Objetivos del tema El alumno... VI. TRANSCRIPCIÓN Y PROCESAMIENTO DEL RNA

Revisará como se expresa la información genética, identificando los factores involucrados en este proceso: DNA y proteínas. Reconocerá los mecanismos por los que se lleva a cabo la maduración de los mensajeros.

1. Tipos de genes.

1.1. Conocerá los diferentes tipos de genes: los que codifican proteínas, los que codifican RNA ribosomal y RNA de transferencia. 1.2. Identificará los diferentes tipos de RNA: RNA mensajeros (mRNA), RNA de transferencia (tRNA) y RNA ribosomales (rRNA), sus características, abundancia en la célula y sus funciones. 2.1. Conocerá las características y funciones de las secuencias promotoras que definen el sitio de iniciación de la transcripción (+1) de mRNA en procariontes: caja TATA (-10). 2.2. Conocerá algunas otras secuencias involucradas en la regulación de la transcripción de mRNA en procariontes. 3.1. Analizará que la reacción de síntesis de RNA es en dirección 5‟3‟, que requiere de ribonucleótidos, de un molde de DNA y de una RNA polimerasa. 3.2. Distinguirá la cadena codificante (con sentido +) de la cadena molde (sin sentido). 3.3. Conocerá la composición de la RNA polimerasas de procariontes y la función de sus subunidades (factores sigma). 3.4. Conocerá que los mRNA tienen regiones no traducibles (5‟UTR y 3‟UTR) que son importantes en la regulación de su vida funcional. 3.5. Será capaz de transcribir una secuencia de mRNA a partir de una secuencia de DNA en la que se indique cual es la hebra molde, la caja TATA y el sitio de inicio de la transcripción. 4.1. Conocerá los requerimientos para el inicio de la transcripción, identificando el complejo cerrado y el complejo abierto. 4.2. Comprenderá como ocurre la polimerización de ribonucleótidos durante el alargamiento de la hebra de mRNA. 4.3. Distinguirá entre el tipo de terminación Rho dependiente y el tipo Rho independiente.

2. Promotores procariontes.

3. Síntesis de RNA en procariontes.

4. Las fases de la transcripción en procariontes.

Conoci- Compren- Aplicamiento sión ción

X

X

X

X

X

X X X X

X X X

Objetivos del tema El alumno... VI. TRANSCRIPCIÓN Y PROCESAMIENTO DEL RNA

Revisará como se expresa la información genética, identificando los factores involucrados en este proceso: DNA y proteínas. Reconocerá los mecanismos por los que se lleva a cabo la maduración de los mensajeros.

5. Transcripción en eucariontes.

5.1. Conocerá las señales que controlan la transcripción en eucariontes: secuencias consenso y secuencias intensificadoras. 5.2. Reconocerá que las RNA polimerasas I, II y III sintetizan diferentes tipos de RNAs en eucariontes. 5.3. Reconocerá que para la síntesis de mRNAs se requieren diferentes factores proteicos (factores de transcripción). 5.4. Comparará los tres pasos de la transcripción de eucariontes con los mismos pasos de procariontes. 6.1. Conocerá algunos inhibidores de la transcripción en procariontes (actinomicina D, acridina, rifampicina) y en eucariontes ( -amanitina). 7.1. Conocerá que los RNAs se transcriben como un transcrito primario que debe ser madurado para ser funcional (procesamiento posttranscripcional). 7.2. Reconocerá que existen secuencias en el RNA y factores proteicos que participan en el procesamiento post-transcripcional. 7.3. Comprenderá que los mRNAs de eucariontes se procesan por tres mecanismos: splicing (empalme), capping y poliadenilación. 7.4. Conocerá que el RNA puede ser catalítico. 7.5. Conocerá que el mecanismo de "splicing" alternativo genera diferentes mRNAs que dan origen a diferentes proteínas (un gen codifica varias proteínas relacionadas). 8.1. Comprenderá como son procesados los RNAs ribosomales: splicing, modificación de bases. 8.2. Reconocerá como son procesados los RNAs de transferencia: splicing, modificación de bases, adición de CCA en el 3‟. 8.3. Conocerá que los rRNA y tRNAs de procariontes también son procesados post-transcripcionalmente.

