Efectos de la Aplicación de Terapias farmacológicas para el Manejo de caligidosis en salmones de cultivo: nutrición y medioambiente.

MSc. Gladys Asencio

Coinvestigadores: Juan Carvajal Andrés Quiroz (UFRO) Sergio Contreras (IFOP) Daniela Farias Alex Mellado Margarita González Verónica Osorio Jorge Pino (UFRO) Hernán Cañon (IFOP)

1) Descripción de la enfermedad (Rozas &Asencio, 2008) a.- Revisión histórica de la caligidosis en Chile y hemisferio norte

Lesiones en la superficie externa de los peces: piel, músculo, ojos, aletas

Efectos en el sistema nervioso: stress

Efectos en la alimentación de los peces: inapetencia

Disminuye actividad del sistema inmune: enfermedades asociadas (SRS, ISAv)

60

0.8

Lice numbers

0.6 40

0.5

30

0.4 0.3

20

0.2 10

0.1

0

Food intake % bw/day

0.7

50

0 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Week no. Lice numbers

Food intake

Figura 1.-En Noruega, el sea lice causa pérdida de apetito estimadas entre el 20 al 40% de consumo diario; niveles tan bajos como 5 parásitos/pez afectan el apetito (Kvenseth, Caligus 2, 1996)

Caligidosis en la salmonicultura mundial Salmonicultura Mundial: inicios en la década 70, sea lice también Paises: •Escocia: Lepeophtheirus salmonis •Irlanda: Lepeophtheirus salmonis •Noruega: Lepeophtheirus salmonis •Canada: Caligus elongatus •Tasmania: Caligus clemensi •Nueva Zelanda: Caligus clemensi •Chile: Caligus teres, Caligus rogercresseyi

Caligidosis en Chile: cultivos de salmonideos

FIGURA 2. Distribución geográfica de los centros de cultivo existentes en la X y XI region, julio 2007

2009 Tabla 1. Promedio, máximos y mínimos de abundancia de Caligus totales por región y especie. Semana 19-09 (mayo 2009). Intesal (Informe)

2007

Especie

X Región

XI Región

Total

E1 E1

CHILOE N

CHILOE CENTRO

CHILOE S

Mi n

Prom

Max

Min

Cohos

0,6

4,0

0,0

0,5

1,0

0,0

0,6

4,0

0,0

Salar

4,6

8,8

0,1

5,0

15,7

0,0

4,9

15,7

0,0

Trucha

2,5

11, 6

0,0

3,0

15,2

0,0

2,6

15,2

0,0

Promedio

2,4

4,3

3,1

ISLA PELADA-V

CALETA ANDRADE-

Tabla 2. N° de centros reportados por empresa, Salmón del Atlántico y Trucha Arcoíris, X y XI Región. Mayo 2009. Informe Intesal

CHILOE CENTRO

CALETA ANDRADEISLA PELADA-V

LOLCURA-Y

AGUANTAOMH PLAN CHADA-MH ALAO SURMH CAGUACHESA AGUANTAOM CHAULINECM POLOUCUH E-T CENTINELAM

QUENAC-SA

CHIDHUAPI 2-M

CHOEN-MH

RALIGUAOME COLACO 2M

GUAR-SM

HUELMO-MH

Max

S/B S/B

S/B

HUELMO-SM

Pro m

S/B

S/B

CHILOE N

Min

HORNOPIREN

S/B

RELONCAVI

Ma x

S/B

LOLCURA-Y

S/B

Prom .

E1

CENTINELAM

AGUANTAOM

CAGUACHESA

PLAN CHADA-MH ALAO SURMH

S/B

PREBAÑO-ALPHAMAX 4500 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 0

S/B

E1

CHAULINECM POLOUCUH E-T

S/B

S/B

AGUANTAOMH

CHOEN-MH

E1

COLACO 2M

HUELMO-MH

GUAR-SM

RALIGUAOME

E1

RELONCAVI

PESO PROMEDIO SALMO SALAR (g)

E1

QUENAC-SA

E1

CHIDHUAPI 2-M

E5

HUELMO-SM

CALIGUS TOTALES (Nº/PEZ)

PREBAÑO-ALPHAMAX 80 70 60 50 40 30 20 10 0

CHILOE S HORNOPIREN

Figura 3. Promedio de abundancia de Caligus totales y peso salmones, por región. Julio 2007. Nº de centros: 325.

