Co

ng

re EL COACTIVADOR DE CREB 3 (CRTC3) EN SANGRE: so NUEVO MARCADOR ASOCIADO CON OBESIDAD Y Na cio METABOLICAS EN EDAD ALTERACIONES na PEDIATRICA. ld el

La

bo r

Pilar Soriano Rodríguez, Anna Prats Puig, Carme Mora Maruny, Neus Bassa Camps, Paula Gassiot Cordomí, Dolors Ragolta Martí, Judit Bassols y Abel López Bermejo.

ato rio

Cl ín

ico

20

14

Co

ng

INTRODUCCIÓN

re so El CRTC3 es: N del factor de transcripción CREB más  El coactivadora cio abundante en adipocitos na ld el La bo ra tor io Cl ín

ico

20

14

Co

ng

INTRODUCCIÓN

re so  Los ratones con silenciamiento del gen CRTC3: Na cioa la obesidad inducida por dieta hipercalórica.  Son resistentes naenergético  Tienen mayor gasto ld  Protegidos contra la esteatosis el hepática La bo  Atenuación de la actividad de la vía rde catecolaminas. Resultado atlas or iograsos en el adipocito. disminuir la lipólisis y la beta oxidación de ácidos Cl í El gen de CRTC3 es un gen obesogéniconic o2 01 genotipo ahorrador 4

Co

ng

INTRODUCCIÓN

re so Na cio n

al

de

lL

ab or

ato Hasta el momento no se ha demostrado rio la Cl ni su presencia de la proteína CRTC3 en sangre íni utilidad como marcador de obesidad en co 2 humanos.

01

4

Co

ng

OBJETIVOS

re so Na Nuestros objetivos fueron: cio n 1) Determinar si el CRTC3 a esl secretado por el tejido adiposo de l Len suero de niños 2) Detectar y cuantificar la proteína ab o ra y de obesidad 3) Estudiar su relación con variables metabólicas tor io Cl íni co 2

01

4

Co

ng

DISEÑO Y POBLACIÓN re so Na cio n

Estudio clínico observacional en la población pediátrica de l’Alt Empordà y Girona.

al

Identificación de CRTC3 Estudio transversal

Estudio longitudinal

de

lL

ab or

ato rio

Cl ín

ico

20

14

Co

IDENTIFICACIÓN DE CRTC3 n gr es oN ac ion

al

de

12 Biopsias tejido adiposo visceral y subcutáneo abdominal

lL

ab or

ato rio

12 Extracciones de sangre venosa

Cl ín

ico

20

14

Co

ng

CULTIVO TEJIDO ADIPOSO

re so Na cio n

300 mg tejido/pocillo 1 ml DMEM

al48h a 37ºC en 5% CO2 de lL ab o ra Medio de cultivo Tejido adiposo tor Extracción de proteínas totales Extracciónio de proteínas totales Cl Concentración de CRTC3 fue ajustada por las proteínas íntotales ico Lowry  Proteínas totales 20 Lactato deshidrogenasa  Viabilidad 14

Co

IDENTIFICACIÓN DE CRTC3 n gr es oN ac ion

al

de

lL

ab or

ato rio

Cl ín

ico

INMUNOBLOT

ELISA

20

14

Co

ESTUDIO TRANSVERSAL

211 niños caucásicos prepuberales sanos 102 niños y 109 niñas 7.0 ± 0.1 años 19.4 sobrepeso y obesidad

ng

re so Na cio 3 años n

al

Examen clínico

de

lL

ab or

Extracción de sangre venosa

ato rio

Cl Ecografía de alta íni resolución co 115 niños caucásicos 20 57 niños y 58 niñas 1 10.0 ± 0.1 años 4 ESTUDIO LONGITUDINAL 6% pubertad

Co

ng

re so Na cio n

Resultados al

de

lL

a bo Identificación de CRTC3 ra tor Estudio transversal io Estudio longitudinal

Cl ín

ico

20

14

Co

IDENTIFICACIÓN: INMUNOBLOT ng re so Na cio 1 n

Anticuerpo policlonal 2

al

CRTC3

1) 2) 3) 4) 5) 6)

3

de

4

5

6 - 76 kDa

lL

ab or

a tor Lisado de MCF-7 Lisado tejido adiposo visceral io

Cl ín

Lisado tejido adiposo subcutáneo Medio cultivo tejido adiposo visceral Medio cultivo tejido adiposo subcutáneo Suero

ico

20

14

Co

ng

8

7 CRTC3 (ng/mL)

6 5

IDENTIFICACIÓN: ELISA

re so Na cio n

al

4 3

de

lL

ab or

ato rio

2 1

0

Cl ín

Tejido adiposo Tejido adiposo Tejido adiposo Tejido adiposo visceral subcutaneo visceral subcutaneo Biopsia

