[UK]

MLB 2 Suspension medium for red cells [REF]

805 200

50 ml

[REF]

805 205

10x10 ml

[PRES] Preservative: < 0.1 % NaN3 [IVD] Diagnostic reagent for in vitro use only To be used by trained laboratory personnel only. Symbols are used according to regulation EN 980. Symbols not contained in regulation EN 980 are described. Test purpose In 1964 Mollison and Polley discovered that by reducing ion strength with a Low Ionic Strength Solution (LISS) antigen-antibody-reaction is considerably accelerated on blood group serological tests. The original formulation has been modified in MLB 2 so that an improved sensitivity is achieved. MLB 2 is a modified LISS solution used as suspension medium for red cells and contributing to reaction time reduction while at the same time increasing reaction strength. In antibody determination with coombsreactive antisera, MLB 2 can be used in addition to the incubation medium. Test principle MLB 2 reduces the incubation time in an indirect antiglobulin-test from 60 to 10 minutes while at the same time MLB 2 increases reaction sensitivity. Reagent MLB 2 is a modified LISS solution. Material needed but not supplied Tube test • Pipettes • Isotonic saline solution • Anti-Human-Globulin (e.g. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804 115 / 804 120 / 804 130) • Biotestcell®-P [REF] 816 028, Biotestcell®-P1, P2 [REF] 816 012, Biotestcell®-P3([REF] 816 017, Biotestcell®-I8 [REF] 816 020, Biotestcell®-I11 [REF] 816 021 • Glass tubes • Laboratory centrifuge Sample material Fresh EDTA blood or whole blood. The samples should be stored at 2...8°C. Test procedure Tube test A. Compatibility test 1. Wash 0.5 ml donor blood (from cross testing tubes or tube segment of red cell bag) 1 time with isotonic saline solution. 2. Suspend the washed red cells 3-5 % in isotonic saline solution. 3. In a properly marked tube mix 1 drop of red cell suspension and 2 drops recipient serum and 2 drops MLB 2. 4. Incubate for 10 minutes at 37°C. 5. Centrifuge for 2 min. at 150 - 200 x g or for 20 seconds at 800 - 1000 x g. 6. Gently dislodge the cell button and observe for agglutination or hemolysis. 7. Wash red cells 3 times in isotonic saline solution. Completely decant supernatant. 8. Add 2 drops Anti-Human-Globulin and mix. 9. Centrifuge for 2 minutes at 150 - 200 x g or 20 seconds at 800 - 1000 x g. 10. Gently dislodge the cell button and observe for agglutination.

C. Antigen determination The coombsreactive antisera (e.g. Anti-Fya) are tested for specificity in a LISS antiglobulin-test (MLB 2) and proved to be reactive. The LISS antiglobulin-test reduces the time needed for antigen determination. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Wash red cells to be tested 1 time in isotonic saline solution. Suspend washed red cells 3–5 % in isotonic saline solution In a properly marked tube mix 1 drop reagent, 1 drop red cell suspension and 2 drops MLB 2. Incubate for 10 minutes at 37°C. Wash red cells 3 times in isotonic saline solution. Completely decant supernatant. Add 2 drops Anti-Human-Globulin and mix. Centrifuge for 2 minutes at 150 – 200 x g or 20 seconds at 800 - 1000 x g. Gently dislodge the cell button and observe for agglutination.

A positive and a negative control should be performed in parallel. Evaluation of the reaction strength is carried out according to the Technical Manual (1): Reaction strength Agglutination 4+ One solid agglutinate. 3+ Several large agglutinates. 2+ Medium size agglutinates, clear background. 1+ Small agglutinates, turbid background. +/Very small agglutinates, turbid background. No agglutination Solidscreen™ II A. semi-automatic Preparation of a 1% cell suspension for antibody detection or antibody identification: 1 ml 3% test red cells + 2 ml MLB 2. Please refer to detailed instructions for use for ◄ Solidscreen™ II Strip. B. TANGO® optimo and TANGO infinity® Please refer to the instructions for use of the fully automated blood typing system TANGO® optimo and TANGO infinity®. Due to its construction, only the 50 ml packaging size of MLB 2 can be used with TANGO® optimo and TANGO infinity®. Performance characteristics and limitations of the method • The intended use of the antiglobulin cross matching using Anti-HumanGlobulin SolidscreenTM II ◄ is the detection of incompatibilities due to IgG antibodies, it is not intended for the detection of AB0 incompatibilities. • ◄ Please refer for further limitations to the instructions of use for Solidscreen™ II Strip, Biotestcell® or the respective antisera. In case of questionable results of unknown origin our Bio-Rad-Service will assist you (phone: +49-6103-3130-611). Shelf life After opening the vial the product can be stored under proper storage conditions (2...8°C) until the expiry date. The expiry date is printed on the label. Do not use damaged vials.

Results Positive cross match = Agglutination and/or hemolysis = Sensitization of donor red cells by antibodies of recipient serum.

Warnings and precautions • Turbidity or other visible changes may indicate a bacterial contamination. In this case the reagent must be discarded. The cause for turbidity must be examined by the manufacturer. • All handling techniques are to be performed according to the manufacturer’s instructions. Each deviation from these instructions is the sole responsibility of the user and needs to be validated by the user. • Used test material must be discarded as hazardous material. Waste management information can be found in the safety data sheet. ◄ • MLB 2 contains no materials of human origin. • The bovine albumin used for the production of this reagent is purchased from BSE-free sources. • ◄ Internal quality controls according to national guidelines are recommended at regular intervals.

