EFECTOS DEL TÉ DE COMPOST Y DE VARIOS FUNGICIDAS SOBRE LA PRODUCCIÓN DE CHAMPIÑÓN FJ Gea, MJ Navarro Centro de Investigación, Experimentación y Servicios (C.I.E.S.) del champiñón. c/ Peñicas s/n. 16220 Quintanar del Rey, Cuenca, [email protected] RESUMEN La principal enfermedad del cultivo de champiñón es la mole seca (Verticillium fungicola). Los métodos de control consisten en la aplicación de procloraz y de estrictas medidas de higiene. Los resultados positivos obtenidos en ensayos in vitro con tes de compost frente a V. fungicola, convierten a estos extractos en una alternativa de control biológico frente a los fungicidas. Se ha estudiado tanto el efecto fitotóxico de diferentes fungicidas (carbendazima, iprodiona, metil-tiofanato, procloraz, tiabendazol) sobre la producción de champiñón, como el nivel de residuos. También se ha valorado la fitotoxicidad del té de compost, obtenido como extracto del sustrato post-cultivo de champiñón. Excepto el tiabendazol, el resto de fungicidas producen descensos de producción, que oscilan entre el 4% (carbendazima) y el 15% (iprodiona). Se detectan valores superiores al LMR autorizado con carbendazima, iprodiona y metil-tiofanato, mientras que no hay problema de residuos con procloraz y tiabendazol. Los descensos de producción con los tes de compost oscilan entre el 4% (una aplicación) y 10% (tres aplicaciones). Por tanto, el menor descenso de rendimiento registrado con los tes de compost, la ausencia de problemas de residuos y la eficacia in vitro observada para controlar V. fungicola, hace recomendable su utilización en el control de esta enfermedad. Palabras clave: fitotoxicidad, residuos de fungicidas, mole seca, Verticillium fungicola, control biológico.

INTRODUCCIÓN La utilización de té de compost de coproductos agrícolas se sitúa entre los métodos de biocontrol sugeridos como alternativa a los productos químicos en el control de hongos fitopatógenos foliares (Weltzein, 1991). En este sentido, se han obtenido buenos resultados en ensayos de eficacia in vitro con tes de compost de alperujo de olivo más cascarilla de arroz, orujo de vid y residuo industrial del corcho, en el control del hongo Verticillium fungicola (Gea et al., 2004). También son favorables los resultados de eficacia in vitro con té de compost de coproductos procedentes del propio cultivo de champiñón (datos no publicados). Desde el año 1995, la empresa Recomsa (Quintanar del Rey, Cuenca) se encarga de reciclar el coproducto originado por el cultivo del champiñón (Agaricus bisporus) y setas (Pleurotus ostreatus), conocido como sustrato post-cultivo de champiñón y setas. En la actualidad, dicha empresa gestiona alrededor de 200 x 106 kg/año de este sustrato, con el que elaboran varias enmiendas orgánicas de suelos que permiten corregir deficiencias de materia orgánica, mejorar la estructura de suelos y restablecer pérdidas de nutrientes (Moya y Checa, en prensa). Son varias las razones que estimulan el estudio sobre la utilización del té de compost elaborado con sustrato post-cultivo de champiñón y setas como método de control biológico de la mole seca: los resultados alentadores que refleja la bibliografía consultada, los datos favorables obtenidos en ensayos in vitro, la proximidad y fácil disponibilidad de estos sustratos, y por último, pero no menos importante, la puesta en

marcha del proceso de revisión de sustancias activas en la Unión Europea, el cual va a dar lugar a la retirada de la práctica totalidad de fungicidas autorizados, dejando al cultivo de champiñón sin ningún método eficaz para el control de enfermedades fúngicas. Como paso previo a la utilización de este té de compost en el cultivo de champiñón, se ha valorado su efecto fitotóxico frente al micelio de champiñón. A efectos comparativos se ha realizado un estudio sobre la fitotoxicidad de cinco fungicidas, dos de ellos autorizados en España para el cultivo de champiñón (iprodiona y procloraz), y los otros tres incluidos en el Anexo I de la Directiva 91/414/CEE (carbendazima, metil-tiofanato y tiabendazol). También se ha realizado un análisis de residuos en los champiñones recolectados, para conocer si los tratamientos fungicidas aplicados respetan los límites máximos de residuos (LMR) autorizados.

