UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA FACULTAO DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

" ESTUDIO DE LA INMUNIDAD CONFERIDA CON CEPA LA SOTA EN DOS CALENDARIOS DE VACUNACION CONTRA NEWCASTLE EN LA ZONA CENTRO DEL ESTADO DE JALISCO.''

TESIS QUE

PROFESIONAL

PARA OBTENER El TITULO DE:

MEDICO

VETERINARIO

ZOOTECNISTA

P

E

N

R

P.M.V.Z.

S

FRANCISCO

E

T

A:

LOPEZ MORALES

ASESOR: M.V.Z. HUGO BERNALES CASILLAS GUADALAJARA, JAL.,

AGOSTO 1993

-----------------------

----

-

A DIOS

A MIS PADRES:

OFICIWA t.l!: ~~ CIEClT~

FRANQSCO Y CRUZ

A MIS HERMANAS: MAGDALENA Y CONCEPCION.

A MI ESPOSA:

CELIA

AMISJDJOS:

JUAN FRANGSCO. MARCELA. Y CELIA MARIA.

AMI ASESOR

MVZ. HUGO BERNALES CASILLAS A MIS AMIGOS Y COMPAÑEROS ING. JORGE AMAYA ACEDO.

tlHmJI\ tlk

~ f.l:ai1'R1

MVZ. SATURNINO NAVA ARECHIGA.

MVZ. ARMANDO RODRIGUEZ NORIEGA. ING. ALBERTO NAVARRO CORDOVA. ING. ARTURO TORRES ESCALANTE. ING. ARTURO COPETILLO LUQUE. ING. ROGEUO ALCARAZ FLORES. SR. FLORENTINO GONZALEZ CAPUZANO.

A MI FACULTAD.

A MIS MAESTROS.

CONTENIDO Pagina

---------------------A

RESUMEN---------INIRODUCCION

--------------------------------~1

PLANTEAMJENTODELPROBLEMA

----------------------4

JUSTIFICACION------------OBJETIVOS-----

--·------------5 - - - -------6

MATERIAL Y METODOS -----------------------·--RESULTADOS ---------------------------DISCUSJON-----CONaUSIONES ANEX01--BIBUOGRAFIA-

7

--·----9

--------------------17

----------------------------------19 - - -----20

- - - - - - ·---·--------------21

A

RESUMEN. El virus de la enfennedad del newcastle, ha sido causa de grandes perdidos en la avicultura mundial, recortándose en Mlxico desde 1946.- Se hmi realizado grandes esfUerzos para e"adicar esta enj'ennedad, siendo el método mas económico y práctico la vacunación, por lo que el objetivo general del presente estudio es conocer los niveles de anticuerpos que se obtienen al uti/WJr este métodO.- Para conocer esto se realiull'on encuestas a projesionislas de la avicultura así como pruebas de laboratorio. Se efectuó este estudio para conocer los calendarios de vacunación en la zona centro del estado de Jalisco.- Dos jileron los calendarios. usados para la inmlmizacion de poUo de engorda c011Jra la er(ermedad del newcastle (grupo 2 y grupo 3).- El grupq 2 jUe el que tuvo una mejor protección medida por el titulo de anticuerpos. humorales obtenidos a lo largo del ciclo de engorda del pollo.- Los dos. caletularios oJ jinaJ del ciclo obtuvieron un titulo aceptable mayor al seftalado como protectivo al desqffo (5/og. 2).- En el análisis estadístico se utilizo la prueba de X2, no encontrátulose discrepancias estadísticamente significativas entre lo esperado y lo observado (P> .01).

INTROD UCCION.