Negative cross match = No agglutination and/or hemolysis = The recipient serum contains no antibodies against the donor red cells.

References ◄ (1) Technical Manual, 17th edition, Section 1, American Association of Blood Banks

B. Antibody detection and antibody identification 1. In a properly marked tube mix 2 drops serum to be tested, 1 drop test red cells (3 to 5 %) and 2 drops MLB 2. 2. Incubate for 10 minutes at 37°C. 3. Centrifuge for 2 minutes at 150 - 200 x g or 20 seconds at 800 - 1000 x g. 4. Gently dislodge the cell button and observe for agglutination or hemolysis. 5. Wash red cells 3 times in isotonic saline solution. Completely decant supernatant. 6. Add 2 drops Anti-Human-Globulin and mix. 7. Centrifuge for 2 minutes at 150 - 200 x g or 20 seconds at 800 - 1000 x g. 8. Gently dislodge the cell button and observe for agglutination.

Key: Underline = Addition or significant change ◄= Deletion of text

An autocontrol (serum to be tested with red cells to be tested) should be performed in parallel. For the detection of IgM antibodies an additional test at room temperature (10 minutes) is recommended. Then centrifuge for 2 minutes at 150 - 200 x g or 20 seconds at 800 - 1000 x g.

| 186159/25 – 05/2015

[DE]

MLB 2 Suspensionsmedium für Erythrozyten [REF]

805 200

50 ml

[REF]

805 205

10x10 ml

[PRES] Konserviert mit: < 0,1 % NaN3 [IVD] Reagenz zur In-vitro-Diagnostik Nur für die Verwendung durch geschultes Laborpersonal. Symbole werden entsprechend der Norm EN 980 verwendet. In EN 980 nicht enthaltene Symbole sind im weiteren Text erklärt. Verwendungszweck Mollison und Polley entdeckten 1964, dass durch die Verminderung der Ionenstärke mit einer Low Ionic Strength Solution (LISS) die Antigen-Antikörper-Reaktion bei blutgruppenserologischen Tests erheblich beschleunigt wird. Mit MLB 2 wurde die Originalrezeptur so modifiziert, dass eine noch größere Empfindlichkeit erreicht wird. MLB 2 ist eine modifizierte LISS-Lösung, die als Suspensionsmedium für Erythrozyten eingesetzt wird und zur Verkürzung der Reaktionszeit bei gleichzeitiger Verstärkung der Reaktionen beiträgt. Bei der Antigenbestimmung mit coombsreaktiven Antiseren kann MLB 2 als Additiv zum Inkubationsmedium zugegeben werden. Testprinzip MLB 2 verkürzt die Inkubationszeit beim indirekten Antiglobulintest von 60 auf 10 Minuten bei gleichzeitiger Steigerung der Empfindlichkeit. Reagenz MLB 2 ist eine modifizierte LISS-Lösung. Zusätzlich benötigte Reagenzien und Materialien Röhrchentest • Pipetten • Isotone Kochsalzlösung • Anti-Human-Globulin (z.B. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804 115 / 804 120 / 804 130) • Biotestcell®-P [REF] 816 028, Biotestcell®-P1, P2 [REF] 816 012, Biotestcell®-P3 [REF] 816 017, Biotestcell®-I8 [REF] 816 020, Biotestcell® I11 [REF] 816 021 • Glasröhrchen • Laborzentrifuge Probenmaterial Frisches EDTA-Blut oder Vollblut. Die Proben sollten bei 2...8°C aufbewahrt werden.

Eine Autokontrolle (Probandenserum mit Probandenerythrozyten) sollte stets mitgeführt werden. Zum Nachweis der IgM-Antikörper ist ein zusätzlicher Ansatz bei Zimmertemperatur für 10 Minuten empfehlenswert. Anschließend wird 2 Minuten bei 150 - 200 x g oder 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugiert und abgelesen. C. Antigenbestimmung Die coombsreaktiven Antiseren (z.B. Anti-Fya) sind im LISS-Antiglobulintest (MLB 2) auf ihre Spezifität geprüft und reagieren einwandfrei. Der LISSAntiglobulintest mit den coombsreaktiven Antiseren verkürzt die Antigenbestimmung. 1. Die zu untersuchenden Erythrozyten 1mal in isotoner Kochsalzlösung waschen. 2. Die gewaschenen Erythrozyten 3 – 5 %ig in isotoner Kochsalzlösung suspendieren. 3. In einem entsprechend beschrifteten Röhrchen 1 Tropfen Reagenz, 1 Tropfen der Erythrozytensuspension und 2 Tropfen MLB 2 mischen. 4. 10 Minuten bei 37°C inkubieren. 5. Die Erythrozyten dreimal in isotoner Kochsalzlösung waschen. Den Überstand vollständig dekantieren. 6. Dem Sediment 2 Tropfen Anti-Human-Globulin zugeben und mischen. 7. 2 Minuten bei 150 - 200 x g oder 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren. 8. Unter leichtem Aufschütteln auf Agglutination prüfen. Eine positive und eine negative Kontrolle sollten bei allen Untersuchungen mitgeführt werden. Die Bewertung der Reaktionsstärken erfolgt analog den Vorgaben des Technical Manual (1): Reaktionsstärke Agglutinationsbild 4+ Ein einziges Agglutinat. 3+ Mehrere große Agglutinate. 2+ Mittelgroße Agglutinate, klarer Hintergrund. 1+ Kleine Agglutinate trüber Hintergrund. +/Gerade noch sichtbare Agglutinate, trüber Hintergrund. Keine Agglutinate. SolidscreenTM II A. semi-automatisch Verdünnungsschema für die Herstellung der 1%igen Zellsuspension für die Antikörpersuche oder Antikörperidentifizierung: 1 ml 3%ige Testerythrozyten + 2 ml MLB 2. Die genaue Testmethode ist in der Gebrauchsinformation ◄ SolidscreenTM II Strip beschrieben.

