CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y CONTROL DE LA CALIDAD
AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
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ANTECEDENTES
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ENERO 2013 La autoridad de Seguridad Alimentaria de Irlanda (FSAI) detecta ADN de equino
Las hamburguesas fueron producidas en Irlanda y Reino Unido
Ministerio de Agricultura Irlandés-FSAI implican a Polonia como el origen La OCU publica un estudio sobre 20 hamburguesas en el que se indica que se ha encontrado un 10% de muestras con carne de caballo AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
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ANTECEDENTES
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FEBRERO 2013 Reino Unido confirma la presencia de carne de caballo en salsa boloñesa y lasaña, y Suecia retira productos del mercado Se responsabiliza a la compañía francesa COMIGEL quien delega responsabilidades sobre SPANGHERO, la cual compró carne procedente de Rumanía Francia declara que la carne salió al mercado desde Luxemburgo La Comisión Europea señala que se trata de una cuestión de etiquetado
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ANTECEDENTES
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¿Dónde estoy?
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ANTECEDENTES
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¿Dónde estoy? 13-02-13 Reunión ministerial informal con los Estados Miembros AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
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PLAN DE CONTROL 19-02-13
CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y CONTROL DE LA CALIDAD
Recomendación para realizar un plan de control coordinado (EC/99/2013)
FENILBUTAZONA
Establecimientos donde se manipula carne de caballo AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
ANALISIS ADN
Punto de venta y almacenes Tlf. 91 822 47 00
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PLAN DE CONTROL 19-02-13
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Recomendación para realizar un plan de control coordinado (EC/99/2013)
2250 MUESTRAS
150 100 50 10
1 AL 31 DE MARZO
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150 muestras
Ministerio de Agricultura, Alimentación y Media Ambiente
100
Ministerio de Sanidad, Servicios Sociales e Igualdad
50
Presencia de ADN de caballo superior al 1% AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
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MUESTRAS
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MUESTREO
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Establecimientos concretos a cada CCAA Marcas genéricas: Cantabria, Murcia y La Rioja Productos Halal: Ceuta y Melilla
51 marcas comerciales AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
% muestras
34 establecimientos 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Tlf. 91 822 47 00
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PATRONES
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Reacciones cruzadas 100%
Secuenciación
1%
“Cut off”
0.1%
Límite de detección
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ANALISIS CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y CONTROL DE LA CALIDAD
Homogeneización de muestra
Extracción de ADN genómico
Visualización del ADN
Cuantificación
PCR AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
PCR
PCR-RT Tlf. 91 822 47 00
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SCREENING
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PCR Vacuno
PCR Equino 438 pb cytb mt
257 pb 12S mt
Caballo
-
Vacuno
+
No se detecta
Caballo
+
Vacuno
+
PCR RT
Caballo
-
Vacuno
-
???
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PCR REAL TIME CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y CONTROL DE LA CALIDAD
Permite determinar la cantidad de fluoróforos, a partir de curvas patrón 5’
3’
3’ 3’ 5’
ADN
100%
mediante
1%
el
uso
de
0.1%
5’ 5’ 3’
3’
5’
5’
3’
El resultado no permite determinar de cuanto tejido real proviene
CABALLO
89 pb ND4 mt AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
MAMÍFERO 74 pb 16S mt
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CUT-OFF CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y CONTROL DE LA CALIDAD
1
2
3
4
5
6 7
8
9 10 11 12
A
Patrón 1%
B
Dilución 1/10
C
∆Ct ~3.3
Muestra
D E F
Cut-off= Ct-2SDCt
G H
Ct< Cut-off
Mamífero
+
>1%
Ct 40.00
Mamífero
+
No se detecta
~3.3
1% AVDA. CANTABRIA, 52 28042 MADRID
CERDO No declarado 80%
20%
N= 25
Se detecta >1% Tlf. 91 822 47 00
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