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˜ OFICINA ESPANOLA DE PATENTES Y MARCAS

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k 2 150 925 kInt. Cl. : A23K 1/00, A23L 1/307

11 N´ umero de publicaci´on: 7

51

˜ ESPANA

A61K 31/33, A23K 1/18 A23K 1/16, A61K 31/365

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TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA

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kN´umero de solicitud europea: 93109449.4 kFecha de presentaci´on : 14.06.1993 kN´umero de publicaci´on de la solicitud: 0 575 846 kFecha de publicaci´on de la solicitud: 29.12.1993

T3

86 86 87 87

k

54 T´ıtulo: Productos alimenticios y piensos que contienen inhibidores de la lipasa.

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73 Titular/es: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG

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72 Inventor/es: Isler, Dorothea;

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74 Agente: Isern Jara, Jorge

30 Prioridad: 24.06.1992 CH 1990/92

Postfach 3255 4002 Basel, CH

45 Fecha de la publicaci´ on de la menci´on BOPI:

16.12.2000

45 Fecha de la publicaci´ on del folleto de patente:

ES 2 150 925 T3

16.12.2000

Aviso:

k k

Rehm, Walter y Widmer, Erich

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En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicaci´on en el Bolet´ın europeo de patentes, de la menci´on de concesi´on de la patente europea, cualquier persona podr´a oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposici´on deber´a formularse por escrito y estar motivada; s´olo se considerar´a como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposici´ on (art◦ 99.1 del Convenio sobre concesi´on de Patentes Europeas). Venta de fasc´ ıculos: Oficina Espa˜ nola de Patentes y Marcas. C/Panam´ a, 1 – 28036 Madrid

ES 2 150 925 T3 DESCRIPCION Productos alimenticios y piensos que contienen inhibidores de la lipasa. 5

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La invenci´on se refiere al empleo de las biomasas que se forman en la la obtenci´on fermentativa de los inhibidores de la lipasa, en particular la lipstatina, en la preparaci´ on de productos alimenticios, piensos, aditivos de productos alimenticios, aditivos de piensos, piensos complementarios, mezclas previas de medicamentos de forrajes, o medicamentos para administraci´ on oral. Se refiere adem´ as la invenci´on a productos alimenticios, piensos, aditivos de productos alimenticios, aditivos de piensos, piensos complementarios, mezclas previas de medicamentos de forrajes o medicamentos para administraci´ on oral, que contienen una biomasa aparecida en la obtenci´ on fermentativa de los inhibidores de la lipasa, en particular la lipstatina y fibras en rama insolubles en agua, a˜ nadidas, en donde la proporci´ on entre el inhibidor de la lipasa y las fibras en rama es de 0,1 - 100 partes en peso del inhibidor de la lipasa por 2000 a 3000 partes en peso de fibras en rama. La invenci´on se refiere adem´as a alimentos, piensos, aditivos de productos alimenticios, aditivos de piensos, piensos complementarios, mezclas previas de medicamentos de forrajes o medicamentos para administraci´ on oral, que contienen uno o varios inhibidores de las lipasa, en particular de la lipstatina o la tetrahidrolipstatina, y fibras en rama insolubles en agua, a˜ nadidas, en donde a) el/los inhibidor(es) est´ a (est´an) en forma pura y/o en forma de la(s) biomasa(s) aparecida(s) en la obtenci´ on fermentativa del (de los) inhibidor(es) de la lipasa, en particular de la lipstatina, y b) la proporci´ on entre los inhibidores de la lipasa y las fibras en rama es de 0,1-100 partes en peso de inhibidores de la lipasa por 2000 a 3000 partes en peso de fibras en rama. Los animales tienen determinadas preferencias gustativas y prefieren un determinado alimento a otro. Solamente cuando un animal se dirige a un determinado alimento por hambre, tomar´a este alimento cuando el hambre sea lo suficientemente grande. Por el contrario, cuando las condiciones de conducta lo permiten, el animal, en particular el perro y el gato, probar´ a de comer un pienso que le agrade, en caso de que ´este est´e en abundancia y entonces es cuando adquirir´ a un sobrepeso. Esto ocurre naturalmente de forma creciente en los pa´ıses industrializados. Un factor esencial para que un pienso sea aceptado, principalmente en los carn´ıvoros, es un determinado contenido en grasas en el pienso. Una disminuci´ on de las grasas en el pienso conduce, seg´ un demuestra la experiencia, por lo menos en los carn´ıvoros, a problemas de aceptaci´on. Por esta raz´ on esto va ligado p. ej. a dificultades para que los perros adopten el llamada pienso dieta con un contenido reducido de grasa. Los animales necesitan adem´as para sentirse saciados un volumen de alimento adecuado. El alimento ideal para perros o respectivamente gatos, se compone de una determinada mezcla de alb´ umina, hidratos de carbono y grasa, as´ı como materias minerales, trazas de elementos y vitaminas, la cual consigue el peso ideal de los animales. Dado que los animales tienen tendencia, cuando les resulta bueno al paladar, a ingerir alimento por encima de su necesidad natural, aproximadamente un tercio de todos los perros y gatos son hoy en d´ıa adiposos. La adiposidad podr´ıa ser evitada si el perro o el gato recibiera un pienso que tuviera las siguientes propiedades: - debe ser aceptado, es decir, debe gustar al animal,