Medio de cultivo

ico

Suero

20

14

Co

ESTUDIO TRANSVERSAL

n gr antropométricas y metabólicas de los niños incluidos en el estudio divididos Características por tertiles dee CRTC3 so (n=211) Na CRTC3 tertiles (ng/mL) cio0.090-0.200 0.201-0.316 0.317-1.037 P na70 N 71 70 -l Niñas (%) 45.1 d 54.5 55.6 -el Edad (años) 6.7 (6.4;7.0) 7.1 (6.8;7.3) 0.163 La 6.8 (6.6;7.1) b0.35(0.08;0.63) Valor Z-IMC -0.19 (-0.39;0.01) 0.23 (-0.02;0.49) 0.005 or ato Perímetro abdominal (cm) 53.9 (52.3;55.5) 57.0 (55.0;58.9) 57.5 (55.5;59.5) 0.003 TAS (mmHg) 98 (97;101) 103 (101;106)ri o C 102 (100;104) 0.007 GIMC (cm) 0.039 (0.038;0.041) 0.039 (0.037;0.041) 0.041 (0.038;0.043) 0.311 lín HOMA-IR 0.53 (0.39;0.68) 0.71 (0.54;0.89) 0.63 (0.53;0.73) 0.332 ico Adiponectina APM (mg/L) 9.56 (8.56;10.55) 7.91 (7.00;8.81) 7.51 (6.55;8.47) 20 0.003 PCRus (mg/L) 1.53 (0.84;2.21) 1.90 (1.04;2.76) 1.36 (0.85;1.87) 1 0.444 4

Co

ng

ESTUDIO TRANSVERSAL re so NaMuestra total cio na p r ld Edad 0.088 0.228 el IMC 0.179 0.010

Análisis de correlación de Pearson entre la concentración de CRTC3 y las variables antropométricas y metabólicas en relación al IMC.

n= 211

Niños delgados

Niños sobrepeso

(IMC Z score < 1; n= 167)

(IMC Z score ≥ 1; n= 44)

r

p

r

p

0.149

0.056

0.123

0.445

0.055

0.431

0.007

0.775

0.379

0.015

0.920

0.124

0.445

0.479

0.002

-0.083

0.620

0.201

0.233

La-0.022 b0.008 or 0.197a 0.148

Valor Z-IMC

0.166

0.017

Masa grasa

-0.063

0.369

Perímetro abdominal

0.207

0.003

TAS

0.164

0.018

0.184

TAD

0.123

0.079

0.061

GIMC

0.074

0.396

0.150

HOMA-IR

0.770

0.275

0.128

0.106

Adiponectina APM

-0.228

0.001

-0.143

0.067

PCRus

-0.015

0.833

0.030

0.708

tor 0.010 i0.017 o0.437C l 0.054

íni 0.410 c0.114 o2 -0.351 0 0.373

0.012 0.480

0.031

140.025

Co

ng

ESTUDIO TRANSVERSAL

re so Na Variable dependiente: cioCRTC3 na l

Estudio multivariante. Regresión lineal múltiple

Muestra total (n= 211)

β

de

p

R2

lL

Adiponectina de APM

ab or -0.153

ato rio

Niños sobrepeso y obesidad (n= 44) Adiponectina de APM Valor Z-IMC

-0.340 0.394

0.029

Cl í 0.024 n

0.024

0.012

ico 0.235 20 14

Co

Cambio en las variables ng re Antropométricas y metabólicas s

n

Niñas (%)

oN ac ion

Edad (años) Valor Z IMC Perímetro Abdominal (cm) TAS (mmHg) GIMC (cm)

al

Transversal

Longitudinal

211

115

51.7

50.2

de6.8 (6.7;7.0) l 0.13 L (-0.01;0.28) ab or 56.1 (55.0;57.1) ato 101 (100;103) rio 0.040 (0.039;0.041)

HOMA-IR

0.62 (0.53;0.73)

Adiponectina APM (mg/L)

8.33 (7.81;8.92)

PCR us(mg/L)

1.60 (1.20;2.03)

10.3 (10.3; 10.7) 0.12 (-0.10;0.0.33) 69.9 (67.7;72.1) 103 (101;105) (0.044;0.050) C0.048 lín(0.73;1.16) 0.94 ico 15.39 (11.64;17.87) 20 1.56 (1.04;1.95)1 4

Co

ng

Estudio longitudinal

re so Na cio n

Cambio valor z-IMC

al

*

Tertiles CRTC3 Basal

de

lL

Cambio adiponectina APM (mg/L)

Se estudió el cambio del valor de Z-IMC y adiponectina de APM en los niños tras 3 años de seguimiento (n=115) respecto a los tertiles de la concentración basal de CRTC3. Análisis ANOVA de un factor * p