1

Desde su aparición el virus de la enfermedad del newcastle en 1926, ha sido causa de grandes perdidas en la avicultura mundial (5,6). Su aparición en México fue reportada en el afiO 1948, aunque su aparición en forma de epizootia parece ser en 1946 (3).- Sin embargo se han realizado grandes esfuerzos para erradicar dicha erifermedad, el método mas ecomímico y práctico ha sido la vacunación que desde que se practica ha sido esencial en todos los programas tendientes a controlar el virus de la enfermedad del newcastle (3). Las vacunas son productos preparados con microorganismos similares a los que producen la enfermedad, pero que al ser sometidos a manipulaciones en el,

laboratorio, se le disminuye la capacidad de producir enfermedad. ·

Los virus utilizados para prevenir la enfermedad del newcastle, (ENC) son preparados con virus designados como cepa la sota.- La cepa mas utilizada en el caso de nuestro pais es Cepa la Sota.- Esta cepa es por tanto un virus de newcastle, pero se le ha seleccionado como virus vacunal porque aunque tiene la capacidad de infectar al animal, el resultado de esta infección es leve.- Asi entonces el virus o cepa la sota del newcastle se utiliza como vacuna para prevenir la enfermedad producida por cepas o virus mas fuertes o con capacidad de producir enfermedad en un grado mayor o mortalidad (cepas llamadas patogenas) (1,7,9).

Las vacunas preparados con cepas de virus atenuados, son aquellas en las cuales el virus original tenia una alta capacidad de producir la enfermedad (virus patogeno).- Este virus e~ cultivado en el laboratorio en condiciones controladas, infectando embriones de pollo o cultivos de células.- El virus es cultivado varias veces en estos sistemas y cada vez que se cultiva será un "pasaje", ya que es pasado por el embrión o cultivo celular.- Después de determinados pasajes el virus es inyectado en el pollo hasta que dicho virus no tenga la capacidad de producir la enfermedad en forma violenta, pero que aun sea capaz de inducir la formación de defensas, por infección en el ave, logrando una cepa del virus llamada " atenuada ... - Son conocidas también estas vacunas como de ?virus vivos" o vacunas "inactivados ".-Este tipo de vacunas contiene el microorganismo pero su capacidad infectante ha sido eliminada por productos quimicos o temperatura inactivando al virus.- Estas vacunas inactivadas "se diluyen ir en aceites

2 especiales, lo que se denomina como "vacunas inactivadas emulsionadas en aceite" (1,2,18). VacWJaS inactivadas contra el virus de la enfermedad del newcastle se han venido utilizando desde 1953, y fueron las primeras que se prepararon comercialmente (1,12).- Este tipo de vacunas han demostrado su efectividad al lograr por mas tiempos niveles altos de anticuerpos, debido a la prolongada permanencia del antigeno viral que se logra con el adyuvante oleoso (3,11). No se puede decir que un tipo de vacunas es mejor, ya que estos dos tipos: inactivada y viva, son complementarias; las vacunas virus vivos, desarrollan una mayor protección en los epitelios y mucosas.- Las vacunas inactivadas, en cambio, producen una protección de tipo humoral (1,8).- Por ello, los calendarios de vacunación que incluyen un método simultaneo son muy utilizados (9,14). -En México las vacunas producidas en contra del virus de la enfermedad del newcastle, son producidas con cepa la sota, que es una cepa lentogenica, es decir, en su estado patógeno, tarda más en motar al embrión de poUo de un tita de edad inoculado por vta intracerebral con una dósis minima letal (1).- Esta cepa ha conferido una protección adecuada.- Sin embargo, es muy común observar brotes de la enfermedad del newcastle en aves vacunadas, supuestamente inmunizadas. Estos brotes pueden ser consecuencia de alguna enfermedad inmwwdepresiva, como alimento contaminado con qflatoxinas, mala aplicación del inmunógeno, stress, etcetera, pero también podrla deberse a la presencia de cepas altamente patógenas del virus del ENC (15).- Esto no ha sido posible determinarlo, generalmente, por la falta de estudios, o reportes de la enfermedad que impiden una busqueda adecuada del origen de un brote en casos particulares. Una de las herramientas mas importantes con que cuenta el técnico avicola para conocer la protección conferida para las vacunas del virus de la enfermedad del newcastle, es la prueba de inlúbición de la hemoaglutinación, conocida como H/(5, 7).- Esta prueba permite medir cuantitativamente los anticuerpos de tipo humoral presentes en el ave, que si bien no es toda la inmunidad del animal, si nos permite aproximarnos al estado inmunológico de este (5,8).

