Microbiota de la leche materna Nadia Raquel García Lara IV REUNIÓN BANCOS DE LECHE HUMANA

¿Podemos hablar de una microbiota de la leche materna?

Diversidad bacteriana leche materna •  La leche materna NO es un fluido estéril •  Tradicionalmente aislamiento de bacterias en LM se consideraba contaminación •  Parto intestino/vagina madre boca neonato contaminación LM o piel pecho •  Estudios flora LM e intestino lactante (vaginal/cesárea) se aíslan las mismas bacterias ácido lácticas que no se aíslan en piel del pecho ni vagina Martín R. J Pediatrics 2003

Diversidad bacteriana leche materna

Nº AISLAMIENTOS IDÉNTICOS (perfil RAPD idéntico)

Martín R. J Pediatrics 2003

Diversidad bacteriana leche materna •  En estudios de muestras de LM (extracción manual) de mujeres sanas, hijos a término sanos, se objetivan especies bacterianas que se aíslan de forma constante •  Resultados similares en estudios realizados en diferentes partes del mundoverdadera microbiota de LM

Diversidad bacteriana leche materna •  Medios cultivo, actualmente técnicas moleculares mucho más sensibles •  Especies bacterianas que se aíslan repetidamente •  Gran variabilidad interindividual •  La leche de cada mujer tiene una composición bacteriana única, similar a lo que ocurre con la microbiota intestinal de niños y adultos

Diversidad bacteriana leche materna •  Estudios con métodos de cultivo  recuentos totales 103-105 Martín R. J Pediatrics 2003 Heikkila M.P. J Appl Microbiol 2003

•  Origen de las bacterias de la leche materna es el tracto gastrointestinal materno RUTA ENTEROMAMARIA Pérez P.F. Pediatrics 2006

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Diversidad bacteriana leche materna  Género Staphyloccus –  Principal S. epidermidis –  También otros S. coagulasa negativo y S. aureus –  El más frecuente (≈100% de las mujeres) –  El más numeroso (recuentos>103 UFC/ml) *Presencia de S. epidermidis en heces es un rasgo diferencial de lactantes amamantados Adlerberth. Ped Res 2006

Diversidad bacteriana leche materna  Género Streptococcus –  Principal S. viridans (S. salivaris, mutis) –  También S. agalactiae  Género Enterococcus –  Principal E. faecium –  También E. faecalis •  No expresión de factores virulentos ni resistencia vancomicina E. faecium Reviriego C. J. Human Lact. 2005

Diversidad bacteriana leche materna  Bacterias ácido lácticas o Lactobacillus, Leuconoctoc, Lactococcus, Weisella, Bifidobacterias  Bacilos Gram negativos entéricos o Eschirichia Coli, cepas comensales   E. Coli se encuentra entre las primeras especies aisladas en el intestino del neonato

o Pseudomonas, Serratia, Acinetobacter, Salmonella Martín R. Res Microbiol 2007 Favier et al. Appl Environ Microbiol 2002 Tannock W. J Clin Microbiol 1990

Diversidad bacteriana leche materna N=40 muestras de LM Medios cultivo anaerobios (estrictos y facultativos) Recuento 102-104; 10-21 especies por muestra Grupo bacteriano Grupo Staphylococci (S. epidermidis)

Grupo Streptococcus (S. salivarius, mitis)

Enterococcus (E. faecium)

Prevalencia en muestras 97,5% 72,5% 7,5%

Bacterias Acido Lácticas (Lactobacillus rhamnosus, Lact. crispatus, Lactococcus lactis, Leuconoctoc mesenteroides)

12,5%

Heikkila M.P. J Appl Microbiol 2003

Diversidad bacteriana leche materna N=50 muestras LM. PCR cuantitativa tiempo real Grupo bacteriano

Prevalencia

Media±DS (log10/ml)

RECUENTO TOTAL

50/50

6.03±0.75

Grupo Staphylococcus

50/50

3.55±0.84

Grupo Bifidobacterium

50/50

3.56±0.23

Grupo Lactobacillus

50/50

3.74±0.47

Grupo Enterococcus

38/50

2.56±0.71

Grupo Streptococcus

50/50

4.50±0.81

Grupo Bacteroides

20/50

2.02±0.51

Clostridium Cluster XIVa-XIVb

48/50

3.32±0.60

Clostridium Cluster IV

2/50

1±60±0.17

Collado M.C. Letters Appl Microbiol 2009

¿Tiene la microbiota de la leche materna propiedades probióticas?

