XVI Cursos de Otoño de la Universidad de Cádiz en Jerez “Innovación en la Industria Agroalimentaria Andaluza” Jerez de la Frontera, 20 Septiembre 2011

Aceite de Oliva y Salud Mª Raquel Mateos Briz Científico Titular (CSIC) Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos y Nutrición (ICTAN) C/ José Antonio Novais, 10, 28040 Madrid. [email protected]

Aceite de Oliva, producto milenario y mediterráneo

DIETA MEDITERRÁNEA Sabio conjunto de alimentos, reunidos durante siglos, que ofrecen beneficios para la salud.

Aceite de Oliva, eje de la dieta mediterránea

Efecto de los factores agronómicos y tecnológicos sobre la CALIDAD y la COMPOSICIÓN del aceite

Efecto de los factores agronómicos y tecnológicos sobre la CALIDAD y la COMPOSICIÓN del aceite

Efecto de los factores agronómicos y tecnológicos sobre la CALIDAD y la COMPOSICIÓN del aceite

Efecto de los factores agronómicos y tecnológicos sobre la CALIDAD y la COMPOSICIÓN del aceite

TIPOS DE ACEITE DE OLIVA

TIPOS DE ACEITE DE OLIVA: COMERCIALIZACIÓN Aceite Aceite de de Oliva Oliva VIRGEN VIRGEN EXTRA EXTRA (Acidez (Acidez hasta hasta 0.8º) 0.8º)

Aceite Aceite de de Oliva Oliva VIRGEN VIRGEN (Acidez (Acidez hasta hasta 2º) 2º)

Aceite Aceite de de Oliva Oliva (hasta (hasta 1º) 1º)

Aceite Aceite de de Orujo Orujo (hasta (hasta 1º) 1º)

REGLAMENTO (CEE) Nº 2568/91 de la comisión de 11 de julio de 1991 Relativo a las características de los aceites de oliva y de los aceites de orujo de oliva y sobre sus métodos de análisis (DO L 248 de 5.9.1991, p.1)

¡ Consume Aceite de Oliva Virgen Extra!

COMPOSICIÓN DEL ACEITE DE OLIVA

FDA: FOOD AND DRUG ADMINISTRATION http://www.fda.gov/

¿Qué hace la FDA? La FDA es responsable de: 1. Proteger la salud pública mediante la regulación de los medicamentos de uso humano y veterinario, vacunas y otros productos biológicos, dispositivos médicos, el abastecimiento de alimentos en nuestro país, los cosméticos, los suplementos dietéticos y los productos que emiten radiaciones. 2. Favorecer la salud pública mediante el fomento de las innovaciones de productos. 3. Proveer al público la información necesaria, exacta, con base científica, que le permita utilizar medicamentos y alimentos para mejorar su salud.

Una grasa mayoritariamente MONOINSATURADA

GRASAS VEGETALES RICAS EN ÁCIDO OLEICO Olivo Olivo

Colza Colza

Girasol Girasol

Soja Soja

EL reto de la investigación actual: Los beneficios del aceite de oliva van más allá de la grasa Nivel de evidencia

Tipo de efecto

Demostrado mediante numerosos estudios de intervención en diferentes poblaciones sana y de riesgo

1. Mejora el perfil lipídico: ↓ LDL y ↑ HDL/Col. 2. Reduce oxidación de LDL. 3. Promociona un ambiente menos protrombótico: reduce agregación plaquetaria y producción tromboxanos B2, entre otros. 4. Mejora de la respuesta vasodilatadora dependiente del endotelio.

NO SOLO AYUDA A CONTROLAR 5. Reduce la presión arterial.

6. Mejora el metabolismo de glucosa en la diabetes.

7. Amortiguación de la inflamación inducida por la ingestión de dietas ricas en grasas saturadas.

LOS NIVELES DE COLESTEROL

Estudios epidemiológicos

1. Menor incidencia de algunos tipos de cáncer; modesta asociación de MUFA con un menor riesgo de cáncer de mama mientras que el riesgo aumenta con dietas SFA.

Todavía pocos estudios de intervención o experimentos in vitro

1. Reducción en el deterioro cognitivo relacionado con la edad y la enfermedad de Alzheimer de una mayor adhesión. 2. Favorables efectos en la prevención de la obesidad.

¿Tiene algún valor añadido a su grasa el aceite de oliva virgen y virgen extra?