3 Existen a la fecha tablas que nos permiten conocer la resistencia a un desafio dependiendo de la cantidad de anticuerpos Hl (7,9).- Estos estudios muestran que una protección de 5 logaritmo 2 (log), es suficiente para proteger al ave de un desafio en la mayoria de los casos (9). Actualmente es notoria la disminución de casos de erifermedad del newcastle en ciertas regiones; desde 1991 se ha reportado que la erifermedad del newcastle, bronquitis irifecciosa y larigotraqueitis en conjunto en la región de Tepatitlán, Guadalajara y otros lugares de influencia de laboratorio Previtep, constituyen solo el13.6% de todos los casos llegados a dicho laboratorio (17).- El hecho de no observar brotes espectaculares, provoca en duelíos de granjas avícolas y técnicos encargados de las mismaS, una relajación en los calendarios de vacunación (15).Sin embargo, es un hecho conocido que el virus de la enfermedad del newcastle ha tenido ciclos más o menos regulares, en donde después de un descenso clinico se presenta una serie de brotes en áreas donde su presencia no había tenido importancia en un cierto periodo de tiempo (5). El área del centro del estado de Jalisco es muy importante en la producción de pollo de engorda, tanto en el estado, como en el pais.- Para efectos de este trabajo se considera "zona centro" del estado tanto a los municipios de Zapopan, Tlaquepaque, Tonala, Tlajomulco y Cocula, y aunque no son propiamente municipios conurbados, estos dos últimos su cercania con Guadalajara y el hecho de que muchas empresas tienen su base en esta ciudad y granjas en todos los municipios mencionados, nos hace pensar y tomar a la región Guadalajara con todos estos para efectos de trabajo en esta área de actividad pecuaria. Otro criterio para coriformar la zona de esta manera, es que la Asociación existente de Médicos EspecialistaS en Aves, que como tal se constituyo en 1989 y que reúne a projesionistas de la medicina veterinaria que trabajan en los municipios mencionados, siendo un hecho que conocimientos y practicas de esta asociación irifluye en las explotaciones donde estos médicos prestan sus servicios y que revasan en mucho el área geopolítica del municipio de Guadalajara.

4 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

En cada area dedicadas a la producción de pollos de engortla se mantienen controles que penniten ir conociendo las fallas o aciertos en un proceso.- Esto es lo ideal, sin embargo, el área inmunologica siempre ha sido el talón de Aquiles en la producción avtcola.- Algunas veces por carencia del laboratorio y personal capacitados en estos estudios y otras, por negligencia o "falta de tiempo· para recolectar muestras y su posterior envió.- Esto provoca que sean pocas las empresas que llevan un control efectivo.- El resultado es que cuando surge un problema viral, es di.ftcil conocer su causa o sus causas reales, por ello, es necesario que se evaluen continuamente los niveles protectivos y asi tener la seguridad que los animales se encuentran debidamente innumizados, esto puede ser la diferencia entre ganar y perder. En algunos estudios se han encontrado parvadas con cero niveles de anticuerpos humorales a las ocho semanas (15).- Esto es grave y refleja que no es raro que se presente esta situcion, ademas cualquier mutación del virus vacunal, o la presencia de una cepa de campo moderadamente patogena, provocarla dai'ws y perdidas cuantiosas a los productores a nivel regional, estatal o nacional.

5

JUSTIFICACION. La importancia del presente estudio se refleja en la carencia de infonnación que sobre calendarios de vacunación se tienen para esta zona; no tan solo de inmunizacion de newcastle, sino que casi todas las inmunizaciones usadas en pollo de engorda, ya que son pocos los estudios locales efectuados, segun lo manifestado *.- Tan solo el hecho de desconocer el numero de calendarios de vacunación en esta zona constituye un problema,mucho mas es no conocer los títulos obtenidos por cada calendario y casi imposible saber cual es el que proporciona mayor proteccion.- Con el presente estudio se obtendra infonnacion real sobre la respuesta inmunologica que proporciona cada uno de los calendarios estudiados, que a la postre, serviran para que los tecnicos avícolas tengan un marco de referencia en la toma de decisiones al momento de elegir su calendario de vacunacion.

