LOS  EFECTOS  NO  PSICOACTIVOS  DEL   CANNABIS  CONSTITUYEN  QUE  EL   CANNABIDIOL  ES  UN  AGENTE  QUE   INDUCE  A  LA  VIGILIA.   REVISIÓN  MCCR   El cannabidiol (CBD) es un constituyente de la Cannabis sativa que induce efectos no psicotrópicos, y algunas de sus acciones biológicas en el sueño han sido descritas por el grupo de los autores. Aquí, los autores informan que cuando se administra 10 o 20 ug / 1 ul durante un periodo directamente en cualquier hipotálamo lateral (HL) o núcleos del rafe dorsal (DRN), que son las áreas del cerebro que inducen vigilia, el CBD ha mejorado la vigilia y la disminución de sueño de ondas lentas y el sueño REM. Además, el CDB aumenta los espectros de potencia alfa y theta, pero disminuyó los espectros de potencia delta. Además, el CDB aumenta la expresión de c-Fos en LH o DRN. Estos hallazgos

sugieren

que

este

cannabinoide

es

un

compuesto

inductor

de

estela

que,

presumiblemente, activa las neuronas en LH y DRN. El Δ 9-tetrahidrocannabinol (Δ 9-THC) y el cannabidiol (CBD) son dos componentes principales de la Cannabis sativa. Además, Δ 9-THC es un compuesto psicoactivo y produce comportamientos estereotipados, la activación de los receptores CB1, que se cree que es responsable de la mayoría de los efectos en el sistema nervioso central. Por lo tanto, el interés farmacológico y farmacéutico en este compuesto ha aumentado, lo que lleva a las investigaciones de la bioquímica de esta molécula. Algunos de sus efectos farmacológicos han sido declarados, por ejemplo, por un lado, el CDB presenta anticonvulsivante, sedante, y propiedades ansiolíticas. Además, han encontrado que la administración de CDB (2,5 mg/kg-10 mg / kg) induce un efecto de tipo ansiolítico tal como se evaluó por el ensayo de laberinto elevado en cruz, mientras que muestra las propiedades neuroprotectoras contra la toxicidad de 6-hidroxidopamina. Por otra parte, varios estudios han demostrado que la administración de Δ9-THC promueve el sueño, mientras que el CDB induce resultados contradictorios. Por ejemplo, se mostró una reducción en el sueño, y más tarde se informó de una mejora del sueño en pacientes con insomnio. Las diferencias metodológicas entre los estudios podrían ser la razón para estos resultados contradictorios. Recientemente, se ha demostrado en los seres humanos que el CDB aumentó la vigilia.

2015 Este documento es solo para fines educativos y uso no comercial. Más información en www.medicalcannabiscostarica.org

 

 

 

En línea con estos resultados, el grupo ha informado de que las inyecciones de CBD en ratas promovieron la vigilia y el sueño de ondas lentas disminuyeron (SWS) y el sueño REM. Si el CDB aumenta la vigilia, uno esperaría que la administración de este compuesto en los núcleos de vigilia, tales como el hipotálamo lateral (LH) o núcleos del rafe dorsal (DRN), provocaría una mejora en el estado de alerta. Sin embargo, hasta la fecha esta cuestión no se ha examinado a fondo. Aquí, hemos investigado si la micro inyección directa de CBD en cualquiera de LH o DRN aumenta la vigilia. Aunque los efectos de CBD sobre Fos eran bastante especificativos, si la inyección de este compuesto es un efecto primario o un efecto secundario a la activación conductual está por descrito. En este sentido, los estudios futuros tendrán como objetivo caracterizar las neuronas activadas con tinción doble con orexina (en el LH) o serotonina (en el DRN). Por lo tanto, se puede concluir que, aunque CDB aumentó notablemente el estado de vigilia, este tal vez es un resultado de la activación de las neuronas en la LH o DRN.