Testdurchführung Röhrchentest A. Verträglichkeitsprobe 1. Etwa 0,5 ml Spenderblut (aus Kreuzprobenröhrchen oder aus dem Schlauchsegment der Erythrozytenkonserve) 1mal mit isotoner Kochsalzlösung waschen. 2. Die gewaschenen Erythrozyten 3 – 5 %ig in isotoner Kochsalzlösung suspendieren. 3. In einem entsprechend beschrifteten Röhrchen 1 Tropfen der Erythrozytensuspension, 2 Tropfen Empfängerserum und 2 Tropfen MLB 2 mischen. 4. 10 Minuten bei 37°C inkubieren. 5. 2 Minuten bei 150 - 200 x g oder 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren. 6. Unter leichtem Aufschütteln auf Hämolyse und Agglutination prüfen. 7. Die Erythrozyten dreimal in isotoner Kochsalzlösung waschen. Den Überstand vollständig dekantieren. 8. Dem Sediment 2 Tropfen Anti-Human-Globulin zugeben und mischen. 9. 2 Minuten bei 150 - 200 x g oder 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren. 10. Unter leichtem Aufschütteln auf Agglutination prüfen.

B. TANGO ® optimo und TANGO infinity® Es sind die Hinweise zur Testdurchführung in der Betriebsanleitung des Blutgruppen-Vollautomaten TANGO® optimo und TANGO infinity® zu beachten. Aufgrund der Konzeption des Blutgruppen-Vollautomaten TANGO® optimo und TANGO infinity® ist nur die 50 ml Abpackung von MLB 2 geeignet.

Auswertung Positive Kreuzprobe = Agglutination und/oder Hämolyse = Sensibilisierung der Spendererythrozyten durch Antikörper des Empfängerserums

Warnhinweis und Vorsichtsmaßregeln • Eine Trübung des Produktes kann ein Hinweis auf bakterielle Verunreinigung sein. In diesem Fall darf das Produkt nicht eingesetzt werden, da die Ursache der Trübung durch den Hersteller geklärt werden muss. • Alle Techniken sind nach den Vorgaben des Herstellers anzuwenden. Abweichungen von den vom Hersteller angegebenen Abarbeitungstechniken sind vom Anwender und in Verantwortung des Anwenders zu validieren. • ◄ Gebrauchtes Testmaterial muss als Gefahrgut betrachtet werden. Informationen zur Entsorgung verwendeter Reagenzien sind dem Sicherheitsdatenblatt zu entnehmen. • MLB 2 enthält keine Bestandteile humanen Ursprungs. • Das bei der Herstellung des Reagenzes verwendete Rinderalbumin wird nur aus BSE-freien Beständen bezogen. • ◄ Es wird empfohlen regelmäßig interne Qualitätskontrollen gemäß den nationalen Richtlinien durchzuführen.

Negative Kreuzprobe = keine Agglutination und/oder Hämolyse = das Empfängerserum enthält keine Antikörper gegen die Spendererythrozyten B. Antikörpersuche und Antikörperidentifizierung 1. In einem entsprechend beschrifteten Röhrchen 2 Tropfen Probandenserum, 1 Tropfen Testerythrozyten (3 bis 5 %ig) und 2 Tropfen MLB 2 mischen. 2. 10 Minuten bei 37°C inkubieren. 3. 2 Minuten bei 150 - 200 x g oder 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren. 4. Unter leichtem Aufschütteln auf Hämolyse und Agglutination prüfen. 5. Die Erythrozyten dreimal in isotoner Kochsalzlösung waschen. Den Überstand vollständig dekantieren. 6. Dem Sediment 2 Tropfen Anti-Human-Globulin zugeben und mischen. 7. 2 Minuten bei 150 - 200 x g oder 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren. 8. Unter leichtem Aufschütteln auf Agglutination prüfen.

MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724 www.bio-rad.com, [email protected]

Leistungsmerkmale und Grenzen der Methode • Der Verwendungszweck der Verträglichkeitsuntersuchung mit Anti-HumanGlobulin Solidscreen™ II ist der Nachweis von Unverträglichkeiten aufgrund IgG-Antikörpern und nicht der Nachweis von AB0Inkompatibilitäten. • ◄ Weitere Limitierungen sind der Gebrauchsanleitung SolidscreenTM II Strip, Biotestcell® oder dem jeweiligen Antiserum zu entnehmen. Bei zweifelhaften Ergebnissen unklarer Ursache steht der Bio-Rad-Service (Tel. 06103-3130-611) für Rückfragen zur Verfügung. Haltbarkeit Nach Öffnung des Reagenzes ist das Produkt bei sachgemäßer Lagerung (2...8°C) bis zum Ende der angegebenen Laufzeit haltbar. Die Laufzeit ist dem Reagenzienetikett zu entnehmen. Bei beschädigtem Fläschchen darf das Produkt nicht mehr verwendet werden.