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- debe tener el volumen necesario y saciar al animal, - la resorci´on de los componentes alimenticios esenciales debe estar garantizada, - no debe causar ning´ un aumento de peso excesivo que conduzca a una adiposidad,

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- los excrementos deben tener forma, de manera que puedan recogerse f´acilmente. Para la resorci´ on de las grasas alimenticias deben escindirse los enlaces ´ester primarios de los triglic´eridos mediante la lipasa del p´ ancreas, en ´acidos grasos libres as´ı como di y monoglic´eridos. Estos compuestos se absorben por el organismo y se aprovechan. Los inhibidores de la lipasa impiden en una parte esencial, la escisi´on de las grasas alimenticias y con ello la resorci´on y aprovechamiento de las grasas alimenticias. Los triglic´eridos se eliminan inalterados. Los inhibidores de la lipasa, como la lipstatina (LST) y an´ alogos de la misma, como la tetrahidrolipstatina (THL) y el ´ester (S)-1-[[(2S,3S)-3-etil-4-oxo-2-oxetanil]metil] octadec´ılico de la N-formil-L-leucina (LOC), que se utilizan en el marco de la presente invenci´on, est´ an descritos en las patentes EP A 129 748, EP A 185 359 y EP A 444 482. Otros inhibidores de la lipasa son la esterastina y sus derivados, como est´an descritos en las patentes US 4 189 438 y US 4 202 824. Ejemplos de las biomasas o tortas de fermentaci´ on aparecidas en la obtenci´ on fermentativa de los inhibidores de la lipasa, como la lipstatina o 2

ES 2 150 925 T3 la esterastina, est´an descritas en las patentes EP A 129 748 y US 4 189 438.

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L´ogicamente la adici´on del inhibidor de la lipasa al pienso se efect´ ua en funci´ on del contenido en grasa del pienso. Mediante la adici´on de 0,1 a 100 mg de inhibidor de la lipasa por gramo de grasa, de preferencia de 1 a 50 mg de inhibidor de la lipasa por gramo de grasa en el pienso, es posible la obtenci´ on de un pienso ideal para perros y gatos. Las substancias inhibidoras de la lipasa pueden a˜ nadirse como aditivos de los piensos como se menciona p. ej. en las normas para piensos de la EG, para el pienso diario, en particular para pienso diario exclusivo. Un pienso de este tipo har´ıa innecesario entonces un pienso dieta convencional para la prevenci´on o terapia de una adiposidad. Podr´ıan a˜ nadirse tambi´en como aditivo a un pienso dieta, el cual contiene p. ej. una dieta pobre en sal. Puede pensarse tambi´en en su empleo en un pienso dieta especial, que se emplee para la prevenci´on o terapia de una adiposidad.

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Las substancias inhibidoras de la lipasa pueden emplearse tambi´en como piensos complementarios o como medicamento para administraci´ on oral mediante la toma en forma de comprimidos, c´apsulas, granulados, polvos, aditivos para el agua de beber como preparado u ´nico o en combinaci´ on o mezclas con otros componentes de piensos complementarios o medicamentos para administraci´on oral.

