25/04/2008

ALERGENOS DEL POLEN DE OLIVO Y SU VARIABILIDAD ENTRE CULTIVARES ALERGO MURCIA (Abril 08)

Carlos Lahoz, Consultor Jefe de Inmunología Fundación Jiménez Díaz, 28040 Madrid (España) [email protected] Dr Lahoz

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HIPOTESIS Los cultivares son grandes extensiones de terreno con olivos plantados La principal caracteristica de los cultivares es que los diferentes arboles dentro del mismo cultivar son genéticamente homogeneos (variedades), ya que son plantados por el sistema de “estaquillas” procedentes del propio cultivar Esto significa que el polen de olivo producido por esos arboles sensibilizan preferentemente a la población mas próxima al mismo y dado que existen ciertas diferencias cualitativas y cuantitativas entre las variedades, la respuesta a esa sensibilizacion estará modificada dependiendo de esas características

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250 cultivares en España: 24 de ellos son relevantes 3,000 cultivares en el mundo

Cat. Mundial Variedades de olivo. Consejo Oleicola Internacional 2000

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Luis Rallo: Variedades de olivo en España. www.alergomurcia.com Junta Andalucia 2004

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Granos de polen en Jaen entre Febrero y Junio de 06 F. Florido, J Quiralte, Jaen 2005

Grafica 98

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Quiralte J, JIACI Vol 17 Supp1, 24-30, 2007

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J Invest Allergoll Clin Immunol. Vol 17 Supp 1 2007. C. Lahoz y F. Florido ed.

Alérgenos del polen de olivo 25 años de la descripción de Ole e 1 !!!!! Tesis Doctoral: Contribución a la caracterización y estandardización de extractos alergénicos de polen de olea europea. Maria Teresa González Quevedo Tejerina. Univ. Sevilla 1983

Lauzurica P, Gurbindo C, Maruri N, Galocha B, Diaz R, Gonzalez J, García R, Lahoz C. Olive (Olea europea) pollen allergens--I. Immunochemical characterization by immunoblotting, CRIE and immunodetection by y a monoclonal antibody. y Mol Immunol. 1988 Apr;25(4):329-35 Lauzurica P, Maruri N, Galocha B, Gonzalez J, Diaz R, Palomino P, Hernandez D, García R, Lahoz C. Olive (Olea europea) pollen allergens--II. Isolation and characterization of two major antigens. Mol Immunol. 1988 Apr;25(4):337-44. Dr Lahoz

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1988 se aisla y estudian las caracteristicas del Ole e 1 utilizando anticuerpos monoclonales 1994 Mapeo epitópico de Ole e 1: Epitopos T-2006 Epitopos B 1998 Primeros estudios de susceptibilidad genética de los pacientes sensibilizados al olivo 1994 Clonaje y expresion de Ole e 1 1996 Restricciones geneticas a respuesta alérgica son dependientes a DR7/DQ2 2000 Actividad inmunológica de r Ole e 1 en pacientes sensibilizados a olivo 2002 Estudios Est dios de actividad acti idad alergénica en 16 cultivares c lti ares 2005 Relación entre asma y rinitis y determinados aspectos clínicos son dependientes del a presencia de Ole 2 y Ole 10 2006 Alergia al olivo en modelos animales 2007 Mutantes hipoalergénicos de Ole e 1 2008 Ole e 11?J Invest Allergoll Clin Immunol. Vol 17 Supp 1 2007. C. Lahoz y F. Florido ed. www.alergomurcia.com

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PUBLICACIONES EN INVESTIGACION BASICA DE OLIVO Y ABEDUL AGRUPADAS POR TRIENIOS

35 30 25 20 15 10 5 0

INVESTIGACION POR TRIENIOS EN PUBLICACIONES

INVESTIGACION BASICA

20072005

20042002

20011999

Olivo Dr Lahoz

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19981996

19951993

19921987

Abedul

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J Invest Allergoll Clin Immunol. Vol 17 Supp 1 2007. C. Lahoz y F. Florido ed.

