PROYECTO DE COOPERACIÓN UE-PERU / PENX
2ºTaller Mejoramiento de semillas de concha de abanico
Marzo 2009
Elisabeth von Brand – Consorcio Asecal-Mercurio Consultores
Genética del ostión Argopecten purpuratus
METODOS DE EVALUACION DE PLOIDIA
Elisabeth von Brand – Consultor Asecal-Mercurio Consultores
Genética del ostión Argopecten purpuratus
Número de Cromosomas:
Ostión diploide (2n)
Ostión triploide (3n)
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Genética del ostión Argopecten purpuratus
Consecuencias celulares de las poliploidías: -Aumento del volumen celular y nuclear -En células triploides el volumen nuclear aumenta 1,5 veces, por lo que aumenta el diámetro Elisabeth von Brand – Consultor Asecal-Mercurio Consultores
Genética del ostión Argopecten purpuratus
Tipo de evaluación 1.- Destructivo (embriones tempranos y larvas) •
Número cromosómico
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Tipo de evaluación 2.- No destructivo (Juveniles / Adultos) • Número cromosómico en biopsias branquiales • Cantidad de ADN y diámetro de núcleo en hemocitos • Inspección visual de gónada • MRI (resonancia magnética)**
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Genética del ostión Argopecten purpuratus
1.- Destructivo (embriones tempranos y larvas) Número cromosómico Ostión diploide (2n) Embriones
Larvas
Antimitótico Fijación
Ostión triploide (3n)
Tinción
Conteo
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2.- No Destructivo (Adultos) Número cromosómico Ostión diploide (2n) Biopsia branquial
Antimitótico Fijación
Ostión triploide (3n)
Tinción
Conteo
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Biopsia de tejido branquial en Ostión del Norte
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2.- No Destructivo (Juveniles / Adultos) Diámetro de núcleo y cantidad de ADN en hemocitos
Extracción de hemolinfa en ostión del Norte
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Diámetro nuclear de hemocitos de Ostión del Norte Diploide • Teñidos con Orceína acética.
• Se observan las medidas del diámetro nuclear mayor
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Diámetro nuclear de hemocitos de Ostión del Norte Triploide
• Teñidos con Orceína acética. • Se observan las medidas del diámetro nuclear mayor
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Genética del ostión Argopecten purpuratus
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Diámetro nuclear hemocitos (µ µm)
Histograma de frecuencia para diámetro nuclear en hemocitos de ostiones diploides y triploides (n=96). Elisabeth von Brand – Consultor Asecal-Mercurio Consultores
Genética del ostión Argopecten purpuratus
Determinación de la cantidad de DNA en unidades arbitrarias Fluorescencia utilizando DAPI
Hemocitos de ostión 2n Elisabeth von Brand – Consultor Asecal-Mercurio Consultores
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Argopecten purpuratus
2n
3n Ostiones diploides
40%
Ostiones triploides
Porcentaje de observaciones
35% 30% 25% 20% 15% 10% 5% 0% 7.5
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2.- No Destructivo (Adultos) Inspección Visual
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2.- Destructivo (Adultos): disección de gónada Inspección Visual
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GAMETOGÉNESIS DE TRIPLOIDES Gónada de ostión triploide (T) y control (C).
Secciones histológicas de gónada de ostión triploide (izquierda) y diploide (derecha). M: Acinos masculinos, F: Acinos femeninos. Elisabeth von Brand – Consultor Asecal-Mercurio Consultores
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Ostión triploide (izquierda) y diploide (derecha)
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Anatomía Interna ostión del Norte
♀ MA R
♂ HP
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Resonancia Magnética (MRI) Estilete cristalino Músculo Aductor
♀ Hepatopáncreas
R
♂
Gónada
HP
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Análisis con Resonancia Magnética • No destructivo • No afecta al animal en ningún sentido • Podría ser apoyo en programas de selección • REQUIERE AUN MÁS INVESTIGACIÓN
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Genética del ostión Argopecten purpuratus
NON-DESTRUCTIVE METHOD TO STUDY THE INTERNAL ANATOMY OF THE CHILEAN SCALLOP ARGOPECTEN PURPURATUS Journal of Shellfish Research, vol.28 Nº2: 1-3 (2009)
• Elisabeth von Brand,* Magdalena Cisterna, Germán Merino, Eduardo Uribe, Claudio Palma-Rojas, Matías Rosenblitt & José Luis Albornoz
Elisabeth von Brand – Consultor Asecal-Mercurio Consultores
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