*Flores Rector presidente (AVECAG),Asociacion de Veterinarios Especialistas en Aves de Guadalajara.- Comunicacion personal.

6

OBJETIVOS. OBJETIVO GENERAL: Conocer los niveles de anticuerpos contra la enfermedad del newcastle en dos calendarios de vacunación con cepa la sota utilizados en la zona centro del estado de Jalisco. OBJE7IVO PAR11CULAR: Conocer los calendarios de vacunación utilizados contra la enfermedad del newcastle en la zona centro del estado de Jaüsco.

MATERIAL Y MÉTODOS.

7

Se ovtubo el número de calendarios de vacunación usados contra la enfermedad del newcastle en la zona centro del estado de Jalisco mediante la encuesta realizada a los medicos veterinarios especialistas en aves agrupados en la Asociacion de Veterinarios Especialistas en Ciencias Avícolas de Guadalajara.

El cuestionario aplicado incluyó las preguntas siguientes: l.- Nombre del médico veterinario encargado. 2.- Empresa para la cual trabaja. 3.- Vacunas que aplica y laboratorio. 4.- Días en los que la aplica y vías. Se conocieron los niveles de anticuerpos contra la elifermedad del newcastle en aves procedentes de granjas ubicadas en la zona centro del Estado de Jalisco mediante la prueba de inhibicion de la hemoaglutinacion (Hl), (anexo 1), realizadas en laboratorios Previtep, situado en Tepatitlan Jalisco.- El metodo utilizado en tales pruebas fue el metodo Beta descrito por Chase (13). Los resultados son dados de logaritmos, que es lo convencionalmente usado por los laboratorios y lo mas aceptado por los medicos veterinarios (3,15).

En la seleccion de las granjas se tomo en cuenta lo siguiente: Que fueran aves de una misma raza, que se aplicara vacuna con cepa la sota, que fuera del mismo laboratorio y que tuviera manejo similar en la aplicacion de otras vacunas (calendario abierto o cerrado). Una vez clasificados los diferentes calendarios de vacunacion se formaron 3 grupos: Uno (Testigo) al cual no se aplico vacuna de ningun tipo contra el virus de ENC,· Dos (grupo 2) el cual co"espónde a animales vacunados con virus vivo modificado de newcastle, via ocular y virus emulsionado via subcutánea, al rededor del decimo día, no volviendo a aplicar algun refUerzo inmunológico; Tres (grupo 3) en el que se aplica virus modificado del newcastle en agua de bebida hacia el 7o. día de edad de las aves.- Posteriormente alrededor del día 22 se aplica virus vivo modificado y virus inactivado emulsionado, via subcutanea.

8 Las muestras de suero fueron tomadas al azar: JO aves por toma incluida la

testigo. En todas las parvadas donde se hizo el estudio, dependiendo del numero de calendarios que se obtuvo, se muestrearon al primer dta de edad cada lote de estudio para conocer su inmunidad materna.- Posteriormente se hizo una segunda toma 15 dtas después de la vacunación ocular y 21 dias después en caso de ser vacunados simultáneamente.- Finalmente se obtuvo una ultima toma entre la 7ma y la 8va semana (alrededor de 50 dtas). Con estos tres monitoreos se buscó cubrir las etapas previas y las posteriores a la vacunación, lo cual nos indicó el grado de inmunidad obtenida con cada calendario. Los resultados fueron expresados en cuadros y graftcas empleandose la prueba de X2 para conocer las discrepancias estadtsticas co"espondientes.

