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CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS
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INFORME ANUAL 2005 LABORATORIO
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CONTENIDO
Resumen ..................................................................................................................................................................... 5 1. Tipo de tests usados, objetivo y número aproximado ........................................................................ 7
2. Reporte del número de rebaños con enfermedades vesiculares en América del Sur en 2005 (hasta semana 44) ............................................................................................................................ 8
3. Investigación seroepidemiológica .................................................................................................... 19
4. Suministro de reactivos de referencia para diagnóstico ................................................................... 19
5. Armonización regional e internacional, estandarización de métodos de diagnóstico y control de vacuna e implementación de sistemas de calidad. ................................ 20
6. Preparación y suministro de estándares de referencia internacional................................................. 23
7. Investigación ..................................................................................................................................... 23
8. Eventos internacionales..................................................................................................................... 25
9. Capacitaciones y discusiones técnicas.............................................................................................. 26
10. Participación en proyectos colaborativos a nivel internacional .......................................................... 29
11. Diseminación de información: presentaciones a congresos y publicaciones..................................... 29
12. Anexos .............................................................................................................................................. 33
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INFORME ANUAL 2005 LABORATORIO
RESUMEN Durante el período de Enero a Diciembre del 2005 el laboratorio ha continuado con el fortalecimiento de las actividades de armonización regional e internacional de procedimientos de diagnóstico y de implantación de sistemas de gestión de calidad. Se fortaleció el programa de capacitaciones a través de la implementación de 9 módulos cubriendo las áreas de diagnóstico, serovigilancia y control de vacunas, y ministrados durante un periodo de 4-5 meses. Como Laboratorio de Referencia de OIE se destacan las actividades tendientes a optimizar las interacciones con los otros laboratorios de referencia de OIE, a través de la definición de las pautas para la constitución de una red integrada de laboratorios de referencia de OIE/FAO. Mantuvo y fortaleció la dinámica operativa de la Red de Laboratorios Nacionales de Referencia de América del Sur, con especial énfasis en diagnóstico de enfermedades vesiculares y confundibles; y control de vacuna antiaftosa, promoviendo la constitución de grupos ad hoc con la participación de profesionales de los laboratorios de la red, e incentivando el intercambio de información. Se continuó dando soporte al área de zoonosis en las acciones tendientes a establecer la red de laboratorios en zoonosis. El laboratorio consolidó con su participación la posición de la región en los foros de discusión internacional, FAO, OIE, UE, IAEA. Se intensificaron las interacciones con otros organismos de referencia internacional. Se cumplieron las actividades de: referencia regional, incluyendo la caracterización de las muestras remitidas, la provisión de biológicos y kits diagnósticos, capacitación, asesorías a consultas, divulgación de información, desarrollos en respuesta a la necesidades locales detectadas etc. A continuación se describen las principales actividades realizadas y los resultados alcanzados durante el 2005.
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1. TIPO DE TESTS USADOS, OBJETIVO Y NÚMERO APROXIMADO
Para detección
Diagnóstico /Vigilancia
Control de Vacunas
Control de Calidad de kits/ biológicos
Investigación
Total
ELISA-CFL (FA)
Anticuerpos
586
70
620
360
1.636
ELISA-CFL (EV)
Anticuerpos
98
0
0
120
218
Antígenos
14
0
0
21
35
3ABC
0
0
0
3,250/342
3,250/ 342
Anticuerpos
0
1.150/700
45.000/9.10 0
18.500/6.500
64.651/ 16.300
ELISA Enf. Diferenciales (Lengua Azul, IBR)
Anticuerpos
0
0
0
79
79
IDGA (FA)
Anticuerpos
0
0
3
0
3
IDGA Enf. (Diferenciales)
Anticuerpos
0
0
0
6
6
VN50% (FA)
Anticuerpos
130
20
0
VN50% (DVB)
Anticuerpos
Test
ELISA-SI (FA/EV) AcM-ELISA/Western blot (FA) I-ELISA 3ABC/EITB (FA)
FC 50% (FA/EV)
Antígenos
114
0
2
150 39
39
30
146 32
PCR FA (3D)
RNA
PCR FA (VP1)
RNA
38
4
30
102
174
PCR EV
RNA
12
0
5
60
77
PCR Lengua Azul
RNA
0
0
0
4
4
RNA
38
4
12
102
156
RNA
12
0
10
60
82
RNA
0
0
0
4
4
Secuenciamiento FA Secuenciamiento EV Secuenciamiento Lengua Azul
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2. REPORTE DEL NÚMERO DE REBAÑOS CON ENFERMEDADES VESICULARES EN AMÉRICA DEL SUR EN 2005 (hasta semana 44). Rebaños afectados por Fiebre Aftosa (#) País
Brasil
Virus O
Virus A
Virus C
16
Clinico/epidem.
1
1
Ecuador
27
Venezuela
1
1
44
2
FA Total 34
18
Colombia
Total
Diag.
54
27
2 45
91
#. Datos preliminares
A continuación se resume el número de focos de Fiebre Aftosa y Estomatitis Vesicular, año 2005, reportados por los países de América del Sur al Sistema Continental de Información y Vigilancia de PANAFTOSA. Durante el año 2005. Rebaños afectados con Estomatitis Vesicular # País
New Jersey
Indiana
Diag. Clin
EV Tot
Bolivia
1
1
Brasil
1
1
Colombia
265
22
Ecuador
34
4
38
Perú
18
9
27
Venezuela
3
Total
320
59
346
3 37
59
416
#. Datos preliminares
El resto de los países de Sudamérica, no reportó ocurrencia de enfermedades Vesiculares en el período mencionado.
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Caracterización de muestras recibidas/procesadas en el año 2005 Del total de eventos reportados en la región, PANAFTOSA recibió de los países y analizó 52 muestras de epitelios (40 de Fiebre Aftosa y 12 de Estomatitis Vesicular) en las cuales se llevaron a cabo estudios de caracterización molecular, y/o antigénica e inmunogénica. Adicionalmente se muestran los análisis de muestras caracterizadas en 2005, pero correspondientes a episodios ocurridos en 2004. Se efectuó el aislamiento viral y la tipificación por FC 50% y/o ELISA de las muestras indicadas en las tablas. En los casos mencionados se realizó la caracterización antigénica y la evaluación de la cobertura inmunológica de la cepa vacunal frente a la de campo, a través de expectativa de protección (EPP) con el banco de sueros de bovinos vacunados y revacunados con vacunas formuladas con las cepas O1Campos, A24 Cruzeiro y C3 Indaial (Figura 1). Asimismo, se indican los casos en que se realizó la amplificación específica por PCR y el secuenciamiento del gen que codifica para la proteína VP1 (gen 1D - Fiebre Aftosa) o parcialmente para la región que codifica para la proteína P (gen NS - Estomatitis Vesicular,). Los estudios de relaciones filogenéticas utilizando el método de Neighbour-Joining, implementado en el programa MEGA 2.1 se muestran en: Figura 2, Fiebre Aftosa Tipo O; Figura 3, Fiebre Aftosa Tipo A; Figura 4, Estomatitis Vesicular.
