TM

TOTAL βhCG REF 33500 Indicaciones

El ensayo Access Total βhCG es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de βhCG total en suero y plasma humanos utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access. La concentración de βhCG determinada mediante este kit puede utilizarse junto con las concentraciones de AFP y estriol no conjugado para evaluar el riesgo de síndrome de Down (trisomía 21). Esta aproximación ha sido verificada utilizando un análisis de distribución gaussiana multivariante 1.

Resumen y explicación

La gonadotrofina coriónica humana (hCG) es una hormona glucoproteínica, producida por la placenta, que estructuralmente se asemeja a las hormonas hipofisarias FSH, TSH y LH. La subunidad alfa (PM 15.000–20.000 daltons) es común a todas estas hormonas, pero las subunidades beta difieren y les confieren especificidad inmunológica y biológica. La hCG beta (PM 25.000–30.000 daltons) comparte varias secuencias peptídicas con LH beta, pero posee una región en el terminal carboxil diferente de las demás hormonas 2,3,4. Determinación de embarazo

Poco después de la implantación de un óvulo fertilizado en la pared uterina, los trofoblastos comienzan a producir hCG. La hormona mantiene las secreciones esteroideas del cuerpo lúteo hasta que la placenta puede hacerlo 5. Durante un embarazo normal, el valor de la hCG es de aproximadamente 50 mUI/mL (UI/L) en la semana después de la concepción, doblándose cada 1,5–3 días durante las primeras seis semanas 6. Los niveles continúan elevándose hasta el final del primer trimestre para, a partir de ahí, descender gradualmente a un nivel inferior durante el resto del embarazo. Después del parto, la hCG vuelve a < 5 mUI/mL (UI/L) y generalmente es indetectable en los primeros días del postparto. La hormona es un excelente marcador del embarazo. Los niveles de las mujeres sanas, no embarazadas, oscilan entre bajos [< 5 mUI/mL (UI/L)] e indetectables. Durante el embarazo, las concentraciones de hCG incrementan en la forma antes mencionada y a continuación muestran un descenso gradual después del primer trimestre. Unos niveles insólitamente bajos o que muestran un rápido declive pueden ser indicativos de una situación anormal, como puede ser un embarazo ectópico o un aborto espontáneo inminente 7. Originalmente, los sistemas de bioensayo medían la hCG por la respuesta del tejido gonadal en varios animales. Estos métodos exhibían una sensibilidad insuficiente, eran difíciles de realizar y requerían grandes volúmenes de muestra. Los tests para medir la hCG en orina empleaban tradicionalmente la aglutinación en látex o métodos de inhibición de la aglutinación. Con el desarrollo de las técnicas de radioinmunoensayo para la medida de hCG por Vaitukaitis y cols. en 1972, se ha podido disponer de ensayos para hCG sensibles y rápidos 8. El posterior desarrollo de los ensayos inmunorradiométricos (IRMA) en dos lugares facilita la realización de ensayos con mayor sensibilidad, especificidad y precisión 9. Pruebas prenatales

El objetivo de las pruebas prenatales es estimar el riesgo relativo de anomalías cromosómicas como la trisomía 21 y la trisomía 18. Este screening prenatal (también conocido como triple screening) se realiza durante el segundo trimestre del embarazo, generalmente entre las semanas 14 y 20 de gestación 10,11. Para realizar el triple screening durante el embarazo se realizan determinaciones de alfafetoproteína (AFP), gonadotropina coriónica humana (hGC) y estriol no conjugado (uE3) en © 2003 Beckman Coulter, Inc.