RESULTADOS

9

De las encuestas realizadas aplicadas a diez miembros A VECAG, se obtuvieron los siguientes resultados. El 60% de los entrevistados aplica el virus vivo modificado de newcastle vla ocular y el virus inactivado emulsionado vla subcutanea al rededor del décimo día, no volviendo a aplicar algún refuerzo inmunologico (GRUPO 2). El 30% aplica virus modificado de newcastle en agua de bebida al rededor del séptimo día de edad de las aves.- Posteriormente alrededor del día 22 se aplica virus vivo modificado y virus inactivado emulsionado vla subcutanea (GRUPO 3). Un solo caso del JO% menciono la aplicación del virus vivo modificado de newcastle en agua de bebida a los 7 dias, a los 2J días, por la núsma vla, y un ultimo refuerzo a los 35 dtas de edad.- Este calendario de vacunación no fue posible evaluarlo, debido a que el momento de realizar el estudio de esta explotación ya habta cambiado su calendario de vacunación por un similar al de tipo A, con este se redujo el estudio del calendario grupo 2 y al calendario grupo

3. Los resultados obtenidos en el estudio son los siguientes: En el grupo J, a un día de edad de las aves se observo un 1111Itimo de anticuerpos HI de 5log. 2, en dos de los animales, existiendo una baja sensible a los J5 y 50 dias de edad de las aves (cuadro J). En el grupo 2, a un día de edad se observó un máximo de anticuerpos HJ de 5 log 2, en 7 de los animales el cual aumento a los 30 días de edada a 6 log. 2 en 7 de JO animales y se conservo en 5 log. 2 en 6 de JO animales a los 50 días de edad (cuadro 2). En el grupo 3, a un dia de edad de las aves se observaron niveles de anticuerpos, HI 3 log 2 en 2 de JO animales y 2log 2 en 8 de los animales; a los 22 días de edad se observaron niveles de anticuerpos de HJ 5 log. 2, en J de JO animales,· a los 50 días de edad, aumento considerablemente el nivel de anticuerpos de HI, observando lo siguiente: 7log. 2 en 1 de JO animales y 6log. 2 en 9 de JO aves, (cuadro 3).

JO

A partir de estos resultados y empleando la prueba de X2 se realizo el arullisis estadistico de los datos, mediante el cual se busco la asociacion entre las variables sujetas a estudio, no encontrandose discrepancias estadisticamente significativas entre los datos esperados y los obtenidos, (P> .01).

NIVELES DE ANTICUERPOS OBTENIDOS EN EL GRUPO 1 (TESTIGO)

TITULOS LOG. 2

1 OlA

15 OlAS

50 OlAS

o

1110

5/10

9110

1

---

4/10

1/10

2

2/10

1110

---

3

4/10

4

lEN

---

1/10

-----

---

5

2/10

---

---

6

---

---

---

7

---

---

---

CUADRO NO. 1

._ ._

NIVELES DE ANTICUERPOS OBTENIDOS EN EL GRUPO 2

TITU1.0S leN LOG. 2

1 DIA

30 OlAS

60 DIAS

-----

---

1

-----

2

1/10

---

3

---

---

-------

4

2110

3/10

2/10

6

7110

---

8/10

7/10

1110

---

1/10

o

8 7

-----

1 1

CUADRO No. 2

......

tv

NIVELES DE ANTICUERPOS OBTENIDOS EN EL GRUPO 3 TITULOS

I~N LOG. 2

1 OlA

22 OlAS

o

---

---

1

---

---

50 OlAS

--------- ~ 1

2

8/10

---

3

2/10

2/10

4

---

7110

5

---

1/10

---

6

-·-

---

9/10

---

---

7

---

1

1

¡

CUADRO No. 3

1/10

J ::;

CUADRO COMPARATIVO DE LOS TITULOS DE ANTICUERPOS PROMEDIO EN LOS TRES GRUPOS.

GRUPO

TOMA 1

TOMA 2

0.6 LOG. 2

TOMA 3

l

0.1 LOG 2

1

3.1 LOG. 2

2

4.5 LOG. 2

5.4 LOG. 2

5.1 LOG. 2

3

2.2 LOG. 2

3.9 LOG. 2

6.1 LOG. 2

CUADRO No. 4 .......