A.1 – FIEBRE AFTOSA - muestras de eventos ocurridos en 2005 BRASIL Código del País 4523-2
Estado
Especie
Aislam. Viral Tipificación
PCR/Secuencia
Mato Grosso do Sul
Bovino
FA-Virus O a
FA-Virus O c
a
FA-Virus O
c
Nd
FA-Virus O
c
Bovino
Nd
FA-Virus O
c
Bovino
Nd
4523-3
Mato Grosso do Sul
Bovino
4523-4
Mato Grosso do Sul
Bovino
4583-7
Mato Grosso do Sul
4583-8
Mato Grosso do Sul
4583-9
Mato Grosso do Sul
Bovino
4583-10
Mato Grosso do Sul
Bovino
FA-Virus O
FA-Virus O
c
a, b
FA-Virus O
c
FA-Virus O
a
FA-Virus O
c
FA-Virus O
a
FA-Virus O
c
FA-Virus O
4583-11
Mato Grosso do Sul
Bovino
4593-50058-2
Mato Grosso do Sul
Bovino
Nd
FA-Virus O
c
4593-50058-3
Mato Grosso do Sul
Bovino
Nd
FA-Virus O
c
814-4
Mato Grosso do Sul
Bovino
Nd
FA-Virus O
c
814-7
Mato Grosso do Sul
Bovino
FA-Virus O
a
815-3
Mato Grosso do Sul
Bovino
FA-Virus O
a
837-2
Mato Grosso do Sul
Bovino
FA-Virus O
a
837-4
Mato Grosso do Sul
Bovino
Nd
Nd FA-Virus O
c
Nd FA-Virus O
c
a: Fue realizada la caracterización antigénica b: Calculada la Expectativa de Protección (EPP) c: Secuenciada la región que codifica para la proteína VP1 CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS
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Nd: no determinado
COLOMBIA Código del País
Departamento
Especie
PCR/Secuencia
32706
Cundinamarca
Bovino
FA-Virus A*
*: en PANAFTOSA se caracterizó únicamente por PCR y secuenciamiento. Fue remitida inactivada en Trizo
VENEZUELA Código del País
Departamento
Especie
PCR/Secuencia
21335
Apure
Bovino
FA-Virus A*
21351
Táchira
Bovino
FA-Virus A*
21369
Mérida
Bovino
FA-Virus A*
21374
Mérida
Bovino
FA-Virus A*
21378
Trujillo
Bovino
FA-Virus O*
21386-IBHK
Zulia
Bovino
FA-Virus O*
*: en PANAFTOSA se caracterizaron únicamente por PCR y secuenciamiento. Fueron remitidas inactivadas en Trizol
A.2 – FIEBRE AFTOSA - muestras recibidas o procesadas en 2005 de eventos ocurridos en 2004 ECUADOR Código del País
Departamento
Especie
PCR/Secuencia
050/04
Pichincha
Bovino
FA-Virus O*
064/04
Pichincha
Bovino
FA-Virus O*
067/04
Cotopaxi
Bovino
FA-Virus O*
071/04
Los Rios
Bovino
FA-Virus O*
072/04
Carchi
Bovino
FA-Virus O*
074/04
Los Rios
Bovino
FA-Virus O*
097/04
Esmeraldas
Bovino
FA-Virus O*
099/04
Cotopaxi
Bovino
FA-Virus O*
101/04
Imbabura
Bovino
FA-Virus O*
106/04
Pichincha
Bovino
FA-Virus O*
*: en PANAFTOSA se caracterizaron únicamente por PCR y secuenciamiento. Fueron remitidas inactivadas en Trizol
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VENEZUELA Código del País
Departamento
Especie
PCR/Secuencia
20904
Táchira
Bovino
FA-Virus A*
21203
Táchira
Bovino
FA-Virus A*
21211
Táchira
Bovino
FA-Virus A*
21218
Barinas
Bovino
FA-Virus A*
21229
Táchira
Bovino
FA-Virus A*
21237
Mérida
Bovino
FA-Virus O*
21270
Yaracuy
Bovino
FA-Virus A*
21283
Barinas
Bovino
FA-Virus A*
*: en PANAFTOSA se caracterizaron únicamente por PCR y secuenciamiento. Fueron remitidas inactivadas en Trizol
B.2 – ESTOMATITIS VESICULAR - - muestras recibidas o procesadas en 2005 de colectas de eventos ocurridos en el 2004 ECUADOR Código del País
Estado
Especie
Aislam. Viral Tipificación
PCR/Secuencia
Napo
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
008/04
Cotopaxi
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
010/04
Loja
Bovino
VEV Indiana
VEV Indiana VEV
011/04
Los Rios
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
014/04
Cotopaxi
Bovino
Nd*
VEV N.Jersey
019/04
Cotopaxi
Bovino
Nd*
VEV N.Jersey
022/04
Pichincha
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
023/04
Los Rios
Bovino
Nd
VEV N.Jersey
027/04
Orellana
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
028/04
Pichincha
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
029/04
Pichincha
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
032/04
Guayas
Bovino
VEV N.Jersey
VEV N.Jersey
Nd: no procesada. Muestra recibida inactivada en Trizol
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Figura 1. Perfiles Antigénicos, relaciones r y cobertura inmunológica de la cepa vacunal O1 Campos
VIRUS O MS-BRASIL/2005 O /Eldorado/MS Brasil/2005 (4523-2)
O/Jporâ/MS Brasil/2005 (837-2)
100
100
80
80
% FC
120
Sueros Hiperinmunes
O2 Brescia
O Poli
O3 Venezuela
O1 UY/2000
100 90
80
80
70
70
60
60
% FC
90
50
100
100
80
80
% FC50%
120
O Poli
O3 Venezuela
O2 Brescia
O Poli
O3 Venezuela
O2 Brescia
O1 UY/2000
O1 Sao Paulo
O Cura/71
O Br/70
O Col/64
O MS/80
O1Campos
O Poli
O3 Venezuela
O2 Brescia
O1 UY/2000
O Cura/71
O1 Sao Paulo
O Br/70
O Col/64
0 O MS/80
20
0
O1 Brugge
40
20
O1 Brugge
O1 UY/2000
60
O1 Caseros
40
O1 Urubamba
60
O1 Caseros
O1 Sao Paulo
O /Japorã/MS Brasil/2005 ( 814 -7)
O /EldoradoMS Brasil/2005 (4583-11) 120
O1Campos
O Cura/71
Sueros Hiperinmunes
Sueros Hiperinmunes
O1 Urubamba
O Br/70
O MS/80
O1 Brugge
O1Campos
O Poli
O3 Venezuela
O1 UY/2000
O1 Sao Paulo
O Cura/71
O Col/64
O1 Brugge
O1 Urubamba
O2 Brescia
0
O Br/70
10
0
O MS/80
20
10
O1 Caseros
30
20
O Col/64
40
30
O1 Caseros
40
O1 Urubamba
50
O1Campos
% FC
O1 Sao Paulo
O /EldoradoMS Brasil/2005 (4583-10)
O /EldoradoMS Brasil/2005 (4523-3)
% FC
O Br/70
Sueros Hiperinmunes
100
Sueros Hiperinmunes
Sueros Hiperinmunes
O/Eldorado MS Brasil/2005 (4583-9)
O /EldoradoMS Brasil/2005 (815 -3) 120
120
100
100
80
80
FC 50%
% FC50%
O Cura/71
O Col/64
O1 Brugge
O Poli
O1Campos
O2 Brescia
O3 Venezuela
O1 Sao Paulo
O1 UY/2000
O Br/70
O Cura/71
O Col/64
O1 Brugge
O1 Urubamba
O MS/80
0
O1 Caseros
20
0
O1Campos
40
20
O MS/80
60
40
O1 Caseros
60
O1 Urubamba
% FC
120
60
40
60
40 20
20 O Poli
O Poli
O3 Venezuela
O2 Brescia
O1 UY/2000
O1 Sao Paulo
O Cura/71
O Br/70
O Col/64
O MS/80
O1 Brugge
O1Campos
Sueros Hiperinmunes
O1 Caseros
0 O1 Urubamba
O3 Venezuela
O2 Brescia
O1 UY/2000
O Cura/71
O1 Sao Paulo
O Br/70
O Col/64
O MS/80
O1 Brugge
O1 Caseros
O1Campos
O1 Urubamba
0
Sueros Hiperinmunes
Sueros Hiperinmunes: 1 O1 Campos 2 O1 Urubamba 3 O1 Caseros 4 O1 Brugge 5 O MS/80 6 O Colombia/64 7 O Brasil/70 8 O Cura/71 9 O São Paulo 10 O1 Uruguay/2000 11 O2 Brescia 12 O3 Venezuela 13 O Polivalente
Virus O1 Campos BHK-4 120
% FC50%
100
80
60
40
20
Sueros Hiperinmunes
Virus O/Eldorado/MS/Brasil/2005 (4583-9) O/Eldorado/MS/Brasil/2005 (4583-10) O/Eldorado/MS/Brasil/2005 (4583-11) O/Eldorado/MS/Brasil/2005 (4523-2) Ojaporã//MS/Brasil/2005 (814-7) O/Japorã/MS/Brasil/2005 (837-2) O1Campos
12
r1 0.56 0.41 0.48 0.62 0.31 0.45 1
EPP - ELISA 30 dpv 30 dpr 82.91 99.29
95.23
99.96
EPP - VN 30 dpv 30 dpr 87.96 98.59
98.43
99.9
CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS
O Poli
O3 Venezuela
O2 Brescia
O1 UY/2000
O Cura/71
O1 Sao Paulo
O Br/70
O Col/64
O MS/80
O1 Brugge
O1 Caseros
O1Campos
O1 Urubamba
0