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suero materno. Los resultados se expresan en términos de múltiplos de la mediana (MoM) quedando establecidas las medianas a partir de conjunto de embarazos normales y estratificadas conforme a la edad gestacional. Cada laboratorio debe establecer sus propios valores medianos. Los resultados obtenidos con estos ensayos deben interpretarse utilizando un software apropiado. Dado que las concentraciones de estos analitos en el suero materno varían en función de la edad gestacional, el calendario del embarazo es crítico. Por lo general la edad gestacional se confirma mediante ultrasonidos, pudiendo medirse bien la longitud cráneo-caudal o el diámetro biparietal. Utilizando un software apropiado, los múltiplos de la mediana resultantes sirven junto con otra información, fundamentalmente la edad materna, para calcular el riesgo relativo de anomalías cromosómicas, en particular de trisomía 21 (síndrome de Down). Test: AFP

La proteína AFP es una glicoproteína de cadena sencilla producida principalmente por el hígado fetal y el saco vitelino. La mediana de su concentración se eleva considerablemente entre las semanas 15 y 22, observándose generalmente valores inferiores en la trisomía 21. Test: hCG

La hormona hCG se produce en la placenta y está compuesta por dos cadenas, alfa y beta, siendo esta última exclusiva de esta glicoproteína. Entre las semanas 15 y 22 de gestación la mediana de su concentración disminuye y en la trisomía 21 suelen registrarse valores superiores. Test: uE3

La hormona uE3 es una hormona esteroidea producida en la placenta que es sintetizada a partir de precursores en la glándula suprarrenal fetal. Entre las semanas 15 y 22 la mediana de su concentración se eleva y en la trisomía 21 se observan por lo general valores inferiores. Principios del procedimiento

El ensayo Access Total βhCG es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones (“sandwich”). Se añade una muestra a una cuveta de reacción conteniendo conjugado de anti βhCG de conejo-fosfatasa alcalina y partículas paramagnéticas recubiertas con complejos IgG antiratón de cabra: anti-βhCG monoclonal de ratón. La hCG se fija a la anti-βhCG monoclonal inmovilizada en la fase sólida mientras que, al mismo tiempo, el conjugado anti-βhCG de conejo-fosfatasa alcalina reacciona con lugares antigénicos diferentes en la hCG. La separación en un campo magnético y el lavado eliminan los materiales no fijados a la fase sólida. Tras la incubación en un vaso de reacción, los materiales unidos a la fase sólida son retenidos en un campo magnético mientras que los materiales que no han quedado unidos a la fase sólida se eliminan mediante lavado. A continuación, se añade al vaso de reacción el sustrato quimioluminiscente Lumi-Phos* 530 y se mide la luz generada por la reacción utilizando un luminómetro. La producción de luz es directamente proporcional a la concentración de hCG en la muestra. La cantidad de analito en la muestra se determina a partir de una curva de calibración de puntos múltiples almacenada.

Información sobre el producto

Envase de reactivos Access Total βhCG Cat. Núm. 33500: 100 determinaciones, 2 envases, 50 ensayos/envase • Se suministra listo para utilizar. • Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a 10 °C. • Conservar en frigorífico de 2 a 10 °C durante un mínimo de dos horas antes de utilizar en el instrumento. • Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se almacena a una temperatura de 2 a 10 °C. • Permanece estable a una temperatura de 2 a 10 °C durante 28 días después del uso inicial. • Una rotura de la capa elastomérica del envase o la presencia de valores de control fuera de rango son indicios de un posible deterioro.

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• Desechar el en vase de reactivo si presenta algún daño (p. ej., rotura de la capa elastomérica). • Todos los antisueros son policlonales a no ser que se indique lo contrario.

Advertencias y precauciones

R1a:

Partículas paramagnéticas recubiertas con complejos IgG antiratón de cabra: anti-βhCG monoclonal de ratón suspendidas en solución salina tamponada TRIS, con surfactante, seroalbúmina bovina (BSA), azida sódica al < 0,1% y ProClin** 300 al 0,1%.

R1b:

Conjugado de anti-βhCG de conejo-fosfatasa alcalina (bovina) diluido en solución salina tampón TRIS, con surfactante, BSA, proteina (cabra, conejo, ratón), azida sódica al < 0,1% y ProClin 300 al 0,25%.