~

RESULTADOS OBTENIDOS CON DOS CALENDARIOS DE VACUNACION CONTRA EL VIRUS DE ENC. TITULOS DE Hl

a-

Loo. 2

A

7LOG. 2

6-

B

. --·-· ......r--7\ -·-·-······-r--:;;

]..-

A

,..

_,

.....

··-··-·--····-""'""-'""'"""'-····-···"

....

·-~---

...-.......

- ......• -·

A

r-

B

-----~lz::::;;

LOG. 2 A

T

. ··- z::

5LOG. 2

4

T

r-

_J.

B

··-·"7/1'""""" ...................

LOG. 2

B

T

LOG. 2

2

T

_,,..¡~·--·····"//

' 1\. l;r-

B

T

~

DE OlAS T• GRUPO 1 A• GRUPO 2 8• GRUPO ll

T .......r -

··r-

LO~~ LOG. 2

,__ ,_ .......

T

J

NUME~O

!··-·····----··--·-

-· ····--· ---·"-r--;

LOG. 2

1

A

B

,...... ""/71"'··..

3-

........ ..

___!J\ ... ~

A

-·-· ·r-

11

A

-~

T

~

1

l,.__

15

¡__

T

~

22 30

50

e:

GRAFICA COMPARATIVA DE LOS TITULOS PROMEDIO DE LOS ANTICUERPOS OBTENIDOS DURANTE LOS 3 MUESTREOS REALIZADOS TITULOS DE Hl

3 LOG.

o

LOG. 2 T• GRUPO 1 A• GRUPO 2 8• GRUPO 8

T

A

TOMA 1

8

T

A

TOMA 2

8

T

A

TOMA 3

8 ...... .

DISCUSIÓN

17

La información recabada para conocer el número de calendarios usados en la zona centro del Estado de Jalisco se obtuvo del33% de los médicos especialistas de aves, que conforman laAVECAG los cuales atienden aproximadamente el ro% de las granjas dedicadas a la crianza de pollos de engorda en la zona objeto del presente estudio. La disminución en los titulos de anticuerpos maternos en el lote testigo va de acuerdo a lo señalado por Villegas (18) y Lozano (9) en el sentido de que a los 15 dias posteriores al nacimiento de los pollos, los anticuerpos se encuentran bajos en sus titulos, lo cual es observable al ver el cuadro 1.- Sin embargo, es revelador que en el cuadro 4 se observen 5 aves con titulas mayor de cero, lo cual revela una disparidad en los titulas de anticuerpos motemos presentes en el pollo de engorda.- Esto qfecta la respuesta inmunitaria, la cual será heterogénea al aplicar la vacuna contra el virus de la enfermedad del newcastle (16). En este estudio el grupo 2, obtuvo titulos mayores a los observados por Ron Guerrero e /barra (15), con un calendario similar (lote A), al.finalizar el ciclo (5.1 log. 2 en nuestro estudio contra 3.9).- Esta disparidad se produjo a pesar de ser 11UlS cerrado el calendario de vacunación del lote A estudiado por ellos.- Esto puede deberse a muchas variables entre las que pueden contarse mala aplicación de la vacuna,factores inmunodepresores, etc.- Puede ser, que actualmente exista 11UlS control que en aflos pasados con respecto a los factores inmunosupresivos. Los resultados comparativamente del grupo 3 del presente trabajo, comparados con los del lote D de el estudio de Ron e /barra, muestra una mayor titulo en nuestro estudio, en promedio de casi 2 logaritmos 11UlS de los obtenidos por ellos.En general podemos qfirmar que en el presente estudio se encontraron titulos mas altos de los obtenidos en 1989 por los citados tesistas.

Un dato resaltable en el presente estudio es la no protección con una sola vacunación virus vivo modificado 15 dias posteriores a la inmunizacion, tiempo en el cual se qfirma existe protección de anticuerpos matemos (5,16) (cuadro 3 y 4).