20

Para emplear los inhibidores de la lipasa en forma de medicamentos para forraje, como est´ an definidos p. ej. en las normas EG, pueden a˜ nadirse los inhibidores de la lipasa tambi´en como mezclas previas de medicamentos para forraje.

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Mediante la adici´on de fibras en rama insolubles en agua se mejora la acci´ on de los inhibidores de la lipasa. Ejemplos de dichas fibras en rama son la celulosa microcristalina, p.ej. AVICEL, salvado de trigo y salvado de avena. El contenido de fibra en rama en el pienso debe estar, despu´es de la adici´ on de la fibra en rama, respecto al contenido en grasa del pienso, en una relaci´ on en peso como m´ınimo de 1/1,5. Un aumento del contenido en fibra en rama es muy posible para lograr otro aumento de la efectividad del inhibidor de la lipasa. Una adici´ on o´ptima de fibras en rama tiene una relaci´ on en peso con la grasa alimenticia de 1:2 ´o 1:3, es decir, el contenido de fibra en rama debe ser aproximadamente del doble al triple del contenido en grasa del pienso. Mediante la adici´ on de fibras en rama, se obtiene adem´ as de aumentar la inhibici´ on de la resorci´ on de las grasas, la consistencia de las heces de los animales. Para todas las finalidades antes citadas, puede emplearse la substancia inhibidora de la lipasa obtenida qu´ımicamente pura o el material obtenido microbiol´ ogicamente, como es el caso p. ej. de la lipstatina. Una preparaci´on particularmente u ´til para ser utilizada ventajosamente en animales, es la utilizaci´ on de la torta de fermentaci´ on (la biomasa) en forma pura, semis´olida o seca. La torta de fermentaci´on contiene junto a la lipstatina tambi´en cantidades valiosas de alb´ umina y grasas. Por su composici´on puede tomarse la torta de fermentaci´on como un producto nutricional natural que contiene un inhibidor de la lipasa. Mediante la directa adici´on de la torta de fermentaci´ on a las grasas pueden ahorrarse otros componentes nutricionales que se a˜ nad´ıan anteriormente, p. ej., alb´ umina en forma de harina de soja y grasas animales o vegetales. La substancia pura o la tarta de fermentaci´ on puede emplearse como sigue: a) Como aditivo para piensos, para el pienso diario o para piensos dieta de animales, en particular perros y gatos, para lograr el peso ideal de los animales o para la prevenci´on y tratamiento de la adiposidad en estos animales.

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b) Como pienso complementario o medicamento para administraci´ on oral o como aditivo para piensos complementarios o medicamentos para administraci´on oral, en combinaci´ on con otros componentes de los piensos complementarios o medicamentos, 55

c) Como aditivo para medicamentos para forraje o mezclas previas para medicamentos para forrajes. Mediante este empleo se logra lo siguiente: a) Un impedimento esencial de la resorci´on de las grasas en el tracto gastrointestinal.

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La resorci´on de las grasas est´a, en funci´ on de la dosis del inhibidor de la lipasa y de las fibras en rama a˜ nadidas, entre el 1 y el 100 % de la cantidad de grasa ingerida con el alimento, de preferencia aproximadamente del 40 al 70 % de la grasa del alimento. 3

ES 2 150 925 T3 b) La prevenci´on y tratamiento de la adiposidad principalmente en perros y gatos, de forma que se mantiene la posibilidad de que los animales queden saciados y no se desv´ıen hacia otros alimentos para satisfacer el hambre restante. 5

10

c) La prevenci´on y tratamiento de la adiposidad mediante la alimentaci´ on con un pienso o un pienso dieta, que contiene las substancias inhibidoras de la lipasa y que el animal come con gusto, es decir, que se mantiene completa la aceptaci´ on, haciendo superfluo un adiestramiento m´ as o menos obligadamente del animal, hacia otro alimento. d) Ahorro de componentes del pienso, de procedencia vegetal y/o animal. Lo anteriormente citado sirve, con las variaciones que sean necesarias, tambi´en para los hombres.