Figura 2. Relaciones filogenéticas, determinadas con la secuencia completa de la región que codifica para la proteína VP1 (639n), para el Virus de la Fiebre Aftosa, tipo O
Fiebre Aftosa Tipo O
O/Cotopaxi/Ecu/04 (099/04 O/Imbabura/Ecu/04 (101/04) O/Esmeraldas/Ecu/04 (097/04) O/Los Rios/Ecu/04 (071/04) O/Pichincha/Ecu/04 (106/04) O/Guayas/Ecu/04 (057/04) O/Pichincha/Ecu/04 (050/04 O/Carchi/Ecu/04 (072/04) O/Cotopaxi/Ecu/04 (034/04) O/Cotopaxi/Ecu/04 (067/04) O/Los Rios/Ecu/04 (074/04) O/Pichincha/Ecu/04 (064/04) O/Loja/Ecu/03 (027/03) O/Lima/Per/04 (1660) O/Ecuador/02-G.III O/Napo/Ecu/03 (009/03) O/Sucumbios/Ecu/03 (016/03) O/Sucumbios/Ecu/03 (028/03) O/Sucumbios/Ecu/04 (02/04) O/Ecuador/02-.G.II O1/Campos/Bra/58 O1/BFS 1860/UK/67 (1) O1/Lausanne/Switzerland/65 O/Murchin/GDR/82 O/Zusmarshausen/FRG/84 O1/Kaufbeuren/FRG/66 O/Caseros/Argentina/67 O/Yrigoyen/Argentina/82 O/Merida/Ven/04 (21237/04) O/Trujillo/Ven/05 (21378/05 O/Zulia/Ven/05 (21386/05 BHK) O1/Lombardy/Italy/46 O2/Brescia/Italy/47 O/Los Andes/La Paz/Bol/02 O3/Venezuela/51 O1/Navirai/Br/98 O1/Artigas/Uruguay/00 O/Canindeyu/Par/02 O/Argentina/00 O1/Joia/Brasil/00 O/Chaco/Tarija/Bol/00 O/Pozo Hondo/Par/03 O/Eldorado/MS/Bra/05 (4593-50056-2) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4593-50056-3) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4583-10) O/Japora/MS/Bra/05 (814-4) O/Japora/MS/Bra/05 (837-4) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4583-9) O/Eldorado/MS/Bra/05 (815-3) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4523-2) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4523-3) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4523-4) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4583-7) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4583-8) O/Eldorado/MS/Bra/05 (4583-11) O ISA 1 74 O JAV 5 72 O TAW 81 97 O PHI 7 96 O HKN 14 82 O ISA 1 62 O ISA 8 83 UKG/12/2001 UKG/3/2001 O IRQ 30 2000 O SAU 38 98 O1 Manisa Turkey 69 O A CHA 58 O/Golan/Israel/81 O VIT 7 97 O CAM 2 98 O TAI 4 99 O ALG 1 99 O CIV 8 99 O GHA 5 93 O UGA 5 96 O KEN 2 95(K10 95) O KEN 83 79
0.02
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[ 1] #O1/Campos/Bra/58 [ 2] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4583-9) [ 3] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(815-3) [ 4] #O/Japora/MS/Bra/05-(814-4) [ 5] #O/Japora/MS/Bra/05-(837-4) [ 6] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4523-2) [ 7] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4523-3) [ 8] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4523-4) [ 9] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4583-7) [10] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4583-8) [11] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4583-10) [12] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4583-11) [13] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4593-50056-2) [14] #O/Eldorado/MS/Bra/05-(4593-50056-3) [15] #O1/Joia/Brasil/00 [16] #O/Chaco/Tarija/Bol/00 [17] #O/Pozo_Hondo/Par/03 [18] #O/Ecuador/02-G.III [19] #O/Napo/Ecu/03_(009-03) [20] #O/Sucumbios/Ecu/03_(016-03) [21] #O/Loja/Ecu/03_(027-03) [22] #O/Sucumbios/Ecu/03_(028-03) [23] #O/Lima/Per/2004(1660) [24] #O/Sucumbios/Ecu/04_(02-04) [25] #O/Cotopaxi/Ecu/04_(034-04) [26] #O/Guayas/Ecu/04_(057-04) [27] #O/Pichincha/Ecu/04_(050-04) [28] #O/Pichincha/Ecu/04_(064-04) [29] #O/Cotopaxi/Ecu/04_(067-04) [30] #O/Los_Rios/Ecu/04_(071/04) [31] #O/Carchi/Ecu/04_072-04) [32] #O/Los_Rios/Ecu/04_(074/04) [33] #O/Esmeraldas/Ecu/04_(097/04) [34] #O/Cotopaxi/Ecu/04-(099/04) [35] #O/Imbabura/Ecu/04_(101/04) [36] #O/Pichincha/Ecu/04_(106-04) [37] #O/Merida/Ven/04_(21237/04) [38] #O/Trujillo/Ven/05_(21378/05) [39] #O/Zulia/Ven/05_(21386/05-BHK)
Analysis : Pairwise distance calculation Model : Nucleotide: p-distance d : Estimate
CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS 1
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Matriz de distancias genéticas (p= n° de mutaciones/n° total de nucleótidos) entre los aislamientos estudiados y muestras relevantes del banco de datos
Figura 2. Continuación
Figura 3. Relaciones filogenéticas, determinadas con la secuencia completa de la región que codifica para la proteína VP1 (639n), para el Virus de la Fiebre Aftosa, tipo A
Fiebre Aftosa Tipo A
A/Antioquia/Col/97 A/Cundinamarca/Col/97 A/Cordoba/Col/97 A32/Venezuela/70 A/Merida/Ven/05 (21369/05) A/Merida/Ven/05 (21374/05) A16/Belem/Bra/59 A24/Cruzeiro/Bra/55(PANAFTOSA) A24/Bogota/Cundinamarca/Col/05(EPITELIO) A/Ecuador/79 A/Peru/00 A/Peru/99 A/SaoCarlos/Bra/84 A26/Argentina/66 A/RS/Bra/81 A/Venceslau/Bra/76 A/Argentina/79 A79/Brasil/79 A79/Bage/Bra/76 A/Apure/Ven/05 (21335/05) A/Yaracuy/Ven/04 (201270/04) A/Tachira/Ven/04 (21203/04) A/Tachira/Ven/04 (21211/04) A/Tachira/Ven/04 (21229/04) A/Barinas/Ven/04 (21218/04) A/Barinas/Ven/04 (21238/04) A/Tachira/Ven/05 (21351/05) A24/Bra/70 Panaftosa A76/Argentina/76 A29/Peru/69 A/La Pampa/Argentina/87 A/Utracan/Arg/87 A/Argentina/00 A/RS/Bra/01 A/TyT/Uru/01 A/Rivadavia/BsAs/Arg/01 A/Argentina/81 A/Buenos Aires/Argentina/87 A/25 de Mayo/Arg/87 A/Castellanos/Arg/87 A/Santa Fe/Argentina/87 A/Tibu/Col/04 A/Tachira/Ven/04 (20904/04) A/Colombia/84 A/Ecuador/75 A18/Zulia/Ven/62 A27/Colombia/67 A27/Cundinamarca/Col/76 A10/Argentina/68 A19/Suipacha/Arg/62 A17/Guarulhos/Bra/59 A25/Argentina/59 A/Beni/Bol/02 A/RS/Bra/97 A/Oruro/Bol/01 A/Cochabamba/Bol/01 A/Sta Cruz/Bol/01 A isolate a23kenya a15thailand A/IND/84/2000 A22/India/17/77 A22/IRQ/24/64
0.02
CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS
15
[ 1] #A24/Cruzeiro/Bra/55 [ 2] #A/Tibu/Col/04 [ 3] #A24/Bogota/Cundinamarca/Col/05 [ 4] #A/Tachira/Ven/04_(20904/04) [ 5] #A/Tachira/Ven/04_(21203/04) [ 6] #A/Tachira/Ven/04_(21211/04) [ 7] #A/Barinas/Ven/04_(21218/04) [ 8] #A/Tachira/Ven/04_(21229/04) [ 9] #A/Yaracuy/Ven/04_(201270/04) [10] #A/Barinas/Ven/04_(21238/04) [11] #A/Apure/Ven/05_(21335/05) [12] #A/Tachira/Ven/05_(21351/05) [13] #A/Merida/Ven/05_(21369/05) [14] #A/Merida/Ven/05_(21374/05) [15] #A/Antioquia/Col/97 [16] #A/Cordoba/Col/97 [17] #A/Cundinamarca/Col/97 [18] #A/Colombia/84 [19] #A/Ecuador/75 [20] #A/Ecuador/79 [21] #A/Peru/00 [22] #A/Peru/99 [23] #A/Venceslau/Bra/76 [24] #A79/Brasil/79 [25] #A/Argentina/79 [26]#A/SaoCarlos/Bra/84 [27]#A/Argentina/81 [28]#A/Castellanos/Arg/87 [29] #A/Argentina/00 [30] #A/Rivadavia/BsAs/Arg/01 [31] #A/Cochabamba/Bol/01 [32] #A/Oruro/Bol/01 [33] #A/Sta_Cruz/Bol/01 [34] #A/Beni/Bol/02 [35] #A/RS/Bra/01 [36] #A/TyT/Uru/01 [37] #A/RS/Bra/97 [38] #A/RS/Bra/81 [39] #A/Utracan/Arg/87 [40] #A27/Colombia/67 [41] #A27/Cundinamarca/Col/76 [42] #A29/Peru/69 [43] #A32/Venezuela/70