6. Inhibición de la transcripción. 7. Procesamiento posttranscripcional de RNAm de eucariontes.

8. Procesamiento posttranscripcional de RNAr y RNAt de procariontes y eucariontes.

Conoci- Comprenmiento sión

X

X X X X

X

X X X X

X X X

Aplicación

TRANSCRIPCIÓN

DOGMA CENTRAL

Tipos de genes Un gene es una secuencia de DNA que codifica: a) un polipéptido (RNA mensajero) a) un RNA (RNA ribosomal y RNA de transferencia)

Estructura química del RNA

cadena sencilla

En el RNA… …el uracilo está en lugar de la timina

…el uracilo se aparea con la adenina

Dúplex

El RNA puede presentar diferentes tipos de estructura secundaria

Región de cadena sencilla

Tallo - asa

Burbujas internas

Protuberancia

Juntas

Tres tallos, cuatro tallos Desapareamiento, simétrica, asimétrica

La transcripción es el proceso por el cual se sintetiza RNA Los RNAs más abundantes y más estudiados son: rRNA

RNA ribosomal, componente estructural y catalítico del ribosoma

tRNA

 RNA de transferencia, adaptador entre mRNA y proteína

mRNA

RNA mensajero, codifica la secuencia primaria de una proteína

Otros tipos de RNA que se sintetizan en eucariontes snRNA

RNAs pequeños nucleares, funcionan en corte y

snoRNA

 RNAs pequeños nucleolares, procesamiento y

scaRNA

 RNAs pequeños de cajal, modifican snoRNAs,

empalme de intrones modificación de rRNA snRNAs, miRNAs, regulan traducción específica

miRNA siRNA

Otros no codificantes

 microRNAs, regulan la expresión genética  RNAs pequeños interferentes, apagan la expresión de genes mediante degradación de mRNAs específicos

 Otros RNAs no codificantes que funcionan en procesos diversos como síntesis de telómeros, inactivación del cromosoma X, transporte de proteínas, etc.

Producto de transcripción: RNA ribosomal PROCARIONTES: RNAr 23S: 2,904 nts. RNAr 16S: 1,542 nts.

EUCARIONTES: RNAr 28S: 4,718 nts. RNAr 18S: 1,874 nts.

Estructura secundaria del rRNA

Producto de la transcripción: RNA de transferencia Región aceptora

Asa anticodón Tamaño: 75 – 80 nucleótidos

Producto de la transcripción: RNA mensajero

El tamaño de los RNAs mensajeros es variable y depende del tamaño del gen que se transcribe.

La estructura de los mRNAs es variable y depende de la secuencia.

Autoradiografía de mRNA marcado radioactivamente con 32CTP. Se observan los diferentes tamaños del mRNA.

La transcripción es la síntesis de RNA a partir de un molde de DNA

Micrografía electrónica de la síntesis de RNA ribosomal Dirección de la síntesis: 5‟

3‟

Mecanismo de transcripción

Para la reacción química de la transcripción se requiere: •La enzima RNA polimerasa •DNA molde •Ribonucleótidos (trifosfatados) ATP, GTP, CTP, UTP •Proteínas o factores de transcripción

A diferencia de la replicación, en la transcripción... • Solamente un fragmento de DNA, que corresponde a un gen, es copiado a RNA • Sólo una de las dos cadenas de DNA es copiada a RNA DNA Cadena codificadora: 5‟-ATTCCGATGTACGAGG-3‟ DNA

Cadena molde: 3‟-TAAGGCTACATGCTCC-5‟

RNA

5‟-AUUCCGAUGUACGAGG-3‟

La secuencia de la molécula de RNA que se sintetiza a) es complementaria y antiparalela a la cadena molde b) tiene la misma dirección y secuencia (U -> T) que la cadena codificante

La polimerización se lleva a cabo en dirección 5’ – 3’

La cadena que sirve de molde se lee en dirección 3’ – 5’

Solamente un fragmento de DNA, que corresponde a un gen, es copiado a RNA y sólo una de las dos cadenas de DNA es copiada a RNA

• ¿Cómo sabe la RNA polimerasa cuál de las dos cadenas usará como molde? • ¿Cómo sabe la RNA polimerasa dónde comenzar a sintetizar? • ¿Cómo sabe la RNA polimerasa donde terminar de sintetizar? • ¿Quién abre la doble hélice de DNA?