18 En el presente trabajo no se tomaron en cuenta las variantes de otras vacunaciones por haber sido iguales para las dos parvadas (bronquitis ocular) de un mismo laboratorio y cepa.- Asi mismo la cepa vacunal utilizada fue la misma en los grupos 2 y 3 y también el laboratorio productor. De acuerdo con el presente estudio el calendario de vacunación del grupo 2 mantiene un mayor titulo de anticuerpos todo el periodo de engorda del ave, en tanto que en el grupo 3, se observa una disminución al rededor del dia 22 (3.9 logaritmo 2) (cuadro 4), no alcanzando el minimo de protección (5 log. 2). El calendario de vacunación del grupo 3 al final del ciclo presento un mayor titulo de anticuerpos HJ y mas homogeneo, debido a la vacunación del dia 22 con virus inactivado emulsionado (cuadro 4).

19

CONCLUSIONES. l.- En la zona centro del estado de Jalisco hay dos tipos de calendarios usados para proteger las aves contra la enfermedad de newcastle.

2.- El presente estudio demuestra que los dos calendarios alcanzan un titulo aceptable al final del ciclo (entre 7 y 8 semanas) que sobrepasa el mínimo aceptable (5log. 2).- Sin embargo, en el caso del grupo 2 hay una baja en el titulo de anticuerpos alrededor del dia 22, teniendo un titulo menor al protectivo. 3.- Aunque los niveles en los titulos de anticuerpos en los grupos estudiados son aceptables, es necesario realizar otras investigaciones con un mayor numero de parvadas y en forma zonificada, considerando las diferentes variables.

20 PRUEBA DE Hl.

(ANEXO 1)

PROCEDIMIENTO.

1.- Se adiciono JO microlitros de antigeno de JO unidades en la primera cavidad y 50 en las demás. 2.- Se uso el microdiluidor de 25 microlitros de suero problema en la primera cavidad, mezclando bien y retirando el microdiluidor. 3.- Se uso el microdiluidor de 50 microlitros, se pasaron 50 microlitros de la primera cavidad a la segunda; 50 de la segunda a la tercera y ast sucesivamente hasta la ultima cavidad.- Las diluciones ast se duplican iniciando 1:5; 1:1O; 1:20,· 1:40 etcetera.

4.- Se incubó a temperatura ambiente por un minimo de 30 minutos. 5.- Alfinal del período de la incubacion se adiciono 5 microlitros de glóbulos rojos a la concentración necesaria. 6.- Se mezcló agitando suavemente.

7.- Se ansiaba aproximadamente por 45 minutos. 8.- Los resultados se leyeron al final del periodo de incubacion.

El titulo final de un suero fue la reciproca de la dilución mas alta donde se inhibió la hemoaglutinacion (12).

21 B1BUOGRAFiA.

1.- ALLAN W. H. ET. AL. YACUNAS CONTRA U ENfERMEDAD DEL SU PRODUCCIÓN Y EMPLEO.- COLECCIÓN FAO PRODUCCIÓN Y SALUD ANIMAL.- ROMA ITAUA.- 1980.

NEWCASTLE.-

2.-4NECA. BOLETÍNINf'OBMAT/fO. NO. 2, ENERO-MARZO 1987 PP. 4 3.-BERNALES C.H.- COMPORTAMIENTODELA VACUNA VIRUSMUERTOPE NEWCAS1IE CEPA [(AN$AS-MdNUA1TAN EN POILQS DE ENGORDA DESAFIO EN CEPAS PATOGENAS DE NEWCAS1LE.- TESIS liCENCIATURA F.M. V.Z. DE G., 1988. . 4.- BLANKFOR M.B. ET. AL. IDENT/FICATIÓN OF THE SOURCES OF

YAR/AYILITY IN NEWCASTLE fNPVJ SEROWG/CAL MEfHODS . - l6ava. CONVENCIÓN NACIONAL DE ANECA, 1991, MÉXICO PP. 25-26. 5.- CALNEK B. W. ET. AL. DISE4SES OF POULTRY. fllNTli EDITJON IOWA STATE UNIVERSITY AMES IOWA 1991 U.S.A. PP. 75-77.

