Informe de Resultados de Vigilancia de Laboratorio Micotoxinas en Alimentos Resumen Ejecutivo: En el año 2013 el Laboratorio de Toxinas Marinas y Micotoxinas, realizó 204 análisis para la detección de micotoxinas, lo que refleja un 79% del cumplimiento del “Programa Nacional Vigilancia Micotoxinas 2013” establecido por el Ministerio de Salud. Se incorporaron análisis de 59 muestras obtenidas directamente por el ISP. El 17,2% de los análisis realizados correspondieron a harinas y el 14,7% a especias. Se obtuvo 1 resultado sobre los Límites Máximos Permitidos para Patulina (jugo de fruta). Para las micotoxinas Aflatoxina M1, Fumonisinas y Zearalenona se obtuvieron resultados no detectables.

Antecedentes: Las micotoxinas son compuestos altamente tóxicos que son el resultado del metabolismo secundario de ciertos hongos, antes de la cosecha o durante la post-cosecha (1) en condiciones favorables para la multiplicación fúngica y la producción de micotoxinas, entre las que destacan factores físicos tales como humedad y agua disponible, temperatura, zonas de microflora (pequeñas zonas del alimento con alto contenido de humedad) e integridad física del grano o del alimento y factores químicos: composición del sustrato, pH, nutrientes minerales y disponibilidad de oxígeno(2). Los efectos tóxicos de las micotoxinas sobre la salud humana y animal son de curso crónico, incluyen carcinogenicidad, inmunosupresión y disrupciones endocrinas; la principal vía de exposición es la oral a través del consumo de alimentos contaminados, aunque también se presentan casos de micotoxicosis por inhalación(3). Las aflatoxinas se producen en los frutos secos, los cereales y el arroz por acción de Aspergillus flavus y Aspergillus parasiticus. El primero de ellos, sólo sintetiza aflatoxinas B, mientras que aflatoxinas B y G son producidas por Aspergillus parasiticus. Las aflatoxinas M son metabolitos oxidativos de las aflatoxinas B, producidos por los mamíferos tras la ingestión de alimentos contaminados con éstos y que se presentan en la leche, la orina y las heces (4). La zearalenona es producida por diferentes especies del género Fusarium spp. tiene distribución mundial y los principales sustratos afectados son trigo, maíz, sorgo, cebada y piensos. (3). La patulina es producida por hongos pertenecientes a varios géneros, incluidos Penicillium, Aspergillus y Byssochlamys. Los alimentos contaminados con mayor frecuencia por esta

micotoxina son duraznos, uvas, melones, peras, aceitunas, cereales y principalmente manzanas y los productos derivados de estas (5). Aspergillus ochraceus, Penicillium verrucosum y P. viricatum, se consideran los principales productores de Ocratoxina A (OTA), siendo los cereales, en humanos, y los piensos, en animales las principales fuentes de exposición alimentaria (6). El deoxinivalenol es el tricoteceno más prevalente, producido principalmente por el género Fusarium (5) que contaminan cereales como avena, trigo, cebada y maíz (3). El Reglamento Sanitario de los Alimentos (RSA) (7), establecía los Límites Máximos Permitidos (LMP) para Aflatoxinas Totales, Aflatoxina M1 y Zerealenona en alimentos destinados a consumo humano; en el año 2013 se incorporó Patulina, Ocratoxina A, Deoxinivalenol y Fumonisinas (8). Tabla 1: Límites Máximos Permitidos (LMP) de micotoxinas en alimentos destinados a consumo humano. Micotoxina

LMP

Alimento Asociado Cereales y sus derivados; los siguientes tipos de especias: Capsicum, Pimienta, Nuez Moscada, Jengibre y Cúrcuma; y los siguientes frutos secos: maní, almendras, nueces, avellanas, pistachos, higos secos y nueces de Brasil.

Aflatoxinas totales

10 ppb

Aflatoxina M1

0,5 ppb

Leche cruda, leche natural tratada térmicamente y leche para la fabricación de productos lácteos.

Zearalenona

200 ppb

Cereales y sus derivados.

Patulina*

50 ppb

Jugos o zumos, concentrados, néctares, compota y puré de manzanas, peras, peras asiáticas, nísperos y membrillos.

5 ppb

Cereales y sus derivados; cacao; pasas, jugos o zumos, néctares y concentrado de uva; y café en grano.

10 ppb

Café soluble (Café instantáneo)

750 ppb

Cereales y sus derivados.

4000 ppb

Maíz no elaborado.

Ocratoxina*

Deoxinivalenol*

Fumonisinas* 1000 ppb

Maíz y sus derivados para consumo directo.

