LA SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

AREA MICROBIOLOGÍA. UNSL.

2016

Equipo docente:

Dra. Alba E. Vega Dra. María Esther Escudero Dra. Gabriela Favier Dra. Cecilia Lucero Estrada Dra. M. Cecilia Villa Lic. Claudia Cáceres

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LA SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Las personas que trabajan en un laboratorio están expuestas a una serie de riesgos potencialmente graves. Comúnmente están en contacto con sustancias químicas y vapores tóxicos y explosivos, carcinógenos, sustancias cáusticas, altos voltajes, radiaciones, etc. En un laboratorio de Microbiología hay que agregar otro riesgo: la INFECCION. La infección difiere de la mayoría de los otros riesgos en que los efectos no están limitados a quien trabaja individualmente ni a sus compañeros de trabajo, sino que la infección también puede transmitirse fuera del laboratorio, a partir de su persona a remotas situaciones o individuos, ya sea en forma primaria o secundaria (su familia, contactos humanos casuales, laboratorios adyacentes, animales domésticos o de experimentación, etc.). No debe olvidarse que pueden diseminarse agentes no patógenos para los seres humanos, pero capaces de contaminar medios de cultivo, reactivos o afectar la vida de las plantas. Un patógeno es cualquier microorganismo capaz de producir una enfermedad infecciosa. La capacidad de un patógeno para producir enfermedad se conoce como patogenicidad Virulencia: grado de patogenicidad que es capaz de producir un determinado microorganismo patógeno Las personas están expuestas de diversas formas a las infecciones adquiridas en el laboratorio de Microbiología: •

al frotarse los ojos o la nariz con las manos contaminadas al inhalar los aerosoles producidos durante la centrifugación, sedimentación o el derrame de cultivos al ingerir microorganismos por accidente, al llevarse los dedos o lapicera a la boca al sufrir inoculación percútanea, por ej al pincharse con agujas.

Vías de infección más comunes en el laboratorio -

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tracto digestivo: ingestión o transferencia de microorganismos desde dedos contaminados. mucosas: nasal, conjuntiva. Aerosoles y manos contaminadas piel – vía percutánea: inyección, cortes o escoriaciones. respiratoria: es la más importante. El 80% de las infecciones contraídas en el laboratorio son de origen aéreo por inhalación de aerosoles.

Importancia de la vía respiratoria

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Se deben tener en cuenta 3 factores principales. - La facilidad con que se producen pequeñas gotas y partículas. - Las pequeñas partículas (entre 1-4 um) no son retenidas en el tracto respiratorio y llegan a pulmón. - La capacidad de la mayoría de los microorganismos patógenos para invadir tejido pulmonar. Infectividad: Es la capacidad que tiene un agente patógeno para introducirse en nuestro organismo y sobrevivir en su interior, multiplicándose y ocasionando enfermedad •

La infectividad depende de: -

el tamaño de la dosis la sensibilidad individual la virulencia del agente (varía con el microorganismo y la cepa) el sitio de invasión.

En el laboratorio de microbiología clínica, las cinco infecciones adquiridas con mayor frecuencia son: shigellosis, salmonellosis, tuberculosis, brucelosis, hepatitis y virus de inmunodeficiencia humana (HIV). Riesgo en las técnicas comunes de laboratorio •

Mecanismo de producción de aerosoles

Muchas técnicas de laboratorio producen distintos aerosoles mediante burbujeo, salpicadura, espuma, quemado del ansa, y dos mecanismos adicionales: vibración de alta frecuencia y fuerza centrífuga. Los aerosoles también se producen cuando se manipulan cultivos secos, liofilizados o secados con acetona (ej. cuando se destapan tubos o ampollas). La producción de aerosoles es generada por 2 mecanismos: - atomización de suspensiones líquidas - molido muy fino de material sólido infectado Además de la producción de aerosoles hay que tener en cuenta el riesgo que se genera como consecuencia de la deposición de material infectado sobre otras superficies a partir de las cuales los microorganismos pueden ser transferidos a la piel, boca y ojos. •

Pipetas y pipeteo

Las pipetas se preparan para conservar su esterilidad hasta que son utilizadas. Una práctica casi universal es colocar un tapón de algodón en la parte superior para prevenir la entrada de polvo. Sin embargo, el tapón protege relativamente a quien usa la pipeta ya que es fácilmente penetrado por microorganismos en suspensiones líquidas. El pipeteo oral debe ser evitado, usar siempre propipeta. •

