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˜ OFICINA ESPANOLA DE PATENTES Y MARCAS

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k ES 2 100 556 kInt. Cl. : G01N 33/74

11 N.◦ de publicaci´ on: 6

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˜ ESPANA

G01N 33/76 A61B 10/00

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TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA

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kN´umero de solicitud europea: 93917785.3 kFecha de presentaci´on : 10.08.93 kN´umero de publicaci´on de la solicitud: 0 656 120 kFecha de publicaci´on de la solicitud: 07.06.95

T3

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54 T´ıtulo: Procedimiento de control y estuches con equipos de an´ alisis.

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73 Titular/es: Unipath Limited

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72 Inventor/es: Catt, Michael

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74 Agente: Carpintero L´ opez, Francisco

30 Prioridad: 21.08.92 GB 9217864

Wade Road Basingstoke, Hampshire RG24 0PW, GB

45 Fecha de la publicaci´ on de la menci´on BOPI:

16.06.97

45 Fecha de la publicaci´ on del folleto de patente:

ES 2 100 556 T3

16.06.97

Aviso:

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Coley, John y Davis, Paul James

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En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicaci´on en el Bolet´ın europeo de patentes, de la menci´on de concesi´on de la patente europea, cualquier persona podr´a oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposici´on deber´a formularse por escrito y estar motivada; s´olo se considerar´a como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposici´ on (art◦ 99.1 del Convenio sobre concesi´on de Patentes Europeas). Venta de fasc´ ıculos: Oficina Espa˜ nola de Patentes y Marcas. C/Panam´ a, 1 – 28036 Madrid

ES 2 100 556 T3 DESCRIPCION Esta invenci´on se refiere a procedimientos y estuches con equipos de an´alisis para su uso en el control del ciclo de ovulaci´on en mam´ıferos hembra, especialmente en los seres humanos. 5

La invenci´on est´a relacionada particularmente, aunque no u ´nicamente, con la provisi´on de informaci´ on fiable concerniente al estado de fertilidad como ayuda a la contracepci´ on, mediante el uso de procedimientos pr´ acticos simples que puedan ser aplicados f´acilmente por personas no expertas, por ejemplo en el hogar.

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A lo largo de esta descripci´on, se utiliza la expresi´on “fase f´ertil” para indicar ese intervalo en el ciclo menstrual de la hembra, abarcando el evento de la ovulaci´ on, durante el que es m´ as probable que la relaci´ on sexual pueda dar como resultado la fertilizaci´ on, debido a la viabilidad normal de espermatozoides y ´ovulos.

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Para proporcionar informaci´ on fiable relativa al estado de fertilidad, se debe dar al usuario el aviso adecuado del comienzo de la fase f´ertil del ciclo. En general, las t´ecnicas propuestas se basan en el control de uno o m´ as par´ ametros que se alteran seg´ un se aproxima el evento de la ovulaci´on. Los par´ ametros t´ıpicos que se han invocado son la concentraci´ on de un analito en un fluido corporal, tal como estradiol y metabolitos del mismo, por ejemplo estrona-3-glucur´ onida (E3G). Otros par´ ametros que se han utilizado con la temperatura corporal basal y diversos cambios fisiol´ogicos tales como las caracter´ısticas de mucosa vaginal.

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Se han llevado a cabo estudios acad´emicos excelentes utilizando tales par´ametros. Tales estudios han establecido c´omo se pueden correlacionar estos par´ametros con el estado de fertilidad de un miembro medio de una amplia muestra de poblaci´ on. Sin embargo, cuando se intenta desarrollar un sistema pr´ actico de control adecuado para su uso por particulares, se ha encontrado que muchos individuos no se ajustan a la media en t´erminos de longitud del ciclo y/o duraci´ on y regulaci´ on de la fase f´ertil. La extensi´on de la variaci´ on de un individuo a otro, y en efecto, de un ciclo a otro en el mismo individuo, hace que los datos de la poblaci´ on media sean demasiado poco fiables para su uso pr´actico.

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Un factor adicional que puede variar ampliamente de individuo en individuo consiste en el umbral o nivel de l´ınea de referencia de un par´ ametro que se elige como caracter´ıstica verificable que puede se˜ nalar el comienzo de la fase f´ertil. De nuevo, aunque puede ser posible disponer un umbral medio o nivel de l´ınea de referencia de los datos de poblaci´ on, este puede ser completamente inapropiado para las necesidades individuales.

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Un objeto de la presente invenci´ on consiste en establecer un procedimiento de control del ciclo de ovulaci´on, u ´til a efectos contraceptivos, que se acomode a las caracter´ısticas particulares de un sujeto individual, teniendo en cuenta las posibles variables que anteceden.

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Otro objeto importante de la invenci´ on consiste en proveer el estado de fertilidad fiable mientras que se evita la necesidad de tener que realizar pruebas de manera frecuente (por ejemplo, diariamente) a lo largo de cada ciclo de ovulaci´ on. La necesidad de comprobaci´ on regular, por ejemplo diariamente, a lo largo del ciclo, ha caracterizado a muchos sistemas de control del ciclo de ovulaci´ on propuestos previamente.

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Existe abundante literatura cient´ıfica sobre los perfiles de hormonas en la orina durante el ciclo de ovulaci´ on. La utilidad relativa de los derivados de estradiol, especialmente la estrona-3-glucur´ onida (E3G), hormona lutenizante (LH), y derivados de progesterona, especialmente pregnanediol-3-glucur´onida (P3G), como indicadores del estado del ciclo, ha sido estudiada ampliamente. Se encuentran ya disponibles comercialmente procedimientos que permiten la utilizaci´on de LH para incrementar la probabilidad de concepci´ on. Bischof et al, Human Reproduction, Vol. 6 n´ um. 4 (1991) p. 515-18, es un estudio acad´emico para evaluar r´ apido ensayo automatizado para LH.

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Cekan et al, Contraception, Vol. 33 n´ um. 4 (1991) p 327-45 compara una gama de analitos urinarios de utilizaci´ on posible en la predicci´on del per´ıodo f´ertil o de ovulaci´on, en experimentos que conllevan la recogida de muestras diarias de orina durante un ciclo completo. Cekan et al concluye que aunque 2

ES 2 100 556 T3 para la predicci´ on del per´ıodo f´ertil o de ovulaci´on, el mejor ´ındice de esteroides de la orina parece ser la elevaci´on mantenida de la relaci´ on de E1G a C, este “mejor” procedimiento no es todav´ıa suficientemente bueno en t´erminos de viabilidad y fiabilidad global. 5

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El art´ıculo “A prospective multicentre study to develop universal tests for predicting female period in women” (OMS, Int J F´ertil 30(3) 1985 p 18-30) discute la predicci´ on de la fase f´ertil en un ciclo de ovulaci´on midiendo los niveles diarios de las hormonas E3G y Pd-3-G (es decir, P3G) en la primera orina de la ma˜ nana. Aunque el principal prop´ osito de este estudio es el de analizar las diferencias en el c´alculo de la fase f´ertil en diferentes colectivos de mujeres, este documento sugiere que los niveles relativos de E3G y de Pd-3-G se puedan utilizar en la predicci´ on del comienzo y del final de la fase f´ertil. Si el comienzo de la fase f´ertil est´a definido por una elevaci´ on mantenida del nivel de E3G en la orina, entonces el final de la fase f´ertil (es decir, el comienzo de la fase luteal) se puede suponer que es 5 d´ıas despu´es de que se haya observado el valor de pico de E3G. De manera similar, si el comienzo de la fase f´ertil se toma como que es un incremento de la relaci´on E3G:Pd-3-G, el final se define como que es 6 d´ıas despu´es de que se haya observado el valor de pico de este ´ındice. El art´ıculo “New assays for identifying the fertile phase” de Brown, Blackwell, Holmes and Smyth (Int J Gynecol Obstet 1989 Suppl 1 p 111-122) discute la utilizaci´on de medidas del nivel de estr´ ogeno como un predictor de la ovulaci´ on, aunque se ha constatado que el estr´ogeno en si mismo es un predictor de ovulaci´ on no fiable. Tambi´en se ha sugerido el pregnanediol como indicador hormonal que significa el final de la fase f´ertil. En los estudios a los que est´a referido este documento, el n´ umero medio de d´ıas de abstinencia de relaciones sexuales por ciclo menstrual fue de diecisiete; adem´as, se encontr´o que la satisfacci´on del usuario con este procedimiento de contracepci´ on, y la disposici´ on de las parejas de prueba a seguir utiliz´ andolo, estaba inversamente relacionada con la longitud del per´ıodo de abstinencia. Se hicieron medidas diarias de la hormona, aunque el art´ıculo hace la reflexi´on de que, cuando se predice la fase f´ertil con medidas de E3G y de P3G, esas 12 pruebas por mes pueden ser suficientes. En un esfuerzo por obtener un per´ıodo de abstinencia inferior al m´ınimo “te´ orico” establecido de siete d´ıas, se ha sugerido que es posible utilizar un procedimiento de predicci´on de fase f´ertil utilizando una combinaci´ on de s´ıntomas de mucosa cervical y de indicadores no sintom´aticos.

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El art´ıculo “Biochemical Indices of Potential Fertility” de Collins (Int J Gynecol Obstet, 1989, Suppl. 35-43), discute el posible uso de analitos m´ ultiples de la orina para trazar la fase f´ertil. Sin embargo, las pruebas llevadas a cabo tuvieron una proporci´ on de ´exito en la predicci´on de la fase f´ertil de alrededor del 80% o menos; tambi´en, la fase f´ertil predicha (y por tanto el per´ıodo de abstinencia) fue en todos los casos de m´as de 10 d´ıas. El documento EP 367 615 (Monoclonal Antibodies Inc) proporciona un procedimiento de control natural de natalidad en el que se mide el nivel en la orina de un metabolito (progesterona) como indicador o estado alcanzado en el ciclo menstrual. Sin embargo, las u ´nicas hormonas sugeridas son los metabolitos de progesterona, y por tanto el procedimiento s´olo puede ser un indicador del per´ıodo seguro de la fase luteal. El art´ıculo “Fertility Awareness: Jet-Age Rythm Method?” por Djerassi (Science, 1 Junio 1990, p 1061-2) sugiere la predicci´on de la fase f´ertil contraceptiva, y con fines particulares de concepci´ on, mediante el an´ alisis de fluidos corporales (por ejemplo, la sangre, la orina o la saliva). En este art´ıculo se sugiere que el comienzo de la fase f´ertil se podr´ıa predecir de manera segura detectando la elevaci´on de estradiol (o de sus metabolitos). El comienzo de la fase luteal se podr´ıa predecir ya sea mediante un segundo incremento de la concentraci´ on de estradiol, o ya sea mediante un incremento mayor de progesterona (o de sus metabolitos).

