LA REVISTA DEL GRUPO INDUSTRIA E INVESTIGACIÓN N

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IZASA LAB www.izasa.es

Editorial Durante las primeras semanas de 2004 están produciéndose novedades interesantes en nuestra organización. De entre estas novedades cabe destacar las siguientes: En nuestra División de Ciencias de la Vida destaca el nuevo acuerdo firmado con la compañía HAMILTON Bonaduz AG para distribuir en nuestro país sus sistemas de manipulación de líquidos Microlab® de su División de Robótica y de prestaciones tan interesantes para este sector. Este acuerdo incluye, entre otros, los modelos Microlab STAR, Microlab AT Plus y Microlab FAME así como sus accesorios, consumibles y mantenimiento. HAMILTON es una de las compañías líderes en tecnología de sistemas automáticos para la manipulación de líquidos con unos altísimos estándares de calidad desde hace más de 45 años.

Foto portada: Copo de nieve (7x). Differential Interference Contrast (DIC).

En nuestra División Analítica destaca el nuevo acuerdo firmado con la firma suiza CAMAG Chemie-Erzeugnisse & Adsorptionstechnik AG fundada en 1958 en Muttenz y que lidera desde hace décadas el mercado de la Cromatografía Plana también conocida como Cromatografía en Placa Fina (TLC) que es un método potente, fiable y económico para análisis cualitativo y cuantitativo en sectores tales como farmacéutico, biotecnológico, toxicológico, cosmético y alimentación, especialmente en productos naturales e ingredientes de plantas.

Sumario Teléfonos de interés Departamento de Atención al Cliente (DAC) Tfno: 902 20 30 80 • Fax: 902 20 30 81 Centro de Recepción de Avisos (CRA) Tfno: 902 12 04 89 • Fax: 934 01 03 30 Departamento de Suministros Tfno: 902 20 30 90 • Fax: 902 22 33 66

Tecnología y servicio

Edita:

Redacción: División Analítica GII Supervisión y edición: APRIORI ❀ Papel ecológico

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Identificación de diferentes especies de Valeriana por Cromatografía Plana (HPTLC)

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Cromatografía Plana: CAMAG

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Niveles de detección de ppt en el campo de los PAH mediante GCMS

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Reducción del tiempo de Análisis de Volátiles con el GCMS-QP2010 de SHIMADZU

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Aumento de Sensibilidad en GC y GCMS. Análisis de Pesticidas

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Software IRSolution de SHIMADZU para trabajo en FTIR

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Nuevos Sistema de Fluorescencia

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Imagine la Perfección en Imagen Digital. Microscopios de Iinvestigación ECLIPSE 80i

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Imagine la Microscopía en perfecto Confort…

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aliQuot dispensador automático en Microplaca para pequeños volúmene, de GENETIX

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Novedades en Análisis Térmico

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Color en Cítricos y Tomates (aprobado por la USDA) con HUNTERLAB

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AA-6300. Análisis Multielemental y validación del sistema

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Normativa FDA 21 CFR parte 11 aplicada a valoración

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Fraccionamiento de células en microplacas por ultrasonidos

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Preparación de Muestras para Proteómica. Digestión directa sobre membranas de PVDF

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Bombas de Jeringa serie D de alta precisión de la firma ISCO

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Validacion de temperatura Multi Vaso con la nueva sonda digital de HANSON

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La Microscopía Electrónica de Transmisión , Túnel y de Fuerzas, en trabajo simultáneo

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Identificación de diferentes especies de Valeriana por Cromatografía Plana (HPTLC) En este artículo se detalla el procedimiento experimental para la identificación de diferentes especies de Valeriana mediante su huella dactilar por Cromatografía Plana de Alta Eficiencia (HPTLC) empleando diferentes condiciones de detección bandas de 10 mm, espaciadas 6 mm, a 8 mm desde el borde inferior del plato.

Preparación de muestras Se toman 0.2 g de Valeriana triturada recientemente. Se agita en 5 ml de CH2Cl2 durante un minuto, se deja reposar durante 5 minutos y se filtra. El filtro se lava con 2 mL de CH2Cl2. Se evapora el filtrado junto con el lavado hasta sequedad. Se disuelve el res¡duo en 0.2 mL de CH2Cl2.

El desarrollo del cromatograma se lleva a cabo en una cámara de desarrollo vertical de 10 x 10 cm de fondo doble, saturada con fase móvil en filtro de papel durante 10 minutos. La distancia de desarrollo es de 55 mm. La detección se realiza empleando un sistema de documentación (CAMAG DigiStore, CAMAG VideoStore). La Figura 1 muestra el cromatograma observado con luz UV 254 nm.