El ansa

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Mediante el flameado del ansa o agujas contaminadas se puede producir diseminación de organismos, particularmente cuando se trabaja con inóculos semi-sólidos (ej. suspensiones de esporas, colonias de Mycobacterium o esputo). También puede ocurrir con pequeños volúmenes de líquido. El mismo riesgo se corre cuando se introduce el ansa caliente en un líquido, o se hace contacto con la superficie de agar de un cultivo. El ansa fría, una vez cargada, puede contaminar cuando se producen vibraciones o rápidos movimientos de aire que causen desprendimiento de pequeñas gotas. •

Las placas de agar y cultivos en medio liquido

La principal fuente de infección resulta cuando cae al suelo y se rompe una placa de Petri incubada. El mismo riesgo se corre cuando se utilizan tubos o botellas con agar o cultivos en medio líquidos. •

Tapones y tapas

La remoción de tapones de algodón, tapas a rosca o tapones de goma u otro tipo de tapa en tubos con caldo de cultivo, tubos de centrífuga, etc., puede crear aerosoles de varias maneras, sobre todo si los cultivos han sido agitados y hay material particulado. Hay que tener presente que los tapones de medios líquidos (sobre todo los agitados) pueden estar humedecidos con material infectivo.

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PRECAUCIONES ESTANDARES El CDC publicó pautas para disminuir el riesgo del virus de hepatitis B –HBVen laboratorios clínicos y bancos de sangre, luego se agregó el HIV, y requieren que la sangre y líquidos corporales de cada paciente se manejen como posibles materiales infecciosos. 1. Tratar a todos los microorganismos como patógenos potenciales o contaminantes para los cultivos vecinos. Rotular todo el material infectivo para prevenir confusiones. Los números en código no son adecuados. 2. Usar ropa para protegerse y elementos de seguridad (ej. guantes, máscaras, anteojos o antiparras, etc). 3. Llevar el cabello recogido. No colocar pertenencias (bolsos, mochilas, abrigos etc) sobre la mesada de trabajo. 4. Manejar los materiales cuyo potencial patógeno se desconoce (ej. esputo, suero, material fecal, microorganismos no identificados) como si fueran infectivos, ya que probablemente lo son. Presuponer que todos los pacientes están potencialmente infectados por HIV, HBV u otros patógenos transportados por la sangre 5. El laboratorio debe permanecer siempre limpio. La mesada debe estar libre de todo material que no sea esencial. 6. La superficie debe limpiarse antes y después de cada sesión de laboratorio con una solución germicida. Luego de finalizar cada experiencia en el laboratorio: trasladar en forma segura el material contaminado a la sala de esterilizacion dispuesta para tal fin y descartar correctamente el resto de los residuos. 7. Todo el material contaminado, cultivos, pipetas, tapones, etc., deberá ser esterilizado antes de ser lavado. 8. Tener un desinfectante listo para ser usado en suficiente volumen para llevar a cabo una descontaminación de emergencia en el caso de salpicaduras. Asegurarse que el desinfectante sea activo contra el organismo que está siendo manejado. 9. Limitar el acceso al laboratorio sólo al personal capacitado 10. Nunca comer, beber, fumar o aplicarse cosméticos (incluso brillo labial) en el laboratorio. 11. Los alimentos y bebidas deben guardarse en heladeras o zonas separadas al área de trabajo. 12. No colocarse o quitarse lentes de contacto 13. No morderse las uñas o masticar lapiceras 14. Nunca pipetear con la boca. Usar propipetas o pipetas automáticas. 15. No tocar superficies (ej: picaporte) con guantes contaminados con material infeccioso o mutágenos (ej: bromuro de etidio) 16. No caminar apresuradamente en el laboratorio, ya que se generan corrientes de aire que favorecen la contaminacion 17. Nunca llevar a cabo una acción apresuradamente, en particular aquéllas que pueden producir burbujeo, salpicaduras, volcaduras o contaminar superficies que es necesario mantener limpias (ej. las tapas de las botellas).

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18. Tener cuidado especial en evitar lesiones con objetos cortantes como agujas, lancetas y escalpelos 19. Nunca recolocar las tapas de las agujas Descartar el material punzo cortante sin envainar en un recipiente adecuado, perfectamente identificado. 20. Antes de dejar el laboratorio, sacarse el guardapolvo y lavarse cuidadosamente las manos con agua y jabón y desinfectarlas. Después de cualquier contaminación también lavarse cuidadosamente las manos con agua y jabón y desinfectarlas. 21. Reportar los accidentes, no importa lo insignificante que puedan parecer. Se debe reportar toda enfermedad o lastimadura tan rápido como sea posible. La pérdida de tiempo en la identificación de una infección de laboratorio puede tener graves consecuencias. 22. Esta prohibido el uso del guardapolvo en: biblioteca, comedores, aulas salas de reuniones, oficinas administrativas y otras áreas comunes ajenas al laboratorio