Literatur ◄ (1) Technical Manual, 17th ed., Sect. 1, American Association of Blood Banks Schlüssel: Unterstrichen = Zusatz oder wichtige Änderung ◄= Entfernter Text

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[FR]

MLB 2 Milieu de suspension pour érythrocytes [REF]

805 200

50 ml

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[PRES] Conservé avec: < 0,1 % de NaN3 [IVD] Réactif pour usage diagnostique in vitro Le test ne doit être utilisé que par le personnel de laboratoire formé à cet effet. Les symboles sont utilisés conformément à la norme EN 980. Les symboles non visés dans la norme EN 980 sont expliqués dans le texte. Application En 1964, Mollison et Polley ont découvert que la réduction de la force des ions au moyen d´une Low Ionic Strengh Solution (LISS) accélère sensiblement la réaction antigène-anticorps dans les tests sérologiques de groupage sanguin. Dans MLB 2, la formulation originale a été modifiée, de sorte qu´elle permet d´atteindre une sensibilité encore améliorée. MLB 2 est une solution LISS modifiée qui est utilisée comme milieu de suspension pour érythrocytes et pour raccourcir le temps de réaction tout en renforçant les réactions. Lors de la détermination des antigènes avec des antisérums réactifs de coomb, MLB 2 peut être ajouté comme additif au milieu d´incubation. Principe du test MLB 2 raccourcit le temps d´incubation dans le test indirect aux antiglobulines de 60 à 10 minutes tout en augmentant la sensibilité. Réactif MLB 2 est une solution LISS modifiée. Réactifs et matériel supplémentaires Test en éprouvette • Pipettes • Solution saline isotonique • Antiglobuline humaine (par ex. Anti-Human-Globulin Color, [REF] 804 115 / 804 120 / 804 130) • Biotestcell®-P [REF] 816 028, Biotestcell®-P1, P2 ([REF] 816 012), Biotestcell®-P3 ([REF] 816 017), Biotestcell®-I8 ([REF] 816 020, Biotestcell®-I11 ([REF] 816 021) • Eprouvettes de verre Centrifugeuse de laboratoire Echantillons Sang frais EDTA ou bien sang total. Les échantillons doivent être conservés dans une plage de température de 2...8°C. Mode opératoire Test en éprouvette A. Epreuve de compatibilité 1. Laver 1 fois avec une solution saline isotonique environ 0,5 ml de sang du donneur (provenant de l´éprouvette sérum receveur/érythrocytes donneur) ou bien du segment de tube de la conserve de sang). 2. Mettre en suspension les érythrocytes lavés dans une solution saline isotonique de 3 à 5 %. 3. Mélanger, dans une éprouvette adéquatement marquée, 1 goutte de suspension d´érythrocytes, 2 gouttes de sérum de receveur et 2 gouttes de MLB 2. 4. Incuber pendant 10 minutes à 37°C. 5. Centrifuger pendant 2 minutes à 150 - 200 x g ou pendant 20 sec à 800 1000 x g. 6. Observer l´agglutination et l´hémolyse en secouant doucement. 7. Laver les érythrocytes 3 fois avec une solution saline isotonique. Décanter ensuite intégralement le surnageant. 8. Ajouter au sédiment 2 gouttes d´antiglobuline humaine et mélanger. 9. Centrifuger pendant 2 minutes à 150 - 200 x g ou pendant 20 sec à 800 1000 x g. 10. Observer l´agglutination en secouant doucement. Evaluation Epreuve sérum receveur / érythrocytes donneur positive = agglutination et/ou hémolyse = Sensibilisation des érythrocytes donneur par anticorps du sérum receveur. Epreuve sérum receveur / érythrocytes donneur négative = aucune agglutination ni hémolyse = Le sérum receveur ne contient pas d´anticorps dirigés contre les érythrocytes du donneur. B. Dépistage et indentification des anticorps 1. Mélanger, dans une éprouvette adéquatement marquée, 2 gouttes de sérum de patient, 1 goutte d´érythrocytes de test (de 3 à 5 %) et 2 gouttes de MLB 2. 2. Incuber pendant 10 minutes à 37°C. 3. Centrifuger pendant 2 minutes à 150 - 200 x g ou pendant 20 sec 800 1000 x g. 4. Observer l´agglutination et l´hémolyse en secouant doucement. 5. Laver les érythrocytes 3 fois avec une solution saline isotonique. Décanter ensuite intégralement le surnageant. 6. Ajouter au sédiment 2 gouttes d´antiglobuline humaine et mélanger. 7. Centrifuger pendant 2 minutes à 150 - 200 x g ou pendant 20 sec. à 800 1000 x g.

MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724 www.bio-rad.com, [email protected]

8.

Observer l´agglutination en secouant doucement.

Un auto-contrôle (sérum de patient avec érythrocytes de patient) doit toujours être inclus dans le test. Pour dépister les anticorps IgM, il est conseillé d´effectuer une préparation supplémentaire à température ambiante pendant 10 minutes. Ensuite, on centrifuge pendant 2 minutes à 150 - 200 x g ou bien pendant 20 secondes à 800 - 1000 x g et on procède à la lecture. C. Détermination des antigènes Les antisérums réactifs de Coombs ◄ (par ex. anti-Fya) ont été analysés dans le test à l´antiglobuline LISS (MLB 2) pour vérifier leur spécificité et réagissent parfaitement. Le test à l´antiglobuline LISS avec les antisérums réactifs de Coombs réduit le temps nécessaire à la détermina-tion des antigènes. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Laver les érythrocytes à analyser 1 fois dans une solution saline isotonique. Mettre en suspension de 3 à 5 % les érythrocytes lavés dans une solution saline isotonique. Mélanger dans une éprouvette adéquatement marquée, 1 goutte de réactif, 1 goutte de suspension d´érythrocytes et 2 gouttes de MLB 2. Incuber pendant 10 minutes à 37°C. Laver les érythrocytes 3 fois dans une solution saline isotonique. Décanter ensuite intégralement le surnageant. Ajouter au sédiment 2 gouttes d´antiglobuline humaine et mélanger. Centrifuger pendant 2 minutes à 150 - 200 x g ou pendant 20 sec. à 800 1000 x g. Observer l´agglutination en secouant doucement.