Nº centros activos, fines julio 2009: 36

Empresa

N°Centros Reportados N° Centros Reportados !º quincena mayo 2da quincena mayo Acuinova Chile 5 4 Aguas Claras 9 10 Camanchaca 7 6 Cong. del Pacífico 2 2 Cultivos Yadrán 2 2 Cupquelan 6 4 El Golfo 5 5 Frio Sur 2 1 G. M. Tornagaleones 2 2 Invertec 3 2 Mainstream 9 9 Marine Harvest 9 8 Multiexport 17 16 Salmones Chiloé 1 1 Salmones Itata 5 3 Ventisqueros 6 6 Total 90 81

b. Biología y Ecología de Caligus rogercresseyi

¿Qué es el piojo (sea lice) del salmón? COPEPODA: Suborden Siphonomastoida: Familia CALIGIDAE En Chile, la especie de piojo de mar económicamente más importante es Caligus rogercresseyi (Boxshall y Bravo, 2000).

En hemisferio norte, la especie de piojo de mar económicamente más importante es Lepeophtheirus salmonis (Jonhson et al., 1997 ).

C C

G

F

N

C

á

203

C

C

I

J

N

II S

Mó N E

á H

M

í

A

I

IV

APAREAMIENTO (OSORIO, 2007) espermatóforos

gonoporo

espermatóforos

FECUNDACION (OSORIO, 2007)

ESPERMATECA

N° HUEVOS/SACO: 40.4 + 13.1

OVARIOS OVIDUCTO

¿N° POSTURAS DE SACOS /HEMBRA? ……3-4 (Osorio,2007) ¿FECUNDIDAD DE HEMBRAS?...... (230-250 nauplios/hembra (Osorio,2007) ¿DESARROLLO GONADICO? …..gónadas en ChIII y ChIV (Levicoy, Tesisen ejecución) REPRODUCCION: Adultos permanecen vivos 3-4 días sin hospederos: manejo en lab. Fecundidad en hembras: ¿valores subestimados? Monogamia en hembras y poligamia en machos Longevidad de hembras y machos adultos: 35 a 50 días

INFESTACION:

HOSPEDEROS: Huéspedes

Nº peces examinados

Oncorhynchus mykiss Salmo salar O. kisutch

50 48 46

Eleginops maclovinus

70

Odontestes regia Paralichthys microps

78 8

Hypsoblennius sordidus Patagonotothen sp.

30 11

Nº peces Infectados 40 12 10 1 64 65 3 2 6 7 2 0 0

Prevalencia (%) 80 25 22,2 1,81 91,42 92,85 4,28 2,85 7,69 87,5 25 -

Abundancia 5,24 0,47 8,84 0,02 23,24 8,98 0,085 0,028 0,33 7 1,37 -

Parásitos Caligus rogercresseyi Caligus rogercresseyi Caligus rogercresseyi Caligus teres L. mugiloidis Caligus rogercresseyi C. cheilodactylus Caligus teres Caligus rogercresseyi L. edwardsi Caligus rogercresseyi -

Variables que afectan en el ciclo de vida del parásito: fases parásitas

A.- Temperatura (González & Carvajal, 2003)

B.- Salinidad (Carvajal, 1998) Salinidad º/oo

Nº inicial de huevos

Nº final de larvas

% eclosión larvas

15

677

8

1,2

20

909

57

6,3

25

999

193

19,3

30

1169

501

42,9

Densidad de cultivo (????)