• Para uso diagnóstico in vitro. • Las muestras de los pacientes y los hemoderivados pueden procesarse rutinariamente con un mínimo de riesgo utilizando el procedimiento descrito. No obstante, deben manipularse dichos productos como potencialmente infecciosos con arreglo a las precauciones universales y a las buenas prácticas de laboratorio clínico, independientemente de su origen, tratamiento o certificación previa. Debe utilizarse un desinfectante apropiado para la descontaminación. Deben conservarse y eliminarse dichos materiales y sus envases con arreglo a las normas y directrices locales. • La azida sódica puede reaccionar con las tuberías de plomo y cobre y formar azidas metálicas muy explosivas. Al desechar los líquidos, debe lavarse con abundante agua para evitar la acumulación de azidas 12. • Xi. Irritante: 0,25% ProClin 300. R 43: Posibilidad de sensibilización en contacto con la piel. S 28-37: En caso de contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente con jabón y agua. Úsense guantes adecuados. • La Hoja de Datos de Seguridad (MSDS) puede obtenerse previa solicitud.

Recogida y preparación de las muestras

Las muestras recomendadas son suero y plasma (heparina). Para la manipulación, proceso y conservación de las muestras de sangre deben cumplirse las siguientes recomendaciones 13,14: • Recoger todas las muestras de sangre observando las precauciones habituales de la venopunción. • Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su centrifugado. • Mantener las probetos cerradas en todo momento. • Antes de transcurridas dos horas desde el centrifugado, transferir al menos 500 µL de muestra sin células a una probeta de conservación. Inmediatamente después, cerrar la probeta herméticamente. • Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a 30 °C) durante un período no superior a ocho horas. • Si el ensayo no se realizara dentro de las ocho horas siguientes, refrigerar las muestras a una temperatura de 2 a 8 °C. • Si el ensayo no se realizara dentro de las 48 horas siguientes, o para el transporte de las muestras, congelar a una temperatura de -20 °C o inferior. • Descongelar las muestras una sola vez. Observar las siguientes recomendaciones a la hora de preparar las muestras a menos que se indique lo contrario en la ficha técnica del producto: • Antes de realizar el análisis asegurarse de que se han eliminado la fibrina residual y el material celular. • Observar las recomendaciones de centrifugado del fabricante del tubo de recogida de

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muestras sanguíneas. Cada laboratorio deberá determinar la validez de sus propios tubos de recogida de muestras de sangre y de sus productos para separación de suero. Pueden existir diferencias en estos productos entre diferentes fabricantes y, en ocasiones, entre distintos lotes. Las muestras congeladas pueden ser almacenadas hasta seis meses 15. Envases de reactivos Access Total βhCG

Materiales suministrados

R1

Materiales necesarios pero no suministrados

1. Calibradores: Access Total βhCG Calibrators Se suministran a cero y aproximadamente 5, 25, 50, 500 y 1000 mUI/L (UI/L). Cat. Núm. 33505 2. Materiales de control de calidad: material de control de calidad comercial 3. Sustrato: Access Substrate Cat. Núm. 81906 4. Solución tamponada de lavado Access: Access Wash Buffer Cat. Núm. 81907 (Access, Access 2, SYNCHRON LX®í) Cat. Núm. 8547197 (Unicel™ DxI)

Comentarios sobre el procedimiento

1. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener una descripción específica de la instalación, puesta en marcha, principios de funcionamiento, características de rendimiento del sistema, instrucciones de funcionamiento, procedimientos de calibración, limitaciones y precauciones operativas, riesgos, mantenimiento y resolución de problemas. 2. Mezclar el contenido de los envases de reactivo nuevos (sin perforar) invirtiendo suavemente los envases varias veces antes de cargarlos en el instrumento. No invierta envases abiertos (perforados). 3. Utilice veinticinco (25) µL de muestra para cada determinación, además del volumen de muerto del recipiente para la muestra. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para determinar el mínimo volumen de muestra requerido. 4. La unidad de medida predeterminada de los resultados de las muestras es mUI/mL. Para modificar las unidades de notificación de los resultados al Sistema Internacional de Unidades (unidades SI), UI/L, consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener instrucciones detalladas. Para convertir manualmente las concentraciones al sistema internacional, multiplicar mUI/mL por el factor de multiplicación 1.