16 Matriz de distancias genéticas (p= n° de mutaciones/n° total de nucleótidos) entre los aislamientos estudiados
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 ] [ 1] [ 2] 0.19 [ 3] 0.00 0.19 [ 4] 0.19 0.04 0.19 [ 5] 0.14 0.20 0.14 0.20 [ 6] 0.14 0.20 0.14 0.20 0.01 [ 7] 0.14 0.19 0.14 0.19 0.02 0.02 [ 8] 0.15 0.20 0.15 0.19 0.02 0.02 0.02 [ 9] 0.14 0.20 0.14 0.19 0.03 0.03 0.04 0.04 [10] 0.15 0.20 0.15 0.20 0.02 0.02 0.02 0.03 0.04 [11] 0.13 0.19 0.13 0.18 0.06 0.06 0.07 0.07 0.07 0.07 [12] 0.14 0.20 0.14 0.20 0.03 0.03 0.02 0.03 0.04 0.02 0.06 [13] 0.12 0.18 0.12 0.18 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.16 0.17 [14] 0.12 0.18 0.12 0.18 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.16 0.17 0.00 [15] 0.11 0.18 0.11 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.17 0.18 0.12 0.12 [16] 0.11 0.19 0.11 0.20 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.17 0.18 0.12 0.12 0.09 [17] 0.11 0.18 0.11 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.17 0.18 0.12 0.12 0.02 0.08 [18] 0.16 0.14 0.16 0.14 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.18 0.18 0.19 0.17 0.17 0.18 0.18 0.18 [19] 0.14 0.12 0.14 0.13 0.19 0.18 0.18 0.19 0.19 0.19 0.19 0.18 0.17 0.17 0.16 0.17 0.16 0.10 [20] 0.10 0.18 0.10 0.17 0.16 0.16 0.15 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.13 0.13 0.12 0.14 0.13 0.14 0.14 [21] 0.13 0.19 0.13 0.20 0.17 0.17 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.18 0.18 0.17 0.20 0.17 0.17 0.18 0.10 [22] 0.15 0.21 0.15 0.21 0.18 0.18 0.17 0.18 0.17 0.18 0.18 0.18 0.19 0.19 0.18 0.20 0.18 0.19 0.20 0.11 0.04 [23] 0.13 0.21 0.13 0.20 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.16 0.14 0.16 0.15 0.15 0.16 0.17 0.16 0.18 0.18 0.14 0.16 0.16 [24] 0.16 0.23 0.16 0.22 0.19 0.18 0.18 0.18 0.19 0.18 0.18 0.19 0.19 0.19 0.18 0.19 0.18 0.21 0.21 0.16 0.20 0.19 0.09 [25] 0.13 0.20 0.13 0.20 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.15 0.18 0.16 0.17 0.18 0.13 0.17 0.17 0.07 0.05 [26] 0.15 0.20 0.15 0.19 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.18 0.17 0.18 0.18 0.18 0.19 0.19 0.19 0.17 0.18 0.14 0.18 0.19 0.15 0.19 0.16 [27] 0.13 0.17 0.13 0.16 0.18 0.18 0.17 0.18 0.17 0.18 0.16 0.18 0.15 0.15 0.14 0.18 0.15 0.18 0.15 0.14 0.18 0.19 0.17 0.18 0.15 0.17 [28] 0.15 0.17 0.15 0.16 0.18 0.18 0.18 0.18 0.17 0.18 0.17 0.18 0.16 0.16 0.16 0.19 0.16 0.18 0.15 0.15 0.19 0.19 0.18 0.18 0.16 0.17 0.05 [29] 0.16 0.18 0.16 0.17 0.20 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.18 0.20 0.18 0.18 0.17 0.20 0.17 0.18 0.17 0.15 0.20 0.20 0.17 0.20 0.18 0.17 0.11 0.12 [30] 0.15 0.16 0.15 0.16 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.16 0.19 0.16 0.18 0.15 0.17 0.19 0.20 0.17 0.19 0.16 0.18 0.08 0.06 0.11 [31] 0.14 0.18 0.14 0.18 0.19 0.19 0.18 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.16 0.16 0.16 0.19 0.16 0.17 0.16 0.15 0.17 0.18 0.15 0.17 0.14 0.18 0.16 0.17 0.16 0.16 [32] 0.15 0.18 0.15 0.18 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.20 0.16 0.16 0.16 0.20 0.17 0.17 0.16 0.16 0.18 0.18 0.15 0.17 0.15 0.18 0.17 0.17 0.16 0.17 0.00 [33] 0.14 0.18 0.14 0.18 0.19 0.19 0.18 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.16 0.16 0.16 0.19 0.16 0.17 0.16 0.15 0.17 0.18 0.15 0.17 0.14 0.18 0.16 0.17 0.16 0.16 0.00 0.00 [34] 0.14 0.17 0.14 0.18 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.15 0.15 0.14 0.17 0.15 0.17 0.15 0.14 0.16 0.17 0.15 0.17 0.15 0.18 0.14 0.15 0.16 0.15 0.06 0.07 0.06 [35] 0.14 0.17 0.14 0.16 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.16 0.18 0.16 0.19 0.16 0.16 0.20 0.20 0.17 0.18 0.16 0.18 0.08 0.07 0.12 0.02 0.17 0.17 0.17 0.15 [36] 0.14 0.17 0.14 0.17 0.17 0.17 0.16 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.16 0.16 0.15 0.18 0.16 0.18 0.15 0.16 0.19 0.19 0.17 0.19 0.16 0.18 0.08 0.07 0.12 0.01 0.16 0.16 0.16 0.14 0.01 [37] 0.15 0.18 0.15 0.17 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.19 0.18 0.18 0.17 0.20 0.17 0.17 0.16 0.16 0.18 0.18 0.16 0.18 0.16 0.19 0.17 0.17 0.17 0.16 0.05 0.05 0.05 0.07 0.17 0.16 [38] 0.14 0.20 0.14 0.19 0.18 0.18 0.17 0.18 0.17 0.18 0.15 0.18 0.19 0.19 0.17 0.19 0.17 0.18 0.18 0.14 0.18 0.17 0.11 0.13 0.10 0.16 0.12 0.14 0.15 0.15 0.17 0.17 0.17 0.17 0.15 0.15 0.18 [39] 0.15 0.21 0.15 0.19 0.20 0.20 0.19 0.19 0.18 0.19 0.17 0.20 0.19 0.19 0.17 0.19 0.17 0.19 0.19 0.15 0.19 0.20 0.18 0.20 0.17 0.17 0.09 0.11 0.13 0.13 0.19 0.20 0.19 0.18 0.14 0.14 0.19 0.14 [40] 0.14 0.15 0.14 0.14 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.17 0.18 0.17 0.17 0.17 0.18 0.17 0.13 0.12 0.15 0.20 0.20 0.18 0.20 0.16 0.17 0.14 0.16 0.17 0.16 0.15 0.15 0.15 0.13 0.16 0.16 0.15 0.17 0.17 [41] 0.13 0.14 0.13 0.14 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.16 0.16 0.17 0.17 0.17 0.17 0.17 0.14 0.11 0.15 0.19 0.20 0.17 0.20 0.15 0.16 0.14 0.15 0.17 0.15 0.15 0.15 0.15 0.13 0.15 0.15 0.15 0.17 0.16 0.04 [42] 0.11 0.17 0.11 0.16 0.16 0.15 0.15 0.16 0.14 0.15 0.15 0.16 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.16 0.15 0.13 0.16 0.16 0.15 0.17 0.14 0.16 0.11 0.11 0.15 0.12 0.16 0.16 0.16 0.14 0.12 0.12 0.16 0.14 0.15 0.13 0.13 [43] 0.07 0.16 0.07 0.17 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.15 0.15 0.10 0.10 0.09 0.10 0.09 0.15 0.13 0.11 0.17 0.18 0.15 0.17 0.14 0.16 0.14 0.15 0.17 0.16 0.15 0.15 0.15 0.13 0.15 0.15 0.15 0.16 0.16 0.14 0.13 0.13 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42
Data Type : Nucleotide (Coding) Analysis : Pairwise distance calculation d : Estimate
Figura 3. Continuación
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Figura 4. Relaciones filogenéticas, determinadas con la secuencia parcial de la región que codifica para la proteína P (~410 n), para el Virus de la Estomatitis Vesicular, tipos New Jersey e Indiana
Estomatitis Vesicular New Jersey (NJ) Indiana (Ind)
NJ/Ecuador/04 (032/04) NJ/Ecuador/04 (028/04) NJ/Ecuador/04 (029/04) NJ/Ecuador/04 (023/04) NJ/Ecuador/04 (019/04) NJ/Ecuador/04 (008/04) NJ/Ecuador/04 (014/04) NJ/Ecuador/04 (022/04) NJ/Ecuador/04 (011/04) NJ/Ecuador/85 NJ/Ecuador/04 (007/04) NJ/Ecuador/04 (027/04) NJ/Costa Rica/66 VSV-New Jersey Ogden Strain (Spiropoulou 1993) Ind1/Costa Rica/72 Ind1/Costa Rica/79 Ind/Ecuador/04(010/04) VSV-Indiana-Glasgow strain (Vandepol 1986) Ind1/El Salvador/78 Ind1/El Salvador/71
0.05
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17
Figura 4. Continuación Matriz de distancias genéticas (p= n° de mutaciones/n° total de nucleótidos) entre los aislamientos estudiados.