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Las deducciones claras que se han de extraer de esta literatura, son:

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el estradiol y sus metabolitos, especialmente el E3G, son las u ´ nicas hormonas de la orina que se pueden utilizar para proporcionar una advertencia suficientemente prematura, durante la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo, a efectos contraceptivos, y cualquier prueba con ´exito de conocimiento de fertilidad que se dirija a proporcionar informaci´ on contraceptiva adecuada, debe incluir la medida del E3G o de una mol´ecula equivalente, y debe identificar la elevaci´on en la concentraci´on de E3G que precede a la ovulaci´ on.

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Sin embargo, la literatura (por ejemplo, Djerassi) indica tambi´en que no se ha desarrollado aun una prueba satisfactoria basada en E3G. 3

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En general se acepta que el nivel b´ asico de la E3G de la orina fluct´ ua tan ampliamente de individuo en individuo que no se puede dise˜ nar un ensayo simple, aplicable universalmente. 5

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Para tratar de solventar este problema, se han incluido complicados procedimientos matem´ aticos, por ejemplo “CUSUM”, para calcular una concentraci´ on de umbral de E3G durante un ciclo de ovulaci´ on normal, y para identificar cualquier elevaci´on significativa por encima del umbral calculado. Tales sistemas poseen la desventaja de que en el momento en que las matem´aticas han reconocido que est´a teniendo lugar una elevaci´ on significativa, puede ser ya “demasiado tarde” si el objetivo es la contracepci´on. En consecuencia, se acepta generalmente que la alternativa CUSUM no puede proporcionar una informaci´ on prospectiva acerca del estado de fertilidad. Una revisi´ on de los procedimientos basados en CUSUM se encuentra en Royston: Statistics in Medicine, Vol. 10 (1991) 221-240. Por lo general, con este examen general de la t´ecnica anterior, se puede observar que en las t´ecnicas previamente conocidas de predicci´on de la fase f´ertil, el per´ıodo predicho es indebidamente largo, dando lugar a un per´ıodo de abstinencia indebidamente largo. Con mucha frecuencia, tal como se muestra por ejemplo en el documento EP 367 615, el largo per´ıodo de abstinencia se extiende desde la menstruaci´ on hasta la fase f´ertil. Esto se debe, en parte, a la dificultad de fijar exactamente el comienzo de la fase f´ertil. Tambi´en ha sido una caracter´ıstica de los procedimientos de la t´ecnica anterior que las frecuentes medidas, a veces a diario, de los niveles de hormonas en la orina a lo largo del ciclo normal, han resultado necesarias para que el procedimiento se pueda considerar fiable como procedimiento de contracepci´ on. Para la provisi´ on de un aviso contraceptivo fiable, resulta claramente muy importante que un procedimiento de control pueda proporcionar una advertencia adecuada del comienzo de la fase f´ertil normal que se produce, considerablemente por adelantado. En este caso, se puede definir “normal” ya sea en t´erminos de datos de poblaci´ on, o normal para esa misma persona individual. La tendencia ha sido la de ejercer una precauci´ on extrema y requerir la comprobaci´on de los par´ ametros relevantes a lo largo del ciclo, y particularmente exactos desde el inicio del ciclo (inicio de la menstruaci´on). Desde el punto de vista del usuario individual, resulta claramente ventajoso que se pueda evitar la necesidad de tal comprobaci´ on constante y, por el contrario, que se realice la comprobaci´ on en una porci´ on comparativamente breve del ciclo. Esto no s´olo beneficia al usuario en t´erminos de conveniencia, sino que tambi´en se puede reducir el coste si, por ejemplo, se precisan menos dispositivos de prueba desechables cada mes.

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En principio, en base a la informaci´ on sobre poblaci´ on, ser´ıa posible reducir el n´ umero de pruebas requeridas si se decide que las pruebas son innecesarias hasta un d´ıa num´erico universalmente definido, u otro intervalo de tiempo especificado, siguiente al inicio de la menstruaci´on. Sin embargo, seg´ un se indica anteriormente, la variaci´on individual tiende a hacer que una tal presunci´ on universal sea insegura. 40

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A los efectos de esta descripci´on, estradiol y todos los metabolitos medibles de estradiol, se referir´ an en conjunto en lo que sigue como “E3G”. Adem´ as de la estrona-3-glucur´ onida ya mencionada, los metabolitos de estradiol que se pueden ensayar tambi´en a los efectos de la invenci´on incluyen el estradiol3-glucur´ onida, estriol-17-glucur´onida, estriol-3-glucur´ onida, estriol-16-glucur´onida y (principalmente para sujetos no humanos) estrona-3-sulfato. Como se apreciar´ a por la descripci´on que sigue, la invenci´on se puede aplicar f´ acilmente a los datos obtenidos de la medida de las concentraciones en fluidos corporales de otros analitos de importancia en relaci´on con el estado del ciclo de ovulaci´on. En general, los analitos m´as adecuados son las hormonas y sus metabolitos. La hormona de estimulaci´on del fol´ıculo (FSH) es un ejemplo. Ejemplos de fluidos corporales alternativos, que son relativamente accesibles, son la saliva, el fluido crevicular, el sudor, la secreci´on seb´ acea, las l´agrimas y el fluido vaginal. En los fluidos internos principales, tales como la sangre, se pueden utilizar, pero en general no se prefieren ya que solamente son accesibles f´acilmente mediante t´ecnicas invasivas. El lector experto apreciar´ a tambi´en que la “concentraci´on” en el fluido corporal del analito o analitos elegidos, no necesita ser medido en t´erminos absolutos, aunque ello se puede hacer, por supuesto, si se desea. En general, ser´ a suficiente con ensayar un analito de una forma que produzca una se˜ nal, convertible en dato num´erico, en relaci´on con la concentraci´on real, de modo que tales datos se puedan comparar con datos similares obtenidos en una etapa diferente del ciclo para determinar si se ha producido o no un cambio significativo en la concentraci´ on real. En consecuencia, donde se refieran la descripci´on y las reivindicaciones que siguen a la “concentraci´on” de un analito, esta expresi´ on debe ser interpretada de manera amplia.

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La invenci´on proporciona un procedimiento para controlar el estado de un ciclo de ovulaci´ on actual de un individuo mam´ıfero hembra, que incluye la medici´ on repetida de la concentraci´ on en el fluido corporal de al menos un analito de importancia en relaci´ on con el estado del ciclo de ovulaci´on durante al menos la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo de ovulaci´ on actual del sujeto individual, en el que la medici´ on de dicha concentraci´on de analito durante el ciclo actual de ovulaci´ on da comienzo una pluralidad de d´ıas siguientes al inicio de la menstruaci´on, pero al menos 2 d´ıas num´ericos con anterioridad al primer d´ıa n´ umerico en el que ocurre la ovulaci´on real en uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on en el mismo sujeto individual; y un cambio de la concentraci´ on de analito indicativo de la ovulaci´ on inminente se identifica a partir de los resultados de tal medici´on por referencia al valor de referencia de la concentraci´on de analito sobre la base de los datos de la prueba de concentraci´ on de analito obtenidos a partir de un sujeto individual durante uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on. La invenci´on proporciona tambi´en un estuche con equipo de an´ alisis que comprende:

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a) uno o m´ as dispositivos de medida para determinar la concentraci´ on de al menos dicho analito en el citado fluido corporal, b) medios que permiten a un usuario deducir a partir de la citada concentraci´ on, una indicaci´ on del estado de fertilidad del ciclo de ovulaci´on actual por referencia a un valor de referencia de la concentraci´on, determinado a partir de uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on en el mismo sujeto, y c) medios que permiten a un usuario deducir un d´ıa preciso de comienzo de la prueba a partir del conocimiento del d´ıa num´erico en el que se produce la ovulaci´ on real durante al menos un ciclo previo de ovulaci´ on en el mismo sujeto.

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Convenientemente, en tal estuche con equipo de an´alisis, en el que los medios b) y c) est´ an combinados, un modelo ideal comprende medios electr´ onicos programados para su uso en un procedimiento de acuerdo con la invenci´on. En una realizaci´ on adicional, la invenci´on proporciona un medio electr´ onico para su uso en un procedimiento de control del estado de un ciclo de ovulaci´ on actual de un mam´ıfero, programado para procesar los datos medidos de concentraci´ on de analito, obtenidos a partir de la medici´ on de un fluido corporal realizada durante al menos parte de la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo actual, y para identificar por medio del citado procesamiento, un cambio de la concentraci´on de analito indicativo de la ovulaci´ on inminente, en relaci´on con un valor de referencia de la concentraci´on de analito que se adapte a un sujeto individual en base a los datos medidos de concentraci´on de analito obtenidos del sujeto individual durante uno o m´as de los ciclos previos de ovulaci´on, y para identificar tambi´en un d´ıa de comienzo de la medici´on del analito que caiga dentro de una pluralidad de d´ıas siguientes al inicio de la menstruaci´on en el ciclo actual de ovulaci´ on pero al menos 2 d´ıas num´ericos en los que se ha producido la ovulaci´ on real en uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on en el mismo sujeto individual. Otro aspecto de la invenci´ on consiste en un dispositivo para controlar el ciclo de ovulaci´on humana, que comprende medios para iniciar el registro de un ciclo, medios para medir (si es necesario, en uni´ on de uno o m´ as dispositivos de prueba legibles por medio del dispositivo de control) y registrar la concentraci´ on de E3G de la orina, medios para determinar una concentraci´ on de umbral de E3G en la orina a partir de medidas tomadas durante las fases no f´ertil y de transici´ on de al menos un ciclo precedente, y medios para alertar a un usuario si una concentraci´on de la E3G medida en la orina durante la fase pre-f´ertil de un ciclo actual excede el umbral determinado, medios para medir (si es necesario, en uni´on de uno o m´as dispositivos de medici´on le´ıbles mediante el dispositivo de control) y registrar la concentraci´ on de LH y/o de P3G en la orina, medios para determinar a partir de tal concentraci´ on de LH y/o de P3G el d´ıa num´erico m´as prematuro en el que ocurri´o la ovulaci´on real en uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on, y medios para alertar a un usuario respecto a un d´ıa ´optimo de comienzo de la medici´on de E3G en el ciclo actual, siendo el citado d´ıa ´optimo de comienzo de la medici´on de E3G al menos 5 d´ıas num´ericos siguientes al inicio de la menstruaci´ on en el ciclo actual pero al menos 2 d´ıas num´ericos por anticipado a dicho d´ıa num´erico m´as prematuro en el que ocurri´o la ovulaci´on real. La concentraci´on de analito se puede medir en t´erminos absolutos, o en t´erminos relativos, por ejemplo como una relaci´on relativa a la concentraci´ on de un analito de referencia presente en la misma muestra del fluido corporal.

