veces mucosa con formación faríngea, adeveces vesículas con formación y pequeñas de vesículas y pequeñas presencia ulceraciones de exudado purulento. y presenciaDe deuna exudado cuartapurulento. parte a De una cuarta parte a asos son la ocasionados mitad de lospor casos virus, son hasta ocasionados una tercera porparte virus, hasta una tercera parte es en niños de las y cerca infecciones de un 10% en niños en adultos y cercapueden de un ser 10% en adultos pueden ser

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 41 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

causadas por Streptococcus causadas pyoge pornes. Streptococcus Hay otras pyoge causas nes. menos Hay otras frecuentes o raras y a veces frecuentes no se puede o raras determinar y a veceslano etiología se puede de determinar estas la e infecciones. En todas las infecciones. formas de En faringitis todas las aguda formas los síntomas de faringitis y aguda signos se traslapan y a menos signosque se traslapan se hagan ylos a estudios menos que de se laboratorio hagan los estudi no es posible determinarno sues etiología, posible por determinar eso existe su etiología, bastante debate por eso existe acerca de la conducta que acerca debedeseguir la conducta el médico queendebe estos seguir pacientes el médico en cuando no hay una causa cuando demostrada. no hay una La evidencia causa demostrada. acumuladaLa daevidencia preferencia a la obtenciónpreferencia de un cultivo a laantes obtención de iniciar de un tratamiento cultivo antes conde iniciar antibióticos, al menos para antibióticos, excluir S.alpyogenes menos para que excluir es la razón S. pyogenes más que común para usar antibióticos. común para usar antibióticos.

Figura 9.2: faringitis aguda exudativa Figura 9.2: faringitis aguda exudativa

En condiciones rutinariasEnel condiciones cultivo de larutinarias faringe para el cultivo bacterias de laestá faringe par orientado únicamente aorientado la búsqueda únicamente de Streptococcus a la búsqueda pyogenes de Streptoco (Estreptococo E hemolítico (Estreptococo de grupoE A). hemolítico Esta práctica de grupo ha sido A). Esta p recomendada en los últimos recomendada 50 años.enBajo los sospecha últimos 50especial años. Bajo de sospec acuerdo con la historia clínica acuerdoy con epidemiológica la historia clínica del caso, y epidemiológica el médico del puede solicitar cultivos separados puede solicitar para otras cultivos bacterias separados como para Neisseria otras bacterias gonorrhoeae o Corynebacterium gonorrhoeae diphtheriae. o Corynebacterium diphtheriae.

La confiabilidad del cultivo La confiabilidad de la faringedelpara cultivo la detección de la faringe de S.para la d pyogenes está sujeta a pyogenes diversas variables está sujeta técnicas, a diversas entrevariables las cuales técnicas, posiblemente la más importante posiblemente es la forma la más enimportante que se toma es la la muestra. forma en que se

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42 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

ebe frotar El firmemente superficie de la sobre faringelaysuperficie de la faringe y hisopo sesobre debe la frotar firmemente vitar tocar amígdalas la úvula y ylaevitar lengua. Enlaesta forma sólo En esta forma un sólo tocar úvula y laun lengua. a sensibilidad detiene 90 a una 97%sensibilidad para detectar cultivo de Estreptococo 90 a 97% para detectar Estreptococo os cultivos de aumentan poco la sensibilidad no sela sensibilidad pero no se grupo A.un Dos cultivos aumentanpero un poco sario un segundo cultivo en la práctica general. considera necesario un segundo cultivo en la práctica general.

puede obtener a cualquier hora del día y anocualquier es importante La muestra se puede obtener hora del día y no es importante a comido osise lavadoha la comido boca recientemente. el ha paciente o se ha lavado la boca recientemente.