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Adem´as debe citarse que las substancias que inhiben la resorci´ on de las grasas alimenticias en los animales, pueden emplearse para la formaci´ on de una musculatura pobre en grasas de los animales, en particular los animales de engorde. Ejemplo 1

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Comprobaci´ on de la acci´ on de un inhibidor de la lipasa en el ejemplo de la tetrahidrolipstatina (THL) sobre la resorci´on de las grasas del alimento e influencia de la celulosa sobre el efecto de la THL en los perros. Perros hembra de una edad de 7 a 15 a˜ nos y un peso corporal entre 13 y 22 kg se dividen en 2 grupos de 6 animales cada uno. Los animales se alimentan con un pienso est´andar para perros. Los animales tienen libre acceso al agua de bebida. El d´ıa del ensayo los perros reciben una comida de ensayo. Esta tiene como componentes del pienso, 7,5 % de prote´ına, 19 % de hidratos de carbono, 6 % de grasa, 1,6 % de minerales, 45 % de agua y 20 % de substancias de carga. La grasa alimenticia se compone de 58 % de aceite de oliva, mezclado con triole´ına C-14. Las grasas restantes se componen principalmente de ´acidos grasos saturados. El inhibidor de la lipasa THL y eventualmente la celulosa, est´an mezclados en la comida de ensayo en las dosis citadas en las tablas. La resorci´on de la grasa administrada por v´ıa oral con la comida de ensayo se midi´ o a la vista de la radioactividad recuperada en las heces del perro. La diferencia entre la cantidad administrada por v´ıa oral de triole´ına marcada con C-14 y la radioactividad recuperada encontrada en las heces a los 3 d´ıas despu´es de la ingesti´ on de la comida de ensayo, se considera que es la grasa reabsorbida. La cantidad reabsorbida se calcula en tanto por ciento de la cantidad aplicada. Cuanto menos se ha reabsorbido, es decir, cuanto m´as bajo es el tanto por ciento, tanto mayor es la actividad del inhibidor de la lipasa.

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En la tabla 1 est´ an resumidos los resultados. TABLA 1 45

Acci´ on de la THL sola y de la THL + celulosa sobre la resorci´ on de las grasas en perros Control

50

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Comida de prueba Cantidad de grasa total en g/comida de ensayo Celulosa en g/comida de ensayo Dosis de THL en mg/comida de ensayo en mg/kg Kpgw. Resorci´on de la trioleina en % de la dosis aplicada

Grupo 1

Grupo 2

420 26

340 26

420 26

340 26

420 26

80

0

80

0

80

0 0

20 1,5

20 1,5

50 4

50 4

100

70

48

63

28

60

4

ES 2 150 925 T3 En la tabla 2 se compararon las concentraciones en plasma sangu´ıneo, de glicerina total en perros cuya comida conten´ıa 50 mg de THL + 80 g de celulosa, con la del control sin THL, pero con celulosa. TABLA 2 5

Comparaci´ on de las concentraciones en plasma sangu´ıneo despu´es de una comida de ensayo con 50 mg de THL y 80 g de celulosa y una comida de ensayo con 80 g de celulosa sin THL Total plasma-glicerina (mmoles/l ± SEM)

10

Momento de la medici´on

15

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25

30

35

Antes de la aplicaci´on (valor de partida) 3 h. desp. de la aplicaci´on 7 h. desp. de la aplicaci´on

Control 80 g celulosa)

Inhibidor de la lipasa (50 mg THL + 80 g celulosa)

0,6 ± 0,05

0,7 ± 0,07

1,3 ± 0,17 0,8 ± 0,07

0,5 ±0,02 0,9 ±0,13

Discusi´ on de los resultados De la tabla 1 se deduce que el inhibidor de la lipasa THL ya conduce, como adici´ on u ´ nica a la comida de ensayo, a una reducci´ on de la resorci´ on de la grasa contenida en el alimento, seg´ un la dosis de un 30 a un 37 %. La actividad del inhibidor de la lipasa aumenta considerablemente cuando a la comida de ensayo se a˜ nade celulosa juntamente con el inhibidor de la lipasa. En el ejemplo, fue posible, despu´es de la adici´ on de celulosa, un aumento del 30-37 % sobre un 52-70 % de la inhibici´ on de la resorci´ on de la grasa alimenticia marcada radioactivamente aplicada. Los resultados resumidos en la tabla 1 se confirman mediante la medici´ on del nivel de glicerina en plasma en los perros, los cuales han recibido una comida de ensayo con la adici´ on de 80 g de celulosa con o sin 50 mg de THL. 3 horas despu´es de la ingesti´on de la comida de ensayo, las concentraciones de glicerina en el plasma de los perros sin THL aumentaron considerablemente, lo cual implic´o una resorci´ on de la grasa alimenticia aplicada, mientras que en el grupo con THL no hubo ning´ un aumento, lo cual confirm´ o la inhibici´ on de la resorci´ on de las grasas alimenticias. El d´ebil aumento de la resorci´on 7 horas despu´es de la comida debe verse en dependencia con la resorci´on atenuada del 28 %. Las heces del perro fueron en aquellos animales que recibieron la celulosa sola o en combinaci´on con THL, s´ olidas y con forma, mientras que en el caso de los animales, que recibieron el THL sin celulosa fueron m´ as bien pastosas.

