Tema: Géneros Legionella, Haemophilus, Bordetella y Brucella

Departamento de Microbiología Curso 2013/2014

Legionella spp.: características Cocobacilos gramnegativos pleomórficos. Crecimiento lento. Muy exigentes desde el punto de vista nutricional (medios especiales con Lcisteina, hierro). Aerobios estrictos

Legionella spp.: patogenia

Legionella pneumophila multiplicándose dentro de macrófagos

Legionella pneumophila: Inhibición de la fusión del fagolisosoma

Bacterial Pathogenesis. A Molecular Approach. 2011. ISBN:978-1-55581-418-2

Legionella pneumophila

Legionella spp.: cuadros clínicos Legionelosis: Neumonía. Necesita tratamiento antimicrobiano (macrólidos o fluoroquinolonas). Fiebre de Pontiac: Similar a una gripe. Sin neumonía. Resolución espontánea sin tratamiento.

Legionelosis: Diagnóstico

Tinciones: IFD. Cultivo (agar CBYE). Antigenuria. Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (PCR en tiempo real). Serología: IFI.

Legionella:Tinción fluorescente

Legionella: Cultivo en agar carbón extracto de levaduras

Tratamiento Legionelosis

Azitromicina. Fluorquinolonas. Eritromicina. Doxiciclina. Rifampicina (nunca sola).

Legionella spp.: epidemiología Reservorio medioambiental Aguas estancadas. Agua torres refrigeración. Sistemas aire acondicionado. Crecimiento intracelular (amebas ). Crecimiento en biocapas..

Transmisión Aire contaminado: a partir agua contaminada. No transmisión persona-persona.

Profilaxis

G. Haemophilus: Características generales BGN pleomórficos. Nutricionalmente exigentes. Aerobios estrictos. Requiere factores especiales en los medios de cultivo para su crecimiento: Factor X = Hemina Factor V = NAD Hematíes lisados (sangre precalentada) AGAR CHOCOLATE

CLASIFICACIÓN HAEMOPHILUS Especie

Localización

H. influenzae H. haemolyticus H. parahaemolyticus

Tracto respiratorio y boca

H. aegyptius

Ojo

H. aphrophilus H. paraprophilus H. seguis H. ducreyi

Placa dental “ “ “ “ Tracto genital

H. influenzae

Cepas capsuladas: Antígeno polisacarido capsular:6 serotipos: a, b, c, d, e, f. Serotipo b más virulento. El 95% de los cuadros son invasivos. Cepas no capsuladas: Menor virulencia. Infecciones menos graves.

G. Haemophilus:

Tipo

Portadores

Patogenicidad

Serotipo b

2-4 %

Inf. sistémicas: meningitis, epiglotitis

Otros serotipos (a, c, d, f)

1-2 %

Rara vez

50-80%

Inf. Localizadas: EPOC, ORL..

No capsuladas

H. Influenzae : Patogenia

FACTORES DE VIRULENCIA: CÁPSULA (tipo b). Pili y adhesinas. IgA-Proteasa. OMPs. LPS. Afinidad por Fe.

H. Influenzae : Patogenia

Colonización de la mucosa nasofaringea. Cápsula, pili, adhesinas, IgA-Proteasa Invasión de tejidos. Cápsula, LPS Bacteriemia y metástasis a distancia. Infecciones por contigüidad.

Cuadros clínicos producidos por H. influenzae tipo b MENINGITIS: • Edad: 3 meses – 6 años. • Clínica: cefalea intensa, fiebre elevada, rigidez de nuca. • Mortalidad: 3-10%. • Secuelas: 9-45 %. EPIGLOTITIS AGUDA: • Edad: 2-7 meses. • Clínica: odinofagia, fiebre, disnea. • Alta mortalidad si no se inicia el tratamiento rápidamente.

Cuadros clínicos H. influenzae NIÑOS Cepas capsuladas: infecciones graves Meningitis. Epiglotitis aguda. Celulitis. Artritis. Neumonía.

ADULTOS Cepas NO capsuladas: infecciones menos graves Sinusitis. Otitis Conjuntivitis. Reagudización EPOC.

Diagnóstico Obtención de muestras clínicas: LCR, sangre, exudado ótico • •

Tinción de GRAM Cultivo – Identificación bioquímica • Factores X y V – Identificación serológica: Serotipos a-f • CIE • Aglutinación con partículas de latex

Vacunas y tratamiento H. influenzae tipo b VACUNAS CONJUGADAS Polisacárido capsular conjugado con una proteína portadora (toxoide tetánico, diftérico y proteínas de la membrana externa de meningococo). INCORPORADA en los programas de 20 países. Eficacia superior al 90%.