MATERIAL Y MÉTODOS Efecto fitotóxico de los tes de compost sobre el micelio de champiñón. El material de partida utilizado fue sustrato post-cultivo de champiñón, el cual se sometió a un tratamiento térmico con vapor a 70 ºC durante 12 horas, con la finalidad de eliminar cualquier organismo patógeno. Posteriormente, se realizó un proceso de recompostaje controlado durante 57 días. En el Cuadro 1 se muestran las características físicas, químicas y biológicas del sustrato post-cultivo de champiñón, una vez finalizado el proceso de recompostaje, utilizado en la elaboración de los tes de compost (Martínez, 2008). Se han ensayado tes de compost aireados (EAA) y no aireados (EANA), preparados a dilución 1:4 (p/v) de sustrato post-cultivo y agua, y aplicando un periodo de extracción de 1 día. Para la obtención de tes aireados, la mezcla sustrato-agua se agita en agitador orbital a 150 rpm a 25 ºC durante 1 día. En el caso de tes no aireados no se realiza el proceso de agitación. A partir de aquí, en ambos casos, la mezcla se filtra por muselina para eliminar el exceso de materia de gran tamaño (Diánez, 2005). Se realizaron medidas del pH y conductividad eléctrica en los dos tes de compost, arrojando las siguientes cifras: en el caso del EAA, pH (1:5, p/v): 7,49-7,66; conductividad eléctrica25 1:10 (pseco/v): 4.910-5.470 µS/cm; y para el EANA, pH (1:5, p/v): 7,62-7,64; conductividad eléctrica25 1:10 (pseco/v): 5.130-5.360 µS/cm. Para valorar el efecto fitotóxico de los tes de compost sobre el micelio de champiñón fue necesario realizar un ciclo de cultivo. Este ciclo se desarrolló en una cámara visitable Ibercex (ASL, S.A., San Fernando de Henares, Madrid, España) de dimensiones 3,70 x 2,10 x 2,60 m (20,2 m3), provista de sistemas de humidificación, calefacción/refrigeración, y recirculación/ventilación exterior, que permite el control automático de la temperatura, la humedad relativa y la concentración de dióxido de carbono. Se utilizaron 35 cubetas, cada una de las cuales se llenó con 6 kg de compost, presentando una superficie de 870 cm2. El compost se sembró con la variedad de micelio Gurelan 45. La mezcla de cobertura utilizada estaba formada por una mezcla de suelo mineral y turba rubia en proporción 4:1 (v/v), que es la habitual en el sector productor de Castilla-La Mancha. La conducción del ciclo se ajustó a las condiciones de cultivo indicadas en Navarro et al. (2004). Las cubetas se situaron en dos alturas, a ambos lados de la cámara, siguiendo un diseño de bloques al azar con 5 repeticiones. El té de compost se aplicó en riego, el mismo día de su obtención, sobre la mezcla de cobertura, a razón de 100 ml por cubeta. Con los dos tipos de té de compost obtenidos (aireados y no aireados) se realizaron 3 tratamientos distintos: 1R: sólo una aplicación en el primer riego, el mismo