¿En qué sitio del gen inicia la transcripción? El sitio donde se inicia la transcripción es el +1 • ¿Cómo reconoce la RNA pol el sitio para iniciar la transcripción? • Es reconocido porque antes de él, hacia el 5’, hay una región llamada promotor • Esta secuencia de DNA no se transcribe, es decir no se sintetiza RNA correspondiente a esa región del DNA. • El promotor sirve de señal de reconocimiento para que la RNA pol se una a esa región y lleve a cabo la transcripción

Estructura de los promotores procariontes Secuencias que se encuentran “corriente arriba” del sitio de inicio de la transcripción. Hay secuencias muy conservadas en los promotores procariontes. 5 –8 pb

• Secuencia -10 o caja Pribnow TATAAT Apertura de la cadena. • Secuencia –35 TTGTCA Es la región de reconocimiento e interacción con el factor de la RNA polimerasa.

Secuencias consenso en promotores procariónticos Caja TATA

Las secuencia del promotor está referida a la cadena codificadora, no a la cadena molde

El promotor Lac controla la expresión del gen lacZ, pero no del gen lacI. Observa que la posición de la caja TATA en el sitio -10 se representa sobre la cadena codificadora, es decir la que va de 5‟ a 3‟.

Los promotores tienen orientación

La dirección en la que se transcriben los genes puede variar sobre el cromosoma

Las flechas azules indican la dirección en la que se transcribirá el mRNA (siempre se sintetiza en dirección 5‟ – 3‟), por lo que se puede deducir cual es la cadena que sirve de molde.

La enzima que sintetiza RNA es la RNA polimerasa. Solo hay una RNA pol en E. coli y está formada por 4 subunidades

: ensamblaje de las unidades y unión al promotor : sitio catalítico ‟: se une al DNA y parte de la subunidad catalítica : reconoce el promotor específico

La estequiometría de subunidades en la holoenzima es 2 '

Núcleo de la enzima

Cuando la subunidad se asocia al núcleo se forma la holoenzima

Modelo de la RNA polimerasa de E. coli a partir de los datos cristalográficos

Núcleo de la enzima

2

Holoenzima

2

La subunidad

sirve como nodo para ensamblar la RNA polimerasa holoenzima y

esta función reside en el dominio N- terminal de la proteína.

El domino C-terminal de la subunidad promotores que la tengan.

interactúa con la región UP de los

¿Cómo reconoce la RNA pol cuáles genes debe transcribir?

Porque existen diferentes factores que reconocen promotores específicos: Factores sigma

Las funciones de la subunidad El factor sigma selecciona los genes a transcribirse al facilitar la unión entre la RNA polimerasa y el promotor. Esta unión depende de la denaturalización local del DNA que permite la formación de un complejo de promotor abierto

El factor

se recicla, i.e. cuando se disocia puede ser usado por otra RNA

polimerasa. Al unirse al promotor, la RNA polimerasa causa la apertura de al menos 10 - 17 pb de la doble cadena de DNA. Esta “burbuja” de transcripción se mueve con la polimerasa exponiendo la cadena molde, de tal manera que puede ser transcrita.

Factores sigma ( )

Sigma 38: Regulate gene expression against external stresses.

La transcripción involucra tres etapas •Inicio •Alargamiento •Terminación

RNA pol Holoenzima

Complejo cerrado

Complejo abierto

Sigma se disocia

Complejo de elongación

Inicio de la transcripción El factor sigma determina la iniciación de la transcripción permitiendo que la RNA polimerasa se una fuertemente al promotor (COMPLEJO CERRADO)

La doble hélice en esa región debe abrirse para permitir la lectura de la secuencia formando el COMPLEJO ABIERTO.

El factor sigma se disocia de este complejo.

La RNA polimerasa tiene un canal abierto al cual se une el DNA. Una vez que se unen al DNA, los “dedos” de la enzima se cierran alrededor del DNA.

Alargamiento 1.- Se disocia la subunidad de la RNA polimerasa. 2.- Comienza la adición de ppp G o ppp A, en el extremo 5‟ del RNA naciente.