TRATAMIENTO -Betalactámicos:

Ampilina Amoxicilna-clavulánico Cefalosporinas

Género Bordetella Características generales Bacilos gram negativos pleomórficos. Aerobios estrictos. Bacterias exigentes. Requieren medios de cultivo especiales con sangre, albumina, carbón y almidón (Bordet-Gengou). Especies: B. pertussis B. parapertussis B. bronchiseptica

B. pertussis: patogenia

Transmisión vía respiratoria (gotitas de pfluge). Adherencia al epitelio traqueobronquial ciliado. Adhesión, inmovilización de los cilios y destrucción del epitelio. Producción local de toxinas y enzimas: Toxina pertussis. Pertactina. Toxina dermonecrótica. Hemaglutinina. Citotoxina. Toxina adenilatociclasa. Inflamación y exudado bronquial: TOSFERINA

B. pertussis: patogenia

Tosferina: cuadro clínico P. INCUBACIÓN: 7-14 días. P. CATARRAL: 1-2 semanas: Mayor contagiosidad Rinorrea. Tos. Conjuntivitis. Febrícula.

P. ESTADO: 4-6 semanas. Accesos de tos (10-15 días). Vómitos. Desnutrición. No fiebre alta.

COMPLICACIONES: Respiratorias: Otitis. Neumonía. Abdominales: Hernias. Prolapso rectal. Hemorragias: Petequias. Epixtasis. Nerviosas: Convulsiones. Coma.

P. DECLINACIÓN: 2-3 semanas.

Tosferina: cuadro clínico

Diagnóstico microbiológico TOMA DE MUESTRAS Ex. Nasofaringeo (Periodo catarral). CULTIVO. Medio Bordet-Gengou.

INMUNOFLUORECENCIA DIRECTA: Falsos positivos.

MÉTODOS MOLECULARES: PCR en lavado nasofaringeo

DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO: No disponible

Vacunas Tosferina Vacuna celular de B. pertussis muerta: Efectos secundarios: Leves: febricula, dolor local, inflamación Graves: convulsiones, daño cerebral (frecuencia < 0.1%)

Vacunas acelulares: Monovalente. Toxina. Bivalente. Hemaglutinina. Trivalente. + Pertactina. Tetravalente. + fimbria.

Vacuna celular

Eficacia 71% 80% 84% 89% 50%

Género Brucella Cocobacilos gramnegativos pequeños. No encapsulados e inmóviles. Crecimiento lento. Exigente desde el punto de vista nutricional. Aerobio estricto (CO2). 6 especies: 4 producen brucelosis a humanos.

Especies de Brucella productoras de patología en humanos Especie

Reservorio

B. mellitensis

Cabras, ovejas

B. abortus

Ganado vacuno

B. suis

Cerdos

B. canis

Perros

Estructura antigénica

Lipopolisacárido: Lípido A y polisacárido O (AgB). Cepas R. (B. ovis, B. canis). Polisacárido B: Fase S. Proteínas Membrana Externa: OMP (Ag. Comunes). Antígenos citoplasmáticos.

Patógeno intracelular facultativo

Brucella: Patogenia

Sobreviven en el fagosoma : – Inhibición de la degranulación. – Resistencia sistemas bactericidas oxígeno-dependientes. Formación de granulomas. Destrucción tisular.

Brucelosis. Clínica Inhalación/ingesta. No persona – persona. Dosis infectiva = 10 -100 organismos. Periodo Incubacion = 5 días - > 6 meses. Duracion enfermedad = semanas a meses. Cuadro agudo: Fiebre, sudoración profusa, malestar general, dolor de cabeza y muscular. Manifestaciones locales: osteoarticulares y genitourinarias (neurológicas,endocarditis). Frecuentes recaidas. Sin tto, cronicidad. Mortalidad: < 5%.

Brucelosis: diagnostico directo Cultivo: Hemocultivo. Medulocultivo. Identificación: Morfología colonia. Oxidasa. Aglutinación. Métodos moleculares: PCR.

Hemocultivos positivos Pacientes febriles Medulocultivos Pacientes apiréticos Recaídas

68-86% 92% 32% 80%

Brucelosis: Diagnóstico indirecto Rosa de Bengala. Aglutinación. Test de Coombs. ELISA: IgG, IgA, IgM.

Brucelosis: Epidemiología y Profilaxis Reservorio: Animal – Vacunación. Mecanismo de transmisión: Leche y derivados – Higiene alimentaria. Huéspedes: Profesionales – Vacunación (?).

Brucelosis: Epidemiología y Profilaxis

Francisella

F. tulariensis Tularemia o fiebre glandular Cocobacilo G- muy pequeño Parasito intracelular Reservorio: diversos animales y artrópodos

Grupo HACEK y otros bacilos G- exigentes

Grupo HACEK y otros bacilos G- exigentes