Las Figuras 2 y 3 muestran el cromatograma tratado con spray de reactivo HCl-acético, secado en aire frío, calentado a 110 ºC durante 5 minutos. Inspeccionado bajo luz visible (Figura 2) y luz UV 366 nm (Figura 3). La Figura 4 muestra el cromatograma tratado con spray de reactivo anisaldehído, secado en aire frío, calentado a 120 ºC durante 2 minutos y observado bajo luz visible. Las pistas en los cromatogramas corresponden a: 1)

Valeriana officinalis (autentificada)

2)

Valeriana officinalis (Pacífico)

3)

Valeriana officinalis (Holanda)

4)

Valeriana radix (PHH8)

5)

Ácido valeriánico

6)

Valeriana stichensis

7)

Valeriana wallichi (India)

Opcionalmente puede prepararse un patrón disolviendo 1 mg de ácido valeriánico en 0.5 mL de CH2Cl2. Preparación de reactivos Reactivo anisaldehído: se mezcla en un baño de hielo 9 mL de H2SO4, 85 mL de metanol, 10 mL de ácido acético y 0.5 mL de anisaldehído. Reactivo HCl-Acético: se mezclan 20 mL de ácido acético con 80 mL de HCl.

Figura 1. Detección UV 254 nm

Figura 2. Tratamiento con reactivo HCl-acético y detección con luz visible.

Figura 3. Tratamiento con reactivo HCl-acético y detección con luz UV 366 nm.

Figura 4. Tratamiento con reactivo anisaldehído y detección con luz visible.

Condiciones cromatográficas Como fase estacionaria se emplean platos HPTLC de gel de sílice 60 F254 de 10 x 10 cm (Merck o equivalente). Como fase móvil se emplea una mezcla de hexano, acetato de etilo y ácido acético (65:35:0,5). La aplicación de muestra se realiza empleando un aplicador automático (CAMAG Linomat 5 ó ATS4). Se aplican 3 µL de muestra o patrón, en Hoja respuesta Ref. 1

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Cromatografía Plana: CAMAG

La compañía Suiza CAMAG está plenamente dedicada a la Cromatografía Plana. Desde 1961 desarrolla y produce sofisticados instrumentos y software para esta utilísima técnica analítica.

Ventajas de la Cromatografía Plana La Cromatografía Plana (TLC Thin-Layer Chromatography, HPTLC - High Performance Thin-Layer Chromatography) es una técnica separativa moderna aceptada universalmente como un método extraordinariamente flexible, fiable y económico. Incluso si se usan de forma rutinaria otras técnicas, como HPLC o electroforesis capilar, la Cromatografía Plana tiene un lugar en el laboratorio. En muchos casos, ofrece la mejor solución, y además puede emplearse como método de confirmación.

Aplicaciones La Cromatografía Plana encuentra aplicación en campos muy diversos, siendo de especial relevancia: • Industria Farmacéutica, donde es especialmente adecuada para test de uniformidad de con tenido y otros ensayos de control de calidad. • Alimentación. • Productos naturales, extractos vegetales, hierbas (Figura 1). • Cosméticos. • Medioambiente, pesticidas en aguas potables. • Investigación bioquímica. • Toxicología, análisis forense y de doping.

Figura 3. CAMAG Linomat 5 para aplicación semiautomática de muestra en bandas por spray.

• Derivatización. • Evaluación densitométrica del cromatograma. • Documentación del cromatograma.

Aplicación y dosificación de muestra

Figura 1. Identificación de diferentes especies de Valeriana.

Las características más destacables de la Cromatografía Plana incluyen: • Enorme flexibilidad. • Análisis paralelo de muchas muestras. • Extrema claridad, ya que permite el examen visual de todas las muestras y sus componentes. • Preparación de una muestra simple, dado que la fase estacionaria solo se usa una vez. • Posibilidad de evaluación múltiple del plato con diferentes parámetros, dado que todas las fracciones de la muestra quedan almacenadas en el plato. 4

Figura 2. CAMAG Nanomat 4 para aplicación manual de muestra en puntos.

¿Qué instrumentación se requiere?

La selección de la técnica de aplicación de muestra y del dispositivo a emplear depende del volumen de muestra, número de muestras a aplicar y de la precisión y grado de automatización requeridos. La oferta de CAMAG incluye sistemas sencillos

La clave del éxito está en contar con un sistema completo e integrado de instrumentos y software, seleccionado en función de los requerimientos analíticos. CAMAG dispone de instrumentos y herramientas para todos los pasos en Cromatografía Plana: • Platos TLC/HPTLC. • Aplicación y dosificación de muestra. • Desarrollo del cromatograma.

Figura 4. CAMAG ATS4 para aplicación automática de muestra en puntos, bandas o rectángulos.

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CROMATOGRAFÍA PLANA manuales para aplicación de muestra en puntos (CAMAG Nanomat 4 Figura 2), equipos semi-automáticos para aplicación de muestra en bandas por spray (CAMAG Linomat 5 Figura 3) y sistemas completamente automáticos para aplicación de muestra en puntos, bandas o rectángulos, así como derivatización precromatográfica y adiciones (CAMAG ATS4 - Figura 4).

Figura 7. Densitómetro CAMAG TLC Scanner 3

Evaluación densitométrica y documentación del cromatograma

Figura 5. Cámaras de desarrollo vertical.