Chaque essai effectué doit inclure respectivement un contrôle positif et négatif. L´évaluation des forces de réaction s´opère conformément aux dispositions du Technical Manual (1): Force de Agglutination réaction 4+ Une seule agglutination 3+ Quelques agglutinations grandes 2+ Agglutination moyenne, fond lucide 1+ Petite agglutination, fond turbide +/Moins visible agglutination, fond turbide Aucune agglutination Solidscreen™ II A. semi-automatique Schéma de dilution en vue de la préparation de la suspension cellulaire à 1% pour le dépistage et l´identification des anticorps: 1 ml d´érythrocytes de test à 3% + 2 ml MLB 2. La méthode du test est décrite dans la notice d´emploi de ◄ Solidscreen™ II Strip. B. TANGO ® optimo et TANGO infinity® Veuillez vous reporter aux notes relatives à la conduite du test figurant dans la notice d´utilisation du système automatique de groupage sanguin TANGO® optimo et TANGO infinity®. La conception du système automatique de groupage sanguin TANGO® optimo et TANGO infinity® ne permet d´utiliser MLB 2 que dans le conditionnement à 50 ml. Performances et limites de méthodes • La réalisation du crossmatch avec utilisation ◄ de l'antiglobuline Solidscreen™ II permet la détection des incompatibilités dues à des anticorps IgG, ce test n'est pas destiné à la détection des incompatibilités ABO. • ◄ D’autres limitations sont contenus dans le mode d’emploi du Solidscreen™ II Strip, Biotestcell® ou de l’antisérum concerné. En cas de résultats douteux et la cause n´en est pas évidente, veuillez consulter le Bio-Rad-Service (Tél. +49-6103-3130-611) qui se tient à votre disposition. Stabilité Une fois le flacon ouvert, le réactif peut être conservé dans des conditions adéquates jusqu´à la date de péremption indiquée. La date de péremption figure sur l´étiquette du réactif. Si le flacon est endommagé, le produit de doit plus être utilisé. Avertissements et précautions • Tout aspect turbide du produit indique une contamination bactérienne. Dans ce cas, ne pas utiliser le produit, car le fabricant est dans l´obligation d´éclaircir la cause de la turbidité de celui-ci. • Toutes les techniques doivent être appliquées conformément aux instructions du fabricant. Toute dérogation aux dispositions du fabricant concernant la technique de conduite du test doit être validée par l´utilisateur lui-même et sous sa propre responsabilité. • ◄ Tous les réactifs des essais doivent être considerés comme étant potentiellement infectieux. Les informations sur le traitement des réactifs utilisés peuvent être consultées sur la fiche technique de sécurité. • MLB 2 ne contient pas de substance d´origine humaine. • L´albumine d´ori-gine bovine utilisée pour la fabrication du réactif provient de stocks certifiés libres de virus de l´ESB. • ◄ Il convient d'effectuer régulièrement des contrôles de qualité en interne conformément aux directives nationales respectivement en vigueur. Bibliographie ◄ (1) Technical Manual, 17th ed., Sect. 1, American Assoc. of Blood Banks Clé : Souligner = Addition ou modification significative ◄= Effacement du texte

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8. [ES]

MLB 2 Medio de suspensión para eritrocitos [REF]