RESUMEN   ABSTRACTO   El cannabidiol (CBD) es un constituyente de la Cannabis sativa que induce efectos no psicotrópicos, y algunas de sus acciones biológicas en el sueño han sido descritas por el grupo de los autores. Aquí, los autores informan que cuando se administra 10 o 20 ug / 1 ul durante un periodo directamente en cualquier hipotálamo lateral (HL) o núcleos del rafe dorsal (DRN), que son las áreas del cerebro que inducen vigilia, el CBD ha mejorado la vigilia y la disminución de sueño de ondas lentas y el sueño REM. Además, el CDB aumenta los espectros de potencia alfa y theta, pero disminuyó los espectros de potencia delta. Además, el CDB aumenta la expresión de c-Fos en LH o DRN. Estos hallazgos

sugieren

que

este

cannabinoide

es

un

compuesto

inductor

de

estela

que,

presumiblemente, activa las neuronas en LH y DRN.

INTRODUCCIÓN   9

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El Δ -tetrahidrocannabinol (Δ THC) y el cannabidiol (CBD) son dos componentes principales 9

de la Cannabis sativa. Además, Δ -THC es un compuesto psicoactivo y produce comportamientos estereotipados, la activación de los receptores CB1, que se cree que es responsable de la mayoría de los efectos en el sistema nervioso central. A pesar de que CDB de la unión al receptor CB1, esta molécula no es psicoactiva. Por lo tanto, el interés farmacológico y farmacéutico en este compuesto ha aumentado, lo que lleva a las investigaciones de la bioquímica de esta molécula. Algunos de sus efectos farmacológicos han sido declarados, por ejemplo, por un lado, el CDB presenta anticonvulsivante, sedante, y propiedades ansiolíticas. Además, han encontrado que la administración de CDB (2,5 mg/kg-10 mg / kg) induce un efecto de tipo ansiolítico tal como se evaluó por el ensayo de laberinto elevado en cruz, mientras que muestra las propiedades neuroprotectoras contra la toxicidad de 6-hidroxidopamina.

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Por otra parte, varios estudios han demostrado que la administración de Δ -THC promueve el sueño, mientras que el CDB induce resultados contradictorios. Por ejemplo, se mostró una reducción en el sueño, y más tarde se informó de una mejora del sueño en pacientes con insomnio. Las diferencias metodológicas entre los estudios podrían ser la razón para estos resultados contradictorios. Recientemente, se ha demostrado en los seres humanos que el CDB aumentó la vigilia. En línea con estos resultados, nuestro grupo ha informado de que las inyecciones de CBD en ratas promovieron la vigilia y el sueño de ondas lentas disminuyeron (SWS) y el sueño REM. Si el CDB aumenta la vigilia, uno esperaría que la administración de este compuesto en los núcleos de vigilia, tales como el hipotálamo lateral (LH) o núcleos del rafe dorsal (DRN), provocaría una mejora en el estado de alerta. Sin embargo, hasta la fecha esta cuestión no se ha examinado a fondo. Aquí, hemos investigado si la micro inyección directa de CBD en cualquiera de LH o DRN aumenta la vigilia.

MÉTODO    TEMA   Ratas Wistar machos (N = 48; 250 g-300 g) fueron alojados a una temperatura constante (21 +/- 1 ° C) en un ciclo de luz-oscuridad controlado (luces encendidas 07:00-19:00). Todos los procedimientos experimentales se realizaron de conformidad con las normas de cuidado de los animales aprobados por los Comités de Atención Institucional y el empleo locales y seguido las Directrices para el Cuidado y Uso de los Mamíferos en Neurociencias, las directrices publicadas por los Institutos Mexicanos de Investigación en Salud (DOF.NOM-062 -Z00-1999), y los Institutos Nacionales de Salud (1986) Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. Se hicieron todos los esfuerzos para minimizar el sufrimiento de los animales y para reducir el número de ratas utilizadas.

CIRUGÍA   En condiciones asépticas y anestesia profunda (acepromacina [0,75 mg / kg], xilazina [2,5 mg / kg], y la ketamina [22 mg / kg ip]), todas las ratas se les implantaron electrodos para registrar el electroencefalograma (EEG) y electromiograma (EMG) y con una cánula unilateral (calibre 23) dirigido en cualquiera de la LH o DRN. Justo después de las cirugías, las ratas se colocaron por separado en las cámaras de sueño de habituación (7 días). A lo largo del experimento, las ratas tenían comida y agua disponible, vivieron bajo una temperatura constante (21 +/- 1 ° C) y en un ciclo de luz-oscuridad controlado (luces encendidas 07:00-19:00). Todos los procedimientos se han reportado previamente por nuestro grupo.