En todos los tipos de densitometría, la señal de una fracción del cromatograma se compara con la señal de fondo del plato. Para análisis cuantitativo, se compara la señal de una muestra desconocida con la de patrones de calibración desarrollados en el mismo plato.

tal (CAMAG DigiStore -Figura 9-, CAMAG VideoStore). La adquisición digital de imágenes ha reemplazado en gran medida a los sistemas fotográficos tradicionales con fines de documentación de cromatogramas, dadas las ventajas en cuanto a facilidad de archivo y posterior recuperación de la imagen sin cambios.

Desarrollo del cromatograma El desarrollo del cromatograma puede realizarse en tanques de vidrio verticales (Figura 5) o en cámaras de desarrollo horizontal. Estas últimas permiten diferentes configuraciones: saturado, no saturado, pre-acondicionado y sandwich. También existen equipos automáticos en los que todos los parámetros quedan bajo control, aumentando por tanto la repetibilidad (CAMAG ADC) o para el desarrollo en gradientes (CAMAG AMD 2 - Figura 6).

Figura 6. CAMAG AMD 2 para desarrollo de cromatogramas en gradientes.

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Figura 8. Vista 3D del barrido de una pista a 31 longitudes de onda diferentes.

La densitometría clásica emplea un haz de luz de longitud de onda seleccionable para barrer las pistas del cromatograma, mientras se mide la luz difusa reflejada. Es posible trabajar en absorbancia o en fluorescencia. El densitómetro CAMAG TLC Scanner 3 (Figura 7) opera en el rango espectral desde 190 nm hasta 800 nm, con alta selectividad espectral. Además es posible la identificación de las fracciones del cromatograma obteniendo su espectro de absorción. También es posible realizar la evaluación del cromatograma mediante un sistema de imagen digi-

Figura 9. Sistema de evaluación y documentación CAMAG Reprostar 3 con cámara digital.

Software El software CAMAG “winCATS Planar Chromatography Manager” está basado en un nuevo concepto que integra todas las funciones necesarias para la Cromatografía Plana. Los módulos individuales pueden combinarse de acuerdo a las necesidades. Durante el análisis, todos los pasos llevados a cabo por instrumentos controlados desde el software winCATS se ejecutan automáticamente y quedan documentados. 5

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Extraordinaria sensibilidad en el análisis de PAH con el nuevo GCMS QP2010 de SHIMADZU. Niveles de detección de ppt en el campo de los PAH El nuevo QP2010 es el cromatógrafo de gases con detector selectivo de masas con cuadrupolo más sensible. Esta gran sensibilidad se debe a tres factores fundamentales: 1.- Nuevo diseño de la fuente de iones, que favorece la generación de iones y facilita el acceso para el mantenimiento.

Tabla 1.- Respuesta del análisis de la patrón con una concentración de 500ppt (tiempo de retención, ión utilizado para calcular el área, área)

2.- Sistema de vacío formado por dos bombas turbomoleculares de 260 l/s y 65 l/s, y una bomba rotatoria. Este sistema asegura un vacío extremadamente bajo y estable, hasta con flujos de columna de 15 ml/min. 3.- Nuevo detector con prefiltro para el aumento de la sensibilidad. En la siguiente aplicación se muestra la alta sensibilidad de este equipo en el análisis de hidrocarburos policiclicos aromáticos (PAH) conforme al método 525.2 de la EPA. Equipamiento El GCMS utilizado para esta aplicación es el QP2010, el cual incorpora el cromatógrafo de gases GC2010 con control avanzado de flujo de última generación. Para la inyección demuestras se han utilizado: el inyector AOC20i y el carrusel de muestras AOC20s con capacidad de hasta 150 muestras. El portal de inyección es el SPL2010 se trata del inyector split-splitless que incorpora de serie el GCMS QP2010. Este viene equipado con un liner de 3,4 mm de diámetro interno. La columna de la firma Resteck tiene unas dimensiones: 30m x 0.25mm x 0.25 micras.

Figura1.- Cromatograma del patrón diluido hasta 500ppt en el GCMS-QP2010.

El software utilizado para controlar el equipo y tratar los datos obtenidos es el GCMSsolutions, el cual pertenece a la plataforma LabSolutions de Shimadzu. Se trata de un software de 32 bit orientado al control del GCMS-QP2010 con un diseño intuitivo y fácil de manejar. La aplicación muestra gráficamente los procedi6

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CROMATOGRAFÍA / GCMS Figuras 2 a 5.- Cromatogramas del patrón con una concentración de 50ppt.