Asegura el aporte de monoinsaturados …. y ….. COMPONENTES MINORITARIOS biológicamente activos

COMPONENTES MINORITARIOS DEL ACEITE DE OLIVA Compuestos

Cantidad o proporción

Escualeno

300 - 700mg/100g

Carotenos

0.5 - 10mg/kg (expresado como bcaroteno)

Clorofilas

0 – 9.7mg/kg

Tocoferoles

7 – 30 mg/100g

α-tocoferol

> 93 %

β y γ-tocoferol

< 10 %

δ-tocoferol

< 1.5 %

Esteroles

80 – 240 mg/100g

Campesterol

2.0 – 3.0 %

Estigmasterol

1.0 – 2.0 %

γ-sitosterol + ∆5 avenasterol

95.0 – 97.0 %

Fenoles

100 – 350 mg/kg (expresado como ácido cafeico)

Otros: Alcoholes, cetonas, éteres, ésteres y derivados furánicos.

COMPONENTES MINORITARIOS: COMPUESTOS FENÓLICOS

Propiedades organolépticas del aceite (amargo y picante).

Estabilidad oxidativa al aceite de oliva.

Propiedades saludables.

COMPONENTES MINORITARIOS: COMPUESTOS FENÓLICOS

Variedad de la aceituna.

Grado de maduración.

Procedimiento de obtención del aceite.

COMPUESTOS FENÓLICOS: ESTRUCTURAS QUÍMICAS COMPUESTOS FENÓLICOS DE LA ACEITUNA R O

HO

O

COOMe

Oleuropeína (R = OH) Ligustrósido (R = H)

O OGlu

COMPUESTOS FENÓLICOS DEL ACEITE DE OLIVA VIRGEN EXTRA

DERIVADOS SECOIRIDOIDEOS R HO

DAOD (R = OH) DALD (R = H)

R O

O

HO

O O

O

OHC

O

COOMe

O

AAO (R = OH) AAL (R = H)

COMPUESTOS FENÓLICOS: ESTRUCTURAS QUÍMICAS DERIVADOS DERIVADOS SECOIRIDOIDEOS SECOIRIDOIDEOS R

R O

HO

O

O

HO

O

DAOD (R = OH) DALD (R = H)

O

COOMe

O

OHC

AAO (R = OH) AAL (R = H)

O

FENOLES FENOLES SIMPLES SIMPLES MeO

R2

COOH

MeO

R1

HO

HO

HO

COOH

Ácido ferúlico

COOH

COOH

Ácido vainíllico

HO Ácido cinámico

Ácido p-coumárico

LIGNANOS LIGNANOS LIGNANOS

FLAVONAS FLAVONAS

OMe

R

HO

OH

O

HO

R

O

O OH

Pinorresinol R=H 1-acetoxipinorresinol

OMe

R = OCOCH3

OH

O

Luteolina Apigenina

R = OH R=H

COMPUESTOS FENÓLICOS: INGESTA MEDIA DIARIA Ingesta diaria 25mL AOVE (350 ppm)

9mg/día C.Fenólicos 8 mg Derivados Secoiridoideos R

R O

HO

DAOD (R = OH) DALD (R = H)

O

O

HO

O

O

OHC

O

COOMe

O

AAO (R = OH) AAL (R = H)

1 mg Hidroxitirosol + Tirosol (y derivados acetilados) R2 HO

100-350 ppm CF de AOVE 0-5 ppm CF de A.OLIVA

R1

HTy Ty Ac-HTy Ac-Ty

R1 = OH; R2 = OH R1 = OH; R2 = H R1 = OCOCH3; R2 = OH R1= OCOCH3; R2 = H

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD

Biodisponibilidad. Cantidad que se absorbe y alcanza la circulación sistémica, momento en el cual se distribuye por los tejidos y alcanza lugares donde puede ejercer sus propiedades beneficiosas.

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD La actividad biológica in vivo:

1. Estabilidad digestiva.

2. Extensión de la absorción.

3. Metabolismo.

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Estudios de intervención con humanos: a) Se absorben de manera dosis dependiente ([Cmax] = 1-2h). b) Extensiva metabolización (90%).

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD 1. Modelo de digestión gastrointestinal in vitro 2. Biodisponibilidad intestinal (Caco-2) 3. Biodisponibilidad hepática (HepG2)

Hidroxitirosol (HTy)

Acetato de Hidroxitirosilo (Ac-HTy)

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Modelo de digestión gastrointestinal in vitro:

Estima la cantidad de estos fenoles disponibles para la posterior absorción intestinal.