La flora de la LM tiene capacidad probiótica Grupo bacteriano

Grupo Staphylococci (S. epidermidis)

Grupo Streptococcus (S. salivarius, mitis)

Enterococcus (E. faecium)

Prevalencia en muestras

Capacidad bactericida frente St aureus

97,5%

23%

72,5%

41% S. salivarius 23% otros

7,5%

100%

12,5%

100%

Bacterias ácido lácticas (Lactobacillus rhamnosus, Lact. crispatus, Lactococcus lactis, Leuconoctoc mesenteroides)

Heikkila M.P. J Appl Microbiol 2003

La flora de la LM tiene capacidad probiótica  Lactobacillus, Bifidibacterium, Lactococcus o Variedades de Lactobacillus de LM tienen potencial probiótico igual o superior que variedades que contienen probióticos comercializados

Martín R. Appl Environ Microbiol 2009 Lara-Villoslada F. Br J Nutr. 2007 Olivares M. J Appl Microbiol 2006 Martín R.J Hum Lact 2005

La flora de la LM tiene capacidad probiótica  Lactobacillus, Bifidibacterium, Lactococcus o Forman barrera microbiológica primaria importante para prevenir infecciones o Capacidad adherirse a mucosas o Productor sustancias antimicrobianas

o Además efecto inmunomodulador y antiinflamatorio Martín R. Appl Environ Microbiol 2009 Lara-Villoslada F. Br J Nutr. 2007 Olivares M. J Appl Microbiol 2006 Martín R.J Hum Lact 2005

La flora de la LM tiene capacidad probiótica  Streptococcus viridans o Inhibe la colonización cavidad oral por S. aureus meticilín resistente en neonatos hospitalizados Uehara Y. Clin Infect Dis 2001

o Presencia en heces factor protector Kiriavainen Immunol Med Microbiol 2001 atopia o S. sanguis antagonista caries, enfermedad periodontal Becker M.R. J Clin Microbiol 2002

La flora de la LM tiene capacidad probiótica  Enterobacterias o Formas comensales E. Coli presentes de forma importante en las superficies mucosas del humano Grozdanov L. J Bacteriol 2004

o E. coli variedad Nissle 1917 (O6:K5:H1) forma parte de un probiótico diseñado para recién nacidos Lodinova R. Biol Neonatol 1997

MECANISMOS ANTIINFECTIVOS BACTERIAS PROBIÓTICAS INTESTINALES Competencia por nutrientes

Inducción IgA

Competencia lugares adhesión

Producción mucina Producción de sustancias antimicrobianas

Uniones intercelulares más fuertes Inmunomodulación

Lara-Villoslada F. Br J Nutr. 2007

¿Qué infuencia tiene la microbiota de la leche materna en la microbiota intestinal del recién nacido?

LM y flora microbiana intestinal del neonato •  La colonización intestinal del neonato comienza inmediatamente tras el nacimiento •  Es esencial para la maduración del tejido linfoide asociado al intestino, mantener la homeostasis del epitelio intestinal y la regulación de la fisiología intestinal Grönlund MM. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed 2000

LM y flora microbiana intestinal del neonato •  La alteración de la flora microbiana en el neonato se relaciona con un estado proinflamatorio (enterocolitis necrosante, broncodisplasia, leucomalacia ventricular) y mayor riesgo de sepsis nosocomial •  Asimismo, se relaciona con otras enfermedades a largo plazo (alergias) Kalliomaki M. J Allergy Clin Immunol 2001

LM y flora microbiana intestinal del neonato •  La flora bacteriana fecal de los lactantes sanos amantados refleja la composición bacteriana de la leche materna. Se han aislado las mismas variedades de Bifidobacterias, Lactobacillus y Staphylococcus en pares madre-lactante

•  La leche materna supone una fuente constante de bacterias comensales para el intestino del lactante Martín V. J Hum Lact 2012 Donnet-Hughes A. Proc Nutr Soc 2010 Pérez PF. Pediatrics 2007

¿Cuál es el riesgo de alimentar a los recién nacidos con leche materna con altos recuentos bacterianos?

Cultivos LM y patología neonatal •  161 madres de prematuros ingresados