Rodriguez R, JIACI Vol 17 Supp1, 4-10, 2007

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SDS PAGE: Pattern of extracts from different Spanish cultivars

Contenido en OLE e 1:

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Alto: Picual, Manzanilla, Blanqueta, Lucio y Loaime Medio: Cornicabra and Hojiblanca Bajo: Arbequina, Verdial, Lechin, and Bella de España www.alergomurcia.com

ANTÍGENOS RECOMBINANTES??

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www.alergomurcia.com Valenta R. Curr Opi Allergy Clin Immunol. 2003, 3: 495-500

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?¿ ¿

?¿ Dr Lahoz

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www.alergomurcia.com Niederberger V, Valenta R. Curr Opi Allergy Clin Immunol. 2004, 4:549-554

Alérgenos del polen de Olivo Nombre

Caracterización

Frecuencia unión IgE

Homología

Ole e 1

145 aa, 1,6 kDa

62%

Gen del tomate LAT52,gen Zmc13 maíz y OSPSG arroz.

Ole e 2

proteína acídica, 17-15 kDa

24%

Elevada homología con profilina abedul

Ole e 3

9.2 kDa, proteína acídica

Ole e 4

Parcialmente, 32 kDa, pIs 4.65 5.1.

80%

Sin homología

Ole e 5

N-terminal 16 kDa, pIs 5.1- 6.5

35%

Alta homología con superoxido dismutasa

Ole e 6

SDS-PAGE:10 kDa, pI 4.2

Ole e 7

50% áreas altos niveles polen

Similitud motivos EF-hand proteínas unión Ca2+ (Polcalcinas)

15 % (según área: 10-55%)

Sin homología

9.8 –10.3 kDa.

47%

Sin homología

Ole e 8

18.7 kDa, proteína unión Ca2+ EF-hand

15%

Sin homología excepto en sitios EF-hand.

Ole e 9

β-1-3 glucanasa, 46.4 kDa

65%

Pequeña homología con 1,3-β-glucanasas de trigo y Arabidopsis thaliana.

Ole e 10

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10.8 kDa, pI: 5.8

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Homología con Ole e 9(53%), Arabidopsis

www.alergomurcia.com thaliana(42-46%).

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EL 80 % IDENT Y SIMIL ENTRE PAREJAS DE PROT HOMOLOGAS ES SENSIBILIZACION PRIMARIA A POLENES DE OLEACEAS: Ole e 1 marcador de sensibilización a oleaceas

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www.alergomurcia.com Rodriguez R, JIACI Vol 17 Supp1, 4-10, 2007

Ole e 2 (profilinas) y Ole e 3 (polcalcinas) marcadores de polisensibilizacion

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Rodriguez R, JIACI Vol 17 Supp1, 4-10, 2007

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Deteccion de alergenos minoritarios

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Rodriguez R, JIACI Vol 17 Supp1, 4-10, 2007

Class II HLA DR-2 (15) was associated with Ole e 10 sensitized patients with severe asthma Dr Lahoz

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Quiralte J, JIACI Vol 17 Supp1, 24-30, 2007

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ANTIGENIC PROFILE OF SEVERAL CULTIVARS FROM ITALY ANALYZED BY MALDI-MS

Group 1: Low Ole e 1 Content: Carolea, Carolea Dolce di Rossano and Sinopolese Group 2: Overenrichment on Ole e 1: Cassanese, Coratina, Nocellera del Belice and Villacidro Group 3: Those with enrichment on Ole e 3 and Ole e 7: Ottobratica

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Alche J, JIACI Vol 17 Supp1, 17-23, 2007

Caractersticas diferenciales entre distintos cultivares: Ole e 1 y Ole e 2

Anti Ole e 1 Tinción con plata

A ti Ole Anti Ol e 2

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Picual

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Arbequina

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Comparison of the allergenicity and Ole e 1 content of 6 varieties of Olea europaea pollen collected during 5 consecutive years. CONCLUSIONS: The different varieties of O. europaea pollen demonstrated great differences in allergenic potency and Ole e 1 content. These differences were maintained throughout the study, suggesting that they are due to genetic differences intrinsic to the varieties, although certain climatic effects may also play a role. Fernández-Caldas E, Carnés J, Iraola V, Casanovas M. Ann Allergy Asthma Immunol. 2007 May;98(5):464-70