Analysis : Pairwise distance calculation Model : Nucleotide: p-distance No. of Sites : 408 d : Estimate [ 1] #VSV-New Jersey Jersey Ogden Strain (Spiropoulou 1993) [ 2] #NJ/Costa_Rica/66 [ 3] #NJ/Ecuador/85 [ 4] #NJ/Ecuador/04 (007/04) [ 5] #NJ/Ecuador/04 (008/04) [ 6] #NJ/Ecuador/04 (011/04) [ 7] #NJ/Ecuador/04 (014/04) [ 8] #NJ/Ecuador/04 (019/04) [ 9] #NJ/Ecuador/04 (022/04) [10] #NJ/Ecuador/04 (023/04) [11] #NJ/Ecuador/04 (027/04) [12] #NJ/Ecuador/04 (029/04) [13] #NJ/Ecuador/04 (032/04) [14] #NJ/Ecuador/04 (028/04) [15] #VSV-Indiana-Glasgow_strain_Vandepol_1986 [16] #Ind1/Costa_Rica/72 [17] #Ind1/Costa_Rica/79 [18] #Ind1/El_Salvador/78 [19] #Ind1/El_Salvador/71 [20] #Ind1/Ecuador/04 (010/04) 1 [ 1] [ 2] [ 3] [ 4] [ 5] [ 6] [ 7] [ 8] [ 9] [10] [11] [12] [13] [14] [15] [16] [17] [18] [19] [20]
18
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
0.17 0.20 0.11 0.19 0.10 0.05 0.22 0.12 0.02 0.07 0.21 0.12 0.03 0.06 0.03 0.22 0.12 0.02 0.07 0.00 0.03 0.22 0.12 0.02 0.07 0.00 0.03 0.00 0.22 0.13 0.02 0.07 0.01 0.03 0.01 0.01 0.22 0.12 0.02 0.07 0.00 0.03 0.00 0.00 0.01 0.19 0.10 0.05 0.01 0.07 0.06 0.07 0.07 0.07 0.07 0.22 0.12 0.02 0.07 0.00 0.03 0.00 0.00 0.01 0.00 0.07 0.22 0.12 0.02 0.07 0.00 0.03 0.00 0.00 0.01 0.00 0.07 0.00 0.22 0.13 0.02 0.07 0.00 0.03 0.01 0.00 0.01 0.00 0.07 0.00 0.00 0.54 0.53 0.56 0.54 0.56 0.55 0.56 0.56 0.56 0.56 0.54 0.56 0.56 0.56 0.52 0.52 0.54 0.55 0.53 0.53 0.54 0.53 0.54 0.53 0.54 0.53 0.53 0.54 0.21 0.57 0.55 0.56 0.56 0.56 0.55 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.15 0.20 0.55 0.54 0.56 0.55 0.56 0.55 0.56 0.56 0.56 0.56 0.55 0.56 0.56 0.56 0.06 0.21 0.15 0.56 0.54 0.56 0.55 0.56 0.55 0.56 0.56 0.56 0.56 0.55 0.56 0.56 0.56 0.05 0.20 0.14 0.01 0.53 0.53 0.56 0.55 0.55 0.55 0.56 0.55 0.56 0.55 0.54 0.55 0.55 0.56 0.06 0.20 0.14 0.08 0.07 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19
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3. INVESTIGACIÓN SEROEPIDEMIOLÓGICA El laboratorio ha cooperado en la interpretación de las investigaciones seroepidemiológicas para monitoreo de actividad viral en la región mediante I-ELISA 3ABC / EITB y para cobertura vacunal mediante ELISA-CFL. Apoyó al LIDIVET, Bolivia, SENASA, Argentina, ICA, Colombia y al DDA, Brasil en los enfoques de ejecución e interpretación de las encuestas serológicas realizadas en los Países, muchas de las cuales fueron presentadas ante la OIE como apoyo al reconocimiento de áreas libres.
4. SUMINISTRO DE REACTIVOS DE REFERENCIA PARA DIAGNÓSTICO El laboratorio de PANAFTOSA prestó asistencia técnica a los países en el suministro y control de calidad de insumos de laboratorio, para actividades de diagnóstico e investigaciones relacionadas a la vigilancia epidemiológica de la fiebre aftosa y otras enfermedades confundibles. En la siguiente tabla se resumen los biológicos (A) o kits completos (B) entregados a los diferentes países para la ejecución de las pruebas correspondientes.
A. Set de biológicos para el número indicado de ensayos País Tests
Argentina
Tipificación ELISA-SI (FA/EV)
1.400
Bolivia
ELISA CFL SeroEpidemiologia EV ELISA CFL Control Vacuna (FA)
10 ml*
49.000
53.000
12.000
5.000
8.000
3.000
168.000 11.000
(FA)
ELISA CFS-LA
2.000
Colombia
14 ml*
9.000
IDGA-VIAA IDGA-LA
Chile
Ecuador
2100
FC 50% (FA/EV) (Suero Hiperinmune) ELISA CFL SeroEpidemiologia FA
Brasil
2.000
15 ml*
Paraguay
Peru
700
350
Total
700
5.250
64 ml*
25.000
2.000
7.000
3.000
154.000
4.000
31.000
13.000
261.000
2.000
2.000
ELISA CFSIBR
Venezuela
25ml*
18.000
70.000
2.000
Uruguay
16.000 11.000
1.000 2.000
17.000 3.000
2.000
4.000
* Suero hiperinmune para tipificación y subtipificación
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B. Kits completos para el número indicado de ensayos Tests
Argentina
I-ELISA 3ABC EITB
Bolivia
Brasil
Chile
Colombia
Ecuador
Paraguay
Peru
Uruguay
Venezuela
Otros
8.800
166.320
7.920
48.400
6.160
35.200
5.280
7.040
2.640
IZS, rescia
26.400
200
11.200
800
8.000
600
Total
880 73.920
7.000
200
359.040
54.000
Se concluyeron las acciones para presentación de los kits que conforman el sistema I-ELISA 3ABC / EITB para bovinos para su registro en OIE. Se iniciaron las acciones para presentación de dichos kits para su registro en los países de la Región. Asimismo, han sido producidas y distribuidas líneas de células BHK, IBRS II, MDBK, PK 15 y Vero para diagnóstico y producción de inmunobiológicos a Argentina, Brasil, Paraguay y Venezuela. Se distribuyeron cepas de virus para producción de vacuna antiaftosa a Paraguay y Venezuela y a Brasil, cepas de virus de estomatitis vesicular para realización de pruebas de virus neutralización. Se enviaron a Ecuador sueros hiperinmunes de cobayo monovalente para diagnóstico de IBR. Se distribuyeron bloques de tejidos incluidos en parafina para control positivo de referencia y reactivos para la prueba de inmunohistoquímica para BSE a Chile, Nicaragua, Panamá y Uruguay. Se mejoró la composición del set ELISA-CFL para evaluación de anticuerpos contra FA con la inclusión de los sueros bloqueadores. Esta en proceso un estudio de estabilidad y período de validez del tampón de dilución para posterior inclusión en el set. Paralelamente se evalúa la posibilidad de incluir además el conjugado comercial. Se prevé que para el segundo semestre del 2006 se cuente con estos componentes en el set. Se efectuaron estudios de factibilidad para distribuir los sets de ELISA para detección de anticuerpos de IBR y lengua azul, con placas sensibilizadas. Esta experiencia demostró que el antígeno preparado en la forma actual no tiene estabilidad suficiente a temperatura ambiente o de refrigeración para transporte de varios dias, por lo que se descontinuó la evaluación.
5. ARMONIZACIÓN REGIONAL E INTERNACIONAL, ESTANDARIZACIÓN DE MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO Y CONTROL DE VACUNA E IMPLEMENTACIÓN DE SISTEMAS DE CALIDAD. En respuesta a la III resolución de la XXXI COSALFA que ratificó las conclusiones y recomendaciones de la Segunda Reunión de Especialistas de Laboratorio en Enfermedades Vesiculares, se creó un grupo ad hoc para vacuna antiaftosa con integrantes de los servicios oficiales y de la industria de producción de vacuna antiaftosa, y se coordinó la primer reunión de dicho grupo que tuvo lugar en PANAFTOSA. De las recomendaciones derivadas de la misma (Anexo 1) se
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destaca la referida al control de la eventual interferencia de proteínas no capsidales remanentes en las vacunas en muestreos serológicos, que propone las pautas a ser implementadas en los nuevos registros y actualización de los ya vigente, así como para el control oficial de series. En respuesta a la VI resolución de la XXX COSALFA, y la III resolución de la XXXI COSALFA que ratificaron las conclusiones y recomendaciones de la Primera y Segunda Reunión de Especialistas de Laboratorio en Enfermedades Vesiculares, respectivamente, se coordinó el “III Taller Internacional de Especialistas de Laboratorio en Enfermedades Vesiculares”. Durante el mismo, se propusieron recomendaciones (Anexo 2) tendientes a optimizar los instrumentos de diagnóstico utilizados en la Región y a lograr el uso armonizado y la equivalencia en la utilización de los mismos. Se resalta la Declaración relacionada al establecimiento de una infraestructura adecuada de Bioseguridad Nivel 3A, apropiada para el trabajo de referencia. Se continuo con el programa de control de calidad externo para las pruebas que conforman el sistema I-ELISA 3ABC / EITB. Participaron 9 laboratorios de 7 países de América del Sur. En los casos necesarios se están implementando medidas correctivas. Con la estrecha colaboración de los Laboratorios de los Servicios Nacionales de los Países, se avanzó considerablemente en la validación del sistema I-ELISA 3ABC / EITB para ovinos y se se dio inicio a la elaboración de los documentos para el reconocimiento de OIE, siguiendo el nuevo formato de OIE/FAO para validación/registro de ensayos de diagnóstico. Se participó en las actividades que derivaron del taller coordinado por el proyecto de la Unión Europea FMD-ImproCom que tuvo lugar en el Instituto Zooprofiláctico Experimental de la Lombardia y de la Emilia, IZS, Brescia, Italia, en Mayo 2004 que incluyó el estudio de aproximadamente 2500 sueros bovinos, 800 sueros ovinos y 100 de porcinos de varias regiones y situaciones epidemiológicas del mundo, así como de numerosos modelos experimentales. Dicho taller tuvo como objetivo principal analizar el desempeño comparativo de kits disponibles en Europa con el kit de PANAFTOSA definido como index test por la OIE. Las actividades correspondientes al año 2005 implicaron la definición de enfoques para la evaluación de los resultados y su análisis, así como el establecimiento de las pautas para la aplicación de estos métodos para la vigilancia durante emergencias sanitarias. Asimismo se participó activamente en las discusiones y en la elaboración de las publicaciones relacionadas a esta materia. PANAFTOSA participó en la reunión de consultores de la Agencia Internacional de Energía Atómica sobre técnicas moleculares aplicadas al diagnóstico y vigilancia de Fiebre Aftosa, en la cual se examinaron los últimos desarrollos en materia del uso de técnicas moleculares para el diagnóstico rápido, preciso, definitivo y de calidad, y para la caracterización genotipica del virus de la fiebre aftosa. La meta es armonizar protocolos, procedimientos operativos patrón (POPs), etc., para el uso específico de estas técnicas para el objetivo propuesto, y siguiendo las guías de OIE para el registro de tests. Se resaltaron los avances realizados en el enfoque diagnóstico de PCR tiempo real. CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS
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En esta última temática se destaca la adquisición por PANAFTOSA de un equipo para PCR tiempo real, que facilita el estudio de un gran número de muestras. Esto abrió la posibilidad de la aplicación de esta técnica para otras enfermedades, así como la capacitación de profesionales de los servicios nacionales en esta metodología. En relación a la gestión del sistema de calidad en PANAFTOSA se avanzó en la redacción de los procedimientos operativos patrón (POP) vinculados a la producción de kits y se fortaleció el sistema de trazabilidad de registros de procedimientos y su seguimiento electrónico. Se participó en el grupo ad hoc de la Comisión Científica de la OIE sobre banco de antígenos y vacunas, a partir del cual se han acordado las acciones básicas para constituir una red de laboratorios de referencia de OIE, incluyendo la elaboración de un “memorando de entendimiento” para la constitución de la misma bajo los auspicios compartidos de OIE y FAO. Los principales objetivos de dicha red se relacionan a: recopilar, generar, analizar y disponibilizar información de laboratorio sobre la ocurrencia mundial y dispersión de fiebre aftosa y sobre la caracterización de los virus actuantes; brindar recomendaciones sobre selección de cepas de vacuna para la implementación de medidas de control y para bancos de antígenos para vacuna; ofrecer expertise a OIE y FAO y países miembros para asistir en el control de fiebre aftosa; armonizar enfoques para la caracterización de virus de la fiebre aftosa y aumentar la competitividad y optimizar la interacción entre los laboratorios de referencia de OIE. Igualmente se propuso la elaboración de un informe anual unificado acerca de los resultados de los laboratorios de referencia de OIE, el cual ya fue consolidado en el informe 2005.