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Ejemplo 2 Comprobaci´ on de la acci´ on de un inhibidor de la lipasa en el ejemplo de la lipstatina (LST, qu´ımicamente pura o como componente de una torta de fermentaci´ on), sobre la resorci´ on de las grasas del alimento en ratones y perros, e influencia de la celulosa sobre la acci´on. El ejemplo se compone de 2 partes. En la parte a) se describe un ensayo con ratones, cuyos resultados se confirman con un ensayo con perros (parte b). En esta parte del ensayo, se investiga la influencia de la celulosa sobre la acci´on del inhibidor de la lipasa.

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En ambas partes del ensayo, se emplea como inhibidor de la lipasa, la lipstatina obtenida microbiol´ ogicamente (LST). La LST se compara como substancia qu´ımicamente pura con la LST como componente de una torta de fermentaci´ on obtenida seg´ un el ejemplo 4 de la patente EP 129 748. El contenido en LST de la torta se determin´o antes del principio del ensayo con los m´etodos anal´ıticos habituales siendo de 4 g de LST por kg de torta de fermentaci´ on reci´en obtenida. Un an´ alisis Weender para la determinaci´ on del contenido en producto alimenticio de los piensos dio para la torta de fermentaci´ on los siguientes valores:

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5

ES 2 150 925 T3

5

10

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Contenido de substancia seca de la torta de fermentaci´ on: Contenido de substancia seca por kg: Cenizas en bruto Prote´ına en bruto Fibra en rama Grasa en bruto Substancia extra´ıda exenta de N

192 g/kg 31,4 g 251,6 g 9,1 g 499,4 g 208,5 g

a) Ensayo con ratones: Comparaci´ on de la LST qu´ımicamente pura con la LST como componente de una torta de fermentaci´ on. La LST pura o respectivamente la torta de fermentaci´ on seca, se suspendi´o en un ensayo farmacol´ogico, en una preparaci´ on habitual de 5 % de goma ar´ abiga / 5 % de polvo de leche, y se aplic´ o como toma u ´ nica en una cantidad de 10 ml/kg de rat´ on por v´ıa oral en animales mantenidos previamente en ayunas durante 24 horas, inmediatamente en conexi´ on con una comida de ensayo l´ıquida. La comida de ensayo conten´ıa 2,5 % de almid´ on, 24 % de glucosa, 12 % de leche en polvo y 7,6 % de aceite de oliva marcado con triole´ına C-14. La cantidad en LST pura o respectivamente de torta, se midi´ o de forma que las dosis que figuran en la tabla 3 quedaran aseguradas. A continuaci´ on, los ratones recibieron un pienso est´andar corriente. El c´alculo de la grasa alimenticia reabsorbida se efectu´o como se ha descrito en el ejemplo 1.

25

Los resultados del ensayo est´ an registrados en la tabla 3, en la cual la dosis de LST est´a calculada en mg/kg de peso corporal. Los valores se calculan como valores medios a partir de las mediciones en 3 ratones cada vez por ensayo. TABLA 3

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Acci´ on de la LST pura y la LST de una torta de fermentaci´ on sobre la resorci´ on de la grasa en 3 ratones por dosis Resorci´on de la triole´ına en % de dosis aplicada

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Dosis de LST en mg/kg

LST pura

LST de la torta de fermentaci´ on

2,7 5,0 15 18,0 50,0

nd 69 52 nd 41

83 nd nd 54 nd

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nd = sin determinar. 45

50

b) Ensayo con perros Este ensayo se efectu´o de manera an´ aloga al ejemplo 1. Como inhibidor de la lipasa se utiliz´o la LST de la torta de fermentaci´ on descrita en la parte a) de este ejemplo. Esta torta se a˜ nadi´ o y se mezcl´o a la comida de ensayo para perros con la adici´ on de 80 g de celulosa por comida de ensayo, como se ha descrito en el ejemplo 1. Los resultados est´an registrados en la tabla 4.