Precauciones estándares para material clínico: Las precauciones estándares del CDC se deben aplicar para el manejo de sangre o líquidos corporales, incluidas todas las excreciones y secreciones (ej. suero, semen, líquidos corporales estériles, salivas de procedimientos dentales y secreciones vaginales) remitidos al laboratorio microbiológico. La observación continua de las precauciones estándares entre los trabajadores de la salud que manejan los materiales de pacientes, disminuirán los riesgos asociados a las muestras. El pipeteo con la boca está totalmente prohibido. Se deben usar dispositivos mecánicos para aspirar todos los líquidos en la pipeta. Se aconseja guardar sueros obtenidos de manera periódica de los trabajadores de la salud, para que en casos de accidentes se pueda documentar una seroconversión. Todos los trabajadores de la salud deben cumplir las precauciones estándares mientras trabajan dentro y fuera del laboratorio. Cuando se obtengan muestras fuera del laboratorio se deben seguir las siguientes pautas: - usar guantes y guardapolvos de laboratorio - usar con cuidado las agujas y las lancetas - descartar el material punzocortante en un recipiente adecuado, resistente a las pinchaduras - nunca recolocar las tapas de las agujas con la mano; de ser necesario se debe disponer de dispositivos especiales para reenvainar las agujas.

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Medidas preventivas Las medidas preventivas a tomar caen en 6 categorías: -

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protección física del trabajador (guardapolvo, guantes, barbijo, gafas, uso de propipeta, etc.) técnicas cuidadosas métodos de confinamiento del agente (cámaras de bioseguridad, flujo laminar vertical, ambientes aislados con presurización positiva o negativa, recipientes con desinfectante para descartar material contaminado, envases bien tapados, sin filtraciones). barreras intangibles (desinfección del aire: uso de lámparas UV, áreas estériles) desinfección en general medidas inmunológicas (vacunación del personal cuando sea posible)

Métodos de confinamiento o contención del agente: Son métodos que hacen seguro el manejo de materiales infecciosos según el grado de peligrosidad. Reducen al mínimo la exposición del personal del laboratorio y a su entorno. Entre ellos se pueden citar: Campana extractora de gases: es un recinto ventilado con salida al exterior Que captura humos y vapores de la manipulación de productos químicos y no ofrece protección frente a riesgos biológicos. Fig 1.

Fig 1: Campanas extractoras de gases

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Cabinas de flujo laminar: son recintos con una barrera de aire que fluye en una sola dirección, a través de un filtro HEPA barriendo la superficie de trabajo. La barrera de aire puede ser vertical u horizontal. Ofrecen únicamente protección al material que se maneja en su interior, pero no al operador. Se usan para manipular material estéril. Fig 2-a y b. Filtros HEPA: (High Efficiency Particulate Air): Laminas de borosilicato que atrapan partículas y agentes infecciosos de 0.3 micras con una eficacia del 99,97%. No retienen gases ni volátiles.

Fig 2b: Cabina de flujo laminar Gabinetes o Cabinas bioseguridad (GSB) Son dispositivos que encierran un área de trabajo con el propósito de proteger a los trabajadores contra la exposición a aerosoles de agentes infecciosos. Existen de diferentes tipos: Los gabinetes de clase I . El aire ambiental (no esterilizado) penetra por la parte frontal, atraviesa la zona de trabajo y sale al exterior a través de un filtro HEPA. Este gabinete provee protección al personal y al medio ambiente pero no al producto. Es similar a una campana extractora de gases, pero esta tiene filtros HEPA que protegen al medio ambiente. Fig 3.

Fig 3: Gabinete de clase I Los gabinetes de clase II:: este gabinete y sus filtros ofrecen protección al operario, al medio ambiente y al producto. Existen varios tipos A, B1, B2 y B3 según sus características de flujo de aire y sistema de extracción. Los filtros hepa están ubicados de manera que se esterilizan el aire que fluye sobre el material infeccioso y también el aire extraído que vuelve al medio 8

ambiente. El aire fluye a través de láminas que actúan como barrera que lo hacen circular a través del gabinete en forma vertical, por esto se lo llama GSB de flujo laminar. Estos GSB tiene una puerta tipo guillotina para que el operador acceda al material de trabajo. En la mayoría de las técnicas de clínica hospitalaria se utiliza el GSB de clase II. El GSB clase IIA está autocontenido y el 70% del aire recircula. Se prefiere el GSB IIB para trabajar con radioisótopos, químicos tóxicos y carcinógenos, el aire de este gabinete se envía al exterior del laboratorio. Fig 4.