Los
laboratorios trabajarán juntos para establecer un sistema de información “on line”. Se acordaron acciones para desarrollar una red de bancos de antígenos y vacuna. En este contexto y para dar respuesta a las necesidades urgentes de armonización de metodologías se iniciaron las acciones tendientes a la definición de cepas de referencia regional. Fue ampliamente discutido el tema de caracterización de muestras en la región (diagnóstico primario y molecular) y los criterios de clasificación de las colecciones de cepas virales existentes en PANAFTOSA, acordandose con la iniciativa de categorizar las cepas existentes en la colección. Tres niveles de categoría y disponibilidad de acceso fueron discutidos y aceptados por los representantes de los países de la región durante la III Reunión de expertos de laboratorio, referida anteriormente. Se inició la consulta a los países para la constitución final de las listas de cada categoría identificada. PANAFTOSA brindó colaboración en el desarrollo de una nueva sección sobre “vaccine matching” para el capítulo de fiebre aftosa del manual terrestre de OIE, y para una revisión más extensa del tema para publicación en la OIE Revue scientifique en Diciembre 2005. Se hicieron gestiones ante OIE para re introducción de ELISA-CFL como test prescrito para movimientos de importación/exportación, en el Manual de Standards de Tests diagnósticos y de control de vacuna, tema que fue considerado por la comisión de standares biológicos de OIE.
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Se elaboró la encuesta de actualización del diagnóstico diferencial de la región la que fue contestada por todos los países participantes. De esta encuesta se puede observar que el diagnóstico diferencial en la actualidad es basado en cuatro enfermedades virales, Estomatitis Vesicular, IBR, BVD y Lengua Azul.
6. PREPARACIÓN Y SUMINISTRO DE ESTÁNDARES DE REFERENCIA INTERNACIONAL En cooperación estrecha con los países de Sudamérica, se evaluaron, prepararon y validaron paneles de evaluación para ensayos que detectan anticuerpos contra proteínas no capsidales. La preparación de estos sueros incluyó una extensiva caracterización, así como pruebas de evaluación interna. Comprenden aproximadamente 20 sueros reactivos al sistema en distintos rangos de reactividad, 10 sueros negativos y 2 sueros de animales vacunados con conocida interferencia al sistema. Los tres sueros estándares de referencia (control positivo, débil positivo y negativo) para uso en ensayos de diagnóstico basados en la detección de proteínas no capsidales preparados en el año 2004 fueron elevados para reconocimientos internacional de OIE, y aceptados. Se dio inicio a la preparación de paneles de sueros bovinos vacunados y re-vacunados con vacuna antiaftosa comercial trivalente (O1, A24 y C3) de formulación oleosa. En colaboración con tres países de la región se está formando la colección de sueros para validación regional del ELISA competición fase sólida.
7. INVESTIGACIÓN En colaboración con el Departamento de Ciencias Clínico-Veterinarias de la Universidad de Liverpool, UK, se analizaron y resumieron los resultados del sistema I-ELISA 3ABC / EITB en modelos de regiones endémicas de Cameroon. Los resultados de estos modelos con otros tests disponibles comercialmente fueron utilizados para evaluar el uso del enfoque “latent class” como alternativa útil para evaluación de ensayos en ausencia de un test “gold Standard” (TAGS), estudio que fue elevado para publicación en la revista Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology Se continuo con los estudios de colaboración del taller organizado por la Unión Europea, proyecto FMD-ImproCom sobre tests que utilizan proteínas no capsidales que se llevó a cabo en el IZS, Brescia, Italia. Este taller tuvo como objetivo evaluar comparativamente los tests existentes comercialmente en Europa con el método de I-ELISA 3ABC, index test de OIE, mediante la evaluación de modelos experimentales europeos, así como de muestras de campo de países que integran la Unión Europea, y de Israel, Turquía y Zimbawe. Como mencionado en el item 5., se colaboró en el análisis de los resultados obtenidos y en la preparación de un manuscrito para publicación en Vaccine. Igualmente se está colaborando en la preparación de un manuscrito en materia de aplicación de este tipo de pruebas para emergencia sanitaria.
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Se continuaron los estudios necesarios para la validación del cambio de expresión de resultados de I-ELISA 3ABC de T/C a PP (porcentaje de positividad), con el objetivo de uniformizar el formato a nivel internacional. En colaboración con profesionales del SENASA-Argentina y ICA-Colombia está en fase final el análisis de los muestreos enviados para PANFTOSA para la evaluación de la modificación de expresión de resultados de T/C a Porcentaje de Positividad. Esta evaluación será extendida a modelos de control de vacuna. Como parte de un proyecto de colaboración Comisión para Asuntos de Aftosa (CAS) del Sindicato Nacional de Industria de Productos para Salud Animal (SINDAN) de Brasil, del Departamento de Defesa Animal (DDA) del Ministerio da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, (MAPA), Brasil y PANAFTOSA, se completó la validación de la Metodología para cuantificación de proteínas no capsidales en suspensiones virales. El trabajo fue presentada en la reunión ‘’New Diagnostic Technology: Applications in Animal Health & Biologics Controls. Applications in disease surveillance, molecular epidemiology and quality control tests of vaccines´´ realizado 3-5 Octubre 2005 en SaintMalo – France y ha sido aceptada para publicación en el Biologicals. Se amplió el estudio de correlación de inducción de anticuerpos contra proteínas no capsidales mediante el sistema I-ELISA 3ABC / EITB en animales inmunizados en condiciones normales y forzadas, y en la correlación de dichas inducciones con la presencia de proteínas no capsidales en suspensiones virales y con el sistema de producción, así como entre la correlación de los métodos de producción y sus etapas con la presencia de dichas proteínas en las suspensiones virales destinadas a vacuna. En base a las recomendaciones surgidas en el II Taller de especialistas de laboratorio en enfermedades vesiculares, ratificadas en la XXXI COSALFA, conjuntamente con los Servicios Nacionales de Colombia y Argentina se dio inicio a la elaboración de un proyecto para validar el método de detección de proteínas no capsidales en las suspensiones virrales destinadas a vacunas y su correlación con la inducción de anticuerpos en animales inmunizados con vacunas de dichos países. Se obtuvieron hibridomas para la producción de anticuerpos monoclonales para 3ABC, 3A y 3B para evaluar pruebas alternativas para la detección de PNC en vacuna y para el desarrollo de un ELISA de competición para detección de anticuerpos anti-PNC. Dichos hibridomas están en fase de caracterización. Se encuentra en fase final de validación el sistema I-ELISA 3ABC / EITB para uso en porcinos. Pruebas comparativas preliminares realizadas en el taller en Brescia indicaron un desempeño satisfactorio del kit de PANAFTOSA. Conjuntamente con el ICA, Colombia, se avanzó en la validación del mencionado sistema para búfalos. Con la colaboración de tres países de la región se esta formando en PANAFTOSA el banco de virus de enfermedades del diagnostico diferencial, en este momento se cuenta con 32 cepas de BVD 8 de IBR y 4 de Lengua Azul. Estas cepas se han testado en los cultivos celulares recomendados
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(GBK, MDBK, BHK y Vero), en las técnicas de detección de antígeno y en el desarrollo de los PCR con buenos resultados. Un gran avance para el área de epidemiología molecular fue la ampliación del banco genético a cepas actuantes en Venezuela y Ecuador durante los últimos dos años. Se realizó un considerable progreso en la detección de RNA del virus de la fiebre aftosa a partir de PCR en LEF, sometidos a distintos tratamientos. Se dio continuidad a la estandarización del PCR para VSV y se implementó la caracterización de cepas de VSV de New Jersey e Indiana 1 mediante secuenciamiento parcial del gen que codifica para la proteína P. Se iniciaron las acciones para montar la infraestructura laboratorial necesaria para la detección/caracterización molecular de otros rhabdovirus (rabia).