Procedimiento

Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda la información relativa a la manipulación de las muestras, la configuración de los tests, las solicitudes de tests y las revisiones de los resultados de los tests. Para procesar muestras con valores de βhCG total superiores a 1000 mUI/mL, seleccionar TΒhCG2. Seleccionar Dil-hCG2 para procesar muestras con valores de βhCG total > 1000 mUI/mL. Se utiliza el mismo estuche de reactivos en ambos ensayos.

Detalles de la calibración

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Para todos los ensayos es necesaria una curva de calibración activa. Para el ensayo Access Total βhCG, se requiere realizar la calibración cada 28 días. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener información acerca de la teoría de calibración, la configuración de calibradores, la introducción de solicitud de la prueba del calibrador y la revisión de los datos de calibración.

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Control de calidad

Los materiales de control de calidad simulan las características de las muestras de los pacientes y son esenciales para controlar el rendimiento del sistema de ensayos inmunoquímicos. Dado que las muestras pueden procesarse en cualquier momento en formato de “acceso aleatorio” en lugar de “por lotes”, deben incluirse materiales de control de calidad en cada período de 24 horas 16. Incluya materiales de control de calidad existentes en al mercado que abarquen al menos dos niveles de concentración de compuesto. Siga las instrucciones del fabricante para su reconstitución y conservación. Cada laboratorio deberá establecer los valores medios y los rangos aceptables para garantizar resultados correctos. Los resultados de control de calidad que no se encuentran dentro de los rangos aceptables pueden indicar resultados de ensayo no válidos. Examine los resultados de todos los ensayos generados desde la obtención del último punto de prueba de control de calidad aceptable para el analito en cuestión. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener información acerca de la revisión de los resultados de control de calidad.

Resultados

Los resultados de las pruebas de los pacientes son determinados automáticamente por el software del sistema utilizando un modelo matemático de aproximación por splines. La cantidad de analito en la muestra se determina a partir de la producción de luz medida mediante los datos de calibración almacenados. Los resultados de las pruebas de los pacientes pueden revisarse utilizando la pantalla apropiada. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener instrucciones completas sobre la revisión de los resultados de las muestras.

Limitaciones del procedimiento

1. Las muestras pueden medirse con precisión dentro del rango analítico comprendido entre el límite inferior de detección y el mayor valor del calibrador [aproximadamente 0,5–1.000 mUI/mL (UI/L)]. 2. Para medir con precisión muestras que contengan entre 1000-200.000 mUI/mL, seleccionar el test Dil-hCG2. Con este test se utiliza el envase TβhCG2. Cuando se registra el ensayo Dil-hCG2 el sistema diluye automáticamente la muestra y realiza la lectura de la concentración resultante de la curva de calibración de TβhCG2. El sistema lo multiplica por el factor de dilución definido en su software (200) y calcula los resultados finales del ensayo. 3. Alternativamente, las muestras que contengan > 1000 mUI/mL pueden procesarse también mediante una dilución previa fuera del equipo siguiendo las etapas siguientes: • Diluir un volumen de muestra con 199 volúmenes de tampón de lavado (1/200) o diluir según el protocolo de dilución del laboratorio. OBSERVACIÓN: La dilución con otros tampones alternativos puede originar la obtención de resultados erróneos. • Introducir en el sistema el factor de pre-dilución al introducir la solicitud de test. Solicitar la realización del test TβhCG o Dil-hCG2. • El sistema multiplicará automáticamente el resultado por el factor de pre-dilución e informará dicho valor. OBSERVACIÓN: Si el sistema informa un resultado de Dil-hCG2 prediluído < 1000 mUI/mL (UI/L), diluir de nuevo la muestra de forma que la lectura quede comprendida entre 1000 y 200.000 mUI/mL (UI/L). La lectura de una muestra pura < 1000 mUI/mL en el ensayo Dil-hCG2 debería confirmarse en el ensayo TβhCG. • Si no se ha seleccionado la opción de pre-dilución, multiplicar el valor calculado por el factor de dilución 200 (o por otro factor de dilución seleccionado) después de analizar la muestra diluida utilizando el ensayo Total βhCG. • Si el valor calculado de la muestra diluida utilizando el ensayo Total βhCG es < 5 mUI/mL (UI/L), diluir de nuevo un volumen de la muestra con 99 volúmenes de tampón de ensayo (1/100) y volver a analizar recordando multiplicar el valor calculado por el factor de dilución 100. • Consultar en los manuales del sistema correspondientes y/o el sistema de ayuda las instrucciones adicionales sobre el procesamiento de muestras pre-diluidas. 4. NO REUTILIZE los pequeños volúmenes de muestra que han permanecido en el ordeandor más de una hora.