Epiglotis.

s una celulitis de la epiglotis tiene de el la potencial La epiglotitis es unaque celulitis epiglotisdeque tiene el potencial de cción completa la vía aérea. El diagnóstico causar de obstrucción completa de la vía es aérea. El diagnóstico es e clínico, eminentemente a diferencia declínico, otras formas de infección a diferencia de otras formas de infección guda, la respiratoria etiología es principalmente aguda, la etiologíabacteriana, es principalmente bacteriana, causada por Haemophilus influenzae. El hisopado de la especialmente causada por Haemophilus influenzae. El hisopado de la se recomienda porque precipitarporque obstrucción epiglotis no sepuede recomienda puede precipitar obstrucción úbita. El respiratoria estudio bacteriológico recomendado es súbita. El estudio bacteriológico recomendado es uando se han hecho estudios comparativos deestudios muestras hemocultivo. Cuando se han hecho comparativos de muestras epiglotis, tomadas con cultivos la sangre, correlación de ladeepiglotis, conlacultivos de lanosangre, la correlación no oluta, unas veces puede demostrarse el patógeno en la siempre es absoluta, unas veces puede demostrarse el patógeno en la s veces sangre en la epiglotis, pero debido al riesgo ya y otras veces en la epiglotis, pero debido al riesgo ya s preferiblemencionado, sólo hacer los es hemocultivos. preferible sólo hacer los hemocultivos.

nasales.Senos paranasales.

de la fosaLa nasal anatomía y senos de paranasales la fosa nasalFig. y senos 9.3). Para paranasales Fig. 9.3). Para acteriologíaentender de la sinusitis la bacteriología aguda esdemuy la sinusitis importante aguda es muy importante ma de obtener conocer las muestras la forma para de obtener cultivo.las El muestras procedimiento para cultivo. El procedimiento uado por un debe otorrinolaringólogo ser efectuado por y se untrata otorrinolaringólogo de una puncióny se trata de una punción ar a travésdel de seno la pared maxilar lateral a través de la cavidad de la pared nasal. lateral Previo de la cavidad nasal. Previo e hace una a la desinfección punción, seminuciosa hace unade desinfección la cavidad minuciosa nasal de la cavidad nasal áximo la contaminación para evitar al máximo de la muestra. la contaminación El trocar sede coloca la muestra. El trocar se coloca nete nasal debajo inferior del para cornete penetrar nasal la cavidad inferior del paraseno. penetrar Los la cavidad del seno. Los aterial aspirado cultivos deben del material ser cuantitativos aspirado para deben discriminar ser cuantitativos para discriminar

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 43 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

posible contaminación, considerándose posible contaminación, importante considerándose un crecimientoimportante igual un 4 4 o mayor de 10 organismos/ o mayor 10 organismos/ mL dededeterminado agente mLpatógeno. de determinado agente

Figura 9.3. Anatomía de la fosa Figura nasal 9.3.yAnatomía senos paranasales. de la fosa nasal y senos paran

En forma alterna y para evitar En forma la punción alterna del y para seno, evitar se pueden la punción obtener del seno, se cultivos por endoscopia del cultivos seno,por losendoscopia resultados del sonseno, comparables. los resultados El son endoscopio se introduce endoscopio por el meato semedio, introduce adyacente por el meato al ostium medio, del adyacen seno, aspirando o usandoseno, un hisopo aspirando fino para o usando obtener un hisopo el material. fino para Con obtener este procedimiento el riesgo estede procedimiento contaminación el del riesgo seno dees contaminación alto. del seno BIBLIOGRAFIA.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 45 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacter

DEL TRACTO RESPIR MUESTRAS DEL MUESTRAS TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR INFERIOR PARA EXAMEN BACTERIOLÓG PARA EXAMEN BACTERIOLÓGICO