DROGAS   2015 Este documento es solo para fines educativos y uso no comercial. Más información en www.medicalcannabiscostarica.org

 

 

 

El CDB se sintetizó en nuestro laboratorio como se describe anteriormente, y se disolvió en el vehículo (PEG / solución salina; 5:95 vol / vol).

ADMINISTRACIONES  FARMACOLÓGICAS.   En el día de la prueba, todas las ratas recibieron al azar los siguientes tratamientos: Vehículos (VEH, n = 6), CBD (10 ug / ul 1, n = 6), o CBD (20 ug / 1 ul, n = 6). Un grupo adicional (tratamiento simulado, n = 6) se incluyó para determinar si la inyección de VEH modificaría el sueño de las ratas. Las administraciones se realizaron a las 07:00, y las drogas fueron inyectados de forma manual utilizando una micro jeringa Hamilton 5-ul unido a través de los tubos (tubo FEP Teflón: 0.65 mm DE x 0,12 mm id; BAS, West Lafayette, IN) a un inyector. Las micro inyecciones se realizaron lentamente (Velocidad de flujo: 1 ul / min), y justo después de las administraciones todas las ratas se unen de nuevo para el sistema de grabación de sueño. Se recogieron y analizaron las grabaciones de sueñovigilia de 4 horas después de la inyección de la CDB sobre la base de nuestro informe anterior.

 LOS  ANÁLISIS  DE  LOS  REGISTROS  DEL  SUEÑO.   Las señales de EEG / EMG se registraron utilizando un polígrafo Grass modelo 12, filtrado (EEG = 0,330,0 Hz, EMG = 0,3-1,0 kHz), digitalizado (frecuencia de muestreo = 128 Hz; National Instruments, Austin, TX), y almacenada en un ordenador con la ayuda de un software de adquisición (Icelus, Mark Opp, Universidad de Michigan, Ann Arbor, MI). Los datos de EEG y EMG se anotaron en 12 épocas de vigilia, SWS y REMS, con la ayuda de un programa de puntuación de sueño (Icelus, Mark Opp, Universidad de Michigan, Ann Arbor, MI) y clasificada visualmente como se informó anteriormente. Para evaluar si los efectos del CDB sobre el sueño estaban también en la calidad del sueño, los espectros de potencia del EEG transformaciones rápidas de Fourier se realizaron en las señales de EEG sin artefactos y generaron valores absolutos de potencia para las bandas de frecuencia delta (durante SWS), theta (durante REMS) y alfa (durante la vigilia). Los datos del poder absoluto corresponden a las medias obtenidas a través de 4 horas consecutivas en cada punto de tiempo (12 s) registrados durante el experimento. La puntuación del sueño y todos los análisis de poder se llevaron a cabo por un solo examinador desconocido al grupo de tratamiento de la rata.

 LOS  ESTUDIOS  INMUNOHISTOQUÍMICOS.   Dos días después del final de los estudios del sueño, todas las ratas recibieron el vehículo (n = 6) o CDB. Una hora después de la inyección de drogas, todas las ratas fueron profundamente anestesiadas con pentobarbital (150 mg / kg ip) y se sometieron a perfusión. Las ratas fueron decapitadas, los cerebros se retiraron y se diseccionaron (30 um) en secciones coronales que se tiñeron para Fos como se describió anteriormente. Una persona consciente de las condiciones

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experimentales contó todas las somas inmunorreactivas en un área adyacente al sitio de inyección (control = 6; CDB = 6), utilizando una cuadrícula de 10 cuadrados (número de cuerpos celulares por unidad de rebanada en un 50-um cuadrado). Las secciones incluyen lo siguiente: para la LH, entre 1,30 y -4,80 mm, y para DRN, entre -7,40 y -8,30 mm. Todas las coordenadas mencionadas bregma.

EL  ANÁLISIS  ESTADÍSTICO.   Los datos se expresaron como M + / – SEM, y la comparación entre varios grupos se realizaron mediante análisis unidireccional de varianza seguido por el test post hoc de Scheffer, mientras que se utilizó la prueba Student’s T para la cuantificación de células inmunorreactivas c-Fos (Statview). El p < 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.

RESULTADOS   El CDB indujo un aumento dependiente de la dosis en el tiempo total de vigilia (p