805 200

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[PRES] Conservación: < 0,1 % de NaN3 [IVD] Reactivo para uso diagnóstico in vitro Para ser utilizado exclusivamente por personal cualificado de laboratorio. Los símbolos se emplean de acuerdo con la norma EN 980. Los símbolos no contenidos en la norma EN 980 son explicados en el presente texto. Finalidad prevista En 1964 Mollison y Polley descubrieron que mediante la reducción de la fuerza de los iones con una solución de baja fuerza iónica (Low Ionic Strength Solution (LISS)), la reacción antígeno-anticuerpo en los tests serológicos para la determinación del grupo sanguíneo es acelerada notablemente. La fórmula original ha sido modificada con MLB 2 para obtener una sensibilidad aún mayor. MLB 2 es una solución LISS modificada que se emplea como medio de suspensión para eritrocitos y que contribuye a reducir el tiempo de reacción aumentando simultáneamente la fuerza de reacción. En la determinación de anticuerpos con antisueros reactivos de Coombs, MLB 2 puede ser empleado como aditivo del medio de incubación. Principio del test MLB 2 reduce el tiempo de incubación en el test indirecto de antiglobulina de 60 a 10 minutos, al mismo tiempo que aumenta la sensibilidad. Reactivo MLB 2 es una solución LISS modificada. Reactivos y materiales necesarios que no se suministran Test en tubo • Pipetas • Solución salina isotónica • Antiglobulina humana (p.ej. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804 115 / 804 120 / 804 130) • Biotestcell®-P [REF] 816 028, Biotestcell®-P1, P2 ([REF] 816 012), Biotestcell®-P3 ([REF] 816 017), Biotestcell®-I8 ([REF] 816 020), Biotestcell®-I11 ([REF] 816 021), • Tubos de ensayo de vidrio • Centrifugadora de laboratorio Muestras Sangre fresca con EDTA o sangre entera. Las muestras deben ser conservadas a una temperatura comprendida entre los 2...8°C. Procedimiento Llevar todos los reactivos a temperatura ambiente antes de su empleo. Procedimiento Test en tubo A. Test de compatibilidad 1. Lavar aprox. 0,5 ml de sangre del donante (obtenida de tubos de ensayo para la prueba cruzada o del segmento de tubuladura de la bolsa de sangre) 1 vez con solución salina isotónica. 2. Los eritrocitos lavados deben ser suspendidos al 3-5 % en solución salina isotónica. 3. En un tubo de ensayo adecuadamente rotulado, mezclar 1 gota de suspensión eritrocitaria, 2 gotas de suero del recipiente y 2 gotas de MLB 2. 4. Dejar incubar 10 minutos a 37°C. 5. Centrifugar 2 minutos a 150 - 200 x g ó 20 segundos a 800 - 1000 x g. 6. Verificar la hemólisis y la aglutinación agitando ligeramente. 7. Lavar los eritrocitos 3 veces en solución salina isotónica. Decantar el sobrenadante completamente. 8. Añadir 2 gotas de antiglobulina humana al sedimento y mezclar. 9. Centrifugar 2 minutos a 150 - 200 x g ó 20 segundos a 800 - 1000 x g. 10. Verificar la aglutinación agitando suavemente. Evaluación Prueba cruzada positiva = aglutinación y/o hemólisis = Sensibilización de los eritrocitos del donante a través de anticuerpos del suero del recipiente. Prueba cruzada negativa = ausencia de aglutinación y/o hemólisis = El suero del recipiente no contiene anticuerpos contra los eritrocitos del donante. B. Criba e identificación de anticuerpos 1. En un tubo de ensayo adecuadamente rotulado, mezclar 2 gotas del suero del paciente, 1 gota de eritrocitos de ensayo (3-5 %) y 2 gotas de MLB 2. 2. Dejar incubar 10 minutos a 37°C. 3. Centrifugar 2 minutos a 150 - 200 x g ó 20 segundos a 800 - 1000 x g. 4. Verificar la hemólisis y la aglutinación agitando ligeramente. 5. Lavar los eritrocitos 3 veces en solución salina isotónica. Decantar el sobrenadante completamente. 6. Añadir 2 gotas de antiglobulina humana al sedimento y mezclar. 7. Centrifugar 2 minutos a 150 - 200 x g ó 20 segundos a 800 - 1000 x g.

MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724 www.bio-rad.com, [email protected]

Verificar la aglutinación agitando suavemente.

Paralelamente se deberá realizar siempre un autocontrol (suero del pacien-te con eritrocitos del paciente). Para la detección de anticuerpos IgM se recomienda un test posterior a temperatura ambiente durante 10 minutos. A continuación centrifugar durante 2 minutos a 150 - 200 x g ó 20 segundos a 800 - 1000 x g y efectuar la lectura. C. Determinación de antígenos Los antisueros reactivos de Coombs (p.ej. Anti-Fya) son analizados en el test de antiglobulina LISS (MLB 2) para comprobar la especificidad y reaccionan perfectamente. El test de antiglobulina LISS con los antisueros reactivos de Coombs reduce el tiempo necesario para la determinación de antígenos. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Lavar los eritrocitos que se desean analizar 1 vez en solución salina isotónica. Los eritrocitos lavados deben ser suspendidos al 3-5 % en solución salina isotónica. En un tubo de ensayo adecuadamente rotulado, mezclar 1 gota de reactivo, 1 gota de suspensión eritrocitaria y 2 gotas de MLB 2. Dejar incubar 10 minutos a 37°C. Lavar los eritrocitos 3 veces en solución salina isotónica. Decantar el sobrenadante completamente. Añadir 2 gotas de antiglobulina humana al sedimento y mezclar. Centrifugar 2 minutos a 150 - 200 x g ó 20 segundos a 800 - 1000 x g. Verificar la aglutinación agitando suavemente.