Fig 4: Gabinete de clase II

Los gabinetes de clase III proporcionan al operador la mejor protección dado que están totalmente cerrados y llevan presión negativa. El aire que ingresa y egresa se esteriliza por filtración. El operador procesa las muestras introduciendo brazos y manos en mangas y guantes de goma adheridos al equipo.

Clasificación de los agentes biológicos sobre la base de su peligrosidad El CDC (Centers of Disease Control and Prevention, Atlanta, EEUU) evaluó los riesgos relativos de trabajar con diversos agentes biológicos y publicó un documento “Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories”. Las muestras de los pacientes representan un riesgo mayor para el personal del laboratorio que los microorganismos en cultivo, ya que en principio se desconoce la naturaleza de los agentes etiológicos de las muestras.

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Los agentes de nivel 1 de bioseguridad carecen de potencial conocido para infectar personas. Estos se utilizan en ejercicios educativos de laboratorio para estudiantes principiantes de Microbiología. Los agentes de nivel I se encuadran en las técnicas estándares de laboratorio. Los agentes de nivel 2 de bioseguridad son los agentes más frecuentes en las muestras clínicas. Son los productores de enfermedades infecciosas (virus de la inmunodeficiencia humana –HIV- y otros). Los empleados que trabajan en este nivel deben vacunarse contra hepatitis B. Dos microorganismos mencionados en bioterrorismo, Bacillus anthracis y Yersinia pestis pertenecen a este nivel. El nivel 3 de bioseguridad se recomienda para el manejo de muestras en las que se sospecha que contienen virus y para cultivos de Mycobacterium tuberculosis, los estadios filamentosos de hongos sistémicos y algunos otros microorganismos. Requieren control cuidadoso de los movimientos de aire, ropa protectora y guantes para el personal. Las personas que trabajan en el nivel 3 deben almacenar sueros basales para compararlos con sueros agudos que pueden utilizarse en los casos de enfermedad sin causa aparente. Ej.: Francisella tularensis y especies de Brucella, en infecciones comunes o en caso de bioterrorismo. Todos los procedimientos se llevan a cabo bajo contención máxima (ropa protectora especial, utilizando gabinete de bioseguridad –GBS- III). Los agentes de nivel 4 sólo incluyen ciertos virus de los grupos de arbovirus, arenavirus o filovirus. Se descontaminan todos los materiales antes de abandonar las instalaciones y todos los procedimientos se realizan bajo contención máxima (ropa de protección especial, GBS clase III). La mayoría de estas instalaciones son laboratorios de Salud pública o de investigación. Requerimientos recomendados para distintos niveles de bioseguridad en Microbiología Nivel

Prácticas y técnicas

Equipamiento

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Prácticas Ninguno microbiológicas standard

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Personal con entrenamiento específico. Acceso restringido absoluto

GBS clase I ó II

3

Acceso más restringido. Registro de visitas y accidentes. Barreras de contención física: máscaras, guantes,

GBS clase II

Alcance Agentes bien caracterizados que presentan riesgo mínimo para el personal y el medio ambiente. Ej. Bacillus subtilis Agentes de moderada peligrosidad para el personal y el medio ambiente. Ej. Salmonella. Sangre, fluidos corporales, tejidos humano y animal. Agentes con potencial de transmisión aérea, que pueden causar infección potencialmente letal. Alto riesgo

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rotores sellados, filtros HEPA 4

Barreras de aire con el exterior, cambio de ropa y ducha, intercambio de ropa sucia a limpia por tuberías.

GBS tipo III Traje presurizado

personal, bajo riesgo comunitario. Ej.: Mycobacterium Agentes exóticos productores de enfermedades letales para los que no existen vacunas ni terapia. Ej.: virus Ebola