Variables que afectan el ciclo de vida del parásito: fases planctónicas

Lepeophtheirus salmonis: Intensidad de luz: Genna et al. (2005) Temperatura: Genna et al.(2005), Gillibrand & Willis (2007), Penston et al.(2008) Salinidad: Genna et al. (2005), Gillibrand & Willis (2007), Penston et al.(2008) Corrientes: Genna et al. (2005), Gillibrand & Willis (2007), Penston et al.(2008) Mareas: Genna et al. (2005), Gillibrand & Willis (2007), Penston et al.(2008) Viento: Genna et al. (2005), Gillibrand & Willis (2007), Penston et al.(2008) Depredadores: ¿? Densidad de Hospederos: ¿? Competencia intraespecífica: ¿? Competencia interespecífica:¿? Caligus rogercresseyi: ¿? …………..Fondecyt 1080098 (ULA, UACh, U. Antofagasta)

2) Manejo de la Epizootia a.- Planes de manejo de la caligidosis en Chile y hemisferio norte (IPM: Plan de Manejo Integrado). Países en los cuales se han incorporado PMI: •Noruega: 1997; Programa nacional para el control del sea lice (Norwegian Animal Health Authorities) •Escocia: 1998; Código de Prácticas para el control del sea lice (SQS National Treatment Strategy) / ISLM; 1999. •Irlanda: 2002; SBM (Syngle Bay Management) •Canadá: 2003; IPM (Integrated Plan Management)

a.1.- Objetivos del IPM (Noruega) •Monitoreo de abundancia •Uso de cleaner-fish (peces limpiadores) •Sincronización de tratamientos •Estandarización de métodos de tratamiento

a.2.-Control del Sea Lice en Escocia •1976 Nogos, Nuvan •1980s Bath treatments and Aquagard •1989 Lice count system •1989 Management agreements •1989 Fallowing •1989 Single year classes •1990 Testing new medicines •1991 Biological control •1991 Improved treatment techniques •1991 Resistance monitoring •1993 Hydrogen peroxide introduced •1995 Strategic treatments

•1996 Scottish National Sea Lice treatment strategy •1996 Molecular approach •1999 Excis authorised •late 1990s: Aquagard and azamethiphos withdrawn •1999 Genetic approach •1999 Tripartite Working Group •1999 Area Management Agreements •1999 Integrated Sea Louse Management ISLM •1999 Epidemiological studies •2001 In feed SLICE treatments

a.3.-Plan de Manejo en Chile

A.- Actualidad: Estrategia de Tratamientos Farmacológicos 1. Definir el área a ser manejada 2. Identificar la compañias en el área y acordar estrategias comunes 3. Formar un grupo de manejo de área local, incluyendo Veterinarios 4. Acordar protocolos de monitoreo estandarizados y frecuencia 5. Acordar períodos y estrategias de tratamientos 6. Llevar a cabo estrategias de tratamientos comunes 7. Plan de monitoreo continuo

B.- Recomendaciones: •Política de trabajo con clases anuales y criterio all-in all-out •Períodos de descanso (sincronización de los centros de cultivos dentro de una misma área). Mínimo tiempo recomendado en Escocia de 6 semanas. •Remoción de peces moribundos •Remoción diaria de mortalidad registrando causas. •Limpieza de redes •Remoción de ejemplares maduros (grisle)

b. Análisis de los productos incluídos en el alimento y baños para el control de Caligus liberados al ambiente b.1.- Calicidas (Bravo, 2008):

ALIMENTO

BAÑOS

VACUNA

• Ivermectin (1989-2003) • Benzoato de Emamectina (Slice) (1999 a la fecha, 2007 resistencia) • Teflubenzuron (Calicide)* • Diflubenzuron (Lepsidon) (abril 2009 a la fecha) • Neguvon (1981- 1985) • Nuvan (1985- 2001) • Peróxido de Hidrógeno (2007 a la fecha) • Cypermethrin (Novartis) (2007)* • Deltamethrin (Pharmaq) (2007 a la fecha) • Pyrethrum (Py-Sal)* • Azamethiphos (Salmosan)

EN ESTUDIO

b.2.- Inmunoestimulantes: Glucanos (Robertsen et al., 1994) Otros: Ewos (A,B,C y D) Skretting (¿?)