6.- DONAHOE JOHN P. ETAL. VACCINATION OFOW CHICKS W/TH BOTHY UVE AND KUl.HD NEWCASTLE DISE4SE VACCINE. 16ava. CONVENCIÓN NACIONALANECA 1991 MÉXICO PP. 75-77.

7.- GORDONIJORDAN. ENfERMEDADES DE LAS AVES 2da. EDICIÓN. 8.- GRETAR.L. "RESPUESTAINMUNOHUMORAL CELULAR".INMUNOLOGIA AYJAR. UNAM 1988 PP. 8-11. 9.- LOZANO D.B. "EXPERIENCIA DE CAMPO DE US DIFERENTES PRUEBAS DE LABORATORIO". MEMOR/ASDE INMUNOWGIA AVIAR C!NAM. 1988 PP. 71-79.

10.- MÉNDEZ R. /. EL PRQCED/MIENTQ DE fNYESTJGAOÓN MÉXICO EDITORIAL TRILLAS. 1987.

22 11.- MESA G.- "CONTROL DE CALIDAD DE AGENTES INMUNJZANTES". HEMOR/A DEL CURSO DE ACTIJAU74CIÓN SQBRE TQXILQGIA E /NMUNOLOGIA AfiAR.- ANECA.-1986.-MÉXICO, D.F. PP. 183-185. 12.- MOZQUEDA T. LUCIO B.- LAS ENfERMEDADES COMl!NES DE LAS AYES DQMÉSTICAS.-.$DICIÓN DEL AUTOR.- MÉXICO 1985 PP. 87-99.

13.- PURCHASE GRAHAM H.INSOI4TION4ND TDENT/FICATIONOFAYIAN PATHOGENS.-THIRD EDillON. A.A.A.P. UNIVERSIIY OF PA. 1989 USA. PP. 114-120. 14.- REYNOSO R. M. L.- EY4LUACIÓNSEROLOGICA DE C4MPODEL GRADQ DE INMUNIDAD CQNTRA LA ENFERMEDAD NEWCASTLE CONFERIDO PQR CUATRO YACUNASCQMERCIALESTIPO VIRUSINACTIVADQEMULS/ONADO ENACEITE EN AVES PABA ENGORDA.QTESIS PROFESIONAL U. DE G. 1983. 15.- RON G. A. /BARRA H.- DETERMJNACIÓNQEL TITUWDEANT/CUERfOS

f§=tk~7/Jt~~1r11!W:Ditm&1JTfJftli~~i SEMANAS- POR MEDIO DE LA PRUEBA DE Hl.=TESIS PROFESIONAL U. DE G. 1989. 16.- SARFATI DAVID, ET AL. "APliCACIÓN DE LA PRUEBA DE INHIBICIÓN DE LA HEMOAGLUT/NACION (Hl) EN EL CONTROL DE LA ENFERMEDAD DELNEWCASTLE". 4POYODELLABORATOR/ODEDIAQNOSTICO. MÉXICO. ANECA. 1985 PP. 57. 17.- SOTO E.- "PRINCIPALES ENFERMEDADES RESPIRATORIAS DE LASA VES EN MExiCO".- COMPLfJOS RESP/RATQR[OSDELASAfES.-AVI-MEX-1992 MÉXICO PP. 20-31. 18.- VH.LEGAS P.-"LAS VACUNAS EN LA AVICULTURA" AVICULTURA PRQFESION4L VOLUMEN 1 No. 21983. PP. 65. 19.- VH.LEGAS P.- "REVISIÓN DE CONTROLES SEROLOGICQS EN A VICULTURA". AVICULTlfR4 PRQFESIONAL. VOLUMEN 7, NUMERO 4, 1990. PP. 154-158.