Soluciones únicas para: • HPLC • UHPLC Que solo Agilent le podrá ofrecer

Page 1

Elementos diferenciales y patentes incluidos en los U/HPLC de Agilent

ver-Jun-2013

1290 Infinity Bomba Binária con mezcla en alta presión

Innovaciones Tecnológicas: • Rango de Potencia (flujo x presion) • Amortiguación electrónica de pulsos • Mezclador “Jet Weaver” • Volumen muerto de 45µl

Page 2

Agilent 1290 Infinity LC

50 x 2.1 mm

Sistema Binario con mezcla en alta presión

100 x 2.1 mm 150 x 2.1 mm

0.45 mL/min

250 x 2.1 mm

bar 1200

H2O/ACN, 40 °C

1000

800

600

ZORBAX RRHT SB-C18 de 1,8 µm 2.1 x 50mm H2O/ACN 2.4ml/min T=95 °C 560bar

400

200

0 0

Page 3

1

2

3

4

5

ml/min

1290 Infinity LC Binary Pump La siguiente generación en Tecnología de Bombas LC  Alta velocidad y resolución  1200 bar @ 2.0 mL/min

Desgasificador Válvula de Selección de disolvente Mezclador “Jet Weaver“

 1000bar @ 3.5ml/min  800 bar @ 5.0 mL/min  Volumen muerto: 10 µl / 45 µl  Amortiguador electrónico de pulsos  Procesador de doble nucleo dedicado al control de pulsos  Motores de 300 picolitros por paso  Largos intervalos de mantenimiento

Canal B Pistones de “Silicon –Carbide“

Page 4

Canal A

Válvula de purga

 “Automatic Leak-Correction“  150 Litros de disolvente  Automatismo  Purga automática

1290 Infinity Binary Pump Amortiguación electrónica de pulsos HPLC 1200

Motor del Pistón

OFF ON

• Motores independientes

para cada pistón • Pasos de 300 picolitros

1290 Inifinity Chanel A 1290 Inifinity Chanel B

Page 5

UHPLC 1290

1290 Infinity Binary Pump El mas bajo volumen muerto y el mas bajo ruido de mezcla 1200 Series Channel A 1200 Series Channel B

Passive Damper 0 - 300 µl

Passive Mixer 400 µl

Very Low Noise ~ 800 µl

1290 Inifinity Chanel A 1290 Inifinity Chanel B

Lowest Noise • min. 50% lower

Aktive Damping 10µl

Page 6

+

Jet Weaver Mixer 35µl

Delay Volume =

• 10µl / 45µl • 80x / 20x lower

Agilent Jet Weaver Siguiente generación: Mezclador de alta eficacia La mas alta eficiencia de mezcla con el mínimo volumen • 35 µl para aplicaciones UV estándar

• 100 µl para Aplicaciones TFA

Tecnología: • Tecnología Propietaria de Microfluidos Multi-capa. • Bandas de difusión de acero con estructuras de (100x120µm)

Page 7

1290 Infinity Bomba Cuaternaria con mezcla en baja presión

Innovaciones Tecnológicas: • Rango de Potencia (flujo x presion) • Amortiguación electrónica de pulsos • Pre Mezclador “Inlet Weaver” • Válvula Multifunción • Volumen muerto de 350µl

Page 8

Agilent 1290 Infinity LC Sistema Cuaternario con mezcla en baja presión p [bar]

•1200 bar: 0 - 2ml/min • 800 bar: 2 - 5ml/min • 250 bar: 5 - 10ml/min

1200

1000 800

600

250

1.0

Page 9

2.0

5.0

10.0

[ml/min]

1290 Infinity Bomba Cuaternaria Diversas innovaciones que permiten el alto rendimiento

Switchable Jet Weaver Mixer

Multi-PurposeValve

4-channel Degasser

MCGV (MultiChannel-GradientValve)

Page 10

In-line Filter Inlet-Weaver

Pump Head

Agilent Inlet Weaver Premezclador en baja presión de alta eficacia Premezcla el eluyente en baja presión antes de entrar en el cabezal de bombeo

Mezclador opcional en alta presión (sólo para condiciones muy críticasp.e. TFA)

Page 11

Influencia Rango Composición:

mAU

Gradiente Escalonado

10%

Saltos 1 % del 0 a 10 %

Salto inicial

Prestaciones con Pequeñas Proporciones de % Orgánico

250 7%

200

150

1% 3%

100

50

1290 Infinity Quaternary system Quaternary UHPLC from other vendor

0 0

Page 12

10

20

30

40

50

Válvula Multifunción Mayor Comodidad y Flexibilidad Purga Automática (controlada por software)