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De forma m´as general, la invenci´on incluye cualquier procedimiento comparable en el que una caracter´ıstica del fluido corporal (por ejemplo la viscosidad, la resistencia i´onica o la conductividad), que sea importante en relaci´on con el estado del ciclo de ovulaci´on, se compara a un valor de referencia que se ha 5

ES 2 100 556 T3 adaptado a un sujeto individual en base a los datos medidos, obtenidos a partir de un sujeto individual durante uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on.

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Opcionalmente, el valor de referencia apropiado, por ejemplo el umbral, se deduce de los datos obtenidos a partir de una base “oscilante” de referencia que consiste en un n´ umero fijo de ciclos consecutivos que preceden de forma inmediata al ciclo actual. Con preferencia, esta base oscilante de referencia consiste en los 4 a 10 ciclos inmediatamente precedentes, con m´as preferencia los 5 o´ 6 ciclos inmediatamente precedentes. Teniendo tal base oscilante de referencia, se puede recoger cualquier “desviaci´on” progresiva en el umbral apropiado, en el individuo afectado. Por ejemplo, el umbral para el siguiente ciclo puede ser una media de los umbrales sugeridos por los datos previos, opcionalmente pesados a favor del ciclo o de los ciclos m´as recientes. Con preferencia, el procedimiento se basa u ´nicamente en los resultados de las pruebas de orina.

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Con preferencia, el procedimiento no incluye la medida de la temperatura corporal basal, en especial como medida tal que necesita ser realizada en cada ciclo. Con preferencia, el analito es estradiol o un metabolito del mismo, tal como estrona-3-glucur´ onida.

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Una realizaci´ on adicional de la invenci´ on consiste en un medio electr´onico para su uso en un procedimiento de control del estado del ciclo de ovulaci´on real de un mam´ıfero, por ejemplo humano, programado para procesar los datos medidos de la concentraci´on de analito, obtenidos a partir de la medici´ on de un fluido corporal realizada durante al menos parte de la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo actual, y para identificar a trav´es de dicho procesamiento, un cambio de la concentraci´on de analito indicativo de ovulaci´ on inminente, en relaci´on con un valor de referencia de concentraci´ on de analito que est´ a adaptado a un sujeto individual en base a los datos medidos de concentraci´ on de analito obtenidos de un sujeto individual o durante uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on. Con preferencia, el medio electr´ onico est´ a incorporado en un dispositivo de registro que posee medios para registrar los resultados de las pruebas de concentraci´ on de analito, y medios para presentar la informaci´ on relativa al estado del ciclo de ovulaci´ on actual de un sujeto individual cuya concentraci´ on de analito ha sido medida. Con preferencia, el dispositivo de registro posee medios para medir el resultado de la prueba de concentraci´ on de analito realizada con la utilizaci´ on de un dispositivo de prueba que se presenta al dispositivo de registro.

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La invenci´on incluye un dispositivo de medici´ on de la concentraci´on de analito de un fluido corporal, cuando se utiliza en uni´ on de una combinaci´ on de medio electr´onico y dispositivo de registro de la invenci´on, cuyo dispositivo de medici´on comprende un medio de recogida de una muestra de fluido corporal y un medio de medici´ on inmunocromatogr´ afica que proporciona el resultado de la prueba en forma legible por el medio de medida del resultado de la prueba del dispositivo de registro. Otro aspecto de la invenci´ on consiste en un estuche con equipo de an´ alisis para proporcionar el conocimiento del estado del ciclo de ovulaci´on de un mam´ıfero normal, por ejemplo humano, que comprende uno o m´ as dispositivos de medici´on para la determinaci´ on de la concentraci´on (en t´erminos relativos o absolutos) en un fluido corporal, de un analito de importancia en relaci´ on con el estado del ciclo de ovulaci´ on, junto con medios electr´ onicos programados para procesar los datos medidos de concentraci´on de analito, obtenidos durante el menos parte de la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo actual y para identificar, a partir del mismo, un cambio en la concentraci´ on de analito indicativo de ovulaci´ on inminente, en relaci´on con un valor de referencia de concentraci´ on de analito que est´ a adaptado a un sujeto individual en base a los datos medidos de concentraci´ on de analito del sujeto individual durante uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on. Con preferencia, el estuche con equipo de an´alisis consiste en una pluralidad de dispositivos desechables de medici´on del fluido corporal.

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En un estuche con equipo de an´ alisis particularmente preferido de la invenci´ on, en el que el analito principal es estradiol o un metabolito del mismo, tal como E3G, medido usualmente en la orina, los dispositivos de prueba miden adicionalmente la concentraci´ on de LH en la orina de un sujeto individual, y los resultados de la medida de la concentraci´ on de LH obtenidos de este modo, son utilizados por el medio electr´onico en uni´ on de otros resultados de la medida de concentraci´ on de analito. Un aspecto importante de la invenci´ on consiste en un procedimiento de predicci´on de la fase f´ertil 6

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durante el ciclo de ovulaci´ on actual de un mam´ıfero individual, por ejemplo, un humano, mediante la detecci´on, en la fase de pre-ovulaci´on, de un cambio de concentraci´ on en un fluido corporal de un analito de importancia en relaci´ on con el estado del ciclo de ovulaci´on, en el que el cambio de concentraci´ on se determina por referencia a una concentraci´ on de umbral determinada para el sujeto individual a partir de medidas de la concentraci´on de analito en el fluido corporal durante la fase de pre-ovulaci´on de al menos un ciclo previo de ovulaci´ on. Con preferencia, el analito es la E3G de la orina, en cuyo caso la concentraci´on de umbral de E3G de la orina adoptada para el ciclo actual es, con preferencia, la concentraci´ on que, en el ciclo previo de ovulaci´on, se excede de manera m´as frecuente durante el n´ umero total de d´ıas que constituye la fase de transici´ on de ese ciclo previo, que durante el mismo n´ umero de d´ıas de la fase no f´ertil que precede inmediatamente a la citada fase de transici´ on. La invenci´on incluye un dispositivo para el control del ciclo de ovulaci´ on del mam´ıfero, por ejemplo humano, que comprende medios para inicial el registro del ciclo, medios para medir (si es necesario, en uni´ on de uno o m´ as dispositivos de medici´on legibles por el dispositivo de control) y registrar la concentraci´on de E3G en la orina, medios para determinar una concentraci´ on de umbral de E3G en la orina a partir de medidas realizadas durante la fases no f´ertil y de transici´ on de al menos un ciclo precedente, y medios para alertar a un usuario si una concentraci´ on de E3G en la orina medida durante la fase pre-f´ ertil de un ciclo actual, excede el umbral determinado. La invenci´on incluye tambi´en un estuche para controlar el ciclo de ovulaci´on de un mam´ıfero, por ejemplo humano, que comprende tal dispositivo junto con al menos un dispositivo de medici´on susceptible de ser utilizado para medir la concentraci´ on de E3G de la orina. Un aspecto adicional de la invenci´ on es un medio electr´onico, tal como un microprocesador, programado para su uso de acuerdo con un procedimiento de la invenci´ on.

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En ninguna parte de la literatura se encuentra ninguna sugerencia de que el valor de referencia de la concentraci´on de analito, por ejemplo el nivel de umbral, se deba calcular, no en base de las medidas tomadas durante el ciclo actual sino, por el contrario, a partir de uno o m´ as ciclos previos del mismo individuo. 30

La invenci´on proporciona un procedimiento compuesto de control del estado de un ciclo de ovulaci´ on actual, y cuyo procedimiento se ha confeccionado de forma muy pr´ oxima a las caracter´ısticas del sujeto individual. 35

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Con preferencia, la medici´ on comienza al menos 3, y de forma m´as preferente al menos 4, d´ıas num´ericos con anterioridad al primer d´ıa num´erico en el que se ha producido la ovulaci´ on real en uno o m´as ciclos previos de ovulaci´on en el mismo sujeto individual. Con preferencia, el d´ıa real m´as prematuro de ovulaci´ on se deduce de los datos recogidos durante al menos 3, o con m´as preferencia al menos 5, ciclos previos consecutivos. Idealmente, el d´ıa m´ as prematuro de ovulaci´ on utilizado para calcular el intervalo de tiempo a efectos del ciclo actual, se deduce de los datos obtenidos durante al menos el ciclo inmediatamente precedente.

