Curso 2011 – 2012. Grupo 16

Paloma Fernández Freire Rocío Gómez Lencero Unidad Docente de Biología Celular

Práctica

Fecha

1

10 noviembre*

2

28, 29, 30 noviembre

Mitosis

3

12, 13, 14 diciembre

Meiosis

4

7, 8, 9 febrero

5

14, 15, 16 febrero

Epitelios 1

6

21, 22, 23 febrero

Epitelios 2

7

13, 14, 15 marzo

Tejido óseo y osificación

8

26, 27, 28 marzo

Sangre y tejido linfoide

9

10, 11, 12 abril

Tejido muscular

10

16, 17, 18 abril

Tejido nervioso

11

23, 24, 25 abril

Histología Vegetal: raíz, tallo y hoja

12

7, 8, 9 mayo

*

TEMA Metodología

Gametogénesis

Repaso y examen

La primera práctica se realizará en el aula 111 del edificio de Biología para todos los grupos de 11:30 a 13:30 h.

NORMATIVA Y EVALUACIÓN DE LAS PRÁCTICAS 1. La asistencia a las sesiones prácticas es obligatoria. No es necesario aportar material ni bata de laboratorio. 2. Cada alumno quedará encuadrado en uno de los tres grupos de prácticas en que se divide el grupo de teoría. Los cambios de grupo deberán ser aprobados previamente por el profesor. 3. Se realizarán 12 sesiones prácticas cuya duración será de 2 horas cada una. Cada alumno asistirá al grupo al cual esté asignado. El horario de las prácticas para el Grupo 16 será de 9:30 a 11:30 horas. 4. Las sesiones de prácticas consistirán fundamentalmente en la observación microscópica de preparaciones cito/histológicas. 5. Habrá un examen de prácticas al final del curso que consistirá en la descripción pormenorizada de cuatro muestras de entre las estudiadas a los largo de las sesiones prácticas. Cada muestra bien descrita tendrá un valor de 2,5 puntos en ele examen. 6. Será necesario superar las prácticas para poder aprobar la asignatura. La nota de prácticas computará un 20% de la nota global de la asignatura.

Según la Normativa de Seguridad de la Universidad Autónoma de Madrid de septiembre de 2008 en la cual se indican la organización, normas y recomendaciones de seguridad e higiene para el trabajo experimental, el profesor de prácticas les indicará al principio de la primera sesión dicha normativa. En este sentido el profesor les informará sobre los riesgos y peligrosidad de las sustancias y experimentos a realizar durante las diferentes sesiones, los medios de autoprotección disponibles en el laboratorio (campana extractora, lavaojos y extintores) y aledaños (bocas de incendio y pulsadores de emergencia), y

los que debe aportar el alumno, los procedimientos para la eliminación de residuos, los teléfonos de contacto para casos de emergencia, la localización y composición del botiquín, y las vías de evacuación para casos de emergencia. Los alumnos deberán asistir a las prácticas provistos de bata, gafas de seguridad homologadas con protección lateral de los ojos, y guantes de látex según indicación previa del profesor. La bata debe de permanecer en todo momento cerrada. Los alumnos con pelo largo deberán tenerlo recogido en todo momento. En el laboratorio de prácticas está prohibido fumar, comer y beber alimentos. Cualquier percance se informará inmediatamente al profesor presente en la sala de prácticas.

1.- Observación de diapositivas y vídeos que muestran los distintos tipos de microscopía utilizados en Citología e Histología.

1.- Estructura del microscopio de prácticas y manejo del mismo.

Oculares Anillo de ajuste de dioptrías

Estativo Interruptor

Revolver

Potenciómetro

Objetivos

Tornillo macrométrico

Platina Tornillo micrométrico

Condensador

Mandos control de platina

• Oculares: Proporcionan un aumento fijo de 10x • Anillo de ajuste de dioptrías: Permiten ajustar el microscopio para aquellas personas que necesitan usar gafas. En caso contrario, la marca debe de estar en la posición 0. • Revolver: Es la estructura en la cual se anclan los objetivos y que desplazaremos para utilizar el objetivo deseado. • Objetivos: Juego de objetivos del microscopio. Nos proporcionan unos aumentos variables. En los microscopios de prácticas tenemos objetivos de 4x, 10x, 40x y 100x (¡¡necesita aceite!!) • Platina: Es la región en la cual se coloca la preparación para ser observada. • Condensador: Estructura que permite concentrar la luz para poder observar la muestra. Tiene posiciones para campo claro (0), contraste de fases (10, 40) y campo oscuro (B). • Interruptor: Para encender la luz del microscopio. • Estativo: Estructura que constituye el armazón del microscopio. • Tornillo macrométrico: Primer tornillo de enfoque. Permite hacer un primer enfoque de la muestra. • Tornillo micrométrico: Segundo tornillo de enfoque. Permite reajustar el enfoque durante la observación. • Mandos de control de la platina: Permiten el desplazamiento de la muestra. • Potenciómetro: Permite regular la intensidad de luz que atraviesa el preparado.