8. EVENTOS INTERNACIONALES Se participó y/o promovió el desarrollo de los siguientes eventos: Reunión del grupo de trabajo del proyecto coordinado por la unión europea FMD ImproCon SSPE-
CT-2003-503603, sobre evaluación comparativa de ensayos diagnósticos que utilizan proteínas no capsidales, Bruselas, Bélgica, 11-14 de Enero. Seminario Internacional sobre obtención y recuperación de estatus sanitario de libre de
enfermedades: marco conceptual y experiencias. Lima, Perú, 7-8 de Marzo. XXXII Reunión Ordinaria de la Comisión Sudamericana de Lucha contra Fiebre Aftosa
(COSALFA). Lima, Peru, 10-11 de Marzo. Reunión sobre “Marker Vaccines and Differential Diagnostic Tests in Disease Control and
Eradication”, Ames, Iowa, 02-07 de Abril. Reunión de la Comisión Permanente de las Américas sobre EET’s en los animales, 11 al 14/04–
Buenos Aires, Argentina Reunión del Grupo Ad Hoc de la Comisión Científica de la OIE sobre bancos de antígenos y
vacunas para fiebre aftosa. Paris, Francia, 13-15 de Abril. Asamblea Ordinaria de la OIE. Paris, Francia, 23-28 de Mayo. Reunión del Grupo ad hoc “producción y control de vacunas antiaftosa”, PANAFTOSA, Río de
Janeiro, Brasil, 01 - 03 de Agosto, 2005. XI Seminario sobre Armonización del Registro y Control de Medicamentos Veterinarios del Comité
de las Américas de Medicamentos Veterinarios (CAMEVET). Montevideo, Uruguay, 12 - 14 de Septiembre.
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Reunión sobre “New Diagnostic Technology Application in Animal Health and Biologics Controls”,
St. Malo, Francia 01 - 04 de Octubre. XXXII Congreso Brasilero de Medicina Veterinaria (CONBRAVET), Uberlândia, MG, Brasil, 17 - 21
de Octubre del 2005. 12 Simposio Internacional de la Asociación Mundial de Laboratorios de Diagnóstico Veterinario
(WAVLD), Montevideo, Uruguay, 16 - 10 de Noviembre. Reunión de Consulta Subregional sobre el Programa Global para el Control Progresivo de las
Enfermedades Transfronterizas de los Animales GF- TADs para la Región Andina. Guayaquil, Ecuador, 28 - 29 de noviembre de 2005. Conferencia Hemisferica de Vigilancia y Prevención de Influenza Aviar, Brasília, DF, Brazil, 30
Noviembre – 2 Diciembre 2005. Reunión de consultores internacionales de la Agencia Internacional de Energía Atómica sobre
técnicas moleculares aplicadas al diagnóstico y vigilancia de Fiebre Aftosa, IAEA, Viena, Austria, 06 – 08 de Diciembre. Taller Internacional de Especialistas de Laboratorio en Enfermedades Vesiculares (Tercera
Reunión del Programa del Proyecto Regional para la Operación Coordinada de la Red de Laboratorios de Salud Animal de América del Sur) PANAFTOSA, Río de Janeiro, Brasil, 23 - 25 de Noviembre.
9. CAPACITACIONES y DISCUSIONES TÉCNICAS A. Entrenamientos individuales en PANAFTOSA Dra. Gisele Santos de Medeiros, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. 14 de Febrero al
11 de Marzo. Cultivo Celular. Dra. Ana Maria Alvarez Rivera, CENIAP-INIA, Venezuela. 6 al 18 de junio. Cultivo Celular, Virus
neutralización. Dra. Florangel Conde Torrealba, CENIAP-INIA, Venezuela. 04 al 18 de Julio . I-ELISA 3 ABC /
EITB. - 19 de Julio al 12 de Agosto; Diagnóstico Molecular. - 01 al 19 de agosto. Biologia molecular y filogenia del virus de enfermedades vesiculares y Detección molecular de virus confundibles con vesiculares. - 28 de Noviembre al 02 de Diciembre. Diagnóstico molecular y filogenia de enfermedades vesiculares Dr. Jorge Ribeiro dos Reis, LANAGRO/PA, Brasil.
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Dra. Mayra Hidalgo Díaz, CENIAP-INIA,Venezuela. 01 al 19 de agosto. Biología molecular y
filogenia de virus de enfermedades vesiculares y Detección molecular de virus confundibles con vesiculares. Virgínia Leo de Almeida Pereira, Facultad de Veterinária de la Universidad Federal Fluminense. 19
a 30 de Septiembre. Instrumentos moleculares para detección y caracterización viral. Gustavo Salgado Jijón, INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE, Quito/Ecuador. 27 de Septiembre al
07 de Octubre. Diagnóstico Diferencial Serológico IBR-DVB-LA con Enfermedades Vesiculares. Alfonso García, SAG, Chile. 07 de Noviembre al 15 de Diciembre. Serología e Identificación de
antígeno de Enfermedades Confundibles con Vesiculares, Diagnóstico Molecular y filogenia de enfermedades vesiculares. Detección molecular de virus confundibles con vesiculares. Salomón Ortiz, SENASA, Perú. 26 de Noviembre al 2 de Diciembre. Serovigilancia de fiebre aftosa
y estomatitis vesicular. Tania Freitas, LANAGRO/MG. 28 de Noviembre al 28 de Diciembre. Técnicas de Epidemiologia
Molecular
B. Programas de postgrado Orientación y conclusión de tesis de doctorado del MS José Junior França de Barros. Universidad
Federal de Río de Janeiro Orientación de tesis de doctorado del MS Renata de Mendonca Campos. Universidad Federal de
Río de Janeiro Orientación y conclusión de tesis de maestría de la biologa Lya Madureira Sepúlveda Universidad Federal Fluminense
C. Visitas para discusiones técnicas Dr. Andrés Pérez - Universidad de Davis, California - 16 de Febrero. Dupont - Nueve profesionales - 28 de Marzo USDA/APHIS - 09 de Mayo - Participantes:
- Dr. Ron DeHaven, APHIS Administrator - Dr. Dan Sheesley, Deputy Administrator; - Mr. Eric Nichols, Director for the America's Trade Policy - Dr. Alan Terrell, APHIS Area Officer. Instituto de Salud Pública de la Comunidad de Madrid - 21 y 22 de noviembre - Participantes:
- Dr. Francisco Orozco (Gerente del Instituto de Salud Pública)
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- Dr. Javier Encinas de Aragón (Jefe de Sección de Sanidad Ambiental e Higiene Alimentaria) - Dr. Ángel Asensio (Director del Laboratorio Regional de Salud Pública)
D. Consultorías a países Brasil, LANAGRO, RS, 26-28 de Abril Interpretación de pruebas para detección de anticuerpos contra proteínas no capsidales. Colombia, ICA, 05-10 de Junio Control de Vacuna en materia de pureza de proteínas no capsidales para garantizar ausencia de interferencia en muestreos serológicos. Paraguay, SENACSA, 05 -10 de Septiembre Interpretación de pruebas ELISA-CFL para detección de anticuerpos contra proteínas capsidales de fiebre aftosa. Brasil, LANAGRO/PA, 15-19 de Septiembre; 25 de Octubre – 8 de Noviembre. Evaluación del sistema de cultivo celular para el diagnóstico virológico Colombia, CEISA-ICA. 12-16 de Diciembre Revisar metodología para procesar muestras de LEF. Argentina, SENASA, CAPROVE (Cámara de Productores del área Veterinaria), 22 de Diciembre Control de Vacuna en materia de pureza de proteínas no capsidales para garantizar ausencia de interferencia en muestreos serológicos. Nicaragua, Laboratorio Central de Diagnóstico Veterinario 5-10 Septiembre Implantación de técnica de inmunohistoquímica para diagnóstico de Encefalopatía Espongiforme Bovina Costa Rica, Laboratorio Nacional, 5-10 Septiembre Evaluación del uso de la técnica de inmunohistoquímica Guatemala, , Laboratorio Nacional, 5-10 Septiembre Evaluación del uso de la técnica de inmunohistoquímica Panamá, , Laboratorio Nacional, 5-10 Septiembre Evaluación del uso de la técnica de inmunohistoquímica
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E. Cursos Curso teórico-práctico: Sistema inmunoenzimático I-ELISA 3ABC / EITB para la vigilancia activa del virus de la fiebre aftosa y para el control de vacuna en materia de pureza de proteínas no capsidales. PANAFTOSA, Rio de Janeiro, Brasil, 24 al 28 de enero. Drs. Flavio Eduardo Ribeiro Soares, José Carlos Morgado y Milton Coelho Barbosa MERIAL
SAÚDE ANIMAL LTDA. Drs. Cibele Monteiro M. Guedes, Paulo Pereira Pinho, VALLÉE S.A Drs Indira Mary Alves Rocha, Kelly Marques de Melo, AKZO NOBEL – INTERVET Dra. Symone Lemos, SCHERING PLOUGH COOPERS Dra. Diocela de Andrade Gonçalves, BAYER HEALTH CARE S.A
10. PARTICIPACIÓN EN PROYECTOS COLABORATIVOS A NIVEL INTERNACIONAL Estudios de colaboración con el Departamento de Ciencias Clínico-Veterinarias de la Universidad de Liverpool, UK en la evaluación de muestreos serológicos en regiones endémicas de Cameroon. Participación en el estudio de la UE sobre desempeño de tests para vigilancia de fiebre aftosa.