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5. El ensayo de Access βhCG Total no muestra “efecto hook” discernible a 1.000.000 mUI/mL. 6. En los ensayos en los que se emplean anticuerpos murinos pueden producirse interferencias provocadas por anticuerpos antirratón humanos (HAMA) presentes en la muestra. En muestras de pacientes que han sido sometidos a inmunoterapia o a procedimientos de diagnóstico en los que se utilizan anticuerpos monoclonales murinos 17,18 o en muestras de individuos expuestos de forma regular a animales, puede haber presencia de anticuerpos antirratón humanos (HAMA). Asimismo, también pueden estar presentes en las muestras de pacientes otros anticuerpos heterófilos tales como anticuerpos anticabra humanos. 7. Los resultados del ensayo Access Total βhCG deben interpretarse a la luz del cuadro clínico total del paciente, incluidos: síntomas, historial clínico, datos de análisis adicionales y otros datos apropiados. 8. Si la concentración de βhCG no concuerda con el cuadro clínico, es preciso confirmar los resultados mediante un método de hCG alternativo o un ensayo de orina 19. 9. Descartar la presencia de enfermedades trofoblásticas o no trofoblásticas antes de informar los resultados. 10.Los resultados de detección prenatal de Total βhCG por si solos no poseen valor diagnóstico. Los resultados deben interpretarse junto con otra información utilizando el software apropiado. Valores esperados

1. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia para garantizar la representación adecuada de poblaciones específicas. 2. Cada laboratorio debe establecer sus propios valores medianos para la detección prenatal. 3. Se midieron las concentraciones de βhCG total en muestras de suero humano recogidas de varones adultos aparentemente sanos y de mujeres no gestantes utilizando el ensayo Access βhCG Total. A continuación figura el rango observado de concentraciones de βhCG total. Grupo de referencia

n

Mediana (mUI/mL)

Intervalo 95% (mUI/mL)

Hombres Mujeres no gestantes

250 250

< 0,5 < 0,5

< 0,5–2,67 < 0,5–2,90

Intervalos esperados: varones adultos aparentemente sanos y mujeres no gestantes

180

recuento

160 140

hombres

120

mujeres

100 80 60 40 20 0

Bin

0

0,5

1 1,5 mUI/mL

2

2,5

3

4. A continuación se resumen los rangos representativos de βhCG total durante una gestación normal 2. Dado que otras citas de referencia clínica pueden mostrar valores diferentes, cada laboratorio debe establecer sus proprios rangos de referencia.