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Un procedimiento particularmente conveniente incluye la determinaci´ on del primer d´ıa de ovulaci´ on previa a partir de los datos obtenidos de una base “oscilante” de referencia que consiste en un n´ umero fijo de ciclos consecutivos inmediatamente precedentes al ciclo actual. Con preferencia, esta base oscilante de referencia consiste en los 4 a 10 ciclos inmediatamente precedentes, de manera m´as preferente los 5 ´o 6 ciclos inmediatamente precedentes. Disponiendo de tal base oscilante de referencia, cualquier “desviaci´ on” progresiva en la ocurrencia de la ovulaci´ on del individuo afectado puede ser recogida y considerada en la asignaci´on del siguiente d´ıa de comienzo de la prueba. La invenci´on incluye un estuche con equipo de an´ alisis que comprende uno o m´ as dispositivos de medici´on para determinar la concentraci´ on (en t´erminos relativos y absolutos) de al menos dicho analito en el citado fluido corporal, junto con instrucciones que advierten al usuario para que comience la citada medici´on durante el citado intervalo de tiempo, y medios que permiten a un usuario deducir el citado intervalo de tiempo y/o el d´ıa preciso de comienzo de la prueba a partir del conocimiento del d´ıa num´erico en el que ocurri´ o la ovulaci´on real durante al menos un ciclo previo de ovulaci´ on. De forma m´as general, la invenci´on se puede aplicar a cualquier procedimiento de control del estado de un ciclo de ovulaci´ on actual de un mam´ıfero hembra individual, por ejemplo humano, que incluya la medida de un par´ ametro de importancia en relaci´ on con el estado del ciclo de ovulaci´on y que presente 7

ES 2 100 556 T3 un cambio detectable durante la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo, que se produzca al menos 2, y m´ as preferentemente al menos 3, d´ıas con antelaci´on al d´ıa de ovulaci´on real.

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En una realizaci´ on preferida de la invenci´ on, la elecci´on del d´ıa de comienzo de la prueba est´ a influenciada por el intervalo de tiempo entre el inicio de la menstruaci´ on y el primer d´ıa num´erico en el que ocurri´ o previamente la ovulaci´ on real. En algunos individuos puede existir un intervalo comparativamente largo entre el inicio de la menstruaci´on y la primera ocurrencia de ovulaci´ on. Esto se observa normalmente en individuos humanos que tienen longitudes de ciclo que son con frecuencia, o siempre, m´as largos que la media de la poblaci´on de “28 d´ıas”. En tales individuos existe un riesgo considerable de que ocasionalmente ocurra la ovulaci´on excepcionalmente pronto (para ese individuo) y que el d´ıa de comienzo de la prueba se debe llevar m´as adelante para permitir esto. Con preferencia, el d´ıa de comienzo de la medici´on se calcula de acuerdo con la siguiente relaci´on: Primer d´ıa de ovulaci´ on previa

D´ıa de comienzo de la medici´on

8 - 10 11 - 14 15 - 18 19 - 23 24 - 28 29+

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El(los) par´ ametro(s) elegido(s) para proporcionar el aviso de ovulaci´ on inminente, no son cr´ıticos para la invenci´on, dado que el par´ ametro presenta un cambio detectable dentro del intervalo de tiempo entre el comienzo de la prueba (como se ha determinado aqu´ı) y un tiempo de seguridad con antelaci´on a la ovulaci´on real en el ciclo actual. En general, sin embargo, el par´ametro m´ as adecuado ser´a un cambio en la concentraci´on (absoluta o relativa) de un analito de un fluido corporal, especialmente una hormona o un metabolito de la misma. El fluido corporal m´ as apropiado es, normalmente, la orina.

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De acuerdo con una realizaci´on preferida de la invenci´ on, a efectos de determinar el umbral aplicable a un sujeto individual, resulta conveniente subdividir la porci´ on del ciclo de ovulaci´on durante la cual es importante el nivel de E3G, a un n´ umero de fases distintas, como sigue:

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i) La fase f´ertil, que se puede definir como la fase que abarca los d´ıas “-3” a “+2” inclusive, en relaci´on con el d´ıa de ovulaci´on real. El d´ıa de ovulaci´on se puede fijar de manera exacta mediante la medici´ on de los niveles de LH en la orina, por ejemplo, tomando la ovulaci´ on que ocurra a continuaci´on de la m´ axima concentraci´ on de LH en la orina. ii) La fase de transici´ on, durante la cual se requiere aviso de ovulaci´ on si el procedimiento de control ha de proporcionar una base segura a efectos contraceptivos. La fase de transici´ on se puede definir como la fase que abarca los d´ıas “-8” a “-4”, inclusives, con respecto al d´ıa de ovulaci´on real.

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iii) La fase no f´ertil, que se puede definir como la fase a partir del inicio de la menstruaci´ on hasta, e incluyendo, el d´ıa “-9” en relaci´ on con el d´ıa de ovulaci´on real. El nivel de umbral de E3G de la orina se determinar´ a a partir de las medias de concentraci´ on de E3G durante las fases de transici´ on y pre-f´ertil de uno o m´ as ciclos previos. Mientras se est´ a estableciendo el umbral para el sujeto individual, se deber´ an tomar medidas regulares (con preferencia, a diario) de la concentraci´on de E3G en la orina, durante estas fases, al menos durante un ciclo y, de manera m´ as preferente, durante al menos dos ciclos, y de manera ideal durante al menos tres ciclos. Cuando se emplea m´as de un ciclo de establecimiento, estos son preferentemente consecutivos. La ovulaci´on real se puede determinar, si se desea, al mismo tiempo por medio de procedimientos ya conocidos en si, tales como la detecci´on de una oleada de LH, elevaci´ on de P3G, u otros cambios corporales tales como una temperatura corporal basal elevada (BBT). Se prefiere mejor la detecci´on de la oleada de LH para este prop´ osito. La expresi´on “oleada de LH” se utiliza aqu´ı para se˜ nalar una elevaci´ on brusca de la concentraci´ on de LH que precede al evento de la ovulaci´ on. En la t´ecnica, se hace tambi´en referencia a “LH m´axima”, es decir, la concentraci´ on de pico de LH. En la mayor´ıa de los individuos, existen para todos efectos pr´ acticos simult´aneos, cuando el ciclo se controla sobre una base de d´ıa a d´ıa. Sin embargo, en unos pocos individuos, quiz´ as el 20% de la poblaci´ on, la concentraci´ on de pico real de 8

ES 2 100 556 T3 LH no se ha observado hasta el d´ıa siguiente a la elevaci´on principal de la concentraci´ on. A los efectos de la invenci´on, preferimos utilizar la elevaci´ on observable como par´ ametro cr´ıtico.

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Una vez que se ha establecido un umbral apropiado de E3G, se puede interrumpir la medici´ on regular de E3G durante la parte prematura de la fase no f´ertil del ciclo actual. Por el contrario, se puede hacer que comience la medici´on en un momento determinado tras el inicio de la menstruaci´ on, por ejemplo. Si se va a utilizar el procedimiento con fines contraceptivos, el usuario deber´ a ser advertido de que el sujeto es al menos probablemente que se f´ertil desde el momento en que se detecte un nivel elevado de E3G. A efectos pr´ acticos, se puede definir el umbral como la concentraci´ on de E3G que se excede m´ as frecuentemente durante la fase de transici´ on que durante la fase no f´ertil. Por ejemplo, se puede exceder en no m´ as del 30% de los d´ıas de la fase no f´ertil, pero puede ser excedida en no menos del 60% de los d´ıas de la fase de transici´ on. De manera m´ as preferible, el umbral es la concentraci´ on de E3G que se excede en no m´as del 20% de los d´ıas de la fase f´ertil, pero que se excede en no menos del 80% de los d´ıas de la fase de transici´ on. Se encontrar´a que el umbral de E3G variar´ a ampliamente de un sujeto individual a otro, pero en general estar´a comprendido en la gama de alrededor de 5 a alrededor de 40 ng/ml. Para muchas mujeres, el umbral por encima del cual se registra un nivel elevado de E3G, es de alrededor de 30 ng/ml. Aunque, si se desea, se podr´ıa deducir un umbral preciso para cada sujeto individual, resulta m´ as conveniente simplificar el procedimiento utilizando una gama de “bandas de umbral”, por ejemplo umbrales de 5, 10, 15, 20, 30, 40 y 50 ng/ml, y asignar una banda particular de umbral a cada sujeto individual en base a la informaci´ on del E3G deducida en ciclos precedentes. Hemos encontrado que la adopci´ on de bandas de umbral es suficientemente segura como para permitir que se obtenga una advertencia contraceptiva fiable. Los ensayos utilizados en el procedimiento se pueden formular para que reconozcan cuando se han excedido tales bandas.

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En un art´ıculo de Brown et al, Int. J. Gynecol. Obstret, 1989 Suppl. 1, p´ aginas 111-122, titulado “Nuevos ensayos para identificar el per´ıodo f´ertil”, se describe un procedimiento en el que se mide un estr´ogeno en la orina, y se realiza una exposici´on de que: 35

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“... el incremento diario en la producci´on de estradiol durante la elevaci´ on hasta el pico pre-ovulatorio, es notablemente constante para todos los ciclos, estando muy cercano a un valor de 1,4 por d´ıa”. Como estad´ıstica de poblaci´on, este valor citado de 1,4 para incremento diario durante la elevaci´ on pre-ovulatoria puede ser correcto, pero en la pr´ actica este factor var´ıa de forma muy considerable de un individuo a otro. En un procedimiento incremental o porcentual de deducci´ on de datos a partir de ensayos sucesivos de concentraci´on de estradiol o de un metabolito del mismo (tal como la E3G de la orina), resulta imprudente basarse en que un incremento de 1,4 es un disparo significativo universal de la elevaci´on pre-ovulatoria. En la pr´ actica, hemos encontrado que el disparo necesario puede ser un factor incremental tan alto como 2,0, en cuyo caso un factor de 1,4 no ser´ıa significativo en relaci´on con las fluctuaciones t´ıpicas b´asicas en la concentraci´on de E3G del individuo referido. En otros individuos, hemos encontrado que el disparo necesario es significativamente m´ as bajo de 1,4, y si se elige un factor de 1,4, la elevaci´ on pre-ovulatoria de la concentraci´ on de E3G no ser´ıa detectada. En consecuencia, la presente invenci´ on se puede aplicar usualmente en cualquier procedimiento de control del ciclo de ovulaci´on que incluya el an´ alisis incremental (“porcentual”) de un par´ ametro variable detectable de importancia durante la fase pre-ovulatoria del ciclo, y en el que se proporciona un aviso de ovulaci´ on inminente cuando se identifica una relaci´ on de referencia predeterminada, habiendo sido determinada la relaci´on de referencia para el sujeto individual en base a los datos deducidos de uno o m´as ciclos previos de ovulaci´on en el mismo sujeto individual. La expresi´ on “valor de referencia de la concentraci´on de analito” seg´ un se utiliza aqu´ı, incluye valores de referencia en forma de relaci´on. La presente invenci´on se puede aplicar por tanto para aventajar a cualquiera de los sistemas de ensayo propuestos que incluyen el an´ alisis matem´ atico de concentraciones sucesivas de analito, en particular concentraciones de E3G en la orina, mediante an´ alisis “CUSUM”, por ejemplo. Usualmente, las concentraciones sucesivas de analito (o en efecto, las medidas sucesivas de cualquier par´ ametro relevante de acuerdo con la invenci´on), se registran en d´ıas sucesivos.