Cap. Nutrición Curso Invierno

Efectos en los piojos y peces de los compuestos probados y usados para su control: • Dichlorvos (Aquagard; Nuvan) (Jones et al, 1992): Organofosfato • Azamethiphos (Salmosan): Organofosfato; inhibe la actividad de la acetilcolinesterasa, stres en peces y muerte por sobre exposición. • Peróxido de Hidrógeno: schock osmótico piojos y peces. (Treasurer et al., 2000) • Cypermethrin (Excis): Afecta el sistema nervioso central, impacto hematológico pez • Deltamethrin (Alpha max Vet): Piretrina. Afecta el sistema nervioso central piojo ( Sevatdal et al.), impacto hematológico pez • Pyrethrum (Py-Sal). Piretrina. Afecta el sistema nervioso central (Sevatdal et al., 2005), impacto hematológico pez • Ivermectin (Ivomec): Avermectina. Actúa sobre el sistema nervioso periférico piojo • Emamectin (Slice): Avermectina. Actúa sobre el sistema nervioso periférico (Bravo et al, 2009). • Teflubenzuron (Calicide, Ektobann): Urea. Inhibidor de la síntesis de quitina (mudas) (Ritchie et al, 2002) • Diflubenzuron (Lepsidon): Urea. Inhibidor de la síntesis de quitina (mudas) (Clarck & Jewess, 1990)

IMPACTO AMBIENTAL: ECOTOXICOLOGIA

Gee et al. (2005) Buschmann et al. (2009)

Benzoato de emamectina: alimento • 5 años de aplicación: mortalidad adultos y juveniles > 80% •¿2007 resistencia en Caligus? (Bravo et al., 2008)

PM

H

AC

Q

Fig. 4. Average sensitivities (±95% confidence intervals, summer survey) in C. rogercresseyi to emamectin benzoate in the areas where the 18 sites are located in Region X.PM= Puerto Montt; H = Hornopiren; AC = Ancud–Castro; Q = Quellón. No significant differences between areas (p=0.493). Bravo et al. (2008)

CONTROL: EC50 para Lepeophtheirus mugiloidis no expuesto a emamectina: concentración de 34.2±10.4 ppb, 4.2 veces menor al EC50 promedio para C. rogercresseyi colectado desde salmoneras (142 ppb).

Mortalidad

Deltametrina:

•adultos: >90%

Baños

•Juveniles: < 40%

2007 inicio tratamientos

: Deltametrina

: Emamectina

06-05-2009

06-04-2009

06-03-2009

06-02-2009

06-01-2009

06-12-2008

06-11-2008

06-10-2008

06-09-2008

06-08-2008

06-07-2008

40 35 30 25 20 15 10 5 0 06-06-2008

Abundancia (ind/pez)

COLACO 1-Caligus totales

: Diflubenzuron

Figura 5. Resultados de aplicación de tratamientos con baño de deltametrina en bahía Codihue, 2008-2009

Diflubenzuron (alimento): Abril 2009 inicio tratamientos Mortalidad: Adultos: 0 % Juveniles: > 70%

Plan de Tratamiento Coordinado de los 35 centros en actividad, fines agosto 2009: 0-1 caligus totales/pez: emamectina 1-3 caligus totales/pez: deltametrina 1-3 caligus adultos/pez: deltametrina > 3 caligus totales/pez: deltametrina + diflubenzuron > 3 caligus juveniles/pez: diflubenzuron

3) Ejemplos Prácticos a.- Presentación del manejo productivo efectuado por 3 empresas durante los últimos 3 años en 8 centros de la bahía de Colaco (relación biomasa, caligidosis y tratamientos.

Descanso área Codihue mayo 2007 (Asencio et al., submitted Aquaculture) ULA: G. Asencio & J. Carvajal Marine Harvest, Ewos Innovation, Aquachile, Mainstream, Multiexport CALIGUS FEB-ABRIL 2007

CENTROS CULTIVO

Fig. 6. Bahía Codihue. Los números indican los centros de cultivos en que se incluyeron 200 smolt de Salmo salar (peces centinela), Mayo-Junio 2007.

10 days

23 days 13 cop.

90 cop .

Variación temporal en la infestación de copepoditos por smolts en centros de cultivo de la zona Colaco-Abtao. 200 Median

180 160

25%-75%

Min-Max

H(3,1565) = 772.760; P