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Características específicas del funcionamiento

Edad Gestacional Aproximada (semanos)

Rango de hCG Aproximado (mUI/mL, UI/L)

Edad Gestacional Aproximada (semanos)

Rango de hCG Aproximado (mUI/mL, UI/L)

0,2–1 1–2 2–3 3–4

5–50 50–500 100–5.000 500–10.000

4–5 5–6 6–8 8–12

1.000–50.000 10.000–100.000 15.000–200.000 10.000–100.000

Comparación entre métodos

Una comparación de los valores de βhCG total en suero utilizando el ensayo Access Total βhCG en el Sistema de Inmunoensayo Access y un kit de inmunoensayo existente en el mercado proporcionó los siguientes datos estadísticos utilizando cálculos de Deming:

n

Rango de observaciones (mUI/mL)

Intersección (mUI/mL)

Pendiente

Coeficiente de correlación (r)

119 56

1,82–939,50 1,82–68,9

-6,56 1,42

0,914 0,804

0,981 0,970

Una comparación de los valores de βhCG total obtenidos analizando pares de muestras de suero y plasma mediante el ensayo Access Total βhCG en el Sistema de Inmunoensayo Access, proporcionó los siguientes datos estadísticos utilizando cálculos de Deming:

n

Rango de observaciones (mUI/mL)

Intersección (mUI/mL)

Pendiente

Coeficiente de correlación (r)

148

0,59–961,08

-1,75

0,957

0,995

Recuperación de dilución (linealidad)

Diluciones múltiples de dos muestras que contienen varios niveles elevados de hCG con el Calibrador Access Total βhCG (cero) han dado los siguientes datos:

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Muestra 1

Concentración esperada (mUI/mL)

Concentración determinada (mUI/mL)

Recuperación (%)

Neta 1/1,2 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32

N/A 437,39 262,44 131,22 65,61 32,80 16,40

524,87 438,18 253,79 127,16 58,83 31,70 16,57

N/A 100 97 97 90 97 101

Recuperación % media

97

Muestra 2

Concentración esperada (mUI/mL)

Concentración determinada (mUI/mL)

Recuperación (%)

Neta 1/1,2 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32

N/A 616,53 369,92 184,96 92,48 46,24 23,12

739,83 618,32 362,90 171,73 83,38 47,15 24,74

N/A 100 98 93 90 102 107

Recuperación % media

98

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Correlación entre instrumento y dilución externa

El siguiente análisis de regresión de Deming se obtuvo de estudios donde se evaluaron protocolos de dilución manual externa en comparación con el protocolo de dilución del Sistema Access. Rango de obseraciones (mUI/mL)

Intersección ajustada (mUI/mL)

Pendiente

Coeficiente de correlación (r)

105 92 64

1037–196.361 1037–49.948 1037–10.267

497 -167,79 -10,45

0,949 1,002 0,975

0,998 0,997 0,993

Access (dilución en linea) mUI/mL

n

Trazado del método de comparacíon de βhCG total 250000 200000 150000 100000 50000 0 0

50000

100000 150000 Dilución manual, mUI/mL

200000

250000

Imprecisión

Este ensayo muestra una imprecisión total inferior al 10% en todo el rango del ensayo. Un estudio realizado con material de control basado en suero humano existente en el mercado, en el que se generaron un total de 20 ensayos, 3 duplicados por ensayo, durante 14 días proporciono los siguientes datos que fueron, analizados mediante análisis de varianza (ANOVA) 20,21. Muestra

Media total (n=60) (mUI/mL)

Intraensayo SD

Intraensayo (%CV)

SD total

Imprecisión total (%CV)