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ES 2 100 556 T3 Convenientemente, el primer ensayo de un ciclo actual se realiza al menos 5 d´ıas despu´es del comienzo de la menstruaci´ on.

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Una vez que se ha detectado un nivel elevado de E3G, es decir, por encima de un umbral predeterminado, aunque no se pueda dar como cierto que la mujer ha entrado en la fase f´ertil de su ciclo, se puede decir con certeza razonable que el d´ıa de ovulaci´ on de su ciclo es inminente. Una ventaja de este procedimiento consiste en que puede actuar por simple disparo de evento, por ejemplo, la observaci´on de un nivel elevado de una hormona, pero en una realizaci´ on de la invenci´ on, se miden 2 o m´ as analitos para proporcionar datos comparativos, tales como la relaci´ on de concentraci´ on de dos analitos medidos simult´ aneamente. La descripci´on que sigue se proporciona en relaci´on con las hormonas particulares E3G, LH y P3G de la orina, aunque se comprender´ a f´ acilmente que los principios del procedimiento se pueden utilizar en relaci´on con otros indicadores bioqu´ımicos, por ejemplo las hormonas estradiol y progesterona, que se encuentran por ejemplo en la sangre o en la saliva. El procedimiento de la invenci´on se puede aplicar a, o utilizar en combinaci´on con, observaciones de otros signos fisiol´ogicos del nivel de fertilidad de una hembra, del que ella es conocedora, o puede ser f´acilmente conocedora de, por ejemplo, los indicadores de otros fluidos corporales.

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Donde sea apropiado, la fecha exacta de ovulaci´on en el ciclo actual se puede determinar por medio de cualesquiera par´ ametros qu´ımicos o fisiol´ogicos conocidos, aunque un procedimiento preferido consiste en medir el nivel de LH. Una vez que ha sido detectada la oleada de LH citada anteriormente, se puede decir que la ovulaci´on del usuario es inminente. Tambi´en, se puede anotar el d´ıa del ciclo en el que se ha producido la ovulaci´ on como referencia futura. Si se detecta la oleada de LH, y por tanto se fija con exactitud el d´ıa de ovulaci´on, se puede indicar al usuario con un grado de certeza muy alto que el usuario no ser´a f´ertil m´as all´ a de cuatro d´ıas (3 d´ıas tras las ovulaci´on). A efectos pr´acticos, una concentraci´on de LH en la orina de 20 mIU/ml se puede considerar como umbral universal indicativo de la oleada de LH virtualmente bajo todas las circunstancias.

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Un procedimiento para predecir el final de la fase f´ertil (aunque no de manera tan segura el d´ıa de la ovulaci´on), consiste en medir los niveles de la hormona P3G en la orina. La P3G tiene un nivel relativamente bajo en la orina hasta el inicio de la fase luteal, en cuyo punto se eleva su nivel de forma absolutamente aguda. Por consiguiente, una vez que se detecta un nivel elevado de P3G, se puede indicar al usuario que ha comenzado la fase luteal del ciclo, es decir el per´ıodo terminal no f´ertil. Un nivel elevado de P3G en la orina puede estar basado en los datos tomados durante los ciclos actual y/o uno o m´ as de los precedentes. Se puede registrar un nivel “elevado” de P3G, por ejemplo, ya sea cuando el nivel de P3G detectado es mayor que la suma de los cuatro niveles de P3G previos registrados en el mismo ciclo menstrual, o ya sea mayor de 3500 ng/ml, cualquiera de estos dos umbrales que sea inferior y se consiga primero. Una vez que se ha registrado un nivel “elevado” de P3G, puede que la usuaria ya sea no f´ertil durante el resto de ese ciclo.

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En una realizaci´ on preferida, la detecci´ on de LH o de P3G se puede utilizar como disparo para indicar al usuario que el usuario ya no es m´ as f´ertil hasta el final del ciclo, actuando una hormona como soporte de la otra. Sin embargo, se prefiere que la detecci´ on de LH sea utilizada como indicador primario de si la ovulaci´on ha ocurrido o est´ a pr´ oxima a ocurrir, puesto que la detecci´ on de LH se presta en si misma a una determinaci´on m´ as precisa del d´ıa exacto de ovulaci´on que el uso de P3G.

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El procedimiento de la invenci´ on posee la ventaja de que permite, con un alto grado de precisi´ on, la determinaci´on de un ida de ovulaci´ on, y por tanto de la fase f´ertil, dentro de un ciclo. Cuando se necesita a efectos de contracepci´on, esto conduce a un procedimiento de predicci´ on de la fase f´ertil que requiere un m´ınimo per´ıodo de abstinencia de relaci´on sexual sin protecci´ on dentro de un ciclo menstrual dado.

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El procedimiento posee tambi´en la ventaja de que puede precisar menos mediciones dentro de un mes dado, y por tanto unas inconveniencias y un gasto reducidos para el usuario, sin ning´ un perjuicio en cuanto a fiabilidad. La detecci´on de un pico de LH no es esencial, aunque la detecci´on del pico de LH se puede utilizar como aviso “sustituto” de posible fertilidad en el caso de no se observe ning´ un nivel elevado de E3G. El procedimiento de la invenci´on tiene tambi´en la ventaja de que es independiente de la necesidad de introducir datos sobre la temperatura corporal basal, evitando con ello que el usuario lleve a cabo un procedimiento inconveniente y discutible, poco fiable, que conlleva tiempo. 10

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La invenci´on proporciona tambi´en un dispositivo de control del ciclo de ovulaci´ on de un mam´ıfero hembra, que comprende medios para iniciar el registro de un ciclo, medios para medir (si es necesario en uni´ on de uno o m´ as dispositivos de medici´on legibles por el dispositivo de control) y registrar la concentraci´on de E3G en la orina, medios para determinar una concentraci´ on de E3G de umbral a partir de las medidas tomadas durante las fases no f´ertil y de transici´ on de al menos un ciclo precedente, y medios para alertar al usuario si la concentraci´ on de E3G medida durante la fase de transici´ on de un ciclo actual, excede el umbral determinado.

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Los medios de iniciaci´on pueden ser, por ejemplo, un medio de entrada tal como un conmutador o un bot´ on que el usuario puede activar al comienzo o finalizaci´ on de la menstruaci´ on.

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Con preferencia, el dispositivo de control de la invenci´ on incorpora tambi´en medios para detectar la ovulaci´on real, por ejemplo mediante la incorporaci´on de medios para medir y registrar la oleada de LH o una elevaci´on de la concentraci´ on de P3G en la orina. La informaci´ on se puede transmitir al usuario por medio de un cristal l´ıquido o presentador LED, por ejemplo. Si se desea, la informaci´on sobre el estado de fertilidad se puede transmitir por medio de una simple indicaci´ on visual, por ejemplo una combinaci´ on de colores que muestre, por ejemplo, el verde para no f´ertil, el rojo para f´ertil, y el amarillo para cualquier estado intermedio cuando la concepci´ on es menos probable pero aun posible. De manera conveniente, las se˜ nales roja y amarilla del dispositivo se pueden combinar, de tal modo que el dispositivo indique se˜ nal “roja” al usuario siempre que la concepci´ on sea posible. Especialmente, si se pretende que sea principalmente un dispositivo de ayuda a la contracepci´ on, deber´a ser “autoprotector” mostrando una se˜ nal de “f´ertil”.

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El dispositivo de control deber´ a estar programado para modificar (si es necesario) su predicci´ on de umbral apropiado para el ciclo actual, o para el ciclo futuro, en base a la medida real registrada durante uno o m´ as ciclos previos. 30

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La invenci´on proporciona adem´ as un estuche para controlar el ciclo de ovulaci´on de un mam´ıfero hembra, que comprende un dispositivo de control como se ha expuesto anteriormente, junto con al menos un dispositivo de prueba susceptible de ser utilizado para medir el nivel de uno o m´ as componentes de la orina. Se ha previsto que el dispositivo de control sea, en general, de naturaleza relativamente duradera y capaz de ser utilizado durante un n´ umero considerable de ciclos. Los dispositivos de prueba para medir los componentes de la orina, son con preferencia desechables tras el uso individual, y por tanto se ha previsto que el usuario del dispositivo de control necesite rellenar los dispositivos de prueba. Una realizaci´ on de la invenci´ on consiste en una pluralidad de dispositivos de prueba de fluido corporal desechable (por ejemplo, la orina), embalados con instrucciones para su utilizaci´ on en un procedimiento de acuerdo con la invenci´on. Estos dispositivos de prueba, donde sea apropiado, pueden ser dispositivos de medici´on de la orina a partir de cada uno de los cuales se puedan determinar las concentraciones de E3G y LH (y/o P3G) (donde sea necesario, en uni´ on de un dispositivo de control o de medios electr´ onicos como se ha expuesto aqu´ı).

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Los procedimientos de detecci´on de analitos de fluidos corporales, tales como los metabolitos de hormonas en la orina, adecuados a efectos de este procedimiento, son bien conocidos por los expertos en la materia. En una realizaci´ on preferida, el analito se detecta mediante dispositivos y procedimientos de ensayo como se describe en el documento GB-A-2204398.