Page 13

Válvula Multifunción Mayor Comodidad yFlexibilidad Filtrado de eluyentes en línea para proteger la columna

Page 14

Válvula Multifunción Mayor Comodidad yFlexibilidad Lavado Automático del filtro en contracorriente (backflush)

Page 15

Válvula Multifunción Mayor Comodidad yFlexibilidad Mezclado Extra para las aplicaciones más exigentes Para el mínimo rizado/ruido de la línea de base (p.e.TFA como modificador)

Page 16

Agilent “Jet Weaver” Una Nueva Tecnología en mezcladores La mejor eficiencia de mezcla, incluso a flujos muy bajos, con el menor volumen de retardo* (35 µl) para muy bajo ruido UV

Prestaciones con TFA Con “Jet Weaver” (b. binaria)

Sin “Jet Weaver”

1 ml/min 2-35 % ACN/H2O (0.1 % TFA)

Competidor

Bomba Cuaternaria Bomba Binaria

Page 17

1290 Infinity Inyectores Automáticos 1290 Infinity FlexCube

Std. Autosampler

Flex Cube

HTS

Innovaciones Tecnológicas: • Ciclo completo de Inyección en 20 seg. • Elimina la contaminación cruzada • Permite realizar mezclas, diluciones, derivatizaciones y dosificaciones • Configuraciones para Inyección en Loop fijo o Loop variable

Page 18

HTC

1290 Infinity Inyectores Automaticos Un modelo de Inyector para cada aplicación G4226A 1290 Infinity Autosampler

Hasta 2 well plates ó 108 viales de 2ml refrigerados.

Capacidad para realizar: • Mezclas • Derivatizaciones • Diluciones • Dosificaciones

Page 19

G4278A 1290 Infinity LC Injector HTC

G4277A 1290 Infinity LC Injector HTS

Hasta12 well plates ó 324 viales de 2ml refrigerados.

Hasta 24 well plates ó 648 viales de 2ml refrigerados.

Page 20

1290 Infinity “FlexCube“ Extendiendo las capacidades Bomba de Jeringa Rail para válvula externa

Válvula Válvula opción 1 Válvula opción 2 de baja presión

Aplicaciones: a) Lavado automatico del asiento de la aguja y de todo el sistema de inyección en contra corriente. b) Inyección en modo Loop Fijo para rapidos ciclos de inyección. c) SPE “online“ Page 21

1290 Infinity Inyector Automático con “FlexCube“ Lavado automático en “backflushing“ del sistema de inyección

 Más robustez para baja contaminación  Elimina posibles bloqueos del asiento de la aguja de inyección

Page 22

Page 23

Online SPE con “FlexCube”

Page 24

Kits de Sistemas de válvulas para SPE “on-line“ SPE starter set 2pos-10port Valve