Bajo Medio Alto

6,95 22,35 321,17

0,15 0,37 4,29

2,15 1,67 1,34

0,17 0,63 10,85

2,42 2,81 3,38

Especificidad analítica / Interferencias

Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL (171 µmol/L) de bilirubina, muestras lipémicas que contienen el equivalente a 1800 mg/dL (20,32 mmol/L) de triglicéridos, y muestras hemolizadas que contienen hasta 500 mg/dL (5 g/L) de hemoglobina, no afectan a la concentración de la βhCG Total testada. Además, las muestras con 3 g/dL (30 g/L) de albúmina humana adicionada a la albúmina endógena contenida en las muestras no afectan a la concentración de βhCG analizado. No hubo reactividad cruzada significativa [< 0,5 mUI/mL (UI/L)] al adicionar hLH, hFSH y hTSH al Access Total βhCG Calibrador S0 (cero) a 1000 mUI/mL (UI/L), 1000 mUI/mL (UI/L) y 1 mUI/mL (UI/L), respectivamente. La especificidad porcentual molar al adicionar 10 mUI/mL (UI/L) de la subunidad de βhCG libre, OMS 75/551, al Access Total βhCG Calibrador S0 (cero) es aproximadamente 200%.

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Sensibilidad analítica

El mínimo nivel detectable de hCG distinguible de cero (Access Total βhCG Calibrador S0) con un grado de confianza del 95% es 0,5 mUI/mL . Este valor se determina procesando una curva de calibración completa de seis puntos, controles y 10 replicados de calibrador cero en ensayos múltiples. Se interpola el valor de la sensibilidad analítica a partir del punto de la curva que se encuentra a dos desviaciones estándar de la señal cero promedio medida del calibrador. Pruebas prenatales

En un estudio “se utilizaron los reactivos Access de Beckman Coulter para AFP, uE3 y hCG (con sus correspondientes productos de calibración) en un analizador Access. Durante un periodo de 6 semanas se procedió a evaluar la concordancia entre los ensayos Access y los ensayos utilizados en la actualidad en 558 pacientes con edades gestacionales comprendidas entre 14 y 22 semanas. La concordancia se evaluó utilizando un gráfico de diferencias de Bland-Altman que expresa la diferencia entre los métodos como un porcentaje del valor medio observado con los dos métodos. Los ensayos Access AFP y hCG exhibieron una concordancia proporcional consistente con la de los ensayos tradicionales, mientras que la concordancia entre los métodos uE3 fue menos consistente. La imprecisión analítica osciló entre el 3-6% en las concentraciones registradas a mediados del trimestre. Se obtuvieron distribuciones normales para los valores de log MoM de los tres marcadores tanto en las poblaciones con síndrome de Down como en las poblaciones no afectadas y sus parámetros de distribución gaussiana fueron equiparables a los valores establecidos. El rendimiento de los ensayos Access en un algoritmo de riesgo trivariante* para el síndrome de Down fue equivalente al rendimiento que exhibieron los métodos tradicionales. El analizador Access de Beckman Coulter proporciona resultados válidos de AFP, uE3 y hCG en suero a mediados del trimestre y estimaciones de riesgos válidas si se dirigen a un servicio de screening de síndrome de Down prenatal” 1. *La evaluación del riesgo de trisomía 21 se realizó utilizando el software AFP Expert de Benetech, Inc.

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TOTAL βhCG CALIBRATORS REF 33505 Indicaciones

Los calibradores Access Total βhCG Calibrators están destinados a la calibración del ensayo Access Total βhCG para la determinación cuantitativa de los niveles de βhCG total en suero y plasma humanos utilizando los Sistemas de Inmunoensayo Access.

Resumen y explicación

La calibración de ensayos cuantitativos es el proceso mediante el cual se analizan muestras con concentraciones de analito conocidas (es decir, calibradores del ensayo) se analizan como muestras de pacientes para medir la respuesta. La relación matemática entre las respuestas medidas y las concentraciones de analito conocidas establece la curva de calibración. Dicha relación matemática, o curva de calibración, se utiliza para convertir las mediciones de RLU (Unidad de Luz Relativa) de las muestras de los pacientes a concentraciones cuantitativas y específicas de analito.