El tracto respiratorio inferior El tracto o bajo, respiratorio está formado inferiorpor o bajo, la laringe, está formado la po tráquea, los bronquios,tráquea, bronquiolos los bronquios, y alvéolos bronquiolos pulmonares.y En alvéolos p condiciones normales estos condiciones sitios anatómicos normalesno estos están sitios colonizados anatómicos por no están bacterias, aunque ocasionalmente, bacterias, sobre aunque todo ocasionalmente, en la laringe y sobre la tráquea, todo en la larin pueden encontrarse escasas pueden bacterias encontrarse que han escasas llegadobacterias allí producto que han de llegado la aspiración de secreciones la aspiración de la vía de respiratoria secreciones superior, de la vía sobre respiratoria todo supe durante el sueño. Aunquedurante los volúmenes el sueño.aspirados Aunque los sonvolúmenes muy pequeños, aspirados son su contenido de bacteriassu escontenido alto, y a veces de bacterias esta aspiración es alto, yde a bacterias veces esta aspirac puede ser significativa. Ordinariamente puede ser significativa. este es un Ordinariamente fenómeno transitorio, este es un fenóm pero también es la forma pero en que también organismos es la forma potencialmente en que organismos patógenos potencialm que residen en el tracto respiratorio que residensuperior en el tracto llegan respiratorio a la parte superior baja de la llegan a la vía aérea y si logran adherirse vía aéreaaly epitelio, si logran establecen adherirse residencia al epitelio,y establece causan infección. Así secausan producen infección. las formas Así se de producen enfermedad las como formas de en laringitis, traqueítis, bronquitis laringitis, y neumonía traqueítis,obronquitis combinaciones y neumonía de ellas o combina como laringo-traqueo-bronquitis como laringo-traqueo-bronquitis y bronconeumonía. y bronconeumonía.

Cultivar en forma significativa Cultivarlasensecreciones forma significativa del tracto las respiratorio secreciones del tra inferior es un proceso frustrante. inferior es YaunBartlett proceso en frustrante. 1974 habíaYaexpresado Bartlett en 1974 h que “el cultivo de muestras que respiratorias “el cultivo de puede muestras resultar respiratorias en más esfuerzo puede resultar e microbiológico innecesario microbiológico que cualquierinnecesario otro tipo deque espécimen”. cualquier otro tipo de es Obtención de muestras:Obtención de muestras:

En algunas infecciones En del algunas tracto respiratorio infeccionesinferior del tracto está respiratorio indicado inferio obtener paradecultivo secreciones obtener muestras para cultivo demuestras secreciones la víade superior, si se de la vía trata deque investigar organismos no forman parte d trata de investigar organismos no forman parte de que la microbiota normal, comoChlamydiophila Bordetella pertussis, Chlamydiophila normal, como Bordetella pertussis, pneumoniae o Mycoplasma pneumoniae. Apartelas demuestras estas excepcione Mycoplasma pneumoniae. Aparte de estas excepciones, que seinfecciones necesitan para estudiar infecciones del tracto res que se necesitan para estudiar del tracto respiratorio inferior

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46 Carlos A. Javier Zepeda de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacteriológicos

irectamente directamente (aspirado se (esputo) obtienenoindirectamente (esputo) otraqueal, directamente (aspirado traqueal, do bronquial, y lavado bronquio alveolar). lavado o cepillado bronquial, y lavado bronquio alveolar). Esputo.

btener lasEsmuestras levantarse la cama la preferibleal obtener las de muestras al por levantarse de la cama por la puto está formado secreciones del tractopor respiratorio mañana.por El esputo está formado secreciones del tracto respiratorio expectoradas en mayor o menor grado en conmayor o menor grado con bajo, se quemezclan al ser expectoradas se mezclan la faringesecreciones y de la boca.dePara disminuir la faringe y delalacontaminación boca. Para disminuir la contaminación s de la víacon superior, el paciente debe lavarseella paciente boca y debe lavarse la boca y organismos de la vía superior, orios de lahacer garganta (“gárgaras”) agua limpia antes con agua limpia antes enjuagatorios de con la garganta (“gárgaras”) a secreción. usa dentaduras, debe retirarlas antes del debe retirarlas antes del de Si expectorar la secreción. Si usa dentaduras, geo. Luego, el buco-faríngeo. paciente debe hacer dedebe toserhacer el esfuerzo de toser aseo Luego,elelesfuerzo paciente secreción ytraqueal y recogerla en traqueal un frascoy estéril de en un frasco estéril de expulsar la secreción recogerla ética y transportarla prontamente al laboratorio. tapadera hermética y transportarla prontamente al laboratorio.