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Cuando el procedimiento de la invenci´ on se basa en la medida de un componente de la orina, esta se debe hacer sobre una muestra de orina. Se encuentran disponibles una variedad de t´ecnicas de inmuno ensayo, que permiten que se midan los componentes de la orina. Una amplia variedad de dispositivos de prueba en fase s´ olida, tales como varillas y tiras cromatogr´aficas, se encuentran descritos en la literatura, y se pueden adaptar f´ acilmente para su uso en la determinaci´ on de analitos en la orina. El dispositivo deber´a estar capacitado, al menos, para indicar los niveles relativos de analito, por ejemplo E3G, en las bandas de umbral. Ejemplos de tecnolog´ıa simple de ensayo que se pueden adaptar f´ acilmente para su uso en el hogar se describen, por ejemplo, en los documentos EP-A-0225054, EP-A-0183442, EP-A-0186799, GB-A-2204398 y EP-A-383619. Se pueden utilizar tiras de ensayo desechables tales como las que se describen en los documentos GB 2204398 y EP 383619, las cuales requieren simplemente ser puestas en contacto con la orina y las cuales proporcionan un resultado del ensayo en forma semi-cualitativa, por ejemplo, o por medio de una serie de zonas de prueba sobre la tira que son progresivamente positivas a niveles de analito de la orina m´ as altos. Se pueden utilizar m´ ultiples tiras que respondan a diferentes um-

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ES 2 100 556 T3 brales de analito, en vez de una tira simple. Alternativamente, un ensayo cuantitativo le´ıble visualmente puede estar basado en la progresi´ on de una regi´ on visible, por ejemplo coloreada, o “frontal” sobre una superficie (por ejemplo, de difusi´ on radial), utilizando por ejemplo un ensayo marcado con una enzima. 5

En una versi´ on m´ as sofisticada de un aparato de acuerdo con la invenci´ on, el dispositivo de registro puede incorporar medios para leer el resultado del ensayo de la orina, por ejemplo midiendo la reflectancia o fluorescencia de una tira de ensayo. Esto puede permitir que se d´e una indicaci´ on num´erica m´as precisa del nivel de analito, e incrementar adem´ as la precisi´on del procedimiento.

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En una realizaci´ on de la invenci´ on en la que se miden simult´ aneamente dos o m´as analitos, tal medida se puede realizar, si se desea, utilizando un u ´ nico dispositivo de medici´ on del fluido corporal, por ejemplo un dispositivo que incorpore m´ ultiples tiras de ensayo, o una tira u ´nica susceptible de detectar de manera independiente el nivel de los diferentes analitos.

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La electr´onica detallada de un dispositivo de registro susceptible de asimilar, recordar y manejar datos sobre la concentraci´on de analito, as´ı como proporcionar las caracter´ısticas electr´onicas preferidas del dispositivo que se discute aqu´ı, y predecir ciclos futuros en base a tales datos, puede ser f´ acilmente proporcionada por los expertos en materia de electr´onica una vez que hayan sido advertidos de los factores que tal dispositivo debe tomar en consideraci´ on, y de la informaci´ on que el dispositivo debe proporcionar al usuario. Tal electr´onica detallada no forma parte de la invenci´ on. Sin embargo, a t´ıtulo de ejemplo solamente, las funciones b´ asicas que tal dispositivo puede requerir se han resumido en la Figura 3 de los dibujos que se acompa˜ nan y se describen brevemente en lo que sigue.

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Si el dispositivo para medir los niveles de hormonas en la muestra de prueba es electr´ onico, contiene convenientemente un medio que var´ıa autom´ aticamente el valor de umbral de E3G de un usuario particular, por ejemplo de 30 ng/ml a 20 ng/ml o 40 ng/ml si el per´ıodo de abstinencia observado para un usuario particular es indeseablemente largo o corto. A t´ıtulo de ejemplo solamente, los aspectos pr´acticos de la invenci´on se describen en lo que sigue con referencia a los dibujos que se acompa˜ nan, en los que: La Figura 1 de los dibujos anexos ilustra un dispositivo de control del ciclo de ovulaci´ on para su uso de acuerdo con la invenci´ on, junto con un dispositivo de prueba de muestra de orina asociado.

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La Figura 2 muestra el dispositivo de prueba de la orina con mayor detalle. La Figura 3 muestra, en forma esquem´ atica, las funciones b´ asicas que se pueden precisar en un monitor electr´onico para su uso de acuerdo con la invenci´ on.

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Haciendo referencia a la Figura 1, el dispositivo de prueba de la muestra de orina comprende una carcasa 100 alargada plana que posee un reborde 101 de posicionamiento sobre sus superficie 102 inferior. Proyect´ andose desde un extremo de la carcasa se encuentra una muestra absorbente que recibe el miembro 103. El monitor comprende una carcasa 112 que posee un rebaje 111 en su superficie 112 superior para albergar la carcasa 100 del dispositivo de prueba. El rebaje 111 incorpora una ranura 113 de posicionamiento en la que se puede insertar el reborde 101 de posicionamiento de la carcasa del dispositivo de prueba, para situar positivamente el dispositivo de prueba en relaci´ on con una ventana 114 de lectura que se encuentra en el rebaje. La carcasa 110 contiene un medio (no representado), tal como un lector de fluorescencia, para medir el resultado de un ensayo de concentraci´ on de analito de la orina, realizado con la utilizaci´on del dispositivo de prueba. La cara 115 frontal inclinada de la carcasa del monitor incorpora una amplia ventana 116, a trav´es de la cual se puede trasladar informaci´ on al usuario, por ejemplo mediante un presentador LED u otra salida visual. Esta informaci´ on se puede proporcionar seg´ un una variedad de formas, tal como una indicaci´on de un calendario y la necesidad de llevar a cabo pruebas de la orina, y una indicaci´ on del estado actual del ciclo de ovulaci´ on. La cara 115 inclinada de la carcasa incorpora tambi´en un bot´ on 117 que el usuario puede presionar para indicar el comienzo de un ciclo de ovulaci´ on y para iniciar la informaci´ on de procesamiento del monitor en relaci´on con ese ciclo. En general, el monitor estar´ a alimentado con bater´ıas, e incorpora en un lateral 118 de la carcasa, un punto de acceso tal como una tapa 119 separable para permitir que se inserten y se cambien las bater´ıas.

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Haciendo referencia a la Figura 2, el dispositivo de prueba se muestra invertido en relaci´ on con el aspecto que se observa en la Figura 1. El reborde 101 de posicionamiento se encuentra ahora sobre la superficie 200 superior. Tambi´en en la superficie 200 que es ahora la m´ as alta, se encuentra una ventana 201 de resultados. El cuerpo del dispositivo de prueba puede incorporar una tira inmunocromatogr´ afica (no representada), que incorpore todos los reactivos necesarios para permitir que se forme un inmunoensayo que detecte la presencia y la concentraci´on de analito en una muestra de orina aplicada al miembro 103 de recogida de muestra. El resultado del ensayo se puede realizar mediante la inmovilizaci´ on de un componente marcado, a trav´es de una reacci´on de competici´on o de sandwich en presencia de analito, en una muestra de orina aplicada, volvi´endose concentrado el reactivo marcado en una zona descubierta a trav´es de la ventana de resultados. Cuando se invierte el dispositivo de prueba y se sit´ ua en el rebaje 111 de la carcasa del monitor, la ventana de resultados se encuentra inmediatamente adyacente a la ventana 114 de lectura del monitor y se puede determinar el resultado del ensayo. Por ejemplo, en el caso de la marca de un reactivo fluorescente, el medio de lectura interior al monitor puede detectar y medir la salida de luz fluorescente de la marca acumulada en la zona de detecci´on sobre la tira, para proporcionar un valor de concentraci´ on num´ericamente preciso para el analito en la muestra de orina. Esta informaci´ on puede ser procesada por el monitor junto con la informaci´ on de calendario resultante de la iniciaci´ on del proceso del ciclo por el usuario y de los datos hist´ oricos que el monitor pueda retener de ciclos anteriores. Con referencia a la Figura 3, se observan algunos de los elementos b´asicos que se pueden precisar en un dispositivo electr´ onico de control. Las caracter´ısticas individuales pueden ser completamente convencionales, y aquellos que est´en familiarizados con la t´ecnica de la electr´onica apreciar´ an que se pueden emplear otras combinaciones y disposiciones de tales caracter´ısticas para conseguir los objetivos de la invenci´on. Por ejemplo, los sistemas llamados “al´ambricos”, y “redes neurales”, se pueden utilizar en lugar de los microprocesadores convencionales basados en tecnolog´ıa de “encapsulado”. Seg´ un se representa en la Figura 3, la combinaci´ on comprende esencialmente: Una unidad 300 de lectura para extraer informaci´on de un dispositivo de prueba, tal como una tira de prueba, comprendiendo la unidad de lectura un iluminador 301 y un lector 302 (representado aqu´ı como un fotodiodo). La unidad de lectura alimenta a una unidad 303 de conversi´ on para convertir la se˜ nal o´ptica en una forma utilizable por un microprocesador 304. Como caracter´ıstica opcional, se proporciona un sistema 305 de calibraci´ on para convertir la se˜ nal derivada de la unidad de lectura en datos correspondientes, por ejemplo, a un valor de concentraci´on absoluta. Un temporizador, tal como un reloj 306, se precisa para regular las medidas dentro de un ciclo. El microprocesador 304 procesa, memoriza e interpreta los resultados a la vista de los casos previos, registrados en particular a partir de ciclos previos. El interfaz 307 de usuario comprender´ a, generalmente, al menos un medio, tal como un bot´on pulsador, que el usuario podr´ a activar al comienzo de un ciclo para iniciar la operaci´on del dispositivo en su conjunto. La fuente 308 de alimentaci´ on incluir´ a medios, tal como un condensador 309 de soporte de memoria, para evitar la p´erdida de los datos hist´ oricos si fuera necesario sustituir las bater´ıas. Los aspectos de la invenci´on se ilustran en los ejemplos que siguen. Estos se refieren al ciclo de ovulaci´ on humana. El ejemplo muestra perfiles de E3G de dos mujeres, una que se sabe que tiene niveles bajos de E3G en la orina y la otra que se sabe que tiene niveles relativamente altos. En las dos primeras columnas de cada tabla, se han dispuesto los 30 d´ıas de cada ciclo en t´erminos de su fertilidad. La primera fase se denomina no f´ertil y consiste en esa porci´on de la fase folicular durante la cual no se espera que las relaciones sexuales sin protecci´on den como resultado la concepci´on. Esta viene seguida de la fase de transici´on, durante la cual ocurren cambios que conducen a un estado f´ertil. Es dentro de esta fase cuando el sistema debe recibir una se˜ nal positiva que indique el inicio de la fase f´ertil. La fase f´ertil es esa fase antes y despu´es de la ovulaci´on durante la cual es m´ as probable que las relaciones sexuales sin protecci´on den como resultado la concepci´on. Su duraci´ on antes de la ovulaci´ on viene determinada completamente por el tiempo de vida efectiva del esperma, y esta, a su vez, est´a influenciada por factores controlados por hormonas hembra, especialmente la mucosidad. La fase luteal, post-f´ertil, es ese tiempo despu´es del cual el o´vulo ha dejado el u ´tero y la concepci´ on en el ciclo actual ya no es posible.