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Modelo de digestión gastrointestinal in vitro:

Compuestos fenólicos a evaluar

Digestión con pepsina pH 2.0, 37ºC, 2 h

Evaluación de la estabilidad gástrica e intestinal mediante HPLC-DAD. Digestión con pancreatina pH 7.5, 37ºC, 2 h sales biliares

ESTABILIDAD GASTROINTESTINAL IN VITRO Cuantitativamente: Compuesto

Digestión gástrica % Pérdida

Digestión gástrica % Pérdida

% Pérdida Global

HTy

0,1

20,2

20,3

Ac-HTy

3,4

22,3

25,7

Cualitativamente: HO

R

O

Hidrólisis

HO

OH

O

HO

HO

Ésteres de HTy

Hidroxitirosol

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Transporte y metabolismo intestinal: Células Caco-2

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Transporte y metabolismo intestinal: AP → BL (Papp, x 10-6 cm/s)

BL → AP (Papp, x 10-6 cm/s)

Efflux Ratio (AP : BL)

HTy

16,2 ± 4,2

14,6 ± 1,3

1,1 ± 0,2 a

Ac-HTy

33,6 ± 1,9

21,1 ± 2,3

1,6 ± 0,2 b

Compuesto

Apical → Basolateral

Basolateral → Apical

Se absorben en relación directa a la naturaleza lipofílica del compuesto.

> 50% compuestos absorbidos…. permanecen sin metabolizar.

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Transporte y metabolismo intestinal:

COMP. FENÓLICOS: METABOLISMO Y BIODISPONIBILIDAD Biodisponibilidad hepática

Células HepG2

1 – HTy 2 – Ty 3 – Ac-HTy

HTy y Ac-HTy se absorben y metabolizan extensivamente por células HepG2.

COMP. FENÓLICOS: ACTIVIDAD BIOLÓGICA Más que un antioxidante.

El 70% de la población mundial fallece por enfermedades cardiovasculares y cancerígenas.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

ETIOLOGÍA DE LA ECV: ATEROSCLEROSIS Progresión de la placa de ateroma (sección transversal)

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

Aterosclerosis: un proceso inflamatorio •Moléculas de adhesión celular VCAM-1; PCAM-1 ICAM-E; P-selectina E-selectina. •Proteínas quimiotácticas MCP-1 •Factores de crecimiento M-CSF

Adhesión

Migración

Endotelio

•Citoquinas proinflamatorias IL-6; IL-8; IL-1b; IFNγ; TNFα

Monocitos LDL Activación

Acumulación colesterol

Diferenciación

Inflamación tejido dañado

LDLox Disponibilidad Retención

Modificación Macrófago Modificación Citoquinas inflamatorias, radicales

COMP. FENÓLICOS: ACTIVIDAD BIOLÓGICA

Biomarcador Una característica que se puede medir y evaluar objetivamente como indicador de procesos biológicos normales o patogénicos, o de respuestas farmacológicas a una intervención terapéutica. (Food and Drug Administration, www.fda.gov)

Una característica bioquímica que puede utilizarse para medir el progreso de una enfermedad o los efectos de un tratamiento. (Webster’s Medical Dictionary)

COMP. FENÓLICOS: ACTIVIDAD BIOLÓGICA

Biomarcador de estrés oxidativo Una molécula cuya estructura ha sido modificada por la acción de las especies reactivas de oxígeno. (Oxford et al., 2000)

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

Biomarcadores: a) Perfil lipídico: HDLc, LDLc, Colesterol. b) Marcadores de estrés oxidativo: a) Lípidos: LDLox (clave en la función cardiovascular) b) Otros c) Marcadores de inflamación.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR Condiciones Seguimiento 30 ♂ sanos 3 semanas 2 w lavado

12 ♂ sanos 4 días 10 días lavado

200 sujetos sanos 3 semanas 2 w lavado

30 sujetos sanos 3 semanas 2 w lavado

36 sujetos sanos 3 semanas 2 w lavado

Dieta Intervención AOV (0 mg/Kg CF) vs AOV (68 mg/Kg CF) vs AOV (150 mg/Kg CF) AOV (10 mg/Kg CF) vs AOV (133 mg/Kg CF) vs AOV (486 mg/Kg CF) AOV (2,7 mg/Kg CF) vs AOV (164 mg/Kg CF) vs AOV (366 mg/Kg CF) AOV (0 mg/Kg CF) vs AOV (370 mg/Kg CF) vs AOV (825 mg/Kg CF) AOR sin CF vs AOV (629 mg/Kg CF)

Resultados grupo AOV

Referencia

LDLoxd LDLc; HDL

Marrugat et al., 2004

LDLc; HDL MDA orina 8-OHdG orina y linfocitos activ. Gpox.