Trazabilidad

El mesurando (analito) de los calibradores Access Total βhCG Calibrators es trazable al 3er Patrón Internacional de la OMS 75/537 22. El proceso de trazabilidad está basado en la norma prEN ISO 17511. Los valores asignados se establecieron utilizando muestras representativas de este lote de calibradores y son específicos de los métodos de ensayo de los reactivos Access. Los valores asignados mediante otras métodos pueden ser distintos. En caso de presentarse estas diferencias, pueden ser debidas a sesgos entres los distintos métodos de ensayo.

Información sobre el producto

Access Total βhCG Pagina 10

Access Total βhCG Calibrators Cat. Núm. 33505: S0–S5, 4,0 mL/vial • Se suministra listo para utilizar. • Almacenar a -20 ˚C. • Descongelar a temperatura ambiente y mezclar el contenido suavemente invirtiéndolo antes de su uso. Evitar la formación de burbujas. • Devolver los calibradores a -20°C después de cada uso. • Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se almacena de a una temeratura -20 ˚C. • La presencia de valores de control fuera de rango es un indicio de un posible deterioro. • Consultar en la tarjeta de calibración o en las etiquetas de los viales las concentraciones exactas. S0:

Matriz tamponada de seroalbúmina bovina (BSA) con surfactante, azida sódica al < 0,1% y ProClin** 300 al 0,5%. Contiene 0,0 mUI/mL (UI/L) de hCG.

S1, S2, S3, S4, S5:

hCG en niveles de aproximadamente 5; 25; 150; 500 y 1000 mUI/mL (UI/L), respectivamente, en matriz tamponada de BSA con surfactante, azida sódica al < 0,1% y ProClin 300 al 0,5%.

Tarjeta de calibración:

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Advertencias y precauciones

• Para uso diagnóstico in vitro. • Se ha analizado el material de origen humano utilizado en la preparación del reactivo y se ha encontrado no reactivo para el antígeno de superficie de la Hepatitis B (HBsAg), para los anticuerpos frente al virus de la Hepatitis C (VHC), y para los anticuerpos contra el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH-1 y VIH-2). Considerando que, en la actualidad, no existen métodos analíticos que garanticen la ausencia absoluta de agentes infecciosos, los reactivos, así como las muestras de los pacientes, deben manipularse comi si fueran transmisores potenciales de enfermedades infecciosas 23. • Material purificado de origen humano, procedente de mujer gestante. Tratar como potencialmente infeccioso 23. • La azida sódica puede reaccionar con las tuberías de plomo y cobre y formar azidas metálicas muy explosivas. Al desechar los líquidos, debe lavarse con abundante agua para evitar la acumulación de azidas 12. • Xi. Irritante: 0,5% ProClin 300. R 43: Posibilidad de sensibilización en contacto con la piel. S 28-37: En caso de contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente con jabón y agua. Úsense guantes adecuados. • La Hoja de Datos de Seguridad (MSDS) puede obtenerse previa solicitud.

Procedimiento

Detalles de la calibración

Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener información sobre la teoría de calibración, la configuración de calibradores, la introducción de solicitud de la prueba de calibración y la revisión de los datos de calibración. Los Calibradores Access Total βhCG Calibrators se suministran a seis niveles - cero y aproximadamente 5; 25; 150; 500 y 1.000 mUI/mL (UI/L) - preparados gravimétricamente a partir de hCG purificada y matriz amortiguada, de BSA. Los datos de calibración del ensayo son válidos durante un plazo de hasta 28 días. Los calibradores se analizan por duplicado.

Limitaciones del procedimiento

Si existen indicios de contaminación microbiana o de turbidez excesiva en un reactivo, debe desecharse el vial.

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Referencias

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Access, SYNCHRON LX y UniCel son marcas registradas de Beckman Coulter, Inc. *Lumi-Phos es una marca registrada de Lumigen, Inc. **ProClin es una marca registrada de Rohm y Haas Company o sus filiales o asociadas.

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Fabricado por: Beckman Coulter, Inc. 4300 N. Harbor Blvd. Fullerton, CA 92835 U.S.A. Impreso en U.S.A. Fabricado en U.S.A. Editado en novembro de 2003.

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