GBS: gabinete de bioseguridad

Capacitación y orientación de los empleados Cada Institución debe contar con un Manual de Seguridad estudiado por los empleados y un Oficial de Seguridad que conozca los riesgos relacionados con las infecciones que puedan contraerse en el Laboratorio. La capacitación para todo el personal se debe actualizar trimestralmente y documentarla por escrito. Es indispensable centrar la atención en el lavado de las manos de todo el personal de laboratorio. La acción mecánica de frotarse las manos y cepillarse debajo de las uñas es la parte más importante del proceso. Se debe ofrecer a los empleados vacunación contra HBV y pruebas cutáneas anuales para tuberculosis. A los que presentan pruebas cutáneas positivas, deberían realizarse radiografías de tórax. Plan para el control de las exposiciones El Director y Supervisor del Laboratorio son los responsables legales de implementar una planilla para el control de las exposiciones y que se cumplan las normas de seguridad obligatorias. La planificación identifica las tareas peligrosas para los empleados y favorece la seguridad por medio de la aplicación de los siguientes ítems: -educación y orientación de los empleados -eliminación adecuada de residuos peligrosos -precauciones estandares -controles de ingeniería y prácticas de trabajo seguro, además de la eliminación adecuada de residuos tóxicos y el uso de gabinetes de bioseguridad -equipo protector para el personal, como ropa de laboratorio, cubiertas para zapatos, guantes y protectores oculares (anteojos, antiparras), barbijos y máscaras. -planificación posterior a la exposición, incluidos la investigación de los accidentes y un plan para prevenir recurrencias.

Eliminación de residuos peligrosos Todos los materiales contaminados con agentes potencialmente infecciosos deben ser descontaminados antes de su eliminación. Esto comprende porciones no utilizadas de las muestras de los pacientes, cultivos de las muestras, cultivos almacenados de los microorganismos e instrumentos 11

descartables como jeringas, escalpelos, etc. Los residuos infecciosos se deben descontaminar mediante autoclave, incinerador o métodos alternativos de tratamiento de residuos. Los residuos peligrosos que no pueden autoclavarse se colocan en bolsas rojas y se llama al servicio municipal o entidad encargada para su eliminación. Existen reglas para sustituir residuos peligrosos tales como: -

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sustituir los compuestos químicos que contaminarían el medio ambiente, cuando sea posible, por otros menos peligrosos, por ej. sustituir radioactivos por colorantes fluorescentes desarrollo de técnicas que utilicen menor cantidad de compuestos químicos menos peligrosos, por ej. sustituir radioisótopos por tecnología infrarroja separación de los residuos peligrosos, de la basura no contaminada (papeles) sustitución por sistemas micrométricos para las pruebas de identificación y sensibilidad a agentes microbianos, con el objeto de disminuir el volumen de los reactivos químicos y los residuos infecciosos los residuos infecciosos (placas de agar, tubos, botellas, pipetas u otros materiales) van a recipientes especiales que van a ser esterilizados en autoclave) los vidrios rotos se colocan en cajas gruesas revestidas de bolsas de plástico para residuos peligrosos que irán a autoclave o se incinerarán los objetos cortantes como agujas, escalpelos, etc. se colocarán en recipientes especiales que irán a autoclave o se incinerarán.

Manejo de gases comprimidos En el laboratorio de Microbiología es frecuente la utilización de gases. Los cilindros de gas comprimido, CO2, las mezclas para anaerobios que contienen gas o gases a baja presión se deben manejar y asegurar en forma adecuada. Si un tanque tiene filtraciones y se cae se pueden transformar en un misil, con pérdida de vidas o bienes. Por lo tanto estos tanques deberán ser atados con cadenas y almacenados en lugares bien ventilados. Si no se utiliza el cilindro de gas, el casquete metálico debe estar colocado en su lugar y se retira en el instante que se coloca el regulador. Los cilindros deben transportarse encadenados en carretillas especiales. Derrames y salpicaduras en la zona de trabajo En el caso de derrames y salpicaduras, las medidas a tomar son responsabilidad exclusiva del Laboratorio de Microbiología y bajo ningún concepto del personal de limpieza. El procedimiento empleado debe estar protocolizado y contemplado en el Manual de Seguridad. Se procederá como se describe a continuación: 1) Retirar, con guantes o pinzas, los restos grandes de cristal, plástico, agar u otra sustancia orgánica que bloquearía la capacidad de actuación de los desinfectantes. Este material será descartado correctamente. 2) Desinfectar con un agente adecuado, considerando el tiempo requerido por el agente desinfectante. 12