Multi SPE Kit

6pos-14port Valve

Page 25

Direct Inject Kit

Direct Inject Kit

High volume inject kit

Flask sampling kit

Direct Inject Kit

2pos-10port Valve

2pos-10port Valve

2pos-10port Valve

2pos-6port Valve

12pos-13port Valve

Flex cube pump

Column

1- Modo Carga SPE Std. ALS 900µL head

SPE2

1260 Pump

BondElut Online SPE PLRP: • 2.1x12.5mm 15-20um • 4.6x12.5mm 15-20um

SPE1

Load

Sistema con SPE alternativo

SPE starter set Waste

Page 26

Flex cube pump

Column

3- Modo Inyección SPE Load Std. ALS 900µL head

SPE2

1260 Bin Pump

SPE1

Elute

Sistema con SPE alternativo

SPE starter set Waste

Page 27

Flex cube pump

Column

1- Modo Carga SPE Hasta 12 Cartuchos SPE

Std. ALS 900µL head

1260 Bin Pump

SPE starter set Sistema con SPE alternativo con múltiples columnas SPE

Load

Multi SPE Kit

Page 28

Waste

Column Flex cube pump Load

3- Modo Inyección SPE Hasta 12 Cartuchos SPE

Std. ALS 900µL head

1260 Bin Pump

SPE starter set Elute

Multi SPE Kit

Page 29

Sistema con SPE alternativo con múltiples columnas SPE Waste

1260 Bin pump

1- Modo Inyección Directa Std. ALS 900µL head

Flex cube pump

SPE2

Waste

Column

SPE1

SPE starter set Direct Inject Kit

Page 30

Sistema con SPE alternativo e Inyección Directa

1260 Bin pump

2- Modo Carga SPE Std. ALS 900µL head

Flex cube pump

SPE2

Waste

Column

SPE starter set Direct Inject Kit

Page 31

SPE1

Load

Sistema con SPE alternativo e Inyección Directa

1260 Bin Pump

3- Modo Inyección SPE Std. ALS 900µL head

Load

SPE2

Flex cube pump

Waste

Column

SPE starter set Direct Inject Kit

Page 32

SPE1 Elute

Sistema con SPE alternativo e Inyección Directa

1- Modo Inyección Directa 1260 Bin Pump

5 mL loop

X X Std. ALS 900µL head

SPE2

Flex cube

Waste

SPE starter set

Column

SPE1

Direct Inject Kit

High volume inject kit

Page 33

Sistema para Inyección de grandes Volúmnes, con SPE alternativo e Inyección Directa

2- Modo Carga SPE 1260 Bin Pump

5 mL loop

X X

Llenado del loop 5 ml via “multidraw“ del Autosampler

Std. ALS 900µL head

Flex cube pump

SPE2

Waste

SPE starter set Direct Inject Kit

High volume inject kit

Page 34

Column

SPE1

Load

Sistema para Inyección de grandes Volúmnes, con SPE alternativo e Inyección Directa

3- Modo Inyección SPE 1260 Bin Pump

5 mL loop

X X

Llenado del loop 5 ml via “multidraw“ del Autosampler

Std. ALS 900µL head

Load

SPE2

Flex cube

Waste

SPE starter set Direct Inject Kit

High volume inject kit

Page 35

Column

SPE1 Elute

Sistema para Inyección de grandes Volúmnes, con SPE alternativo e Inyección Directa

1260 Bin Pump Hasta 12 Solventes

1- Modo Inyección Directa Std. ALS 900µL head

Flex cube pump

SPE2

Waste

SPE starter set

Waste Column

SPE1

Direct Inject Kit

Flask sampling kit

Page 36

Sistema con SPE alternativo, Inyección Directa y selección de Disolvente

1260 Bin Pump

Hasta 12 Solventes

2- Modo Purga Disolvente Std. ALS 900µL head

SPE2

Flex cube

Waste

SPE starter set

Waste Column

SPE1

Direct Inject Kit

Flask sampling kit

Page 37

Sistema con SPE alternativo, Inyección Directa y selección de Disolvente

1260 Bin Pump

Hasta 12 Solventes

3- Modo Carga SPE Std. ALS 900µL head

Flex cube pump

SPE2

Waste

SPE starter set Column

Direct Inject Kit

Flask sampling kit

Page 38

SPE1

Load

Sistema con SPE alternativo, Inyección Directa y selección de Disolvente

1260 Bin Pump

Hasta 12 Solventes

4- Modo Inyección SPE Std. ALS 900µL head

Load

Flex cube pump

SPE2

Waste

SPE starter set Direct Inject Kit

Flask sampling kit

Page 39

Column

SPE1 Elute

Sistema con SPE alternativo, Inyección Directa y selección de Disolvente

1290 Infinity Compartimento termostatizado de columnas

Innovaciones Tecnológicas:

• Refrigerado por efecto peltier • Permite trabajar desde sub-ambiente hasta 100ºC • Dos zonas independientes de temperatura • Precalentadores de eluyente con distintos volúmenes muertos • Permite alojar una válvula termostatizada

Page 40

1290 Infinity Compartimento de columnas Siguiente nivel en facilidad de uso: New valve drive and valve head New prolonged HX-carrier with 3rd hand (not shown)

New leak funnel

New capillary guide

New door-open sensor

modified lowdisp HX

New Thermal insulation

RFID-tag, stores type, pressure range, valve switches New 2PS/6PT, 2PT/10PT and 9PT/8PS Quick-Change high pressure valves

Page 41

1290 Infinity Detector Diode-Array

Innovaciones Tecnológicas: • 1024 Fotodiodos activos • Tecnologia de celda por “Guia de Ondas” • 160 Espectros por Segundo • Celdas de largo Caminino Óptico y bajo volumen muerto • Rendija proglamable por software • NO se ve afectado por los cambios de Índice de Refracción

Page 42

1290 Infinity Detector Diode Array Como trabaja la óptica

Mirror

160 Hz

Grating

Programmable slit

Deuterium lamp

Max-Light cartridge cell

Page 43

1024 element diode-array

Cartucho de Celda “Max-Light“ Tipos de Celda Non-coated fiber (fused silica)

DISEÑO OPTICO PARA OFRECER UNA MINIMA DISPERSIÓN

CELDA Estandard:  De

10 mm de camino óptico y tan solo 1 µl de volumen

CELDA de Alta Sensibilidad:  De

Page 44

60 mm de camino óptico y tan solo 4,8 µl de volumen

1290 Infinity Detector Diode-Array Rendija programable: Absorbance (mAU) 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 230 240 250 260 270 280 nm

1 nm 2 nm 4 nm 8 nm Nivel de ruido

Rendija Programable para la fácil optimización de la sensibilidad o resolución espectral.