mientos operativos en una barra de asistencia que, junto con las funciones Wizard, simplifican la entrada de los parámetros necesarios para trabajar con el equipo. La operación automática es posible ya que el software es capaz de realizar controles de parámetros introducidos por el usuario en base a los resultados de los análisis, gracias a las funciones de control de calidad. De este modo, el equipo se puede parar automáticamente en el caso de que los resultados obtenidos no se ajusten a los valores esperados (i.e. rango de concentración). Con el fin de satisfacer los requerimientos de las GLP (Good Laboratory Practice), las condiciones del equipo en el momento del análisis, así como los datos, son almacenados en un solo fichero de datos. Patrones Los patrones proceden de AccuStandards Inc. Las muestras se prepararon por dilución desde 0.5 microg/ml (500 ppb) hasta 0.0005 microg/ml (500 ppt). Condiciones del espectrómetro de masas El método de trabajo del QP2010 se definió para un rango de masas entre 45 y 400. La velocidad de barrido se definió para obtener entre 10 y 15 puntos para el pico mas estrecho del cromatograma. Condiciones del cromatógrafo de gases En el GC-2010 se definió la curva de temperatura y con el control avanzado de flujo (AFC) se ajustó el programa de presiones para obtener una velocidad lineal constante del gas portador en la columna. Con el equipo puesto a punto el último pico sale en menos de 28 minutos. Resultados Como resultados se muestran los cromatogramas obtenidos para los análisis de 500 ppt junto con una tabla con los tiempos de retención, ión utilizado para el cálculo de área y el área (figura1 y tabla 1). También se muestran los análisis realizados con diluciones de 50 ppt (figuras 2 a 5).

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Reducción del tiempo de Análisis de Volátiles con el GCMS-QP2010 de SHIMADZU ¿Es posible acortar el tiempo de análisis y alcanzar niveles de detección de ppt en el análisis de VOC? El sistema de muestreo por espacio en cabeza (Head-Space) es la forma más habitual de analizar y cuantificar los compuestos orgánicos volátiles en muestras de agua. Normalmente este sistema de inyección se acopla a un equipo de cromatografía de gases con detector de masas. Dada la importancia que está adquiriendo el análisis de las aguas, la duración de estos análisis se convierte en un punto en el que se podría mejorar para aumentar la productividad del laboratorio. La duración de los análisis se puede reducir de varias formas: reduciendo la longitud de la columna, aumentando el flujo de gas portador, aumentando la temperatura del horno y las rampas de temperatura, pero estos modos de acelerar los análisis dan lugar al empeoramiento significativo de la resolución. El mejor modo de aceptar los análisis es disminuyendo el diámetro interno de la columna. Aun así, la resolución del flujo de gas portador en un sistema de HS-GCMS, provoca la reducción de la sensibilidad debido a la disminución de la cantidad de gas introducido en la columna, y por otro lado el ensanchamien-

Figura 1.- Cromatograma de los VOC (2ppb).

Figura 2.- Cromatograma del Bromoformo en modo SIM (0.1ppb y blanco).

to de los picos del cromatograma. El agua introducida en el espectrómetro se puede convertir en un problema debido a que puede afectar a las condiciones de vacío y por tanto provocar fluctuaciones en la sensibilidad.

El GCMS-QP2010 de SHIMADZU ofrece alta sensibilidad y tiene una capacidad de vacío extraordinaria gracias a las dos bombas turbomoleculares (260L/s y 65L/s). Estas características permiten reducir los

Figura 3.- Curvas de calibración de los trihalometanos.

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CROMATOGRAFÍA / GCMS En la tabla 3 están los resultados de repetibilidad para 3 análisis consecutivos de los 4 trihalometanos (Cloroformo, bromodiclorometano, dibromoclorometano y bromoformo) con concentraciones de 0.1 microg/l (0.1ppb).

Figura 4.- Repetibilidad de los cromatogramas.

Curvas de calibración

tiempos de análisis con columnas de diámetro interno pequeño.

ellos. La duración del cromatograma es de tan solo 9 minutos.

Esta aplicación muestra el ejemplo de la reducción del tiempo en un ciclo completo, desde 30 hasta 15 minutos entre dos análisis, cuando se analizan muestras de compuestos orgánicos volátiles, en este caso 23 analitos.

Sensibilidad y repetibilidad

Separación

El bromoformo es el compuesto de esta serie que presenta la menor respuesta, es el pico más pequeño de cromatograma, y aun así se puede detectar en concentraciones por debajo de las ppb.

La figura 1 muestra el cromatograma en modo SIM de una solución de los VOC con una concentración de 2microg/l (2ppb) de cada uno de

En la figura 2 se presenta el cromatograma en modo SIM del patrón de Bromoformo con una concentración de 0.1 microg/l (0.1ppb), y un blanco.

Tabla 1.- Condiciones analíticas del equipo.

Las curvas de calibración (figura 3) corresponden a los trihalometanos antes mencionados en concentraciones que van de los 0.1 a los 20 microg/l. Las curvas de calibración se ajustan a una recta con un coeficiente de correlación superior al 0.9995 en todos los casos, lo cual demuestra la extraordinaria sensibilidad y estabilidad del GCMSQP2010. La estabilidad en el tiempo también se muestra en la figura 4, donde se han representado 3 cromatogramas tomados en distintos momentos de una secuencia de 20 análisis de muestras reales de agua, en los que se ha intercalado un patrón de 2 microg/l (2ppb).

Tabla 2.- Lista de los VOC estudiados.

Tabla 3.- Repetibilidad de trihalometanos.