3) De ser necesario utilizar toallas o repasadores descartables para completar el secado. Se empleará un desinfectante preferentemente líquido. Los más útiles en el laboratorio de Microbiología son: 1- Hiplocorito de sodio: para suelos, cerámicos etc. No debe usarse en superficies metálicas. Se deja actuar 20 minutos en la concentración del fabricante (ej. 55g/l) 2- Iodóforo: son antisépticos que contienen iodo en su composición y se usan en la concentración recomendada por el fabricante. 3- Alcohol etílico al 70% 4- Detergentes desinfectantes: son productos comerciales de fácil manejo, no corrosivos, no irritantes, activos en presencia de materia orgánica y que generalmente cambian de color cuando se inactivan. Derrames en la recepción de muestras: son los más frecuentes, casi siempre por estar mal cerrados los envases. Se desinfecta con el mismo procedimiento descrito anteriormente. Limpieza y desinfección de otras áreas Para la limpieza de pisos, mesadas, azulejos, paredes, vidrios, picaportes, puertas y otras áreas se deben utilizar detergentes que no dañan las superficies. No usar lampazos, plumeros u otro objeto de limpieza que genera polvillo La desinfección implica la destrucción de microorganismos a través de agentes químicos y físicos. Entre los desinfectantes más utilizados existen: alcoholes, compuestos de amonio cuaternario, cloro, compuestos clorados. La limpieza debe ser un paso previo a la desinfección, ya que con este proceso se eliminan muchas sustancias que pueden ser nutrientes para los microorganismos y que pueden inactivar la acción de los desinfectantes. Normas de utilización de equipos: congeladores, cámaras frigoríficas, estufas, microondas, autoclaves, centrífugas, etc. Normas generales Al elegir la localización del equipo tener en cuenta la producción de ruidos, generación de gases, humos etc. Nunca colocarlos en zonas de paso (pasillos). Los aparatos eléctricos no deben utilizarse en zonas mal aisladas y húmedas. Es esencial tener conocimiento del manejo, mantenimiento y resolución de problemas. El mantenimiento adecuado y periódico reduce los riesgos asociados a su utilización. La limpieza y desinfección se realizan de acuerdo a lo descripto anteriormente en “Derrames y salpicaduras en la zona de trabajo”. Congeladores, cámaras frigoríficas, heladeras No deben almacenarse cultivos en recipientes que no estén convenientemente cerrados, especialmente si la cámara tiene circulación de aire. Los recipientes que se guarden en las heladeras no deben llenarse completamente de líquido, más aun si van a congelarse. Recordar que la congelación mantiene la

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viabilidad de muchos agentes infecciosos. Tratar de identificar en ficheros, rótulos, etc. el contenido de lo almacenado. Descongelar periódicamente, limpiar y desinfectar. Manipular con guantes. Estufas e incubadores La limpieza y desinfección periódicas y sistemáticas reducen los riesgos de contaminación accidental del personal de laboratorio. Microondas Los recipientes deben tener el tapón flojo para evitar desbordes y explosiones. Usar intensidad máxima para hervir agua y mínima para fundir el agar. Deberá existir una tabla que indique tiempos, intensidades y cantidades a emplear. Autoclaves Deben poseer manómetros y termostatos, válvula de seguridad y sistema de desconexión rápido. No abrir jamás si el manómetro no está en cero y no ha sido purgado totalmente para eliminar la presión de vapor interna. Usar guantes para protegerse del calor y controlar el nivel de agua periódicamente. Controlar una vez al mes su correcto funcionamiento mediante control biológico (tiras de esporas) junto con un registro escrito de presión y temperatura de cada proceso. Centrifugas Utilizar tubos cerrados, rotores y cestillos de seguridad que eviten la generación de aerosoles hacia el operador. En la rotura accidental de un tubo proceder como se indica en el apartado descripto anteriormente en “Derrames y salpicaduras en la zona de trabajo”. No utilizar centrífugas antiguas que no posean sistemas de cierre de seguridad para evitar la apertura mientras está en funcionamiento. Se deben equilibrar cuidadosamente los rotores de las microcentrífugas. Otros equipos Las bombas de vacío y aspiradores deberán contar con las trampas y filtros correspondientes. Los baños de agua deberán ser limpiados una vez a la semana o desinfectados mensualmente. En la zona de trabajo no deben colocarse material de escritorio ni libros, ya que el papel es de difícil esterilización.

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Seguridad en el ambiente del laboratorio

Fig 5: Símbolo de peligro biológico Se debe colocar el símbolo de peligro biológico (Fig 5) en un lugar destacado de las puertas del laboratorio y en cualquier equipo (refrigeradores, incubadoras, centrífugas, etc.) que contengan material infeccioso. El sistema de manejo de aire debe desplazar al aire desde las zonas de menor riesgo a la de mayor riesgo y nunca al revés. Lo ideal es que un laboratorio de microbiología tenga presión negativa, no se debe reciclar el aire después de pasar por microbiología. El uso selectivo de los gabinetes de seguridad biológica (GSB) para los procedimientos que generen aerosoles infecciosos es esencial para la seguridad del laboratorio (peste, tuberculosis, brucelosis, etc.). Como la sangre es una de las muestras que con mayor frecuencia contiene partículas virales infecciosas se debe efectuar el trabajo detrás de una barrera para proteger al operador. Los procedimientos usados en el procesamiento de muestras para cultivo (trozar, triturar, preparación de extendidos, etc.) producen gotitas en aerosol. Estos procedimientos se deben realizar en un GSB. El laboratorio de microbiología presenta muchos peligros para las personas no entrenadas ni advertidas, por lo tanto se debe limitar el ingreso al personal y empleados. Las áreas de alto riesgo, como los laboratorios deben estar cerradas a los visitantes. También se deben entrenar al personal de custodia. Los laboratorios deberían estar exentos de insectos (ej. ácaros) que pueden desplazarse y arrastrar microorganismos. Las plantas deben excluirse del laboratorio porque pueden representar una fuente de insectos. Se deben aplicar programas de control de insectos y roedores.