55

Los valores de E3G para los primeros 20 d´ıas de cada ciclo se dan en la tercera columna. Estos han sido deducidos por inmunoensayo sobre muestras de orina recogidas cada d´ıa, por la ma˜ nana temprano. El inmunoensayo fue un ensayo competitivo convencional de ant´ıgeno marcado con enzima. Los valores se dan en ng/ml. 60

La ovulaci´on real se toma como las 24 horas que siguen al valor m´aximo de LH. Estos valores de LH se determinaron por inmunoensayo convencional sobre las mismas muestras, pero los valores no se han 13

ES 2 100 556 T3 incluido en la tabla ya que la fecha de ovulaci´ on es el resultado esencial. Se emplearon las siguientes “pautas” en la determinaci´on de un umbral apropiado para el siguiente ciclo: 5

1. Los umbrales de E3G pueden ser valores de 5, 10, 15, 20, 25 y 30 ng/ml, pero no m´ as altos. 2. La longitud ideal de precauci´ on es de 6 d´ıas antes de la ovulaci´on. 10

15

3. La excedencia del umbral en los d´ıas 4◦ y 5◦ de la Fase de Transici´on es m´as importante que en los anteriores de la Fase de Transici´on. 4. El primer umbral elegido deber´ıa ser el valor m´ as bajo excedido m´ as frecuentemente durante la Fase de Transici´on, y menos frecuentemente en la Fase No F´ertil del ciclo de “instrucci´on”. Con preferencia, no se deber´ıa exceder en ning´ un momento durante la Fase No F´ertil. 5. Durante el primer ciclo, la medici´on se deber´ıa efectuar cada d´ıa, hasta que se identifique la oleada de LH, ya que esta es la mayor fase de “instrucci´on”. 6. En ciclos posteriores, el umbral se puede modificar si:

20

a) el umbral elegido no se excede en los d´ıas 4 y/o 5 de la Fase de Transici´on: b) el umbral elegido es innecesariamente menor que el necesario para el disparo en los d´ıas 4 y/o 5 de la Fase de Transici´on. 25

30

7. Si se ignoraran los niveles de E3G en los 5 primeros d´ıas de cada ciclo, en el supuesto de una prueba de uso dom´estico, la toma de muestras no deber´ıa comenzar inmediatamente despu´es de la menstruaci´ on. A continuaci´ on del ciclo inicial de cada individuo, se eligi´o un d´ıa de comienzo de la prueba (identificado por “∗∗∗”) aplicable en situaci´on de uso dom´estico, para el siguiente ciclo de acuerdo con la relaci´on tabulada dada anteriormente en esta descripci´ on. De este modo, por ejemplo, siguiendo el ciclo A1 en el que la ovulaci´ on real ocurri´ o el d´ıa num´erico 18, el d´ıa elegido de comienzo la prueba para el ciclo A2 fue el d´ıa num´erico 12 (18-6).

35

Examinando el ciclo A2 se puede observar que, en la pr´ actica, comenzar la prueba en el d´ıa 12 habr´ıa coincidido con el comienzo de la elevaci´on de E3G indicativa de ovulaci´ on inminente. La ovulaci´ on real ocurri´o en el d´ıa 17. Aplicando la relaci´ on tabulada, el d´ıa elegido de comienzo de la prueba para el ciclo A3 fue el d´ıa num´erico 11.

40

En la pr´actica, el d´ıa num´erico 11 del ciclo A3, fue simplemente 4 d´ıas con antelaci´on a la ovulaci´ on real que ocurri´ o en el d´ıa 15. El d´ıa elegido de comienzo de la prueba para el ciclo A4 fue el d´ıa 9.

45

50

Se puede ver por el ciclo A4 que ese d´ıa 9 fue 5 d´ıas de antelaci´ on de la ovulaci´ on real (en el d´ıa 14) y que el d´ıa recomendado de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo fue tambi´en el d´ıa 9. En el ciclo A5, la ovulaci´on real ocurri´ o en el d´ıa 17 y probablemente hab´ıa cesado la desviaci´on de la ovulaci´on real hacia d´ıas anteriores en los ciclos sucesivos de este individuo, y la ovulaci´on real est´ a volviendo a un per´ıodo de tiempo m´as “normal”. El d´ıa recomendado de comienzo de la prueba deb´ıa permanecer, sin embargo, como el d´ıa num´erico 9, al menos durante el tiempo que sea, para salir adelante con otra desviaci´on prematura del d´ıa de ovulaci´ on. Esta serie de ciclos muestra la ventaja de utilizar una sucesi´ on de ciclos consecutivos para establecer el d´ıa ´optimo de comienzo de la prueba.

55

60

Para un individuo B, el d´ıa de comienzo de la prueba recomendado del ciclo B1 fue el d´ıa num´erico 13, el cual fue modificado tras el ciclo B2 al d´ıa num´erico 11, y despu´es del ciclo B4 al d´ıa 10. Con respecto al umbral EJG apropiado, en el ciclo 1 del individuo B, se exedio el valor de 25 en los d´ıas 8 y 11, (en la fase no f´ertil) de modo que el umbral deb´ıa estar, con preferencia, por encima de este on (d´ıas 15 y 16), de modo que se eligi´ o el 30, valor. El 30 se excedi´o en los d´ıas 4◦ y 5◦ de la transici´ puesto que es la opci´on disponible de umbral m´ as alto, y ello es conforme con las pautas 2, 3 y 4.

14

ES 2 100 556 T3 En el ciclo 3, actu´ o el umbral 30, pero en el d´ıa 13 (el 5◦ d´ıa de transici´ on) fue el valor 23,9 de modo que, de acuerdo con la pauta 6a, el umbral deb´ıa ser rebajado a 20, que es la opci´on m´ as alta excedida en ese d´ıa. 5

10

En el ciclo 4, de acuerdo con la pauta 6b, se deb´ıa adoptar un nuevo umbral de 25, puesto que los dos d´ıas de transici´ on disponibles mostraron que el 20 era innecesariamente bajo y que el 25 act´ ua justamente bien. En el ciclo 5, siguiendo las pautas 2, 3 y 6b, se adopt´ o un umbral revisado de 30 para el siguiente ciclo. El primer d´ıa en que se excedido el umbral de E3G elegido aparece destacado (∗∗∗∗). INDIVIDUO A

15

Ciclo A 1 Ciclo de establecimiento de perfil 20

25

30

35

40

45

50

55

60

D´ıa

Fase

Valor de E3G

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ”

2,7 3,3 2,4 1,8 3,6 2,5 1,7 1,9 3,1 5,4 2,1 5,3 10,5 7,7 5,2 8,3 6,8 4,3 4,9 5,3

Ovulaci´on Real

LHM + 1

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: ninguno este mes (establecimiento de par´ ametros) Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 5ng/ml

15

ES 2 100 556 T3 D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 12. Ciclo A 2 5

10

15

20

25

30

35

40

D´ıa 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12∗∗∗ 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

Fase

Valor de E3G

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ”

2,0 1,5 1,1 4,1 4,0 3,5 2,3 1,9 3,6 3,7 3,0 9,2∗∗∗ 8,9 14,6 12,6 8,8 15,8 6,9 6,5 6,5

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 6 d´ıas 45

Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 5ng/ml D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 11

50

55

60

16

Ovulaci´on Real

LHM + 1

ES 2 100 556 T3 Ciclo A 3 D´ıa

Fase

Valor de E3G

no f´ertil ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” ”

2,0 2,0 2,7 2,9 2,7 1,6 2,5 5,4 4,0 5,6 3,7 6,2∗∗∗∗ 23,6 21,3 8,3 4,5 3,7 3,4 2,8 3,1

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11∗∗∗ 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 3 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 5ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 9

50

55

60

17

LHM + 1

ES 2 100 556 T3 Ciclo A 4 D´ıa

Fase

Valor de E3G

1 2 3 4 5 6 7 8 9∗∗∗ 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

no f´ertil ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” ”

2,4 2,8 5,2 3,6 2,5 3,1 3,9 4,6 5,1∗∗∗∗ 6,1 16,7 10,8 22,8 21,3 9,4 12,2 5,7 5,2 7,5 9,0

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 6 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 5ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 9

50

55

60

18

LHM + 1

ES 2 100 556 T3 Ciclo A 5 D´ıa

Fase

Valor de E3G

1 2 3 4 5 6 7 8 9∗∗∗ 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ”

2,3 2,8 2,7 2,3 2,8 4,8 5,6 4,5 3,2 8,5∗∗∗∗ 7,3 6,3 7,0 11,8 19,3 18,5 9,2 5,3 4,8 6,1

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 7 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 5ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 9

50

55

60

19

LHM + 1

ES 2 100 556 T3 INDIVIDUO B Ciclo B 1 5

10

15

20

25

30

35

40

45

Ciclo de establecimiento de perfil D´ıa

Fase

Valor de E3G

Ovulaci´on Real

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ”

10,9 15,2 21,2 12,7 11,8 16,5 15,6 25,1 10,1 16,8 28,2 24,6 28,7 27,7 62,6 68,5 61,9 103,4 85,4 45,4

LHM + 1

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: ninguno este mes (establecimiento de par´ ametros) Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 30ng/ml

50

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 13.

