Factores de virulencia bacterianos. Alicia Farinati

Factores de virulencia bacterianos Alicia Farinati Proceso infectivo (Finlay, 1997; Lipschit 1997) Enfermedad Número de microorganismos X Virul

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Factores de virulencia bacterianos

Alicia Farinati

Proceso infectivo

(Finlay, 1997; Lipschit 1997)

Enfermedad

Número de microorganismos X Virulencia Defensa del huésped

Atributos de MO patógenos   

 

Adherencia y penetración Evasión del ataque fagocítico e inmunológico Secreción de proteínas tóxicas para debilitar al huésped y promover la diseminación del patógeno Obtención de nutrientes para crecer (Ej: hierro) Supervivencia en condiciones adversas dentro y fuera del huésped

Anatomía bacteriana Pared celular adhesinas Membrana citoplasmática mesosomas Citoplasma ribosomas flagelos

Acidos nucleicos ADN cromosómico y extracromosómico Estructuras periféricas cápsula capa mucosa

Estructuras bacterianas con importancia clínica  

   

   

 

Bacterias gram positivas Pared celular Acidos teicoicos y lipoteicoicos Cápsula Flagelos Bacterias gram negativas Pared celular Membrana externa LPS Adhesinas Cápsula Flagelos

Contribución Microbiana a las Infecciones  

   

Interacción huésped-parásito Mecanismos de patogenicidad * Adhesividad y adhesinas * Invasividad e invasinas * Agresinas y toxigenicidad * Modulinas y superantígenos * Impedinas y evasión de las defensas del huésped Transmisibilidad Adaptación Proliferación Virulencia en la vida real

Pared celular bacteriana

PC-Bacterias gram positivas

PC-Bacterias gram negativas

NAG----NAM

Bacterias grampositivas 



Peptidoglicano: Liberación de unidades estándar de PG acetilados activan el C´ , producen fiebre AT y ALT : Facilitan la adherencia -Sindrome séptico por liberación de monocinas y citocinas Facilitan la resistencia a la lisozima

Bacterias gramnegativas 

LPS: Mitógeno de las células B Actividad endotóxica Enlace con una proteína sérica (LBP) El LPS-LBP adhiere con el CD14 Los complejos LPS-sCD14 Interleuquina 1 (IL-1) Factor de necrosis tumoral (TNF-alfa) Leucotrieno B4 (LTB4)

Síntesis de la pared celular l UDP-N-acGlc UDP-N-acMur L-ala Cicloserina D-alanil-D-alanil

UDP-N-AcMur tripéptido UDP-N-AcMur pentapéptido

D-ala

CITOPLASMA

---------------------------------------------------------------------

Síntesis de la pared celular ll Lípido-P-P-N-acMur-pentapéptido Lípido-P-P-N-acMur-pentapéptido-N-acGlu Vancomicina Mureína Lípido-P-P

Bacitracina Lípido-P MEMBRANA-------------------------------------------

Síntesis de la pared celular lll Mureína pentapéptido Penicilinas Cefalosporinas Entrecruzamiento Pared celular

Sintesis de la pared celular

Interferencia en la síntesis e inhibición de la interferencia

Actividad de moléculas generadas por bacterias I    

Proteínas de fase aguda Componentes del Complemento Moléculas de adhesión celular endotelial Interleuquinas (IL-1, IL-6, IL-8) IL-1:>PG-liberación de histamina – pirógeno endogeno-promueve IL-2 e IL-6. IL-6: proliferación de células T IL-8:regula adherencia de PMn a células endoteliales –liberación de elastasade los PMN-expresión de selectinas de los PMN

Actividad de moléculas generadas por bacterias II  



 

Leucotrieno (LTB4): Aumenta la permeabilidad vascular - Quimiotáctico Factor activador de plaquetas (PAF): Activación de las plaquetas – adherencia al endotelio-hipotensor Trombomodulina (TM): Enlaza la trombina activa proteína anticoagulante Factor tisular : inicia la coagulación TNF: potencia liberación de IL-6 dependiente del LPS

Factores de virulencia  







Adhesinas : adhesión bacteriana Agresinas: dañan las células o los blancos moleculares en el huésped Invasinas: permiten la entrada del microorganismo en el huésped Modulinas: disparan la producción de citoquinas o moléculas bioactivas similares Impedinas: limitan la efectividad de los factores de defensa del huésped



Receptores de tipo Toll: reconocimiento de patrones



Ligandos: patrones moleculares asociados con patógenos (PAM



PAMP: exclusivamente producidas por patógenos (sujetos a bajas tasas de mutación): LPS, PG, ácidos teicoicos , mananos, ADN bacteriano, ARN de doble cadena y los glicanos.