o del examen investigar tuberculosis, no es M. tuberculosis, no es Si el es propósito del M. examen es investigar usar un frasco estéril, pero sí un debe ser un frasco limpio. indispensable usar frasco estéril, pero sí debe ser un frasco limpio. as son normalmente sometidas a un proceso de Estas muestras son normalmente sometidas a un proceso de ión antes de ser cultivadas. antes de ser cultivadas. descontaminación

el pacienteMuchas no puede expectorar espontáneamente para espontáneamente para veces el paciente no puede expectorar stra de esputo. En esos casosde seesputo. puede recurrir obtener obtener la muestra En esosa casos se puede recurrir a obtener ucido”, que nebulizar paciente en connebulizar una unconsiste “esputo en inducido”, queal consiste al paciente con una ónica de solución cloruro de sodio 3%,deusando en 3%, un usando 10 mL en un hipertónica cloruro10 demL sodio rasónico durante 15 aultrasónico 30 minutos.durante Este es método nebulizador 15un a 30 minutos. Este es un método nvasivo que la broncoscopia. El que procedimiento ha sido El procedimiento ha sido directo menos invasivo la broncoscopia. ener muestras pacientes sospecha neumonía usadoenpara obtenercon muestras en de pacientes con sospecha de neumonía omunes opor cuando hay comunes sospecha odecuando tuberculosis. Los bacterias hay sospecha de tuberculosis. Los uar deben cultivos hacerseaen forma cuantitativa paraen discriminar, efectuar deben hacerse forma cuantitativa para discriminar, antidad de si es una un una contaminación o un encrecimiento, base a la cantidad decontaminación crecimiento, sio es nificativo. crecimiento significativo.

pecha tuberculosis estuberculosis muy importante que eles muy importante que el Cuando sepulmonar sospecha pulmonar para la inducción de esputo haga en un procedimiento para se la inducción de ambiente esputo se haga en un ambiente evitar que la producción de aerosoles contaminede al aerosoles contamine al protegido para evitar que la producción o y auxiliar. personal médico y auxiliar.

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Manual de obtención de muestras para exámenes bacteriológicos 47 Manual de Toma de Muestras Manual para Exámenes de Toma de Bacteriológicos Muestras para Exámenes Bacte

Una vez en el laboratorio, Una vezla enmuestra el laboratorio, debe serla evaluada muestra debe microscópicamente antesmicroscópicamente de ser cultivada. Seantes efectúa de una ser cultivada. coloraciónSe deefectúa u Gram y se examina con objetivo Gram yde sebajo examina podercon (10X). objetivo Se han de bajo establecido poder (10X). Se diversos criterios (Tabla diversos 10.1) para criterios considerar (Tabla una 10.1) muestra para adecuada considerar una mu de esputo. De acuerdo con de el esputo. procedimiento De acuerdo recomendado, con el procedimiento la muestrarecomend podrá ser rechazada si nopodrá reúneser lasrechazada condiciones. si no reúne las condiciones.

Tabla 10.1: Criterios de tamizaje Tabla 10.1: de muestras Criteriosde deesputo tamizaje de muestras de para estudio bacteriológico para estudio bacteriológico Autor Bartlett

Murray y

Método Autor

Criterio Método mínimo para una muestra aceptable Suma de LPMN Bartlett (10-25= 1+;Suma de LPMN (10-25= 1+; >25= 2+, moco (1+), CEE (10>25= 02+, moco (1+), CEE (1025= -1; >25= -2). 25= -1; >25= -2). CEE

Geckler et al Van Scoy Heineman y Radano Kalin Morris et al

0

CEE 1

Relación LPMN/CEE Kalin

Relación >5 LPMN/CEE

>5

Washington

Murray y

C pa

Washington CEE LPMN

Relación Morris LPMN/CEE et al y Relación