55

60

20

ES 2 100 556 T3 Ciclo B 2 D´ıa

Fase

Valor de E3G

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ”

27,5 28,8 24,7 22,6 24,9 28,9 14,6 8,4 24,7 33,6 39,3 25,6 43,2∗∗∗∗ 67,1 62,0 94,6 58,4 42,4 60,4 56,0

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13∗∗∗ 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 4 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 30ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 11

50

55

60

21

LHM + 1

ES 2 100 556 T3 Ciclo B 3 D´ıa

Fase

Valor de E3G

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ”

46,4 30,0 12,4 6,5 8,7 17,2 14,9 11,8 11,0 13,1 25,6 32,5∗∗∗∗ 23,9 63,8 22,1 65,9 41,2 7,6 35,3 33,7

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11∗∗∗ 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

LHM + 1

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 6 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 20ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 11 (sin cambio)

50

55

60

22

ES 2 100 556 T3 Ciclo B 4 D´ıa

Fase

Valor de E3G

no f´ertil ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ” ” ”

17,7 12,2 7,2 6,2 13,9 12,9 12,7 9,3 16,5 17,7 26,0∗∗∗∗ 38,3 70,6 74,6 70,6 49,7 23,5 29,8 44,4 32,7

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11∗∗∗ 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 6 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 25ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 10

50

55

60

23

LHM + 1

ES 2 100 556 T3 Ciclo B 5 D´ıa

Fase

Valor de E3G

no f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” transici´on ” ” ” ” f´ertil ” ” ” ” ” post-f´ertil ” ” ” ” ” ” ” ” ”

33,9 27,3 20,2 7,0 12,7 7,2 14,5 14,8 10,8 8,7 14,1 17,4 41,3∗∗∗∗ 57,5 42,0 55,4 60,1 39,4 24,7 10,5

Ovulaci´on Real

5

10

15

20

25

30

35

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10∗∗∗ 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

LHM + 1

40

Advertencia de d´ıas de ovulaci´ on: 6 d´ıas Umbral de E3G elegido para el siguiente ciclo: 30ng/ml 45

D´ıa elegido de comienzo de la prueba para el siguiente ciclo: 10 (sin cambio)

50

55

60

24

ES 2 100 556 T3 REIVINDICACIONES

5

10

15

1. Un procedimiento de control del estado del ciclo de ovulaci´on en curso de un sujeto individual mam´ıfero hembra, que incluye la medici´ on repetida de la concentraci´ on en el fluido corporal de al menos un analito de importancia en relaci´ on con el estado del ciclo de ovulaci´on durante al menos la fase de pre-ovulaci´ on del ciclo de ovulaci´on en curso del sujeto individual, en el que: a) la medici´on de la concentraci´on de dicho analito durante el ciclo de ovulaci´ on en curso se inicia una pluralidad de d´ıas siguientes al comienzo de la menstruaci´ on pero al menos 2 d´ıas num´ericos con anterioridad al primer d´ıa num´erico en el que haya ocurrido la ovulaci´ on real en uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´ on del mismo sujeto individual, y b) se identifica un cambio de concentraci´ on del analito identificativo de ovulaci´ on inminente a partir de los resultados de tal medici´on por referencia a un valor de referencia de la concentraci´ on de analito que ha sido adaptado al sujeto individual en base a los datos de la medida de la concentraci´ on de analito obtenidos del sujeto individual durante uno o m´ as ciclos previos de ovulaci´on. 2. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 1, en el que la medici´ on comienza al menos 3 d´ıas num´ericos con anterioridad al primer d´ıa num´erico en el que haya ocurrido la ovulaci´ on real en uno o m´as ciclos previos de ovulaci´on del mismo sujeto individual.

20

3. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 1, en el que la medici´on se inicia al menos 4 d´ıas num´ericos con anterioridad al primer d´ıa num´erico en el que haya ocurrido la ovulaci´ on real en uno o m´as ciclos previos de ovulaci´on del mismo sujeto individual. 25

30

35

40

45

50

4. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la medici´on se inicia al menos 5 d´ıas num´ericos a continuaci´on del inicio de la menstruaci´ on. 5. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 1, en el que la medici´on se inicia en un d´ıa num´erico con anterioridad al primer d´ıa num´erico en el que haya ocurrido la ovulaci´ on real en uno o m´ as ciclos previos de ondulaci´on del mismo sujeto individual, siendo calculado el citado d´ıa de comienzo de la medici´on de acuerdo con la siguiente relaci´on: Primer d´ıa de la ovulaci´ on previa

D´ıa de comienzo de la medici´on

8 - 10 11 - 14 15 - 18 19 - 23 24 - 28 29+

-4 -5 -6 -7 -8 -9

6. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el fluido corporal es la orina. 7. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el analito es estradiol o un metabolito del mismo, tal como E3G. 8. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que miden 2 o m´ as analitos para proporcionar datos comparativos, tales como la relaci´ on de concentraci´ on de dos analitos medidos simult´ aneamente.

55

60

9. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el d´ıa de ovulaci´ on real m´as prematuro se deduce de los datos recogidos durante al menos 3 ciclos previos consecutivos. 10. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el d´ıa de ovulaci´ on real m´as prematuro se deduce de los datos recogidos durante al menos 5 ciclos previos consecutivos.

25

ES 2 100 556 T3 11. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el d´ıa de ovulaci´on m´ as prematuro se deduce de los datos obtenidos durante al menos el ciclo inmediatamente precedente. 5

10

12. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 11, en el que el d´ıa de ovulaci´ on m´as prematuro se deduce de los datos obtenidos de una base oscilante de referencia que consiste en un n´ umero fijo de ciclos consecutivos que preceden de forma inmediata al ciclo actual. 13. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 12, en el que la base oscilante de referencia consiste en los 4 a 10 ciclos inmediatamente precedentes. 14. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 12, en el que la base oscilante de referencia consiste en los 5 ´o 6 ciclos inmediatamente precedentes.

15

20

15. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el d´ıa de ovulaci´ on real se determina mediante la detecci´on del valor de pico de la concentraci´ on de LH en la orina. 16. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en el que la ovulaci´on real se determina mediante la detecci´on de una oleada de LH en la orina. 17. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el sujeto es un ser humano.

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18. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, el cual se basa u ´ nicamente en los resultados de las pruebas de orina. 19. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, el cual no incluye la medida de la temperatura corporal basal.

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20. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que se detecta un cambio de concentraci´on en el fluido corporal de un analito de importancia en relaci´ on con el estado del ciclo de ovulaci´ on, por referencia respecto a una concentraci´on de umbral determinada para el sujeto individual a partir de la medida de la concentraci´ on de analito en el fluido corporal durante la fase de pre-ovulaci´ on de al menos un ciclo de ovulaci´ on previo del mismo sujeto. 21. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 17 para la predicci´ on del per´ıodo f´ertil durante el ciclo de ovulaci´on humana en curso mediante la detecci´on de una concentraci´ on elevada de E3G en la orina en la fase de pre-ovulaci´ on, en el que la concentraci´on elevada de E3G en la orina se determina por referencia a una concentraci´ on de umbral determinada para una hembra individual humana a partir de las medidas de la concentraci´on de E3G en su orina durante la fase de pre-ovulaci´ on de al menos un ciclo de ovulaci´on previo. 22. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 21, en el que la concentraci´on de umbral de E3G de la orina adoptada para el ciclo actual es la concentraci´ on que, en un ciclo previo de ovulaci´on, se excede m´as frecuentemente durante el n´ umero total de d´ıas que constituyen la fase de transici´ on de ese ciclo previo durante el mismo n´ umero de d´ıas de la fase no f´ertil que precede inmediatamente a la citada fase de transici´on. 23. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 22, en el que la concentraci´on de umbral de E3G de la orina es la concentraci´ on que se excede en no m´as del 30% de los d´ıas de la fase no f´ertil pero que se excede en no menos del 60% de los d´ıas de la fase de transici´on. 24. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 22, en el que la concentraci´on de umbral es la concentraci´on que se excede en no m´as del 20% de los d´ıas de la fase no f´ertil pero que se excede en no menos del 80% de los d´ıas de la fase de transici´on. 25. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, en el que el valor de referencia de concentraci´on de analito se deduce de los datos obtenidos a partir de la base “oscilante” de referencia consistente en un n´ umero fijo de ciclos consecutivos que preceden inmediatamente al ciclo actual.

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ES 2 100 556 T3 26. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 25, en el que la base oscilante de referencia de concentraci´on de analito consiste en los 4 a 10 ciclos inmediatamente precedentes.

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27. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicaci´on 26, en el que la base oscilante de referencia de concentraci´on de analito consiste en los 5 ´o 6 ciclos inmediatamente precedentes. 28. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 21 a 24, en el que se mide la concentraci´on de LH y/o de P3G en la orina para proporcionar una indicaci´ on del final de la fase f´ertil.

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29. Un estuche con equipo de an´ alisis para llevar a cabo un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende: a) uno o m´ as dispositivos de medici´on para determinar la concentraci´ on de al menos dicho analito en el citado fluido corporal,

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b) medios que permiten a un usuario deducir a partir de la citada concentraci´ on, una indicaci´ on del estado de fertilidad en el ciclo de ovulaci´ on actual por referencia a un valor de referencia de concentraci´on determinado a partir de uno o m´ as ciclos previos del mismo sujeto, y c) medios que permiten a un usuario deducir el d´ıa preciso de comienzo de la medici´on a partir del conocimiento del d´ıa num´erico en el que ocurri´o la ovulaci´on real durante al menos un ciclo previo de ovulaci´ on del mismo sujeto. 30. Un estuche con equipo de an´ alisis de acuerdo con la reivindicaci´on 29, en el que los medios b) y c) est´an combinados. 31. Un estuche con equipo de an´ alisis de acuerdo con la reivindicaci´on 29 o´ 30, en el que los medios b) y c) comprenden medios electr´onicos.

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32. Un estuche con equipo de an´ alisis de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 31, que incorpora una pluralidad de dispositivos desechables de medici´on del fluido corporal.

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NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposici´ on Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicaci´ on del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a Espa˜ na y solicitadas antes del 7-10-1992, no producir´ an ning´ un efecto en Espa˜ na en la medida en que confieran protecci´ on a productos qu´ımicos y farmac´euticos como tales. Esta informaci´ on no prejuzga que la patente est´e o no inclu´ıda en la mencionada reserva.

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