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Aumento de Sensibilidad en los Equipos de GC y GCMS gracias a la Inyección múltiple de grandes volúmenes. Aplicación al Análisis de Pesticidas En algunas ocasiones surge un deseo cuando se trabaja con equipos de GC y GCMS: “¡Si pudiera aumentar la cantidad de muestra inyectada en el equipo para aumentar la sensibilidad!”

En general cuando se inyecta líquido, éste se evapora y se produce una rápida expansión del volumen. Si inyectamos gran cantidad de líquido, corremos el riesgo de saturar el inyector y la columna, provocando la perdida de muestra y de resolución. El AOC20i es el inyector adecuado para resolver el problema mencionado gracias a sus funciones:

se realizaron con la inyección sucesiva de 200 microl de una solución de 2 ppb de una mezcla de 7 pesticidas. Para alcanzar los 3000 microl de volumen final, se realizaron 15 inyecciones consecutivas de 200 microl con el AOC20i.

La figura 1 muestra el resultado de la inyección múltiple con un volumen final de 3000 microl. Con este método evitamos el ensanchamiento de picos característico de las inyecciones de grandes volúmenes y aumentamos la cantidad absoluta de analitos buscados.

Figura 1.- Cromatograma de 3000 microl de pesticidas inyectados con el AOC20i en el modo de inyección múltiple.

- Permite la inyección múltiple. - Compatible con jeringas de gran capacidad (250 microl) - Permite la inyección a baja velocidad. - Permite ajustar la velocidad del émbolo. En los ejemplos siguientes se muestran análisis con el AOC20i en el modo de inyección múltiple. Este modo permite la inyección de grandes volúmenes por la inyección repetitiva cuando la cantidad necesaria para la detección supera la capacidad de la jeringa.

Figura 2.- Cromatograma del extracto de pimiento verde en el modo de inyección múltiple del AOC20i.

En los ejemplos se utiliza el inyector PTV (Programmed Temperature Vaporizer) con un inserto de vidrio con un relleno gracias al cual, podemos inyectar cantidades superiores a los 1000 microl (1ml) de muestra líquida, y podemos detectar cantidades por debajo de las ppb en el detector FPD. * Análisis de 3000 microl de residuos de pesticidas por inyección múltiple El inserto del inyector PTV se rellenó con TENAX-TA y los análisis 10

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CROMATOGRAFÍA / GCMS Figura 3.- Correlación de área de picos frente al volumen de inyección (nº de inyecciones).

* Análisis del extracto de pimiento verde con el AOC20i en modo inyección múltiple. La figura 2 muestra el cromatograma del extracto de pimiento verde en el que se han añadido 7 pesticidas organofosforados. Este análisis es el resultado de la inyección múltiple hasta un volumen final de 1000 microl (1ml). * Linealidad de las áreas respecto al número de inyecciones en cada análisis. La figura 3 muestra la curva de calibración de una muestra de 10 ppb de cada uno de los tres pesticidas. Cada inyección, desde 1 hasta 15, introduce un volumen de 40 microl.

Tabla 1. Condiciones analíticas Instrumento:

GC-17Av3

Columna:

DB1 (0.25mm x 30m)

T. Horno:

50º(5min) --- 20º/min --- 160º --- 5º/min --- 280ºC

T. Detector:

280ºC

Presión de He:

50kPa --- 50kPa/min --- 150kPa

Relleno del inserto:

Tenax TA

Inyección:

Modo inyección múltiple sobre PTV

T. PTV:

70º(1min) --- 30º/min --- 100º(1min) --- 250º/min --- 280ºC --- 250º/min --- 280ºC

Detector:

FPD (detección de fósforo)

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ESPECTROMETRÍA FTIR

Software IRSolution de SHIMADZU para trabajo en FTIR El software IRSolution es un paquete de software de 32 bits basado en Windows para control de los espectrómetros FTIR de Shimadzu. Con el IRSolution, las operaciones para el análisis FTIR se realizan de forma fácil y rápida utilizando pantallas de análisis dedicadas. Medidas y seguimiento de estado Todos los parámetros de medida se disponen en cinco ventanas de diálogo fácilmente visibles. La medida arranca con un sólo clic mostrándose el espectro a tiempo real durante la misma. Los ajustes de hardware: selección de fuente, divisor de haz, detector y accesorios, se muestran por pantalla en el seguimiento de estado. Además del modo de acumulación normal, también hay opción para evaluar barridos, barrer de forma continua y corrección atmosférica eliminando los efectos de la humedad y el dióxido de carbono.

ne de funciones tales como detección de picos, resta espectral, conversión Kubelka Punk, corrección de ATR para búsqueda espectral y cuantificación, etc. Los resultados del proceso se pueden importar dentro de ficheros Word o Excel.