55

60

6

ES 2 150 925 T3 TABLA 4 Acci´ on de la LST contenida en una torta de fermentaci´ on, sola o en combinaci´ on con celulosa, sobre la resorci´ on de la grasa en perros 5

Dosis de LST 10

N´ umero de animales

mg/kg de peso corporal

mg/comida

N

LST sola

LST + celulosa

1,9

20

2

nd

94

4,3

50

4

86

68

13,9

150

4

69

38

41,0

460

4

33

14

240

95

15

20

ID50 en mg/comida 25

30

Resorci´on de la triole´ına en % de la cantidad aplicada por v´ıa oral

Las diferencias est´an estad´ısticamente aseguradas mediante el ensayo “t” de pares de comparaci´ on, con p < 0,05. Los resultados del ensayo con perros (b) confirman en primer lugar los resultados obtenidos con ratones en el ensayo a), a saber, que el LST tambi´en cuando est´a contenido en una torta de fermentaci´ on, act´ ua como un inhibidor muy activo de la lipasa. Esto fue sorprendente puesto que hab´ıa que tener en cuenta que el inhibidor, no se libera de las c´elulas en las cuales se forma, como es el caso en otros productos naturales, como las vitaminas. El costoso y caro aislamiento del LST de la torta de fermentaci´ on puede tambi´en ahorrarse sin que tenga que contarse con una p´erdida de efectividad. La potencia del inhibidor de la lipasa aumenta en un factor 3 en presencia de celulosa como ya se ha descrito en el ejemplo 1, y podr´ıa ilustrarse mediante los resultados de la parte a) del presente ejemplo 2.

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Ejemplo 3

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Comprobaci´ on de la acci´ on de un inhibidor de la lipasa en el ejemplo del derivado de la lipstatina LOC definido m´ as arriba, sobre la resorci´ on de las grasas del alimento cuando se aplica una vez o varias veces, en ratones. En el ensayo se emplean por dosis, 3 ratones albinos cada vez, con un peso de 25 g.

45

Los ratones recibieron durante varios d´ıas una llamada dieta de grasas, cuyo contenido en grasa estaba ajustada de forma que los ratones recibieran 23,4 g de grasa por kg de peso corporal, por d´ıa. Los ratones fueron alimentados 8 d´ıas con este pienso. Del d´ıa 3 al 6 del ensayo, se a˜ nadi´ o y mezcl´o a este pienso, triole´ına marcada con C-14, y LOC en una dosis de 50 mg/kg de peso corporal. Las heces de los ratones se recogieron en intervalos de 24 horas desde el d´ıa 4 hasta el 8 del ensayo, y se analizaron siguiendo las normas citadas en el ejemplo 1.

50

Los animales de control recibieron cada vez la comida de ensayo sin la substancia activa LOC. La resorci´on de la grasa administrada por v´ıa oral se analiz´o como en los ejemplos 1 y 2. 55

Los resultados del ensayo figuran anotados en la tabla 5:

60

7

ES 2 150 925 T3 TABLA 5 Acci´ on del LOC despu´es de su aplicaci´ on durante 1 d´ıa o respectivamente 4 d´ıas, sobre la resorci´ on de las grasas en ratones 5

Dosis de LOC

Resorci´on de la triole´ına en % de la cantidad dada por v´ıa oral (± SDM)

10

Control (sin LOC) 50 mg/kg peso corp. 15

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1er d´ıa

2◦ d´ıa

100 26±4

100 26±3

De la tabla se deduce que tambi´en despu´es de varios d´ıas de medicaci´on el efecto de un inhibidor de la lipasa permanece inalterable, es decir, que la inhibici´on de la resorci´ on de la grasa alimenticia permanece sin disminuir. Ejemplo 4 Dieta de mantenimiento con una prote´ına y contenido en sal com´ un reducido para perros (la cantidad corresponde a una raci´ on diaria para un perro de 10 kg de peso): 200 g 10 g 100 g 60 g 4g 2,5 g