ATP GTP UTP CTP Sustratos

+

DNA (como molde)

Polimerasa de RNA dirigida por DNA (Mg++) nPPi

5‟ 3‟ pppApUpCpCpCpGpU… RNA (tipo, longitud y secuencia de este RNA dependen del gen de DNA que se está transcribiendo)

El RNA que se va copiando del DNA se llama transcrito

ESTRUCTURA DE UNA CADENA DE RNA

Se añaden ribonucleótidos polimerizándose la cadena a través de enlaces fosfodiéster (la cadena va creciendo en la dirección 5‟ –> 3‟)

Alargamiento RNA polimerasa Rebobinado

Desenrollado

Hebra codificadora Hebra molde

3

5

3

5 Hélice híbrida RNA - DNA 5’ ppp

RNA naciente

3

Punto de elongación

Desplazamiento de la polimerasa

4.- La “burbuja de transcripción” va avanzando, por un lado se abre el DNA duplex y por el otro se re-bobina. 5.- El RNA sintetizado va formando un híbrido (transitorio), con la cadena 3‟ – 5‟ del DNA

BURBUJA DE TRANSCRIPCIÓN

Alargamiento La subunidad

contiene el sitio activo de la RNA polimerasa donde se forman

los enlaces fosfodiéster

Hay dos sitios en el DNA que interactúan con la RNA polimerasa: 1.

Un sitio de unión débil que involucra la zona del DNA desnaturalizada y el sitio activo en la subunidad de la polimerasa. La interacciones son principalmente electrostáticas.

2.

Un sitio de unión fuerte que involucra al DNA río abajo del sitio activo y lo conforman las subunidades La subunidad

y

„ de la enzima.

„ une dos átomos de Zn2+ que participan en la catálisis.

Esta subunidad se une fuertemente al DNA.

Terminación Hay dos mecanismos de terminación de la transcripción 1. Mecanismo dependiente de la proteína Rho 2. Mecanismo independiente de la proteína Rho

Terminación: dependiente de la proteína Rho (trans) La proteína rho es un hexámero que hidroliza ATP en presencia de RNA. Se une al RNA que se está sintetizando y se mueve en dirección al sitio de síntesis. Desestabiliza al híbrido DNA – RNA, facilitando así la terminación de la transcripción.

Terminación independiente de la proteína Rho (cis) La secuencia al final del gen contiene repeticiones invertidas que permiten la formación de una estructura de horquilla en el RNA. Hay una región rica en Adeninas, de tal forma que el híbrido DNA-RNA que se forma es débil y se disocia.

Transcripción en eucariontes

Diferentes tipos de RNA polimerasas Las tres RNA polimerasas en eucariontes: 1. RNA Polimerasa I sintetiza RNA ribosomal (rRNA) 5.8S, 18S y 28S. 2. RNA Polimerasa II sintetiza RNAs mensajeros (mRNA), RNAs pequeños nucleolares (snoRNA), micro RNAs (miRNA), RNAs pequeños interferentes (siRNA) y la mayoría de RNAs pequeños nucleares (snRNA). 3. RNA polimerasa III sintetiza RNAs de transferencia (tRNAs), rRNA 5S y algunos RNAs pequeños nucleares (snRNAs).

Los promotores reconocidos por la RNA pol II se llaman Promotores de clase II Los promotores clase II tienen diferentes secuencias reguladoras dependiendo de la combinación de factores de transcripción requeridos para formar el complejo transcripcional funcional en cada promotor.

Algunos de los elementos que han sido descritos en los promotores de clase II de eucariotes son los siguientes: • La TATA Box. Su secuencia consenso es TATAAAA. Está localizada 25 bp upstream de el punto de inicio de la transcripción. • El Iniciador es una secuencia que es encontrada en muchos promotores y define el sitio de inicio de la transcripción. • La GC box. Su secuencia consenso es GGGCGG. Puede haber una o más copias localizadas entre 40 y 100 bp upstream del inicio de la transcripción. • La CAAT box – secuencia consenso CCAAT - es también frecuentemente encontrada entre 40 y 100 bp upstream del inicio de la transcripción. El factor de transcripción CTF o NF1 se une a la CAAT box.

TATA Box Localizada aproximadamente 25 bp upstream de el punto de inicio de la transcripción, es encotnrada en muchos promotores. La secuencia consenso es TATAAAA (semejante a la caja TATA de procariontes localizada en la región 10). La caja TATA parece ser más importante para seleccionar el punto de inicio de la transcripción (i.e. posicionar la enzima) que para definir el promotor.