Cuantificación: además de la calibración multipunto, el IRSolution ofrece MLR (regresión Multilineal) y opcionalmente PLS (Mínimos Cuadrados Parciales) que es muy útil para las medidas en NIR. Búsqueda Espectral: El IRSolution permite la creación de bibliotecas de

Conformidad con GLP/GMP y FDA 21 CFR Parte 21 Desde hace poco, la fiabilidad y seguridad del software que controla un instrumento así como su toma de datos se ha convertido en algo de suma importancia. En el IRSolution se incluyen las siguientes características: • Seguridad y función de registro con nombre de usuario y contraseña. • Restricción de derechos de usuario por grupo de usuarios. • Preservación de datos brutos que incluye el interferograma y espectro de referencia antes de aplicar la FFT (Trasformada Rápida de Fourier). • Firma trónica

usuario a partir de espectros adquiridos y la búsqueda espectral en bibliotecas de usuario y comerciales.

elec-

También hay disponibilidad de documentación IQ/OQ si es menester.

Generador de Informes Modo Visualización Todos los datos que se adquieren se pueden visualizar a tamaño normal y aumentar con zoom para un mejor examen de ciertas áreas o para comparar con otros espectros.

Capacidad de personalizar informes usando o creando plantillas donde volcar los datos que pueden ser espectrales, curva de calibración, resultados de cuantificación tablas de

Procesos de datos: cuantificación y búsqueda Una vez acabada la adquisición, se puede extraer una gran variedad de información específica de cada espectro medido. El IRSolution dispo12

picos, etc. Se puede configurar el color, el espesor del gráfico, el tamaño, etc. Hoja respuesta Ref. 6

P M

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Cu P mple /

L G

El El Rey Rey ha ha muerto....... muerto....... ¡Viva ¡Viva el el Rey! Rey! El El que que fue fue Líder Líder Mundial Mundial en en su su Clase, Clase, el el UV-1600, UV-1600, da da paso consigue 1 nm de de Resolución Resolución paso al al nuevo nuevo UV-1700 yy consigue

• Especificaciones y funciones (exactitud de longitud de onda, resolución, exactitud fotométrica, etc.) según Farmacopeas Europea, USA y Japonesa.

• Diseño compacto tamaño aproximado de A2. 18 kg de peso que puede transportar una persona. • Trabajo sencillo con teclas dedicadas. Gran senci-

• IQ/OQ .

• Referencia de auditoria, integridad de los datos y seguridad.

El beneficio de tener 1nm de Resolución

Las sustancias con anillo aromático muestran perfiles espectrales de resolución afilada en torno a los 250nm. En tales casos, una diferencia de 1nm en resolución, nos da un perfil completamente claro. El gráfico de arriba muestra dos espectros de benceno en etanol, uno visto con un UV-1700 (en rojo) y el otro con un instrumento de 2nm de resolución (en negro). Nos confirma la diferencia espectral patente al trabajar con una resolución no adecuada. (Gráfico obtenido con el Software UVProbe).

El UV-1700 consigue confortablemente la resolución en longitud de onda que prescribe la Farmacopea Europea. Esta demanda un ratio de 1,5 entre el valor del pico cercano a 269nm y el valor del valle cercano a 266nm para una disolución de tolueno en hexano. Este ratio es 2,23 en el gráfico mostrado arriba con el UV-1700. (Gráfico obtenido con el Software UVProbe).

IZASA - C/ Aragoneses, 13 - Pol. Ind. de Alcobendas. 28108 Madrid - Tel.: 902 20 30 80 - Fax: 91 663 05 45 - www.izasa.es - E-mail: [email protected]

Características especiales

Nuevos Sistema de Fluorescencia La compañía SYNGENE, líder de mercado en sistemas de documentación de geles, lanza sus nuevos sistemas y mejoras en el campo de la fluorescencia Estos avances consolidan a SYNGENE como la compañía fabricante de sistemas de documentación más versátil del mercado, con una gama de productos muy extensa que, en el ámbito de la fluorescencia, permiten al usuario disponer de equipos desde 3.000 euros a 50.000 euros. Este año, las innovaciones pasan, dentro de los equipos de fluorescencia, por los nuevos sistemas GENEFLASH y DIGIGENIUS, ambos a precios muy asequibles y con un rango de calidades y resultados que los hacen imprescindibles para usuarios que necesiten sistemas de fotodocumentación rápidos, sencillos e intuitivos en su uso. Nuevo GENEFLASH Sin duda, el sistema con mejores expectativas de venta para el 2004, dentro de la gama sencilla de SYNGENE, será el nuevo sistema GENEFLASH. Este nuevo instrumento, permite al usuario captar imágenes de geles de cualquier tipo, (geles de agarosa o acrilamida teñidos con SYBr Green, SYBR Gold o bromuro de etidio, de proteínas 1D2D teñidos con coomassie o plata, TLC, GFP, autorradiografías, placas de Elisa, etc.), con la particularidad de no necesitar PC.