Weinbrenner et al., 2004

HDL, TAG, Col LDLox Biomarcad estrés

Covas et al., 2006

LDLox HDL

Gimeno et al., 2007

LDLox y dienos conjugados

De la Torre-Carbot et al., 2010

The effect of polyphenols in olive oil on heart disease risk factors. A randomized trial. Covas et al. Ann. Intern. Med. 2006; 145:333-341.

Estudio EUROLIVE, multicéntrico europeo: 200 voluntarios sanos. 25mL de aceite de oliva/día: a) 2,7 mg/Kg b) 164 mg/Kg c) 366 mg/Kg. Intervención Tratamiento

Tratamiento 2 sem

8 semanas

2 sem

8 semanas

Tratamiento 2 sem

8 semanas

Bajo CF

Alto CF

Medio CF

Medio CF

Bajo CF

Alto CF

Alto CF

Medio CF

Bajo CF

Covas et al. Ann. Intern. Med. 2006; 145:333-341.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR Condiciones Seguimiento

Dieta Intervención

Resultados grupo AOV

Referencia

Voluntarios de alto riesgo cardiovascular 24 ♂ enferm periferica vascular 12 semanas 40 ♂ con enfermedad coronaria estable 3 semanas 2 semanas lavado 22 hiperlipidémicos 7 semanas 4 semanas lavado 21 hipercolesterolémicos 1 dosis aguda

AOV (60mg/Kg CF) vs AOV (800 mg/Kg CF) AOR (15mg/Kg CF) vs AOV (161 mg/Kg CF)

LDLox Activ antiox plasma

Ramírez-Tortosa et al., 1999

LDLox; LPO GSH-Px P sistólica

Fito et al., 2005

AOR (2mg/Kg CF) vs AOV (166 mg/Kg CF) AOV (80mg/Kg CF) vs AOV (400 mg/Kg CF)

Activ antiox plasma TXB2;

Visioli et al., 2005

LPO y F2 isoprostanos

Ruano et al., 2005

Los fenoles del AOV mejora el perfil lipídico y el estatus antioxidante de los voluntarios.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

INFLAMACIÓN a) Inhibición de la ruta del ácido araquidónico:

PLA2

PG

AA

Formación trombo

Tx 5-,12-LOX

LT

COX-1/2

Eicosanoides

PG

Tx

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

INFLAMACIÓN Condiciones Seguimiento 14 mujeres obesas post-menopáusica 4 semanas 22 hiperlipidémicos 7 semanas 4 semanas lavado 12 ♂ sanos 1 dosis aguda

Dieta Intervención AG alto oleico (25mg/Kg CF) vs AOV (108 mg/Kg CF) AOR (2mg/Kg CF) vs AOV (166 mg/Kg CF) Aceite de maíz sin CF vs AOV (16 mg/Kg CF) vs AOV (607 mg/Kg CF)

Resultados grupo AOV

Referencia

TXB2 y LPO en plasma tras la ingesta de AOV.

Oubiña et al., 2001

Activ antiox plasma TXB2.

Visioli et al., 2005

TXB2 Activ antiox plasma.

Bogani et al., 2007

Los fenoles del AOV disminuye significativamente el nivel de tromboxano B2.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

INFLAMACIÓN b) Modulación del sistema de citoquinas/quimioquinas

Pro-inflamatorios

Anti-inflamatorios

IL-1β; TNFα; IL-6

IL-10; IL-4; TGFβ

IL-8; IFNγ

Anti-inflammatory effects of virgin olive oil in stable coronary disease patients: a randomized, crossover, controlled trial. Fito et al. Eur J. Clin. Nutr. 2008; 62:570-574.

Intervención Tratamiento

28 voluntarios con enfermedad coronaria estable

2 sem

3 semanas

Tratamiento 2 sem

3 semanas

AOR (0,62 mg CF)

AOV (6,53 mg CF)

AOV (6,53 mg CF)

AOR (0,62 mg CF)

CF del aceite de oliva mejoraron significativamente los niveles de citoquinas pro-inflamatorias (IL-6) y PCR aunque no mostraron cambios en las moléculas de adhesión (sVCAM-1 y sICAM-1).