GC box y CAAT box La GC box es un elemento común en promotores eucariónticos de clase II. Su secuencia consenso es GGGCGG. Puede estar presente en una o más copias las cuales pueden estar localizadas entre 40 y 100 bp upstream del inicio de la transcripción. El factor de transcripción factor Sp1 une la GC box. La CAAT box – secuencia consenso CCAAT - es también frecuentemente encontrada entre 40 y 100 bp upstream del inicio de la transcripción. El factor de transcripción CTF o NF1 se une a la CAAT box.

Los promotores eucariontes son muy complejos y tienen diversas secuencias regulatorias

Diagram based on and adapted from Figure 28.26 of Mathews & van Holde, Biochemistry, 2nd ed.

Además de los elementos anteriormente mencionados, Enhancers pueden ser requeridos para la expresión adecuada de un gen. Estos elementos no son parte del promotor per se. Pueden estar localizados upstream o downstream del promoter e incluso estar muy lejos de él. El mecanismo por el cual funcionan no se conoce. Podrían proporcionar un punto de entrada para la RNA polimerasa o podría asistir en la unión de otras proteínas a la región promotora

Sitios consenso en promotores eucariontes

RNA polimerasa II de levadura

Arthur Kornberg, premio Nobel Medicina 1959 por el descubrimiento de la DNA polimerasa III bacteriana

Transcripción por la RNA polimerasa II - 12 subunidades formando un complejo de mas de 500 kDa - múltiples factores accesorios (factores de transcripción)

RNA pol II

cola que se fosforila

RNA pol bacteriana

Promotor tipo II basal de eucariontes Caja TATA

D

25 pb río arriba del Inr (+1)

Factores de transcripción generales:

TFIID

A

TBP: proteína de unión a caja TATA TAFs

B TFIIA TFIIB

E

Ayudan a posicionar al complejo de factores sobre el promotor

F TFIIF

Proporciona la ocupación de +30 bp

Promotor tipo II basal de eucariontes TFIIE

H

TFIIJ

TFIIH

Une a RNA pol II al complejo montado sobre el promotor

Promueve el escape del promotor y fosforila el CTD de RNA pol II brindando progresividad a la transcripción

La unión de la TBP al sitio TATA distorsiona la cadena

Proteínas activadoras de la transcripción

Activadores: se unen a secuencias intensificadoras en el promotor del gen. Incrementan los niveles de transcripción

Coactivadores: integran señales de activadores y/o represores a la maquinaria de transcripción con los factores de transcripción basal

Represores: se unen a secuencias silenciadoras en el promotor del gen. Disminuyen los niveles de transcripción

Factores de transcripción basal: Estos factores posicionan a la ARN polimerasa sobre el gen y comienzan la transcripción en respuesta a la señal de activadores y/o represores

Diferencias en la transcripción entre procariontes y eucariontes Procariontes

Eucariontes

1. Todas las especies de RNA son sintetizadas por la misma especie de RNA polimerasa.

1. Hay 3 diferentes RNA polimerasas responsables de la transcripción de diferentes moléculas de RNA

2. El mRNA se traduce durante la transcripción.

2. El mRNA es procesado antes de ser transportado a citoplasma (adición de CAP, cola de poliA, remoción de intrones

3. Los genes son segmentos contiguos de DNA alineados ininterrumpidamente con el RNA traducido a proteína.

3. Los genes frecuentemente se interrumpen por intrones.

4. Los mRNAs son frecuentemente policistrónicos

4. Los mRNAs son monocistrónicos

Inhibición de la transcripción en procariontes Las rifampicinas son producidas por Streptomyces mediterranei, con buena actividad contra bacterias Gram-positivas y contra Mycobacterium tuberculosis . Bloquea la transición de iniciaciónelongación. Se une de manera no covalente a la subunidad en el complejo RNA pol-promotor una vez que se han incorporado dos o tres nucleótidos a la cadena de RNA.

La estreptolidigina inhibe a la RNA polimerasa durante el alargamiento.

Inhibición de la transcripción en eucariontes -amanitina

Actinomicina D Sar L-Pro

Sar

L-meVal

D-Val

O

L-Pro D-Val

L-Thr O

L-meVal O L-Thr

C

C

O

N

NH2 O

O CH3

CH3

Se intercala entre bases G y C

Acridina +

N H

Se intercala entre bases

Octapéptido bicíclico que se obtiene del hongo Amanita phalloides. Inhibe la translocación de la RNA polimerasa II eucarionte durante la transcripción.