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Barber D, JIACI Vol 17 Supp1, 11-16, 2007

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Ole e 1 LEVELS IN DIFFERENT CULTIVARS

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CORRELACIÓN % Ole e 1 y REACTIVIDAD DE PACIENTES ALÉRGICOS AL POLEN DE OLIVO A DISTINTOS CULTIVARES

% Ole e 1

reactividad media (mm2)

120 100 80 60 40

LECHIN

PICUDO

HOJIBLANCA

ARBEQUINA

MANZANILLA

GORDAL

FRANTOIO

LOAIME

PICUAL

0

LUCIO

20

20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0

•% (Ole e 1) en el p polen de diez cultivares. •LECHIN 100%., sólo un 18% en la variedad GORDAL SEVILLANA. • Valores medios de reactividad de 30 pacientes diagnósticados de alergia al polen del olivo tras ser sometidos a pruebas de SPT •Se observa un buen nivel de correlación entre el contenido relativo de alergeno mayoritario Ole e 1 de cada cultivar y la reactividad media de los pacientes a los extractos correspondientes.

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REACTIVIDAD DE PACIENTES ALÉRGICOS AL POLEN DE OLIVO A DISTINTOS CULTIVARES

Paciente 1 1 Hojiblanca 2 Morisca 3 Lechín de Sevilla 4 Verdial de Huevar 5 Picudo 6 Manzanilla de Sevilla 7 Arbequina 8 Cornicabra 9 Blanqueta 10 Loaime 11 Bella de España 12 Lucio 13 Picual

1

Paciente 2

Paciente 3

10 1

2

11

3

12

2 3

4

13 Picual 4

5

6

7

9

10Loaime

Comercial Histamina

7 8

1

8

2

9

3

10

Loaime

11 4 12

5

6

8

9

5 13 6

11 12 13

Comercial 7

Histamina

Comercial Histamina

•Estudio 30 pacientes sometidos a pruebas cutáneas SPT con 13 variedades de polen de olivo •Diferencias intervarietales y con respecto al extracto comercial Olea europaea Castro, A. J., Alché, J.D. Cuevas, J., Romero, P.J., Alché, V. and Rodríguez-García, M.: “Pollen from different olive tree cultivars contains varying amounts of the major allergen Ole e 1”. Int. Arch. Allergy Clin Immunol 131, 164-173 (2003).

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Factores Genéticos

Factores Ambientales

Presencia de alelos HLA específicos Polimorfismos FcεRI-β Polimorfismos de familia de IL-4 y genes de citocinas Polimorfismos de CD14 P li Polimorfismos fi de d otros t loci l i

Sensibilización alergénica Tener pocos hermanos Excesiva higiene Tomar antibióticos en los primeros 2 años de vida prevención de la enfermedad Vacunación y p

ATOPIA Defectos en Órganos Diana

Desencadenantes

Epitelio Bronquial Piel Intestino

Infecciones virales p a alérgenos g Exposición Humo del tabaco Contaminantes ambientales

Inflamación alérgica mediada por Th2 Dr Lahoz

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1.- OLIVE POLLEN IS THE MOST IMPORTANT ALLERGEN IN THE MEDITERRANEAN AREA 2.- IN ITALY AND SPAIN EXIST SEVERAL CULTIVARS AND VARIETIES OF OLIVE TREES WITH ALLERGOLOGICAL IMPORTANCE 4.-THERE ARE ALSO DIFFERENCES IN THE CONTENT OF OTHER ALLERGENS 3.- IN GENERAL Ole e 1 CONTENT IN (No Ole e 1) COMPARING SEVERAL THE EXTRACTS FROM POLLEN OF VARIETIES WHICH MAY MODIFY THE DIFFERENT CULTIVARS DETERMINE ALLERGIC RESPONSE ITS DEGREE OF REACTIVITY 5.- EVEN POINT MUTATIONS IN Ole e 1 SEQUENCE OBTAINED FROM DETERMINED CULTIVARS AND VARIETIES MAY MODIFY THE REACTIVITY GIVEN THAT THEY MAY AFFECT TO AREAS INVOLUCRATED IN IMMUNE RECOGNITION Dr Lahoz

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