Page 45

Ganancia de Sensibilidad Comparación de la celda Standad con la celda de Alta Sensibilidad DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/Bw:10 nm Ref 360 nm/Bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-STD-CEL7.D) DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/Bw:10 nm Ref 360 nm/Bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-HS-CEL07.D) mAU

Up to 4~7 x Higher Sensitivity*

40

35

30

Max-Light High Sensitivity cell (60 mm) S/N: 2339

25

Max-Light standard cell flow cell (10 mm) S/N: 612

20

Sample: Anthracene, 16.4pg/µl Column: 2.1x50mm BEH C18, 1.8µm Mobile phases: Water/Acetonitrile = 30/70 Flow rate: 0.5ml/min Detection 251, PW >0.05min, Injection volume:1µl Column temp: 36°C

15

10

5

0

0

Page 46

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

min

Incremento 30x del Rango Dinámico Lineal Para cuantificar en 1 sola inyección compuestos con muy distinta respuesta o concentración

Agilent 1200 Infinity High Dynamic Range (HDR-DAD) Solution

1260/1290 Infinity HDR-DAD

Page 47

Rango Dinámico x30 con HDR-DAD Combina 2 DAD„s con celdas Max-Light de 3.7 mm y 60 mm

Detector Signal [AU/cm]

Computing the signals from 60 mm path-length for the low concentration 3.7 mm path-length for the high concentration 3.7 mm path-length

60 mm path-length

10 x higher sensitivity 30x lower Limit of Detection (LOD)

Page 48

Conc ~3x higher upper [µg/mL] limit

Combinaciones Dosis Fijas de varios Principios Activos (API) con Muy Distinta Respuesta: From Roche Switzerland Sin la opción HDR-DAD se requerirán 2 inyecciones con distinto 7 UAvolumen • Agilent 1200 (black): API 2: 10 ml injected • Agilent 1200 (red): API 1: 100 ml injected • Infinity HDR-DAD (blue): API 1 and 2 simultaneously: 70 ml injected

API 2 3 UA

API 1 API 1: iny. 100 ml API 1+2: iny. 70 ml con HDR

Page 49

API 2: iny. 10 ml (API 1 baja resp.) (API 2 satura detector.)

Bomba Cuaternaria 1290 Infinity: BlendAssist (Asistente de Mezclas) Heramienta de software para la dilución en línea de tampones y modificadores: • Mejora la reproducibilidad de los tiempos de retención (inter-día). • Facilita la programación del gradiente con diferentes concentraciones a partir de soluciones stock. Ejemplo: 2 Métodos con distinto % modificador: 1. Water

Water 1% TFA

2.

5 to 95% gradiente de ACN con 0.1% TFA en Agua y 0.08% TFA en ACN. 20 – 80% gradiente de ACN con 0.5% TFA en Agua y 0.4% TFA en ACN.

Sin BlendAssist: Se deben preparar manualmente los 4 eluyentes requeridos o programar complejos gradientes (%A, B, C, D).

Con BlendAssist: ACN

ACN

Page 50

1% TFA

1. 2.

Definir el factor de dilución de las soluciones stock. Programar un sencillo gradiente binario orgánico/acuoso!!

1290 Infinity Cuaternario: Asistente Preparación Mezclas “On-line: BlendAssist*” Heramienta de software para la dilución en línea de tampones y modificadores: Mejora la reproducibilidad y Facilita la programación del gradiente.