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR

INFLAMACIÓN c) Efecto en las moléculas de adhesión VCAM-1 PCAM-1 ICAM-E P-selectina E-selectina

Anti-inflammatory effects of virgin olive oil in stable coronary disease patients: a randomized, crossover, controlled trial. Fito et al. Eur J. Clin. Nutr. 2008; 62:570-574.

Los CF del aceite de oliva no mostraron cambios en sVCAM-1 y sICAM-1.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR Minor compounds of olive oil have postprandial anti-inflammatory effects. Pacheco et al. Br. J. Nutr. 2007; 98:260-263. Estudio postprandial 14 voluntarios sanos y 14 hipertriacilglicerolémicos. Macarrones con: a) AOR (0 mg/Kg CF) b) AOV (1125 mg/Kg CF) 1 día

1 día Ayuno 1h

2h

3h

4h

5h

6h

7h

8h

Ayuno 1h

2h

3h

4h

5h

6h

7h

8h

2 sem

AOR

AOV

AOV

AOR

La ingesta de AOV rico en CF provocó una disminución postprandial de s-ICAM-1 y s-VCAM-1.

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR In vitro nutrigenomic effects of virgin olive oil polyphenols within the frame of the Mediterranean diet: a randomized controlled trial. Konstantinidou et al. FASEB J. 2010; 24:2546-2557. 90 voluntarios sanos. 3 tipos de dieta: a) Dieta Mediterránea (DM) + AOV (328mg/Kg CF) b) Dieta Mediterránea (DM) + AOV (55mg/Kg CF) c) Dieta habitual Intervención Tratamiento 2 sem

12 semanas

Tratamiento 2 sem

12 semanas

Tratamiento 2 sem

12 semanas

DM + AOV high

Dieta habitual

DM + AOV low

DM + AOV low

DM + AOV high

Dieta habitual

Dieta habitual

DM + AOV low

DM + AOV high

COMPUESTOS FENÓLICOS: SALUD CARDIOVASCULAR In vitro nutrigenomic effects of virgin olive oil polyphenols within the frame of the Mediterranean diet: a randomized controlled trial. Konstantinidou et al. FASEB J. 2010; 24:2546-2557.

Especialmente con la Dieta Mediterránea y AOV rico en CF: a) Mejora el estado antioxidante del plasma. b) Disminuye el estado inflamatorio del individuo. c) Modula la expresión de genes implicados en la inflamación (IFNγ, ARHGAP15 y IL7R) y estrés oxidativo (ADRB2 y POLK).

Los efectos de los fenoles del AOV sobre el riesgo cardiovascular se podrían deber a cambios en la expresión de genes proaterogénicos.

HIDROXITIROSOL

Reciente Declaración Nutricional HO El consumo diario de 5mg de HTy y sus derivados, OH tomados como parte del aceite de olivaHO virgen en la Hidroxitirosol dieta, puede proteger a las LDL del estrés oxidativo (HTy) manteniendo la concentración de HDL y colesterol en sangre, la presión arterial y aportando componentes con propiedades antiinflamatorias.

(EFSA, 2011, EC Nº 1924/2006)

COMPUESTOS FENÓLICOS: CÁNCER

Condiciones Seguimiento 10 ♀ menopausicas 8 semanas 2 sem lavado 182 ♂ sanos 3 semanas 2 w lavado

Dieta Intervención AOV (147mg/Kg CF) vs AOV (592 mg/Kg CF) AOV (2,7 mg/Kg CF) vs AOV (164 mg/Kg CF) vs AOV (366 mg/Kg CF)

Resultados grupo AOV

Referencia

Daño DNA en linfocitos tras la ingesta del AOV rico en CF.

Salvini et al., 2006

13% Daño DNA (8OHdG, 8OHG), independientemente el contenido fenólico.

Machowetz et al., 2007

Los resultados obtenidos hasta la fecha no muestran resultados concluyentes sobre los efectos de los CF del AOV en los procesos cancerígenos.

COMPUESTOS FENÓLICOS: ESTUDIOS IN VITRO (Beauchamp et al.)