Efectivamente, el GENEFLASH incorpora una pantalla a color de LCD 6” para visualizar en TIEMPO REAL las imágenes, grabando éstas con sólo pulsar un botón en una tarjeta compact flash de 32 MB, en formatos TIFF, JPG y BMP . Asimismo, el GENEFLASH se suministra con un lector de tarjetas apto para cualquier PC o MAC que se conecta directamente vía USB por si el usuario prefiere guardar sus imágenes en ordenador. GENEFLASH usa la última tecnología en vídeo digital combinada con la posibilidad de guardar las imágenes en uno de los formatos de última generación como son las COMPACT FLASH, las cuales se han convertido hoy en día en la forma estándar de almacenamiento de datos digitales. El sistema presenta un nuevo estilo ergonómico de cabina oscura con puerta corredera para un completo acceso sin restricciones y sin ocupar espacio adicional en el laboratorio cuando se abre. Posee también un completo panel de control en el frontal de la cabina con el objeto de controlar, visualizando en la pantalla, todas las funciones de la cámara CCD de 8 bits que incorpora (zoom, exposición, iris, enfoque), así como las opciones de configuración y almacenamiento en la tarjeta.

Una de las características únicas de este instrumento es que funciona con cualquier transiluminador que el usuario pueda tener en el laboratorio previamente, dentro de las medidas estándares de la cabina, lo que puede significar una reducción significativa en el coste. Otra característica es la posibilidad de imprimir directamente la imagen visualizada en la pantalla LCD, a través de la impresora térmica que se incluye, con lo que, para casos determinados en los que no es necesario almacenar la imagen para su posterior uso, esta opción ahorra al usuario un tiempo crucial. Opciones de pantallas convertidoras SYNGENE ha adoptado una nueva tecnología en pantallas de fósforo que permiten la conversión de la luz UV en diferentes rangos de longitudes de onda. Seleccionando la correcta combinación, SYNGENE es capaz de suministrar pantallas de conversión para diferentas tipos de aplicaciones: * UV-Blanca: Convierte la luz del transiluminador en luz blanca para su uso con autorradiografías, coomassies, geles de proteínas, etc. * UV-Azul: Produce un área uniforme y de alta intensidad a 480 nm, ideal para el trabajo con GFP, SYBR Gold y SYBR Green Softwares En la línea que SYNGENE viene manteniendo desde su creación, el GENEFLASH se suministra opcionalmente con una licencia del software de análisis y cuantificación GENETOOLS. Todos los softwares

Especificaciones Cámara Resolución Pantalla Lentes Sensibilidad Señal/ruido Apertura Panel de control Formato de grabado Compact Flash 32 MB. Lector de tarjetas

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CCD 8 bits. Tiempo Real 768 x 582 pixeles LCD 6” color activo matrix 8 to 48mm zoom manual + lente 2x Less than 0.1ng of DNA >56db f1.2 Apertura, enfoque, zoom y tiempo de exposición (0,1 a 10 seg) Sharpening, inversión, saturación. TIFF, BMP Hasta 70 imágenes. Incuído y válido para PC o MAC, vía USB

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CIENCIAS DE LA VIDA de SYNGENE son actualizables de forma gratuíta y de por vida para el usuario, directamente desde Internet. Garantías Todos los sistemas de SYNGENE están garantizados por tres años. Nuevo DIGIGENIUS El DIGIGENIUS es el sistema de documentación de geles más sencillo de Syngene, sin embargo, no por ello deja ser uno de los más versátiles y más usados en el mercado, con una sensibilidad de detección de < 20 pg de ADN de doble cadena. Para el año 2004 se han actualizado las posibilidades de este fotodocumentador con el fin de hacerlo, por un lado, muy accesible por precio al cliente y por otro con el de dotarlo de una nueva cámara digital capaz de capturar imágenes de cualquier tipo de gel con una resolución y rapidez incomparables actualmente en el mercado. La posibilidad que ofrece de controlar todas las funciones de la cámara desde el PC atraves de su “TWAIN DRIVER” especial, permite al usuario capturar tantas fotos como desee, almacenarlas en el PC y posteriormente analizarlas, sin tener que tocar en ningún momento la cámara, con lo que el riesgo de contaminación por agentes como el Bromuro de Etidio utilizado en la tinción de los geles, es prácticamente nulo.

deo. Esta cámara funciona a 24 bits para las imágenes a color o a 8 bits en blanco y negro, lo que se traduce en 256 niveles en la escala de grises. Asimismo tiene una pantalla a color de LCD que posibilita el uso de la cámara no sólo para el laboratorio, sino para el uso en fotografía general. La cámara se suministra con cables y software de apoyo. Autofocus Sencillos zoom y enfoque automáticos para la captura rápida de imágenes de geles de cualquier tamaño. Gracias a esta función es muy rápido y sencillo el capturar imágenes de un gel con sólo apretar un botón.

incluso establecer patrones de semejanza entre bandas de diferentes calles con la opción de matching del programa. Cada uno de los resultados tiene la opción de ser directamente exportado a Excel. Aplicaciones y Garantía. Escoja entre análisis de geles, spot blots, colonias, placas, autorrads y más dentro del mismo software de análisis GeneTools….siempre contando con los tres años de garantía que SYNGENE ofrece así como las actualizaciones de los softwares de manera gratuita para sus clientes de forma permanente.

