CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGIA –CONCYTSECRETARIA NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGIA-SENACYTFONDO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGIA -FONACYTFACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

INFORME FINAL

PROYECTO FODECYT No. 12-2004 VALIDACION FARMACOLOGICA Y EVALUACION FITOQUIMICA DE EXTRACTOS DE TRES ESPECIES VEGETALES COMERCIALIZADAS EN GUATEMALA COMO SEDANTES-HIPNOTICOS

AMARILLIS SARAVIA GOMEZ Ph.D. Investigadora Principal

GUATEMALA, ENERO DEL 2008.

AGRADECIMIENTOS: La realización de este trabajo, ha sido posible gracias al apoyo financiero dentro del Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología –FONACYT-, otorgado por la Secretaría Nacional de Ciencia y Tecnología – SENACYT- y el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología – CONCYT-

OTROS AGRADECIMIENTOS: Al Departamento de Farmacología, Fisiología, Laboratorio de Productos Naturales LIPRONAT y Bioterio, de la Escuela de Química Farmacéutica de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia de la Universidad de San Carlos de Guatemala, ya que sin el apoyo de esta entidad no hubiera sido posible llevar a cabo toda la parte experimental del proyecto. A las Licenciadas Claudia Roca y María Alejandra Ruiz Mayén por su valioso aporte y conocimiento en la parte Fitoquímica y Farmacología Experimental correspondiente, que concluyó en un excelente trabajo de investigación y un aprendizaje para ellas en el campo que se proyecta a nuestra sociedad y sean cada día mejores profesionales. A Cristian López como técnico de Bioterio, por su gran apoyo en sus conocimientos sobre cuidado, uso y manejo de animales de laboratorio. Al Lic. Armando Cáceres y Licda. Zully Cruz por su colaboración en dicho trabajo de investigación.

AMARILLIS SARAVIA GOMEZ Graduada de Química Farmacéutica de la Universidad de San Carlos de Guatemala en 1974 Graduada en la Facultad de Medicina y Farmacia de la Universidad de Clermont – Ferrand Francia 1978 con el grado de Ph.D. en Farmacología Experimental. Asesora de más de 250 tesis de grado Expresidenta del Colegio de Farmacéuticos y Químicos de Guatemala Editora del Manual de Ensayos Toxicológicos y Farmacológicos experimentales in vivo e in Vitro editorial Universitaria 2005. Más de 50 publicaciones sobre Validación Farmacológica de Plantas Medicinales de uso popular en Guatemala. Consultora en la OMS periodo 1985-1989 Presidenta de la Comisión Nacional para el Aprovechamiento de las Plantas Medicinales 19871992. Jefa del departamento de Farmacología y Fisiología. 1980 a 2008 Miembro ordinario de la Academia de Ciencias Médicas, Físicas y Naturales de Guatemala. Participante en más de 300 eventos cientificos nacionales e internacionales Organizadora de más de 50 eventos científicos nacionales e internacionales Presidenta de la Asociación de Mujeres Científicas de Guatemala 1996-2006 Miembro de la Third World Organization of Women in Science . –TWOWSMiembro del Internacional Council of Laboratory Animal Sciences. –ICLASVice Presidenta del Consejo de Centroamericano de Acreditación de Postgrados –ACAP-20052008.

INDICE DE CONTENIDOS RESUMEN

i

ABSTRACT

ii

PARTE I

1

I.1. Introducción

1

I.2. Planteamiento del Problema I.2.1. Antecedentes I.2.2. Justificación

2 2 3

I.3 Objetivos e Hipótesis I.3.1. Objetivos Generales I.3.2. Objetivos Específico

4 4 4

I.4. Metodología

5

PARTE II

9

II.1. Marco Teórico PARTE III

9 21

III.1 Resultados III.1.1. Tamizaje Fitoquímico III.1.2. Tamizaje Farmacológico

21 21 29

III.2. Discusión de resultados

63

PARTE IV

65

VI.1. Conclusiones

65

VI.2. Recomendaciones

67

VI.3. Referencias

68

VI.4. Anexos

71

Gráficas de Tuckey

71

Fotografías

168

Pasiflora

168

Tilo

169

Valeriana

170

Fitoquímica

171

Bioterio y Ensayos Farmacológicos Experimentales

174

PARTE V V.1. Informe financiero

177 177

INDICE DE TABLAS

Tabla 1. Porcentaje de rendimiento de cada fracción obtenida de las especies vegetales

21

Tabla 2. Aceites Esenciales

22

Tabla 3. Saponinas

23

Tabla 4. Flavonoides

24

Tabla 5. Principios Amargos

25

Tabla 6. Cardenólidos y Bufadienólidos

26

Tabla 7. Sesquiterpenlactonas

27

Tabla 8. Valepotriatos

28

INDICE DE GRAFICAS

Gráfica 1 Gráfica 2-3

Gráfica 4-5

Gráfica 6-7

Gráfica 8-9

Pasiflora. Tabla agujereada extracto alcohólico

29

Rota Rod extracto alcohólico y chimenea extracto etanólico

30

Potenciación del sueño extracto alcohólico y Tabla Agujereada extracto hexánico

31

Rota Rod extracto hexánico y Chimenea extracto Hexáncio

32

Potenciación del sueño extracto hexánico y tabla agujereada extracto etanólico

33

Gráfica 10-11 Rota Rod extracto clorofórmico y Chimenea extracto clorofórmico

34

Gráfica 12-13 Potenciación del sueño extracto clorofórmico y Tabla agujereada extracto acetato de etilo

35

Gráfica 14-15 Rota Rod extracto acetato de etilo y Chimenea extracto acetato de etilo