25

30

50 a 100 35

40

H´ıgado de pollo o carne picada Mantequilla Arroz crudo Salvado de trigo Fosfato dic´ alcico Mezcla de vitaminas en la cual la vitamina A y E deben estar contenidas en cantidad suficiente y en forma no esterificada. Torta de fermentaci´ on conteniendo la lipstatina (4 g de lipstatina/kg de torta)

La carne se cuece en la mantequilla y se mezcla con el arroz (hervido con poca sal). A continuaci´ on, se a˜ nade la torta de fermentaci´ on que contiene la lipstatina, la fibra en rama, la mezcla de minerales y vitaminas, y se envasa de forma adecuada, p. ej. en una lata de conservas de 500 g. En caso de que no se desee una dieta pobre en sal, puede aumentarse la cantidad de carne y disminuirse correspondientemente la cantidad de arroz. Ejemplo 5

45

Mezcla simple utilizando la torta de fermentaci´ on que contiene la lipstatina como pienso complementario: 800 g

50

200 g 80 g 100 g

55

pienso en lata para perros (75 % de agua, 8-13 % de prote´ına, 4-7 % de grasa) pienso en dados para perros (15-20 % de agua, 19-22 % de prote´ına, 5-15 % de grasa) salvado de trigo tortas de fermentaci´ on conteniendo la lipstatina (4 g de lipstatina/kg de torta)

La torta de fermentaci´ on de la lipstatina se incorpora a la comida junto con el salvado de trigo, de forma que se obtenga una papilla. 60

8

ES 2 150 925 T3 La cantidad corresponde a una raci´on diaria para un perro de 20 kg de peso, la cual se dar´a convenientemente en 2 porciones.

5

Se garantiza un suficiente aporte de vitamina A y E, administrando las dosis adecuadas 3 horas antes o despu´es de la comida.

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15

20

25

30

35

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45

50

55

60

9

ES 2 150 925 T3 REIVINDICACIONES

5

10

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1. Empleo de las biomasas que se forman en la obtenci´on fermentativa de los inhibidores de la lipasa, en particular de la lipstatina, en la preparaci´ on de productos alimenticios, piensos, aditivos para productos alimenticios, aditivos para piensos, piensos complementarios, mezclas previas de medicamentos para forrajes o medicamentos para administraci´ on oral. 2. Productos alimenticios, piensos, aditivos para productos alimenticios, aditivos para piensos, piensos complementarios, mezclas previas de medicamentos para forrajes o medicamentos para administraci´ on oral, que contienen una biomasa que se forma en la obtenci´ on fermentativa de inhibidores de la lipasa, en particular la lipstatina, y fibras en rama insolubles en agua, a˜ nadidas, en donde la proporci´ on entre el inhibidor de la lipasa y las fibras en rama, es de 0,1 a 100 partes en peso de inhibidor de la lipasa por 2000 a 3000 partes en peso de fibras en rama. 3. Productos alimenticios, piensos, aditivos para productos alimenticios, aditivos para piensos, piensos complementarios, mezclas previas de medicamentos para forrajes o medicamentos para administraci´ on oral, que contienen uno o varios inhibidores de la lipasa, en particular la lipstatina o la tetrahidrolipstatina, y fibras en rama insolubles en agua, a˜ nadidas, en donde a) el/los inhibidor(es) est´ a(n) en forma pura y/o en forma de biomasa(s) formada(s) en la obtenci´ on fermentativa del (de los) inhibidor(es) de la lipasa, en particular de la lipstatina, y b) la proporci´ on entre el inhibidor de la lipasa y la fibra en rama es de 0,1 a 100 partes en peso de inhibidor de la lipasa por 2000 a 3000 partes en peso de fibras en rama.

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NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposici´ on Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicaci´ on del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a Espa˜ na y solicitadas antes del 7-10-1992, no producir´ an ning´ un efecto en Espa˜ na en la medida en que confieran protecci´ on a productos qu´ımicos y farmac´euticos como tales. Esta informaci´ on no prejuzga que la patente est´e o no inclu´ıda en la mencionada reserva.

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