día en que se aplica la mezcla de cobertura (día 0); 2R: dos aplicaciones, en primer y segundo riegos (días 0 y 2), y 3R: tres aplicaciones, primero, segundo y tercer riegos (días 0, 2 y 6). Se utilizó un control en el que únicamente se aplicó agua. La fitotoxicidad de los tes de compost se valoró durante las tres primeras floradas (F1, F2 y F3), contrastando el rendimiento obtenido en cada tratamiento con el del control. Además se ha calculado la precocidad de la cosecha en cada tratamiento, la cual se expresa como el tiempo que transcurre entre la aplicación de la mezcla de cobertura y la cosecha de la primera florada, ponderando la producción relativa diaria. Efecto fitotóxico de varios fungicidas sobre el micelio de champiñón. Análisis de residuos. La fitotoxicidad de los cinco fungicidas se valoró llevando a cabo un ciclo de cultivo en el que se aplicaron los tratamientos a las dosis indicadas en el Cuadro 2. La aplicación de los fungicidas se realizó: (I) en el primer riego (día 0) o, (II) en el segundo (día 5), con 100 ml de caldo por cubeta, e igual cantidad de agua en las cubetas control. Las condiciones de cultivo fueron similares a las descritas anteriormente. En esta ocasión, el número de cubetas usado se incrementó hasta 66, distribuidas en tres alturas, a ambos lados de la cámara, siguiendo también un diseño de bloques al azar con 5-6 repeticiones. El efecto fitotóxico se valoró, al igual que en la experiencia anterior, en base al rendimiento y la precocidad. Por otra parte, se analizó el nivel de residuos de cada materia activa en champiñones cosechados durante las dos primeras floradas. Para ello, el día de máxima producción de la florada se recogieron aproximadamente 500 g de champiñón de cada tratamiento, y se enviaron al Laboratorio Kudam S.L. (Pilar de La Horadada, Alicante), para su procesamiento y análisis. La determinación de residuos de iprodiona se realizó mediante cromatografía de gases (KUDAM CRV0101), mientras que para el resto de fungicidas se usó cromatografía de líquidos (KUDAM CRV3000). Análisis estadístico. Los datos obtenidos se evaluaron mediante un análisis de varianza, utilizando el paquete informático Statgraphics Plus v. 4.1. Para el establecimiento de diferencias significativas entre medias se usó el test de Tukey-HSD (p=0,05).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN Efecto fitotóxico de los tes de compost sobre el micelio de champiñón. Los rendimientos y la precocidad obtenidos en los diferentes tratamientos quedan reflejados en el Cuadro 3. Se observa un pequeño descenso de producción (3-4%) en las cubetas en que se ha aplicado un primer riego con los tes de compost; este descenso se agudiza conforme se incrementa el número de riegos, llegando incluso al 10% de la producción cuando se realizan tres riegos con té de compost aireado. Este hecho puede estar relacionado con la elevada conductividad eléctrica que presentan los tes de compost, que pueden incrementar, a su vez, la conductividad de la mezcla de cobertura, lo que dificulta la fructificación del champiñón (Pardo et al., 2004). Sin embargo, el análisis estadístico de los datos no muestra diferencias significativas entre los tratamientos.

En cuanto a la precocidad, se observa un ligero retraso, con respecto al testigo, en el inicio de la cosecha de la primera florada en todos los tratamientos en que se ha utilizado el té de compost, independientemente del número de aplicaciones que se hayan realizado. Este retraso es algo mayor para el extracto EANA (1,2-1,4 días) que para el EAA (0,8-1 día). Efecto fitotóxico de diferentes fungicidas sobre el micelio de champiñón. Análisis de residuos. En el Cuadro 4 se muestran los datos de producción de champiñón y precocidad obtenidos en cada uno de los tratamientos fungicidas realizados. El análisis estadístico de los datos de producción presenta diferencias significativas entre los tratamientos. Destaca claramente el descenso de producción observado en los tratamientos con iprodiona, en cualquiera de los dos riegos, con valores que superan, en ambos casos, el 15% con respecto al control. Así mismo, se observan descensos próximos al 10% en los tratamientos con metil-tiofanato y procloraz, también independientemente del momento de la aplicación. Un valor similar se obtiene en las cubetas tratadas con carbendazima en el segundo riego, mientras que la aplicación de esta materia activa en el primer riego produce un 5% de descenso. Por último, destacar que la aplicación de tiabendazol no provoca, en ningún caso, pérdidas de rendimiento; al contrario, se obtienen valores ligeramente superiores al control en ambas aplicaciones. En cuanto a la precocidad, se observa una tendencia similar, siendo la iprodiona y el metil-tiofanato los tratamientos que más retrasan el inicio de la cosecha (hasta 2,5 días), mientras que el tiabendazol ocasiona el menor retraso (apenas 1 día). La carbendazima y el procloraz muestran un comportamiento intermedio, con retrasos de 1 día con el primer riego, y de 2 días con el segundo. Los resultados obtenidos en los análisis de residuos de las diferentes materias activas en champiñones cosechados durante las dos primeras floradas, quedan reflejados en el Cuadro 5. Es necesario aclarar, que el metil-tiofanato se descompone en carbendazima, por lo que en este caso se realiza el análisis para ambas materias activas. Los resultados muestran que se supera el LMR permitido para los tratamientos realizados con iprodiona, carbendazima y metil-tiofanato, de forma más acusada cuando se aplican en el segundo riego. Sin embargo, la aplicación de procloraz y tiabendazol, en las dosis y momentos indicados, no suponen un problema de residuos en el caso del cultivo de champiñón.