Para todos los análisis se deberá efectuar paralelamente un control negativo y uno positivo. La intensidad de reacción se evaluará de acuerdo con lo dispuesto en el Technical Manual (1): Intensidad de Aglutinación reacción 4+ Un solo aglutinado 3+ Varias grandes aglutinados 2+ Aglutinados medianos, fondo claro 1+ Aglutinados pequeños, fondo turbido +/Aglutinados apenas visible, fondo turbido Ningunos aglutinados Solidscreen™ II A. semiautomático Esquema de dilución para la preparación de una suspensión eritrocitaria al 1% para la criba y la identificación de anticuerpos: 1 ml de eritrocitos de ensayo al 3% + 2 ml de MLB 2. El método analítico exacto viene descrito en las instrucciones de empleo de ◄ Solidscreen™ II Strip. B. TANGO ® optimo y TANGO infinity® Observar las indicaciones relativas a la ejecución del test que encontrará en las instrucciones de empleo del sistema automatizado TANGO® optimo y TANGO infinity®. Por sus características, sólo el envase de 50 ml de MLB 2 está indicado para ser empleado con el sistema automatizado TANGO® optimo y TANGO infinity®. Características de funcionamiento y limitaciones del método • El uso previsto de las pruebas cruzadas de la antiglobulina usando Anti-Human-Globulin Solidscreen™ II ◄ es la detección de incompatibilidades debidas a anticuerpos IgG. No está diseñado para la detección de incompatibilidades AB0. • ◄ Limitaciones addicionales se puede sacar de los instrucciones del uso de los productos Solidscreen™ II Strip, Biotestcell® o del antisuero correspondiente. En caso de resultados dudosos de causa desconocida póngase en contacto con nuestro servicio Bio-Rad de atención al cliente (Tel. +49-6103-3130-611). Estabilidad Una vez abierto el reactivo, el producto puede ser conservado en las condiciones adecuadas (2...8°C) hasta la fecha que se indica. La fecha de caducidad viene indicada en la etiqueta del reactivo. No utilizar el producto si el vial está deteriorado. Advertencias y precauciones • Un enturbiamiento del producto puede ser indicio de contaminación bacterial. En este caso no se deberá emplear el producto, ya que la causa del enturbiamiento debe ser esclarecida por el fabricante. • Todas las técnicas se han de realizar de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Toda divergencia respecto a las instrucciones del fabricante deben ser validadas por el usuario bajo su entera responsabilidad. • ◄ Todos los reactivos destinados al ensayo se deberan manejar como si fueran potencialmente infecciosos. Se puede encontrar la información del manejo de desechos en la ficha de datos de seguridad. • MLB 2 no contiene componentes de origen humano. • La albúmina de origen bovino empleada para la fabricación del reactivo se adquiere exclusiva-mente de proveedores certificados libres de EEB. • ◄ Se recomienda el uso de los controles de calidad interno en intervalos regulares conforme a las regulaciones nacionales. Referencias ◄ (1) Technical Manual, 17th ed., Sect. 1, American Association of Blood Banks Clave: Subrayado = Adición o cambio significativo ◄= Texto borrado

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[IT]

MLB 2 Mezzo di sospensione per eritrociti [REF]

805 200

50 ml

[REF]

805 205

10x10 ml

[PRES] Conservato con : < 0,1 % de NaN3 [IVD] Reagente per uso diagnostico in vitro Da utilizzare solo da parte di personale di laboratorio esperto ed addestrato. I simboli vengono utilizzati secondo la normativa EN 980. I simboli non riportati nella normativa EN 980 sono descritti nel testo. Finalità d'uso Nel 1964 Mollison e Polley scoprirono che, attraverso la riduzione della forza degli ioni con una soluzione a bassa forza ionica (Low Ionic Strength Solution / LISS), la reazione antigene-anticorpo nei test sierologici per la determinazione del gruppo sanguigno viene notevolmente accelerata. La formula originale venne modificata con MLB 2 in modo da ottenere una sensibilità ancora maggiore. MLB 2 è una soluzione LISS modificata che viene impiegata quale mezzo di sospensione per eritrociti e che contribuisce a ridurre il tempo di reazione aumentandone contemporaneamente la forza. Nella determinazione degli antigeni con gli antisieri reattivi di Coombs, l'MLB 2 può essere impiegato quale additivo del mezzo di incubazione. Principio del test MLB 2 riduce il tempo di incubazione nel test indiretto all'antiglobulina da 60 a 10 minuti, aumentando allo stesso tempo la sensibilità. Reagente MLB 2 è una soluzione LISS modificata. Reagenti supplementari e materiali necessari Test in provetta • Pipette • Soluzione salina isotona • Antiglobuline umane (ad es. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804 115 / 804 120 / 804 130) • Biotestcell®-P [REF] 816 028, Biotestcell®-P1, P2 ([REF] 816 012), Biotestcell®-P3 ([REF] 816 017), Biotestcell®-I8 ([REF] 816 020), Biotestcell® -I11 ([REF] 816 021) • Provette in vetro • Centrifuga da laboratorio Materiale in esame Sangue fresco con EDTA o sangue intero fresco. I campioni vanno conser-vati ad una temperatura compresa fra 2...8°C. Esecuzione del test Portare tutti i reagenti a temperatura ambiente prima dell'uso. Esecuzione del test Test in provetta A. Test di compatibilità 1. Lavare circa 0,5 ml di sangue del donatore (ottenuto da provette per la prova crociata o da un segmento di tubo della sacca di sangue) 1 volta con soluzione salina isotona. 2. Gli eritrociti lavati vanno sospesi al 3-5 % in soluzione salina isotona. 3. In una provetta opportunamente contrassegnata, miscelare 1 goccia di sospensione eritrocitaria, 2 gocce di siero del ricevente e 2 gocce di MLB 2. 4. Incubare per 10 minuti ad una temperatura di 37°C. 5. Centrifugare per 2 minuti a 150 - 200 x g o per 20 secondi a 800 - 1000 x g. 6. Verificare l'emolisi e l'agglutinazione scuotendo leggermente. 7. Lavare gli eritrociti per tre volte in soluzione salina isotona. Decantare completamente il surnatante. 8. Aggiungere 2 gocce di antiglobuline umane al sedimento e miscelare. 9. Centrifugare per 2 minuti a 150 - 200 x g o per 20 secondi a 800 - 1000 x g. 10. Verificare l'agglutinazione scuotendo leggermente. Valutazione Prova crociata positiva = agglutinazione e/o emolisi = Sensibilizzazione degli eritrociti del donatore attraverso gli anticorpi del siero del ricevente. Prova crociata negativa = nessuna agglutinazione e/o emolisi = Il siero del ricevente non contiene anticorpi contro gli eritrociti del donatore B. Individuazione e identificazione degli anticorpi 1. In una provetta opportunamente contrassegnata, miscelare 2 gocce di siero del paziente, 1 goccia di emazie test (dal 3 al 5 %) e 2 gocce di MLB 2. 2. Incubare per 10 minuti ad una temperatura di 37°C. 3. Centrifugare per 2 minuti a 150 - 200 x g o per 20 secondi a 800 - 1000 x g. 4. Verificare l'emolisi e l'agglutinazione scuotendo leggermente.

MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724 www.bio-rad.com, [email protected]

5.

Lavare gli eritrociti per tre volte in soluzione salina isotona. Decantare completamente il surnatante. 6. Aggiungere 2 gocce di antiglobuline umane al sedimento e miscelare. 7. Centrifugare per 2 minuti a 150 - 200 x g o per 20 secondi a 800 - 1000 x g. 8. Verificare l'agglutinazione scuotendo leggermente. Va eseguito sempre parallelamente un autocontrollo (siero del paziente con emazie del paziente). Per l'identificazione degli anticorpi IgM si raccomanda un ulteriore test a temperatura ambiente per 10 minuti. Infine, centrifugare per 2 minuti a 150 - 200 x g o per 20 secondi a 800 - 1000 x g ed eseguire la lettura. C. Determinazione degli antigeni Gli antisieri di Coombs reattivi (ad es. Anti-Fya) vengono analizzati con il test all'antiglobulina LISS (MLB 2) per la specificità e reagis-cono perfettamente. Il test all'antiglobulina LISS con gli antisieri di Coombs reattivi riduce il tempo necessario per la determinazione degli antigeni. 1. Lavare gli eritrociti da analizzare una volta in soluzione salina isotona. 2. Gli eritrociti lavati vanno sospesi al 3-5 % in soluzione salina isotona. 3. In una provetta opportunamente contrassegnata, miscelare 1 goccia di reagente, 1 goccia di sospensione eritrocitaria e 2 gocce di MLB 2. 4. Incubare per 10 minuti ad una temperatura di 37°C. 5. Lavare gli eritrociti per tre volte in soluzione salina isotona. Decantare completamente il surnatante. 6. Aggiungere 2 gocce di antiglobuline umane al sedimento e miscelare. 7. Centrifugare per 2 minuti a 150 - 200 x g o per 20 secondi a 800 - 1000 x g. 8. Verificare l'agglutinazione scuotendo leggermente. Per ciascuna analisi vanno effettuati un controllo positivo e un controllo negativo. La valutazione della forza di reazione viene eseguita secondo le istruzioni riportate nel Technical Manual (1): Forza di Agglutinazione reazione 4+ Un unico agglutinato. 3+ Vari agglutinati grandi. 2+ Agglutinati di medie dimensioni, in uno sfondo chiaro. 1+ Piccoli agglutinati, in uno sfondo torbido. +/Agglutinazione appena visibile, in uno sfondo torbido. Nessuna agglutinazione. SolidscreenTM II A. semiautomatico Schema di diluizione per la preparazione di una sospensione eritrocitaria all'1% per la ricerca e identificazione degli anticorpi: 1 ml di emazie test al 3% + 2 ml di MLB 2. Il metodo esatto viene descritto nelle istruzioni d'uso relative a ◄ SolidscreenTM II Strip. B. TANGO ® optimo e TANGO infinity® Osservare le indicazioni relative all'esecuzione del test riportate nel manuale del sistema automatizzato per la determinazione del gruppo sanguigno TANGO® optimo e TANGO infinity®. Per le sue caratteristiche, solo la confezione da 50 ml di MLB 2 è indicata per l'uso con il sistema automatizzato TANGO® optimo e TANGO infinity®. Caratteristiche delle prestazioni e limiti del metodo • L'uso di Anti-Human-Globulin Solidscreen II ◄ per le prove di compatibilità in Coombs è inteso per la rilevazione di incompatibilità dovute ad anticorpi IgG e non per la rilevazione di incompatibilità AB0. • ◄ Per ulteriori limitazione fare riferimento alle istruzioni d'uso per Solidscreen™ II Strip, Biotestcell® o i rispettivi antisieri. In caso di risultati dubbi con causa ignota è possibile contattare l'assistenza Bio-Rad (tel. +49-6103-3130-611) per chiarimenti. Stabilità Una volta aperto il flacone, il reagente può essere conservato in condizioni appropriate (2...8°C) fino alla data di scadenza indicata. La data di scadenza è riportata sull'etichetta del reagente. Se i flaconi dovessero risultare danneggiati, il prodotto non va più utilizzato. Avvertenze e precauzioni • L'eventuale presenza di torbidità nel prodotto può essere indice di contaminazione batterica. In tal caso il prodotto non va utilizzato in quanto spetta al produttore chiarire la causa della torbidità. • Tutte le tecniche vanno impiegate secondo le istruzioni del produttore. Eventuali deviazioni rispetto alle istruzioni del produttore vanno validate dall'utente sotto la sua completa responsabilità. • ◄ Tutti i reagenti devono essere considerati come potenzialmente infettivi. Per questo motivo, si dovrebbero prendere le misure di sicurezza necessarie. Informazioni sulla gestione dei rifiuti si possono trovare nelle schede di sicurezza. • MLB 2 non contiene componenti di origine umana. • ◄ L'albumina bovina impiegata per la preparazione del reagente va acquistata unicamente da fornitori certificati contro la BSE. • Devono essere effettuati regolarmente controlli di qualità interni in conformità alle normative nazionali. Bibliografia ◄ (1) Technical Manual, 17th ed., Sect. 1, American Association of Blood Banks Chiave: Sottolineatura = Aggiunta o cambiamento significativo ◄= Cancellazione di testo

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