Amanita phalloides

Procesamiento del RNA El RNA para ser funcional debe ser procesado

mRNA: sólo en eucariontes tRNA y rRNA: tanto en eucariontes como en procariontes Otros RNAs no codificantes: tanto en eucariontes como en procariontes

Procesamiento del mRNA en eucariontes • Adición del CAP en el extremo 5‟ • Splicing. Exclusión de intrones • Poliadenilación en el extremo 3‟

1. Adición del CAP

1) La fosfatasa remueve un fosfato del 5´

2) Una guanil transferasa agrega GMP 3) Una metil transferasa agrega el grupo metilo

2. Reacción de corte en la unión exón-intrón

Existen secuencias específicas en los límites exón-intrón

R= purinas Y= pirimidinas

Moléculas de RNA son las responsables del corte

El apareamiento de las moléculas de snRNA requiere complementación de bases con el pre-mRNA

snRNPs: U1, U2, U4, U5, U6 BBP U2AF

El splicing (corte y empalme de intrones) lo realiza el snRNA de U6 snRNP: Actividad de ribozima

Puede existir procesamiento alternativo de intrones en el pre-mRNA

5 mRNAs maduros

5 proteínas diferentes

3. Poliadenilación

Proteínas específicas reconocen las secuencias de poliadenilación

El mRNA es cortado y la enzima Poli-A polimerasa (PAP) agrega A’s

Proteínas de unión a la cola de poliA se unen al extremo 3’ hasta que el mensaje sale del núcleo

El alargamiento del RNA está acoplado su procesamiento

La salida del mensaje del núcleo es coordinada

El receptor de exporte nuclear dirige la salida

En eucariontes, cada paso en la regulación de la expresión genética (de transcripción a traducción), es una subdivisión de un proceso continuo.

RNA ribosomal Es el RNA más abundante de la célula. Tiene función tanto estructural como catalítica en la síntesis de proteínas. Existen diferentes tipos de acuerdo a su coeficiente de sedimentación asociados a las subunidades ribosomales:

En procariontes

Subunidad ribosómica grande

23S 5S

Subunidad ribosómica pequeña

16S

En eucariontes 28.5S 5.8S 5S

18S

Procesamiento del rRNA en procariontes

Procesamiento del rRNA en eucariontes

El nucléolo es el lugar de síntesis de rRNA y pre-ribosomas

Nature Reviews Molecular Cell Biology 2, 514-520

El ribosoma

Alberts et al., 3rd ed., p 232

Ribosomas procariontes y eucariontes

Cumbre

cabeza

Protuberancia central Tallo

plataforma base

El rRNA juega un papel muy importante en la traducción

rRNA 16S rRNA 23S

RNA de transferencia Es el RNA más pequeño, con unos 75 nt de longitud, en promedio. Su función es transportar los aminoácidos en forma activada hasta el ribosoma donde ocurre la síntesis de proteínas. Existe al menos un tipo de tRNA para cada uno de los 20 aminoácidos. Sin embargo, algunos aminoácidos tienen varios tRNAs. Todos los tRNAs presentan en su 3’ la secuencia CCA, independientemente del aminoácido que transporta. El extremo 3’ consitutye el sito aceptor del aminoácido.

Procesamiento de tRNA en procariontes Procesamiento del extremo 5’: Rnasa P (Ribonucleoproteína compuesta por RNA 377 nt y proteína 20 kDa) Acción catalítica: RNA (ribozima) Procesamiento: co-transcripcional Procesamiento del extremo 3’: 1) endonucleasa elimina un grupo de bases 2) exonucleasa, RNAsa D elimina los restantes nucleótidos 3) El triplete CCA característico de estas moléculas es añadido por una tRNA nucleotidil transferasa

Bases modificadas que se encuentran en los tRNA

• Pseudouracilos ( • 4 tiouridina • 2 metilguanina • 2 isopententenil adenina • Dihidrouridina (D) • Inosina

Procesamiento del intron en los tRNA en eucariontes Una endonucleasa corta en los sitios donde hay protuberancias y una DNA ligasa sella esos cortes

Los tRNA

tienen una longitud de aproximadamente 80 nucleótidos