CONCLUSIONES Los resultados obtenidos en el análisis de residuos descartan la aplicación de los fungicidas iprodiona, metil-tiofanato y carbendazima a las dosis y momentos utilizados en este trabajo. Además, en el caso de la iprodiona y, en menor medida, del metiltiofanato, esta conclusión se ve apoyada por los descensos de producción detectados. Los otros dos fungicidas utilizados, procloraz y tiabendazol, no presentan problemas de residuos; en el caso del segundo, además no se detectan mermas de producción. Para el procloraz, los resultados obtenidos muestran descensos en torno al 10%. Comparativamente, la aplicación de los tes de compost produce descensos que no llegan, en ningún caso, a superar este 10%, y esto en el caso de sucesivas aplicaciones. Por otra parte, no existen problemas de residuos. Por tanto, el menor descenso de rendimiento registrado con los tés de compost, la ausencia de problemas de residuos y la eficacia in vitro observada para controlar V. fungicola, permite considerarlos como una alternativa biológica en el manejo integrado de esta enfermedad.

BIBLIOGRAFÍA Diánez, F., 2005. Evaluación de la capacidad supresora de la microbiota bacteriana y fúngica del compost de orujo de vid frente a hongos fitopatógenos. Tesis doctoral inédita. Universidad de Almería. 276 pp. Gea, F.J., Navarro, M.J., Blanco, R., Avilés, M., Sinobas, J. y Tello, J.C., 2004. Actividad in vitro de extractos acuosos de compost de alperujo de olivo más cascarilla de arroz, orujo de vid y residuo industrial del corcho frente a Verticillium fungicola. En: Agroecología: Referente para la transición de los sistemas agrarios, 467-474. Sociedad Española de Agricultura Ecológica (Ed), Catarroja, Valencia, España. Martínez, M., 2008. Reutilización del compost agotado en la producción de champiñón cultivado (Agaricus bisporus (Lange) Imbach). Tesis doctoral inédita. Universidad de Castilla-La Mancha. 264 pp. Moya, M.J. y Checa, J.G. Gestión y valorización de residuos orgánicos del cultivo de champiñón y setas en la comarca de La Manchuela Conquense. En: Avances en la tecnología de la producción comercial del champiñón y otros hongos cultivados, 3 (Actas de las IV Jornadas Técnicas del champiñón y otros hongos comestibles en Castilla-La Mancha). Patronato de Desarrollo Provincial, Diputación Provincial de Cuenca (Ed), en prensa. Navarro, M.J., Gea, F.J. y Ferragut, F.J., 2004. Biología y control de Brennandania lambi en los cultivos de champiñón de Castilla-La Mancha. Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación. Madrid. 203 pp. Pardo, A., Navarro, M.J., Moya, M.J. y GEA, F.J., 2004. Uso del compost agotado de hongos cultivados reciclado como material de cobertura para el cultivo de champiñón. En: Agroecología: Referente para la transición de los sistemas agrarios,1.599-1.609. Sociedad Española de Agricultura Ecológica (Ed), Catarroja, Valencia, España. Weltzien, H.C., 1991. Biocontrol of foliar fungal diseases with compost extracts. En: Microbial ecology of leaves. Andrews, J.H., Hirano, S.S. (Eds). Springer-Verlag, New York, 430-450.