Seguridad contra compuestos químicos Todo el personal de laboratorio debe tener conocimientos en cuanto a los peligros inherentes a los compuestos químicos con los que se trabaja. Indicar en el rótulo del recipiente si son carcinogénicos, corrosivos, venenosos, inflamables u oxidantes. Fig 6. Cada laboratorio debe contar con el plan de higiene química que incluye: rotulado correcto de los recipientes de compuestos químicos, planilla de seguridad respecto a los materiales provistos por el fabricante y programas escritos de capacitación y recapacitación referido a la seguridad química.

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Todos los compuestos químicos peligrosos se deben inventariar cada año y preparar un archivo donde conste: Nombre de la sustancia Nombre y teléfono del fabricante Ingredientes peligrosos Precauciones en caso de incendio y explosión Toxicidad Efectos sobre la salud y primeros auxilios Estabilidad y reactividad Precauciones de embalaje Procedimientos en caso de derrame, filtraciones y eliminación Equipo para el personal: reglas de manejo y almacenamiento El laboratorio debe contar con campanas para las emanaciones e impedir inhalación de gases tóxicos. Cuando se manipulan compuestos químicos tóxicos, se debe hacer bajo campana o con máscara contra emanaciones. Para limpiar se debe usar máscara contra emanaciones, guantes, guardapolvo impermeable a la humedad y anteojos protectores. Hay equipos para derrame de ácidos, álcalis, inflamables o radiactivos para facilitar la inactivación de cualquier pérdida peligrosa de un compuesto químico. Para un correcto Plan de higiene química, es necesario: • • •

rotulado y almacenamiento correcto planilla de seguridad programas escritos de capacitación

Fig 6: Pictogramas de diversos compuestos químicos 16

Equipamiento protector del personal Está establecido que las instalaciones de atención de la salud provean a los empleados el equipamiento personal necesario para protegerlos de los peligros que pueden presentarse en el curso del trabajo. Esto incluye pantallas plásticas, anteojos para proteger contra gotitas, recipientes especiales para objetos punzocortantes, contenedores para botellas de vidrio, bandejas para transportar elementos peligrosos, dispositivos manuales para pipetear, batas impermeables, guardapolvos de laboratorio, guantes descartables, barbijos, soporte de seguridad para centrífuga especialmente usados en el laboratorio de bacilos ácidos alcohol resistentes (BAAR) y respiradores HEPA. Se requieren respiradores HEPA para todos los trabajadores de la salud, incluso los flebotomistas que ingresan a las habitaciones de pacientes con tuberculosis y los que limpian las salpicaduras de microorganismos patógenos. El funcionamiento de los respiradores debe controlarse individuakmente para que todos tengan la certeza de que funcionan en forma adecuada. Los empleados de sexo masculino deben afeitarse para lograr un buen ajuste del respirador. Es necesario que los microbiólogos usen guardapolvo de laboratorio sobre su ropa de calle y de quitárselo antes de abandonar el laboratorio. La mayor parte de las exposiciones a los líquidos que contienen sangre se producen sobre las manos o los antebrazos, por lo que las batas con puño cerrado o protecciones sobre los antebrazos son mejores junto con los guantes que cubren toda la piel de las manos y/o antebrazos que pueda quedar expuesta. Si la ropa protectora de laboratorio se contamina con líquidos corporales o posibles patógenos se debe esterilizar de inmediato en autoclave y lavar antes de volver a usarse. Las Instituciones o una empresa de uniformes deberían lavar los guardapolvos de laboratorio ya que no se permite que los microbiólogos laven sus propios guardapolvos. En vez de esto se pueden usar guardapolvos descartables. Los empleados de laboratorio que ingresan en un área del hospital con pacientes, en situación especial de riesgo de adquirir una infección (unidades de terapia intensiva, neonatología, quirófanos o áreas que administran tratamientos inmunosupresores) deben tomar todas las precauciones de cubrir sus ropas de calle con ropas protectoras limpias o estériles que sean adecuadas para el área que se va a visitar. Se recomienda ropa especial impermeable para ciertas actividades, como el trabajo con sustancias radioactivas o compuestos químicos cáusticos. Se recomiendan batas con la parte delantera de una pieza para las personas que trabajen con muestras y cultivos de micobacterias. En la mayoría de los laboratorios de microbiología no se necesitan batas impermeables. Envío de materiales biológicos peligrosos Las muestras clínicas y los aislamientos se deben envolver con material absorbente y colocar en una bolsa de plástico para material biológico peligroso