2.-Observación mediante microscopía de campo claro, contraste de fase y campo oscuro de aplastados de meristemos radiculares de ajo (Allium sativum) (2n _ 16) fijados con etanol:ácido acético 3:1, teñidos con la técnica citoquímica de Feulgen para demostrar ADN.

Aplastado de células meristemáticas de Allium sativum (2n = 16) Tinción : reacción de Feulgen

Interfases

Profase

Metafase

Anafase

Telofase

1.- Visualización de las distintas etapas de la espermatogénesis en aplastados de testículo de ortóptero.

Primera división meiótica

Profase I

Leptotena

Cigotena

Paquitena

Diplotena

Diacinesis

Prometafase I

Metafase I

Anafase I

Telofase I

Segunda división meiótica Intercinesis

Profase II

Prometafase II

Metafase II

Anafase II

Telofase II

Espermátidas tempranas

Espermátidas maduras

Espermatozoides

Esquema representativo de la meiosis de un individuo macho 2n=4. Los cromosomas de una pareja de homólogos aparecen en verde y rojo, y los cromosomas de otra pareja de homólogos en azul y amarillo. Todos los cromosomas son telocéntricos. Nota: Las espermátidas medias y tardías que aparecen en el esquema no corresponden con la espermiogénesis de ortópteros.

Observación de aplastados permanentes de testículos de saltamontes de la especie Locusta migratoria (2n=11 + XO) fijados en metanol:acético 3:1 y teñidos con la técnica de Feulgen.

Prepaquitene (Leptotene o Cigotene)

Paquitene

Diplotene

Diacinesis

1.- Visualización del proceso de espermatogénesis en cortes de testículo humano y de ratón, teñidos con tricrómico de Masson.

TESTÍCULO

EPITELIO SEMINÍFERO

Arterias Vena Conducto deferente Cabeza del

dimo

bulos feros

nica albugínea Cola del dimo TÚBULOS SEMINÍFERO

Espermatogonias

Espermatocito

Lumen del bulo fero

Fibras de geno

Núcleos de los espermatozoides

Epitelio seminífero

cleos de los fibroblastos

Tejido conjuntivo denso ( nica nea)

Flagelos de los espermatozoides

lulas de Leydig

2.- Visualización del proceso de oogénesis en cortes de ovario de rata, teñidos con hematoxilinaeosina.

Ovario n de los

Folículo primordial

Folículo primario

culos

Folículo primario multilaminar

Folículo secundario

Folículo maduro o de Graaf

1.- Observación los diferentes tipos de epitelios presentes en el riñón. Se utilizarán cortes de riñón de conejo y ratón teñidos con tricrómico de Masson .

rulo

Epitelios de la nefrona

Túbulo contorneado proximal

Túbulo contorneado distal Asa de Henle

2.- Observación del epitelio cilíndrico simple con microvellosidades (ribete en cepillo) en el epitelio de revestimiento del intestino delgado. Se usarán cortes de parafina de intestino delgado de ratón teñidos con tricrómico de Masson.

Epitelio cilíndrico simple con microvellosidades

lula caliciforme

Glándula tiroides

Tráquea

Esófago

Mucosa

Muscular de la mucosa

Epitelio

Luz Epitelio

Submucosa

Adventicia Luz

Túnica muscular

Cartílago

1.- Observación del epitelio pseudoestratificado cilíndrico ciliado en la tráquea,. Se emplearán cortes de tráquea y esófago de conejo teñidos con tricrómico de Masson

Músculo liso

Epitelio

Adventicia Cartílago hialino

Cilios

lula caliciforme

Célula caliciforme Célula epitelial

Célula basal

Conjuntivo subyacente

2.- Observación del epitelio plano estratificado queratinizado en el esófago. Se emplearán cortes de tráquea y esófago de conejo teñidos con tricrómico de Masson

Epitelio

Luz

Mucosa

Submucosa

Muscular

Estrato córneo Estrato granuloso

Estrato espinoso

Estrato basal

Serosa

3.- Análisis de acinos serosos, mucosos y mixtos en cortes de glándulas salivales teñidos con hematoxilina/eosina. Visualización de glándulas endocrinas de tipo folicular en cortes de tiroides teñidos con hematoxilina/eosina.

Folículo tiroideo

1.- Visualización del proceso de osificación endocondral en la placa epifisaria. Se emplearán cortes de tibia de rata teñidos con tricrómico de Masson.

EPÍFISIS

METÁFISIS (PLACA EPIFISARIA)

METÁFISIS (PLACA EPIFISARIA)

Hueso largo adulto

Osteoclasto

Osteocitos

Osteoblasto s

TIPOS CELULARES

EPÍFISIS

2.- Visualización del proceso de osificación endocondral en la placa epifisaria. Se emplearán cortes de tibia de rata teñidos con tricrómico de Masson.