Programar un sencillo gradiente binario

BlendAssist calculará el factor de dilución necesario,

* BlendAssist standard incluido en bombas 1290 Cuartenarias. Opcional “BlendAssist Pro“ con funciones adicionales

Page 51

Estudio Repetibilidad Composición y Flujo en Análisis Isocratico de Glucocorticoides: - Mezcla dinámica (/en linea) “vs” mezcla manual diversos usuarios Norm. 30

25

20

15

6 eluyentes mezclados dinámicamente

10

5

0 1

2

3

4

min

El mezclado dinámico mejora considerablemente la reproducibilidad* de tiempos de retención (*entre días)

Norm. 40 35 30 25

6 eluyentes mezclados manualmente (diferentes usuarios)

20 15 10 5

Usuarios1 a 6

0 1

Page 52

2

3

4

min

53

Page 53

Confidentiality Label June 28, 2013

Transferencia del método entre instrumentos Impacto del volumen muerto y de la calidad de la mezcla ¿Que ocurre cuando se programa un gradiente? respuesta 90%

Pasos de programación del gradiente 1200 SeriE Bomba Binaria SL 1290 Infinity Bomba Binaria Perfil del gradiente/ Calidad de la mezcla

10%

Volumen Muerto

1200 Series 1290 Infinity

Page 54

tiempo Volumen muerto total del sistema (suma de los capilares, mezclador, celda, valvulas..)

Analisis en Gradiente con diferentes LC´s Impacto del volumen muerto y de la calidad de la mezcla DAD1 B, Sig=275,4 Ref=400,40 (B:\RIC\AGI...RIC DATA\1 PHARMA METOCLOPRAMIDE\WAD PHARMA\XBRIDGE-2000004.D) mAU 200

8.930

1200 Series LC Quatenary Pump

9.975

12.005 12.215 12.393

10

12

9.545

50

3.049

2.747

100

8.747

8.121 8.323

150

9.937

7.923 7.480

100

6.872 6.328

2.884 2.744

150

6.673

1290 Infinity LC

mAU 200

6.088

2 4 6 8 DAD1 C, DAD1B, DAD: Signal B, 275 nm/Bw:4 nm Ref 400 nm/Bw:60 nm (B:\RIC\AGI...A\GV 1PHARMA\HPLC000001.D)

10.249

0

50 0

12.395 12.630 12.763

8.538

10.379

9.159

8.744

9.951

50

12

El resultado: • Diferencias en los RT y resolución • ¡Desaparece un pico!

3.320

2.887

mAU Sample: 0.5% impurities in formulation 200 (metoclopramide) Xbridge C18, 150x3 mm, 3.5 µm dp, 150 0.45 ml/min, Eluent: A =0 .25 % AmAc, B = ACN, 100 Gradient: 0-15 min; 5-57 % B

10

9.325

2 4 6 8 DAD1 C, DAD1B, DAD: Signal B, 275 nm/Bw:4 nm Ref 400 nm/Bw:60 nm (B:\RIC\AGI...A\GV 1PHARMA\HPLC000003.D)

0 2 Page 55

4

6

8

10

12

NUEVO

Sistema Inteligente Tecnología de Emulación (ISET)

Page 56

Transferencia de metodos: 1290 Infinity LC System Emulation Technology

FA Seleccionar el equipo que quiere ser emulado con un simple click del ratón:

Agilent 1100 Series

Page 57

Agilent 1200 Series LC

Agilent 1260 Infinity LC

Agilent 1220 Infinity LC

Other

Tecnología de Emulación Inteligente ISET Como?

Page 58

Tecnología de Emulación Inteligente Como trabaja (p.e. 1290 con un 1200) mAU 400 350 300

Inyecctión Mismas condiciones de gradiente pero desplazando el gradiente y emulando el perfil de gradiente a clonar

250 200 150 100

Programa de gradiente 1290 gradiente

50

1200 gradiente

0 0

Page 59

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

min

Tecnología de Emulación Inteligente - Como trabaja (1290 con un 1200) mAU 400 350 300

Inyecctión Mismas condiciones de gradiente pero desplazando el gradiente y emulando el perfil de gradiente a clonar

250 200 150 100

Programa de gradiente 1290 gradiente

50

1200 gradiente

0 0

Page 60

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

min

Pesticidas con 1200/1260/1290/1290 ISET 1200

1260

1290 ISET

1290

Used Method: % B: 25-95 %; Time : 8 min; Flowrate: 0.8 ml/min

Page 61

Agilent 1290 Infinity el UHPLC equipado con ISET El arte de la Emulación  Emula cualquier instrumento (U)HPLC – con un simple click de ratón  Ejecuta cualquier método (U)HPLC – sin ninguna modificación del método o del equipo

 Consigue los mismos Tiempos de Retención y resolución de picos – para una Infinitamente mejor transferencia de métodos

Page 62

Transferencia de métodos de HPLC a UHPLC

Page 63

63

¿Preguntas?