11. DISEMINACIÓN DE INFORMACIÓN: PRESENTACIONES A CONGRESOS Y PUBLICACIONES A. Publicaciones Bergmann, I. E., Malirat, V., Neitzert, E and Correa Melo, E. Evaluation of Diagnostic Tools for
Epidemiological Purposes. Application to FMD. In: Makkar HPS and Viljoen GJ. Applications of gene-based technologies for improving animal production and health in developing countries. Netherlands: IAEA 211-244, 2005. Bergmann, I.E., Malirat, V. & Neitzert E. Non-capsid proteins to identify foot-and-mouth disease viral
circulation in cattle irrespective of vaccination. Biologicals, 33 (4), 235-239, 2005. Franca de Barros, J.J. Tesis doctoral, Instituto de Microbiologia UFRJ. Estudo da variacão genetica
de virus da Febre Aftosa durante a infecção persistente em búfalo indiano e durante episódios ocorridos a campo em bovinos 2005. Madureira Sepúlveda, L. Tesis de maestrado, Facultad de Veterianria, Universidad Federal
Fluminense. Reação en cadeia da polimerase com transcrição reversa (RT-PCR) na detecção de variantes virais da estomatite vesicular 2005. CENTRO PANAMERICANO DE FIEBRE AFTOSA – Unidad de Salud Pública Veterinaria – OPS/OMS
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Centro Panamericano de Fiebre Aftosa. Laboratorio: informe anual, 2004. Rio de Janeiro:
PANAFTOSA, 2005. Centro Panamericano de Fiebre Aftosa. Manual de procedimientos de auditoria y evaluación de
programas de fiebre aftosa. Río de Janeiro: PANAFTOSA, 2004. 43p. (Serie de Manuales Técnicos, n. 8) 2005. Informe Taller Internacional de Especialistas de Laboratorio en Enfermedades Vesiculares del Proyecto
Regional para la Operación Coordinada de la Red de Laboratorios de Salud Animal de América del Sur. Río de Janeiro, Brasil, 14-16 de diciembre de 2004. Río de Janeiro: PANAFTOSA, 2005. Bergmann, I.E., Malirat, V & Falczuk, A.J. Evolving perception on the benefits of vaccination as foot-
and-mouth disease control policy: contributions of South America. Expert Review of Vaccines, 4 (6), 903-913, 2005. Paton, D.J., Valarcher, J-F., Bergmann I.E.,, Matlho, O.G., Zakharov, V.M., Palma, E.L. & Thomson,
G.R. Selection of foot-and-mouth disease vaccine strains – a review. OIE Scientific and Technical Review, 25, 3 (2005). Bergmann, I.E., Neitzert, E., Malirat, V., de Mendonça Campos, R., Pulga, M., Muratovik, R.,
Quintino D., Morgado, J.C., Oliveira, M. de Lucca Neto, D. Development of an inhibition elisa test for the detection of non capsid polyprotein 3abc in viral
suspensions destined to inactivated foot-and-mouth disease vaccines. Short title. FMDV non-capsid proteins in viral suspensions. Biologicals En prensa. Darsie, G., Falczuk, A.J. & Bergmann, I.E. Institutos de investigación y seguridad biológica. Special
issue of the OIE Scientific and Technical Review, ‘Preparedness of Veterinary and Public Health Services in responding to accidental and provoked biological disasters’. En Prensa. Bronsvoort, B.M.deC., Toft, N., Bergmann, I.E., Sørensen, K.J., Anderson, J., Malirat, V., Tanya,
V.N. & Morgan, K.L. Use of a latent class model for parameter estimation of diagnostic tests for footand-mouth disease non-structural protein ELISAs. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. Enviado a publicación. Franca de Barros, J.J., Malirat, V., Rebello, M.A., Costa, E. & Bergmann, I.E. Genetic variation of
foot-and-mouth disease vírus isolates recovered from persistently infected water buffalo (Bubalus bubalis). Veterinary Microbiology. Enviado para publicación. Brocchi, E., Bergmann, I.E.,
Dekker, A.D., Paton, D., Sammin, D., Greiner, M., Grazioli, S., Desimone, F., Yadin, H., Haas, B., Bulut, N., Malirat, V., Neitzert, E., Goris, N., Parida, S., Sorensen, K. & De Clercq K. Comparative evaluation of six ELISAs for the detection of antibodies to the nonstructural proteins of foot-and-mouth disease virus. Vaccine Enviado para publicación.
Paton D. j., Clercq k. de, Greiner, M., Dekker, A., Brocchi, E., Bergmann I.E., Sammin, D., Gubbins,
S. & Cameron A. Application of foot-and-mouth disease (FMD) virus non-structural protein antibody tests in helping to demonstrate disease-freedom after outbreaks of FMD in cattle. Manuscrito en preparación para Veterinary Record
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B. Presentaciones a Congresos / Reuniones Bergmann, I.E. Experiencia de PANAFTOSA –OPS/OMS en el uso del sistema I-ELISA 3ABC /
EITB para vigilancia activa de la fiebre aftosa. Seminario Internacional sobre obtención y recuperación de estatus sanitario de libre de enfermedades: marco conceptual y experiencias. Lima, Perú, 7-8 de Marzo. Bergmann, I.E. XXXII Reunión Ordinaria de la Comisión Sudamericana de Lucha contra Fiebre
Aftosa (COSALFA). Lima, Peru, 10-11 de Marzo. Bergmann, I.E., Malirat, V. & Neitzert, E. Non-capsid proteins to identify foot-and-mouth disease viral
circulation, irrespective of vaccination. Reunión “Marker Vaccines and Differential Diagnostic Tests in Disease Control and Eradication”, Ames, Iowa, 02-07 de Abril. Bergmann, I.E. Vacunación y ensayos diagnósticos para la vigilancia activa de la fiebre aftosa. ICA,
Bogotá, Colombia 12-28 de Junio. Malirat, V. Avances en los estudios de epidemiología molecular del virus de la fiebre aftosa en
América del Sur, Colombia 12-28 de Junio. Campos, R.M., Rebello, M.A. & Bergmann, I.E. Extensão da validação do sistema I-ELISA 3ABC e
EITB para espécie ovina: Avaliação de animais vacinados. III Jornada de Pós-Graduação do IMPPG/UFRJ. Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brasil, 21-23 de Setembro de 2005. Bergmann, I.E., Neitzert, E., Malirat, V., de Mendonça Campos, R., Pulga, M., Muratovik, R.,
Quintino D., Morgado, J.C., Oliveira, M. de Lucca Neto, D. Detection of viral non-capsid proteins in antigens used in inactivated foot-and-mouth disease vaccines. Reunión sobre “New Diagnostic Technology Application in Animal Health and Biologics Controls”, Saint Malo, Francia 3-5 October Bergmann, I.E., Malirat, V. & Neitzert, E. Importância dos testes diagnósticos nas novas estratégias
de controle e erradicação da febre aftosa. XXXII Congreso Brasilero de Medicina Veterinaria (CONBRAVET), Uberlândia, MG, Brasil, 17-21 de Octubre del 2005 Bergmann, I.E., Malirat, V. & Neitzert, E. Diagnostic tools for epidemiological surveillance of foot-
and-mouth disease. Experience in South America. 12 Simposio Internacional de la Asociación Mundial de Laboratorios de Diagnóstico Veterinario (WAVLD), Montevideo, Uruguay, 16-10 de Noviembre. Bergmann, I.E., Malirat, V. Research and field (routine) experience of the use of molecular methods
in diagnosis, surveillance and characterisation with FMDV: experience in South America. Grupo ad hoc IAEA sobre: Molecular techniches applied to FMD diagnosis and surveillance, Viena, Austria. December 6-8, 2005 Reunión de consultores internacionales de la Agencia Internacional de Energía
Atómica sobre técnicas moleculares aplicadas al diagnóstico y vigilancia de Fiebre Aftosa, IAEA, Viena, Austria, 06-08 de Diciembre.
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ANEXO 1
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ANEXO 2
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20:00 hs. Cena de compañerismo em “Barril 1800 o Sindicato do Chopp”.
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16:00 a 16:30 hs. Intervalo para café, despedida y regreso al hotel. 20:00 hs. Cena de Compañerismo em “Barril 1800 o Sindicato do Chopp”
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Editado en febrero de 2006
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