Placa epifisaria

Placa epifisaria Cartílago hialino en reposo

Cartílago hialino en proliferación (columnar)

Cartílago hipertrófico Cartílago calcificado

Espículas óseas (hueso esponjoso)

2.- Observación de la estructura del hueso maduro en cortes obtenidos por la técnica de devastación.

Periostio

Hueso esponjoso Cavidad medular Hueso compacto

Osteonas

Capilar Vénula Laminillas

Vena Arteria

Trabéculas de hueso esponjoso

Canal central Endostio

Canal perforante

1.- Observación de los elementos formes de la sangre en frotis de sangre humana y de pollo, fijadas en metanol y coloreadas según la técnica de May-Grünwald-Giemsa.

Elementos formes de la sangre

5 4

1

1. Eritrocitos

3

4

2. Neutrófilo 6 7

2

6

3. Basófilo

5. Plaquetas

7. Eosinófilo

6. Linfocito

4. Monocito

2.- Visualización de tejido linfoide en cortes de timo teñidos con hematoxilina/eosina.

Cápsula de tejido conjuntivo

Linfocitos

Célula reticular

Zona cortical Zona medular Corpúsculo de Hassall

Corpúsculo de Hassall

Corteza

Médula

Corpúsculo de Hassall

Fibra Núcleo

Miofibrillas Núcleos Sarcómero

Disco intercalar

Fibra

Músculo cardíaco Músculo esquelético

Núcleo Fibras Músculo liso

1.- Observación de tejido muscular liso en la túnica muscular del intestino delgado.

Corte longitudinal

Capa circular interna

Capa longitudinal externa

Corte transversal

2.- Observación de músculo estriado esquelético en cortes de lengua de hamster fijada en Bouin acuoso e incluida en parafina, y teñidos con tricrómico de Masson.

Epitelio

Capa músculo estriado

Células musculares estriadas esqueléticas Corte longitudinal

Corte transversal

Fibras musculares en corte transversal Núcleos Núcleos

Fibra muscular en corte longitudinal

Fibras musculares

Capas del epitelio plano estratificado queratinizado de la lengua

Papila filiforme Estrato córneo

Estrato lúcido Estrato granuloso

Estrato espinoso

Estrato basal o germinativo

Fibra muscular cortada longitudinalmente Fibra muscular cortada transversalmente

Nervios

Arteria

Tejido conjuntivo

3.- Análisis de músculo cardíaco en cortes corazón.

Corte longitudinal

Corte transversal

Núcleo

Fibra cardíaca

Discos intercalares

1.- Observación de cortes de cerebelo de rata y humano, fijados con Bouin e incluidos en parafina, teñidos con hematoxilina/eosina. 2.- Observación de cortes de cerebelo de humano, fijados con Bouin e incluidos en parafina, teñidos con plata.

Corte transversal de

Corte transversal de

Pliegues cerebelosos

falo humano

falo de rata

Piamadre Vaso sanguíneo

Capa molecular Células de Purkinje

Capa granular

Sustancia blanca

Capa granular

Células de Purkinje

Capa molecular

Sustancia blanca

Capa molecular Dendrita Soma Núcleo

Axón

Células de Purkinje Capa granular

Sustancia gris

2.-

Visualización de secciones transversales de médula espinal de ratón teñidas con hematoxilina/eosina. Asímismo se observarán cortes transversales semifinos de médula espinal de rana, fijada en glutaraldehído, contrastada mediante osmio-parafenilendiamina y posteriormente incluida en Epón.

Región dorsal Asta posterior

Sustancia gris

Sustancia blanca

Canal del epéndimo

Cuerpos de motoneuronas

Asta anterior

Piamadre

Región ventral

3.- Observación de cortes de nervio periférico teñidos con hematoxilina/eosina.

Nervio

rico

1.- Observación de secciones transversales de raíz de lirio (Iris germanica, monocotiledónea) teñidas con azul de toluidina.

Epidermis Exodermis Parénquima cortical

Cilindro cortical

Endodermis

Floema

Endodermis

Periciclo

Parénquima medular

Cilindro medular

Xilema

Floema

Célula de paso

Periciclo

Xilema

2.- Observación de secciones transversales de tallo de lirio (Iris germanica, monocotiledónea) teñidas con azul de toluidina.

Epidermis Parénquima clorofílico Colénquima

Parénquima intersticial Haz vascular

Epidermis

Parénquima clorofílico Campo de poros primarios

Haz vascular

Floema Colénquima

Parénquima intersticial

Xilema

3.- Observación de cortes transversales de hoja de adelfa (Nerium oleander, dicotiledónea) teñidos con safranina o azul de toluidina.

Haz

Envés

Nervio central

Epidermis

Xilema

Epidermis

Parénquima lagunar

Haces vasculares

Criptas estomáticas

Cutícula

Estoma

100 μm

Parénquima

Floema

Parénquima en empalizada

Tricomas