Cuadro 1. Características físicas, químicas y biológicas del sustrato post-cultivo de champiñón una vez recompostado. Parámetro Densidad aparentefresco (g/ml)

0,609

Humedad (%)

50,4

pH 1:5 (p/v)

7,78

Conductividad eléctrica25 1:10 (pseco/v) (µS/cm)

5.265

Nitrógeno (%)

1,34

Cenizas (%)

64,62

Materia orgánica (%)

35,38

Relación C/N

15,3

Retención de agua (kg/kg)

1,95

Densidad aparenteseco (g/ml)

0,302

Densidad real (g/ml)

2,118

Porosidad (%)

85,7

Ácaros

Depredadores

Nematodos

Saprófagos

Trichoderma

Ausencia

Cuadro 2. Relación de fungicidas y dosis aplicadas. Nombre comercial

Materia activa

Dosis

BAVISFOR 50 (IQV)

Carbendazima 50% WP

0,1%

ROVRAL WP (AGRODAN)

Iprodiona 50% WP

0,1%

TOPSIN 70 WG (BAYER)

Metil-tiofanato 70% WG

0,1%

SPORGON (BASF)

Procloraz 46% WP

0,05%

TEXTAR 60T (TECNIDEX)

Tiabendazol 60% SC

0,1%

Cuadro 3. Producción total de champiñón cosechado, en kg/m2 (valor medio ± desviación estándar) y en porcentaje respecto al control, y precocidad (valor medio ± desviación estándar) para cada uno de los tratamientos con té de compost realizados. Tratamiento

EANA

Precocidad (días)

(kg/m2)

%

20,00 ± 1,80

100

21,07 ± 0,34

a*

1R

19,20 ± 2,55

96,00

21,86 ± 0,48

b

2R

18,60 ± 1,59

93,00

21,87 ± 0,58

b

3R

17,97 ± 1,30

89,85

22,08 ± 0,64

bc

1R

19,42 ± 2,26

97,10

22,41 ± 0,44

bc

2R

18,23 ± 1,87

91,15

22,46 ± 0,28

bc

3R

18,87 ± 1,83

94,35

22,50 ± 0,22

c

Control EAA

Producción

p = 0,4963

p = 0,0007

*Letras distintas indican diferencias significativas (p < 0,05) entre las medias.

Cuadro 4. Producción total de champiñón cosechado, en kg/m2 (valor medio ± desviación estándar) y en porcentaje respecto al control, y precocidad (valor medio ± desviación estándar) para cada uno de los tratamientos con fungicidas realizados. Tratamiento

Producción (kg/m2)

Precocidad (días) %

Control

22,79 ± 1,41

bc*

100

20,81 ± 0,45

a*

Carbendazima – I

21,99 ± 0,96

abc

96,49

21,85 ± 0,76

bcd

Iprodiona – I

19,25 ± 1,70

a

84,47

23,12 ± 0,83

f

Metil-tiofanato – I

20,48 ± 1,68

ab

89,86

23,21 ± 0,48

f

Procloraz – I

20,58 ± 2,13

ab

90,30

21,87 ± 0,71

bcd

Tiabendazol – I

23,91 ± 0,90

c

> 100

21,95 ± 0,74

bcd

Carbendazima – II

20,83 ± 7,91

abc

91,40

22,18 ± 0,66

cde

Iprodiona – II

19,29 ± 1,63

a

84,64

22,61 ± 0,71

def

Metil-tiofanato – II

20,48 ± 2,15

ab

89,86

22,85 ± 0,96

ef

Procloraz – II

20,00 ± 1,44

ab

87,76

22,70 ± 0,87

def

Tiabendazol – II

22,94 ± 2,18

bc

> 100

21,68 ± 0,94

abc

p = 0,0005

p = 0,0005

*Letras distintas indican diferencias significativas (p < 0,05) entre las medias.

Cuadro 5. Residuos de fungicidas (ppm) detectados en champiñones de las dos primeras floradas. Tratamiento

LMR

Primera florada

Segunda florada

Carbendazima – I

0,10

0,42

0,14

Iprodiona – I

0,02

0,03

0,06

Metil-tiofanato – I*

0,10

< 0,10 (0,34)

< 0,10 (0,36)

Procloraz – I

2,00

< 0,05

< 0,05

Tiabendazol – I

10,00

1,01

1,44

Carbendazima – II

0,10

0,88

0,84

Iprodiona – II

0,02

0,18

0,28

Metil-tiofanato – II*

0,10

< 0,10 (0,37)

< 0,10 (0,86)

Procloraz – II

2,00

< 0,05

< 0,05

Tiabendazol – II

10,00

0,87

1,08

* En el caso de la aplicación de metil-tiofanato, se valoran también los residuos de carbendazima (entre paréntesis).