Receptores de la inmunidad innata reconocen como extraños a los MO



Desencadenan las respuestas que controlan la infección



TLRs en PMN: TLR1, TLR2, TLR4 y TLR5

MODELO EN 2 PASOS DE RESPUESTA INFLAMATORIA Receptor Toll-like normal

Receptor Toll-like anormal Receptor Toll-like Anormal 4

Receptor Toll-like normal 4

Bacteria P fimbriada

Bacteria P fimbriada

Receptor GSL

Receptor GSL

Ceramida

Mediadores de

Inmunidad

Inflamación

Ceramida

No señal

Diferenciación celular

Inflamación

Svanborg C y col. 2001

MODELO EN 2 PASOS DE RESPUESTA INFLAMATORIA

CXCR1

UNIÓN DE LA PROTEÍNA DE TAMMHORSFALL A LA FIMBRIA-1 DE E. coli Fimbria Tipo 1 E. coli Manosa

Proteina

Célula Uroepitelial THP Monómero

THP Oligómero

Manosa Proteina

Receptor Uroplaquina

Modificado de J. Pak. J Biol Chem 2001; 276: 9924-9930

Fases de la vida intracelular de E.coli en las células vesicales (CBI) FASE 1

Bacterias no móviles, multiplicación rápida, formas bacilares

FASE 2

Bacterias no móviles, multiplicación lenta, formas cocoides

FASE 3

Bacterias cubren el citoplasma celular

FASE 4

Bacterias filamentan

Importancia de la filamentación

E.coli en proceso de filamentación

Filamentación • • •

Aparece como respuesta a la inmunidad innata mediada por TLR4 Las bacterias que escapan de la célula son capaces de entrar nuevamente y dar lugar al CBI con una cinética enlentecida Crecimiento intracelular y filamentación

Ventaja para la bacteria : evade a los PMN

Unión

Invasión

Unión

Formación del reservorio

Filamentación

Comunidad CBI temprana

CBI media CBI tardía

Desprendimiento

bacteriana intracelular temprana

CBI madura

Recurrencia

Exfoliación

Differentiation and developmental pathways of uropathogenic Escherichia coli in urinary tract pathogenesis Sheryl S. Justice y cols. PNAS February 3, 2004 vol. 101 no. 5 1333–1338

INTERACCIONES BACTERIA-HUÉSPED PMNL (lisis)

Liberación de la Bacteria Intracelular

Sideróforo

Proteínas de Membrana Externa

Fe3+

Cápsula de Polisacárido Membrana Externa con LPS Especies Reacivas IL-8 del Oxígeno

Ruptura, necrosis y apoptosis de la célula epitelial

Citoquinas Fe3+ PMNL Adhesinas

PMNL

IBC

Receptores

Celula Epitelial (huesped)

IL-1

IL-6

IL-8 CXCR

E. coli ingresando a la célula epitelial

Multiplicación bacteriana dentro de la PMNL célular huesped Persistencia del foco de infección

Johnson JR. Infect Dis Clin N Am.2003;17:261-268

Factores microbianos e IUR Uroplaquina e internalización de E.coli

Vida intracelular

 

IRO: intermediarios reactivos del oxígeno Reducción parcial del oxígeno molecular (estallido respiratorio) 2O2 + NADPH H+

NADPH oxidasa

2O2- + NADP+ +



Péptidos antimicrobianos



Enzimas hidrolíticas



Gránulos: contenido de MPO: peroxidasas positivos: (azurófilos o primarios) peroxidasas negativos: lactoferrina-gelatinasa vesículas secretorias



Programa de homeostasis : limita la destrucción de los tejidos del huésped



Eliminación de los MOs por fagocitosis



Disminución progresiva del reclutamiento de los PMN: cambio del patrón de citoquinas



Apoptosis y fagocitosis de leucocitos apoptóticos por los macrófagos

Transducción de señales intracelulares producidas por el LPS

? MD-2 LBP

TLR4

LPS CD14

TRAF 6

?

IRAK Complejo IkB cinasas

MyD88

? Familia de cinasas

Balance de la expresión de citocinas LPS Respuesta inicial

Moléculas pronflamatorias IL-1 TNF-α IL-6 IFN-γ IL-12

Moléculas antinflamatorias IL-1ra IL-4 sIL-1R IL-10 sTNFR I IL-11 sTNFR II IL-13

SRIS Fiebre Taquicardia Taquipnea GB: > 12.000 mm3, 12.000 mm3,

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