• • • •

0.9 mg/día Oleocantal Biodisponib. y Biotransformación Presencia de otros CF en el AOV Influencia de la matriz lipidica

Ingesta diaria 9mg de oleocantal 50g aceite (200ppm oleocantal)

Actividad Antioxidante del hidroxitirosol y su derivado el acetato de hidroxitirosilo en células de hepatoma humano

El Hígado es el principal órgano implicado en el metabolismo de xenobióticos. Susceptible a cualquier exceso que genere un daño oxidativo.

Evaluación del efecto protector del Ac-HTy en comparación con el HTy frente al daño oxidativo inducido en células de hepatocarcinoma humano (HepG2)

Células HepG2

Viabilidad celular: • Método Cristal Violeta Marcadores de estatus oxidativo celular: • Nivel intracelular de glutation reducido (GSH) • Especies reactivas de oxígeno (ROS) • Actividad de enzimas antioxidantes (GPx y GR) • Biomarcador de peroxidación lipídica (MDA)

Modelo celular de estrés oxidativo: Tratamiento celular con 400 µM t-BOOH 3h. Alía et al., J. Biochem. Mol. Toxicol. 19, 119-128, 2005.

Efecto Protector del hidroxitirosol y acetato de hidroxitirosilo en células HepG2:

0.5-10 µM HTy, Ac-HTy 2 y 20h

400 µM t-BOOH 3h

Determinación parámetros tomando 2 referencias: • Control • t-BOOH

Viabilidad Celular – Cristal Violeta Evaluación del número de células vivas.

• Células HepG2 • Concentraciones: 0.5, 1, 5 y 10 µM • Tiempo Incubación: 2, 20h • t-BOOH: 400 µM durante 3h

Viabilidad Celular – Cristal Violeta

Especies Reactivas de Oxígeno (ROS) Método basado en la medida de la fluorescencia que emite la sonda DCF, resultante de la oxidación de DCFH por los oxidantes intracelulares. t-BOOH Células control

• Células HepG2 • Concentraciones: 0.5, 1, 5 y 10 µM • Tiempo Incubación: 2, 20h • t-BOOH: 400 µM durante 3h

Especies Reactivas de Oxígeno (ROS) 2h

20h

Glutation Intracelular Reducido (GSH) Método basado en la medida de la fluorescencia que emite la concentración intracelular del glutation reducido. • Células HepG2 • Concentraciones: 0.5, 1, 5 y 10 µM • Tiempo Incubación: 2, 20h • t-BOOH: 400 µM durante 3h

Glutation Intracelular Reducido (GSH)

Malondialdehído (MDA) Método basado en la medida de un derivado hidrazona del MDA mediante HPLC-DAD. • Células HepG2 • Concentraciones: 0.5, 1, 5 y 10 µM • Tiempo Incubación: 2, 20h • t-BOOH: 400 µM durante 3h

Malondialdehído (MDA)

Enzimas antioxidantes (GPx y GR) 2 GSH + ROOH GSSG + NADPH +

GPx

H+

GSSG + ROH + H2O GR

2GSH + NADP+

• Células HepG2 • Concentraciones: 0.5, 1, 5 y 10 µM • Tiempo Incubación: 2, 20h • t-BOOH: 400 µM durante 3h

Enzimas antioxidantes (GPx)

Enzimas antioxidantes (GR)

Conclusiones El pretratamiento de las células HepG2 durante 2h o 20h con 0.5-10 µM de HTy y Ac-HTy reduce parcialmente la citotoxicidad provocada por t-BOOH. Además, previenen completamente el daño celular inducido por t-BOOH tras 20h de incubación, especialmente a las concentraciones más altas, mientras que a 2h el daño oxidativo es contrarrestado parcialmente. En resumen estos resultados demuestran un efecto protector del Ac-HTy similar, e incluso ligeramente superior, al descrito para el HTy frente a situaciones de estrés oxidativo.

COMPUESTOS FENÓLICOS

Absorción

Lumen

C. Fenólicos

Antioxidante

Anticancerígeno

Anticardiovascular

[email protected]

‘Que el alimento sea tu mejor medicina, y tu mejor medicina sea tu alimento’ Hipócrates

XVI Cursos de Otoño de la Universidad de Cádiz en Jerez “Innovación en la Industria Agroalimentaria Andaluza” Jerez de la Frontera, 20 Septiembre 2011

Aceite de Oliva y Salud Mª Raquel Mateos Briz Científico Titular (CSIC) Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos y Nutrición (ICTAN) C/ José Antonio Novais, 10, 28040 Madrid. [email protected]