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llamado recipiente primario, que luego se inserta en un contenedor de plástico duro o cilindro o caja metálica con tapa rosca. Cuando se tapa este segundo contenedor, se lo coloca en un tercer contenedor de cartón. Un número sobre la caja externa indica que cumple con los requerimientos estandares. Además se coloca un rótulo de sustancia infecciosa. En el formulario o nota se incluirá la dirección de destino y el remitente. Algunos materiales necesitan refrigeración, hielo, hielo seco o nitrógeno y recipientes especiales para mantener la temperatura. Seguridad contra incendios Los laboratorios deben contar con planes de evacuación para casos de incendios señalando las salidas más cercanas debiendo hacer simulacros de incendio trimestrales o anuales; así todo el personal sabrá qué hacer en caso de incendio. Las salidas siempre deben estar libres de obstáculos y los empleados deben recibir instrucciones sobre el uso de extinguidores de incendio, pudiendo capacitarse sobre los tipos de extinguidotes y su uso en el Departamento de Bomberos. Los extintores o extinguidotes se clasifican y se los etiqueta con la misma letra de acuerdo al tipo particular de fuego que sofocan: Extinguidores de tipo A se usan para sofocar fuegos producidos por combustibles sólidos: madera, papel, telas, caucho y plástico. Extinguidores de tipo B se emplean para compuestos químicos: líquidos y gases inflamables (aceites, diluyentes, naftas etc.) Extinguidores de tipo C para incendios provocados por equipos eléctricos o tomas de corriente eléctrica. Contienen CO2 u otro compuesto químico seco que no daña los equipos. Extinguidores de tipo D: destinados a metales combustibles: Mg, Na, Li, K etc En la mayoría de los laboratorios de microbiología existen extinguidores tipos ABC. Para mayor descripción ver diapositivas adjuntas. En el siguiente orden se indican los pasos a seguir en caso de incendio - rescate de personas lesionadas - activar la alarma de incendio - contener (sofocar) el fuego, si se cuenta con puertas contra incendios se deben cerrar - extinguir el fuego si es posible. Uso de extintor: a) Colocar la mano en la parte superior del cilindro y tirar del pasador. Ello libera la maneta y permite activar la unidad b) Apuntar la boquilla a la base de las llamas c) Comprimir la maneta liberando la sustancia extintora. d) Barrer con la boquilla a un lado y a otro de la base de las llamas y vaciar el extintor sobre el fuego

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Seguridad contra la electricidad Regularmente se debe controlar el cableado eléctrico para detectar posibles desgastes y reemplazarlo si es necesario. Todos los enchufes deben ser triples, con conexión a tierra. No se deben usar prolongadores en el laboratorio. Control posterior a la infección Todos los accidentes de laboratorio y las posibles exposiciones se deben informar al supervisor, quien derivará de inmediato a la persona afectada a un centro de salud o a un médico laboral. Es fundamental la atención médica inmediata; la investigación del accidente se hace después. Ej.: en un pinchazo con aguja se debe identificar al paciente y evaluar el riesgo de que adquiera una infección transmitida por sangre. La investigación ayuda a que el médico establezca la necesidad de medidas preventivas. El médico también puede estudiar la posibilidad de que se transmita la enfermedad a miembros de la familia. Además se debe evaluar la terapéutica de seguimiento, por ej. con extracción de sangre en periodos de 6 semanas y 3 y 6 meses, para pruebas de HIV. El director del departamento debe revisar las circunstancias en las que se produjo el accidente para establecer si podría prevenirse o tomar medidas para evitar nuevos accidentes. El accidente y las acciones correctoras se deben documentar.

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c) www.cdc.gov/od/ohs/pdffiles/bmbl4_spanish.pdf. . d) www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/supleII/suple8/html.

e) Seguridad e Higiene: Manual para laboratorios químicos y biológicos. 2010. Compilado por el Dr. Carlos J. A. Menendez. Unidad de Gestión de Riesgos. Fac de Qca., Bioquica y Fcia. UNSL.

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