*LMP entrará en vigencia el 5/10/2014, según DS 22/2013 MINSAL El Instituto de Salud Pública (ISP) de Chile en su función de Laboratorio Nacional y de Referencia tiene un rol importante en la vigilancia de estos contaminantes. Actualmente, cuenta con

capacidad analítica, para la detección de 7 grupos de micotoxinas en matrices de alimentos (Aflatoxinas totales B1, B2, G1 y G2, Aflatoxina M1, Zearalenona, Ocratoxina, Patulina, Deoxinivalenol y Fumonisinas).

Material y método: Se realizó la determinación de micotoxinas mediante cromatografía líquida con detector de fluorescencia (HPLC/FLD), los resultados se capturaron y procesaron en el paquete Excel 2007. Tabla 2: Límites de Detección (LD) de micotoxinas en alimentos destinados a consumo humano, según método. Micotoxina

LD 9,10

Aflatoxinas totales

0,1 ppb

Aflatoxina M1

0,01 ppb

11

Zearalenona

5 ppb

12

Patulina

2 ppb

13

Ocratoxina

0,5 ppb

14,15

16

Deoxinivalenol

50 ppb

Fumonisinas

100 ppb

17

Resultados de la Vigilancia de Laboratorio: En el año 2013, el Instituto de Salud Pública realizó 204 análisis para la determinación de micotoxinas, lo cual representa un aumento del 161,5% respecto al año 2012 (78 análisis). Se analizarón muestras provenientes de la Secretaria Regional Ministerial de Salud (SEREMI) de Valparaíso (32), Región Metropolitana (16), O’Higgins (31), Maule (34), Magallanes (6), Biobío (26); dada la implementación de la técnica de análisis de M1 en leche, el ISP incorporó 59 muestras además se incluyeron muestras obtenidas por el ISP (59) directamente. El cumplimiento general del Programa Nacional Vigilancia Micotoxinas 2013 (18) fue del 79% (145/205). En el caso de la SEREMI del Maule, Valparaíso y O’Higgins presentan un alto porcentaje de cumplimiento siendo estos del 97%, 91% y 78% respectivamente, por el contrario, destaca que la SEREMI de Antofagasta no remitió muestras (Figura 1).

La Figura 2 muestra los análisis realizados según mes de recepción y procedencia, destaca que el 19,6% de las muestras provenientes de las SEREMI se recibieron en agosto.

Según grupo de alimentos, el 17,2% (35/204) de las muestras analizadas correspondió a harinas y el 14,7% (30/204) a especias (Figura 3).

En total se realizaron 334 análisis, donde el 31,1% (104/334) correspondió a Aflatoxinas Totales en matrices de: alimento infantil, especias, harinas y frutos secos; y el 21% (70/334) correspondió a Ocratoxina en matrices de: alimento infantil, estimulantes y fruitivos, especias y productos de confitería (Figura 4).

Se realizaron 104 análisis para la determinación de Aflatoxinas Totales (B1, B2, G1 y G2). El 89,4% (93/104) de ellos presentó resultados inferiores al límite de detección (0,1 ppb). Por otro lado, se obtuvieron resultados detectables en especias (ají merkén) y frutos secos (almendras sin cáscara, maní tostado), en valores inferiores a los LMP establecidos por la normativa (Tabla 3 y Tabla 4). En el año 2012 también se obtuvieron resultados bajo el LMP para Aflatoxinas Totales en especias.

Micotoxinas Aflatoxina B1 Aflatoxina G1 Aflatoxinas Totales

Tabla 3: Estadística descriptiva de Aflatoxinas Totales en frutos secos. Chile 2013. n min ppb max ppb media ppb 6 0,20 0,60 0,42 5 1,50 2,70 2,04 6 0,20 3,10 2,12

DS 0,13 0,43 1,00

Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile Tabla 4: Estadística descriptiva de Aflatoxinas Totales en especias. Chile 2013. Micotoxinas n min ppb max ppb media ppb Aflatoxina B1 5 0,20 0,80 0,46 Aflatoxina B2 5 0,02 0,10 0,06 Aflatoxinas Totales 5 0,22 0,90 0,52 Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile

DS 0,24 0,04 0,27

Se realizaron 45 análisis para la detección de Deoxinivalenol (35 de harinas y 10 de alimento infantil), el 78% (35/45) presentó resultados no detectables; mientras que en el 22,2% (10/45) se detectó Deoxinivalenol en niveles inferiores al Limite Máximo Permitido, en muestras correspondientes a harinas (Tabla 5). Tabla 5: Estadística descriptiva de Deoxinivalenol en harinas. Chile 2013. n min ppb max ppb media ppb DS 10 74 490,00 250,60 166,26 Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile

Para la detección de Ocratoxina se realizaron 70 análisis (15 productos de confitería, 10 alimentos infantil, 30 especias y 15 estimulantes y fruitivos) donde el 40% (28/70) fueron resultados no detectables. Ninguna muestra presento resultados por sobre lo que establece la normativa del RSA (Tablas 6, 7). Tabla 6: Estadística descriptiva de Ocratoxina en productos de confitería. Chile 2013. n min ppb max ppb media ppb DS 12 0,5 2,30 1,43 0,59 Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile

Tabla 7: Estadística descriptiva de Ocratoxina en estimulantes y fruitivos. Chile 2013. n min ppb max ppb media ppb DS 13 0,8 3,00 1,57 0,56 Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile

Se detectó presencia de Ocratoxina en especias, matriz para la cual no existe límite máximo regulatorio establecido (Tabla 8). Tabla 8: Estadística descriptiva de Ocratoxina en especias. Chile 2013. n min ppb max ppb media ppb DS 17 0,5 416,30 33,92 101,44 Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile

Para la detección de Patulina se realizaron 39 análisis, 3 de ellos correspondientes a jugo de frutas presentaron resultados detectables, solo uno con niveles sobre el límite máximo establecido por la normativa (50,7 ppb). Tabla 9: Estadística descriptiva de Patulina en jugo de fruta / pulpa de fruta. Chile 2013. n min ppb max ppb media ppb DS 3 8,6 50,70 27,13 21,50 Fuente: Laboratorio de Micotoxinas y Toxinas Marinas Instituto de Salud Pública de Chile

Se realizarón 20 análisis para la detección de Aflatoxina M1, 11 para Fumonisinas y 45 para Zearalenona, todos ellos con resultados no detectables.

Conclusiones: 

El cumplimiento general del “Programa Nacional Vigilancia Micotoxinas 2013” fue de un 79%.



El 17,2% de los análisis realizados correspondieron a harinas y el 14,7% a especias.



Se obtuvieron resultados detectables para Aflatoxinas Totales y Deoxinivalenol, sin embargo, estos fueron inferiores a los Limites Máximos Permitidos establecidos por la normativa del Reglamento Sanitario de Alimentos.



Se obtuvo 1 resultado sobre los Límites Máximos Permitidos para Patulina.



Para las micotoxinas Aflatoxina M1, Fumonisinas y Zearalenona se obtuvieron resultados no detectables.

Referencias 1. Rodríguez HWM. Micotoxinas y Aflatoxina B1, un problema en salud animal. Revista Teoría y Praxis Investigativa. Centro de Investigación y Desarrollo. CID. Fundación Universitaria de Área Andina. 2010; 5, 71-78. 2. Gimeno A., Martis M. L. Micotoxinas y Micotoxicosis en animales y humanos. 3° edición Internet]. [Visitado el 30 de mayo de 2013]. Disponible en: http://www.specialnutrients.com/pdf/book/3%20edicion%20MICOTOXINAS%20LR%20Secure. pdf 3. Duarte-Vogel S, Villamil-Jiménez LC. Micotoxins in Public Health. Revista de Salud Pública. 2006 May; 8:129–35. 4.

Peraica M; Radi´c B, Pavlovic M. Efectos tóxicos de las micotoxinas en el ser humano. Boletín de la Organización de la Salud. [Internet]. [Visitado el 30 de mayo de 2013]. Disponible en: https://apps.who.int/bulletin/digests/spanish/number2/bu0024.pdfbu0024.pdf

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13. Maria Joao Barreira et.al. Ocurrence of patulin in apple-based foods in Portugal. Food Chemistry 121 (2010) 653-658. 14. Sugita- Konishi et.al . The comparison of two clean-up procedures, multifunctional column and inmunoaffinity column, for HPLC determination of ochratoxin A in cereals, raisins and green coffee beans. Talanta 69(2006) 650-655. 15. Copeti et.al.Co-occurrence of ochratoxin A and aflatoxins in chocolate marketed in Brazil.Food Control 26 (2012) 36-41. 16. Sugita-Konishi et.al. Validation of an HPLC analytical method coupled to a multifunctional clean-up column for the determination of deoxynivalenol. Mycophatologia (2006) 161:239243. 17. J.Rubert et.al. A survey of mycotoxins in random Street-vended snacks from Lagos, Nigeria, using QuEChERS-HPLC-MS/MS. Food Control 32 (2013) 673-677. 18. Subsecretaría de Salud Pública, Ord.B34/N°1776 de fecha 31 de mayo de 2013.

Elaborado por: Instituto de Salud Pública de Chile