36

Gráfica 16

37

Potenciación del sueño extracto acetato de etilo

Gráfica 17-18 Valeriana. Tabla Agujereada extracto alcohólico y Rota Rod extracto alcohólico

38

Gráfica 19-20 Chimenea extracto alcohólico y Potenciación del sueño extracto alcohólico

39

Gráfica 21-22 Tabla Agujereada extracto hexánico y Rota Rod extracto hexánico

40

Gráfica 23-24 Chimenea extracto hexánico y Potenciación del sueño extracto hexánico

41

Gráfica 25-26 Tabla Agujereada extracto clorofórmico y Rota Rod extracto clorofórmico

42

Gráfica 27-28 Chimenea extracto clorofórmico y Potenciación del sueño extracto clorofórmico

43

Gráfica 29 -30 Tabla Agujereada extracto acetato de etilo y Rota

Rod extracto acetato de etilo

44

Gráfica 31-32 Chimenea extracto acetato de etilo y Potenciación del sueño extracto acetato de etilo

45

Gráfica 33 y 34 Tilo. Tabla Agujereada extracto alcohólico y Rota Rod extracto alcohólico

46

Gráfica 35-36 Chimenea extracto etanólico y Potenciación del sueño extracto etanólico Gráfica 37-38 Tabla Agujereada extracto hexánico y Rota Rod extracto hexánico

48

Gráfica 39-40 Chimenea extracto hexánico y Potenciación del sueño extracto hexánico

49

Gráfica 41-42 Tabla Agujereada extracto clorofórmico y Rota Rod extracto clorofórmico

50

Gráfica 43-44 Chimenea extracto hexánico y Potenciación del sueño extracto clorofórmico

51

Gráfica 45-46 Tabla agujereada extracto acetato de etilo y Rota Rod extracto acetato de etilo

52

Gráfica 47-48 Chimenea extracto acetato de etilo y Potenciación del sueño extracto acetato de etilo

53

Gráfica 49-50 Tabla Agujereada extracto alcohólico y Rota Rod extracto alcohólico

54

Gráfica 51-52 Chimenea extracto etanólico y Potenciación del sueño extracto alcohólico

55

Gráfica 53-54 Tabla Agujereada extracto hexánico y Rota Rod extracto hexánico

56

Gráfica 55-56 Chimenea extracto hexánico y Potenciación del sueño extracto hexánico

57

Gráfica 57-58 Tabla Agujereada extracto clorofórmico y Rota Rod extracto clorofórmico

58

Gráfica 59-60 Chimenea extracto clorofórmico y Potenciación del sueño extracto clorofórmico

59

Gráfica 61-62 Tabla Agujereada extracto acetato de etilo y Rota

47

Rod extracto acetato de etilo Gráfica 63-64 Chimenea extracto acetato de etilo y Potenciación del sueño extracto acetato de etilo

60

61

RESUMEN El proyecto fue una investigación orientada a la generación de conocimientoo botánico, fitoquímico y farmacológico de tres especies usadas comercialmente como sedanteshipnóticos en Guatemala y popularmente conocidas con nombres de especies que no se encuentran en el país. El propósito fundamental fue preparar extractos con diferentes disolventes evaluando la actividad sobre el sistema nervioso central (SNC) en ratones machos por diferentes pruebas farmacológicas. Para cada especie se prepararon por extracción fraccionada, cuatro extractos de diferente polaridad (hexano, cloroformo, acetato de etilo y etanol) para establecer por las pruebas realizadas la posible composición química responsable de la actividad. Se evalúo por pruebas macro y semimicro, la presencia de metabolitos secundarios que podrían ser los responsables de la actividad farmacológica. De los resultados obtenidos se confirma la hipótesis para Pasiflora (Passiflora edulis) Sims, presentando una actividad reguladora del SNC, ya que fue la única que dio positivo para el efecto hipnótico, con el extracto etanólico a dosis de 50 y 200 mg/kg de peso corporal y con el extracto clorofórmico a dosis de 25 y 50 mg/kg de peso corporal. Al obtener el resultado positivo se trabajó la toxicidad aguda (DL50) no presentándose ninguna toxicidad de los extractos a dosis 1 mg/mL. Con estos resultados se concluye que los extractos etanólico y clorofórmico de P. edulis pueden utilizarse para el desarrollo de productos fitofarmacéuticos por sus propiedades hipnóticas y sus componentes químicos, como un aporte para el desarrollo de los recursos naturales del país. En el caso de V. prionophylla deberá evaluarse mediante otros modelos para analizar la actividad sobre el SNC y en el caso de T. tepezapote se requiere de pruebas más profundas para validar su uso popular.

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ABSTRACT This Project was a research oriented to the generation of botanical, phytochemical and pharmacological knowledge of three species commercially used as sedative-hypnotic plants in Guatemala, and popularly known with names of species that do not grow in the country. The basic purpose was to prepare extracts with different solvents evaluating the activity within the Central Nervous System (CNS) in male mice by different in vivo tests. For each species a fractionated extraction was prepare, using different polarity solvents (hexane, chloroform, ethyl acetate and ethanol) to determine the possible chemical compound responsible of the activity.. By macro and semimicro tests, the presence of secondary metabolites was evaluated to determine which might explain the expected pharmacological activity. The experimental results confirm the hypothesis that Pasiflora (Passfilora edulis Sims),presented a regulating activity over de SNC, since it was the only species with positive results of the hypnotic effect, the ethanol extract at a doses of 50 and 200mg/kg of body weight and the chloroform extract at doses of 25 and 50 mg/kg of body weight. Since the results were positive, it was studied the acute toxicity (LD50), showing no evidence of toxicity of this extracts at a dose