Filtros, Transiluminador y Hood Soporte para filtro y filtro estándar para UV. Transiluminador de 302 nm opcional y Hood compacto de 20cm x 26 cm acoplado a la cámara digital que permite el análisis de geles de 21cm x 26 cm. Acceso directo al Software de análisis Gene Tools. No se necesita Hardware adicional ni otro software aparte. Conecte directamente su DigiGenius al PC, Laptop o MAC gracias a su puerto USB. Incluído Software de documentación de geles Gene Tools. GeneTools es el más rápido y eficaz sistema de análisis de geles del mercado, el cual le permite procesar imágenes y detectar automáticamente datos de calles y bandas, cuantificación, pesos moleculares e intensidad en pocos segundos. Es posible Especificaciones

Cámara digital Este sistema se presenta con la nueva cámara digital CANON POWER SHOT G5 con una resolución de 5 Megapíxeles, lo que permite crear imágenes de alta definición, muy ùtiles cuando se trabaja con geles de baja discriminación de banHoja respuesta Ref. 7

Captador CCD Apertura Medición Luz Balance de blancos Obturador Modo ráfaga Modo Vídeo Sensibilidad Pantalla LCD Resolución Interface Peso Dimensiones Accesorios

5.0 megapixles f2/-/3.0 TTL AF 9 zonas o 1 punto al centro Evaluativa, spot, centro Auto, pre-reglajes y maual 15-/2000 seg Sí, 2 imágenes por segundo Sí, hasta 3 minutos Auto, 50, 100, 200, 400 ISO TFT color PSI 1,8 pulgadas 2595x1944,1600x1200, 1024x768, 640x480 píxeles USB y Vídeo 410 gr 121x73,9x69,9mm Cámara, batería Li-ion, adaptador/cargador, cables USB y vídeo, telecomanda, tarjeta compact flash 32mb.

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Imagine la Perfección en Imagen Digital. Microscopios de Investigación ECLIPSE 80i Atendiendo a las necesidades del investigador en Biomedicina, Nikon nuevamente ha establecido estándares de nuevas tecnologías para satisfacer las demandas técnicas del mercado. El microscopio ECLIPSE 80i es el primer microscopio con óptica especialmente dedicada a imagen digital. Construido para una óptima fotodocumentación digital, incorpora un amplio rango de nuevos accesorios y funciones avanzadas recientemente desarrolladas para expandir las prestaciones, ergonomía y versatilidad de la microscopía digital de investigación. Centrado en conceptos de estabilidad y precisión mecánica, Eclipse 80i alcanza además nuevos niveles de prestaciones en fluorescencia, incorporando una nueva óptica Plan Apocromática VC con corrección de amplio espectro (hasta 405 nm), y ofrece el mayor rango de configuraciones de investigación disponible en el mercado.

• Portaoculares para campo visual de hasta 25 mm y ángulo de inclinación de 25º. • Módulo divisor de haz con doble salida para cámaras digitales, módulos confocales y detectores espectrales. • Función Zoom integrada para permitir una perfecta equiparación de la resolución óptica de la serie de objetivos CFI60 a la resolución digital de las cámaras digitales Nikon recomendadas, así como las de otros fabricantes.

alcanzan tanto un alto contraste como una excelente resolución. - Iluminador “Ojo de Mosca” para una iluminación transmitida completamente homogénea y 1,6 veces más luminosa que el sistema previo.

Basándose en encuestas hechas a usuarios, Nikon ha diseñado un sistema de Nomarski totalmente nuevo para el Eclipse 80i, permitiendo seleccionar entre capacidades de imagen de alto contraste y alta resolución, críticas para muchas aplicaciones en investigación biológica.

Construido para Imagen Digital - Nuevo Cabezal de Imagen Digital que permite la equiparación de la resolución óptica de los objetivos con la resolución digital de las cámaras a utilizar. - Epifluorescencia integrada con torreta para seis bloques de filtros. - Puertos de salida dual de imagen - Zoom continuo 0,8X – 2,0X en la salida posterior. El nuevo Cabezal de Imagen Digital DIH es una unidad integrada que incluye: • Sistema de epi-fluorescencia interconstruido con 6 posiciones para bloques de filtros y un obturador motorizado de control remoto 16

Avances significativos en Fluorescencia - El epi-iluminador de fluorescencia de nuevo desarrollo – Sistema de Fluorescencia Hi S/N – incorpora un novedoso dispositivo “Noise Terminador” que permite la obtención de relaciones señal/ruido cinco veces superiores a los sistemas de fluorescencia previos, extrayendo lo último en imagen de fluorescencia de baja señal.

Se ofrecen prestaciones mejoradas mediante el nuevo sistema de iluminación transmitida y la revolucionaria matriz multifacetada “Ojo de mosca”, que ofrece una intensidad homogénea que llena completamente la apertura posterior del objetivo y satiface las demandas más estrictas de la imagen digital en alta resolución. Combinando todos los factores, junto con un nuevo condensador universal, se constituye una perfecta plataforma óptica y digital para captura de imágenes críticas.

DIC totalmente nuevo - Obtención de imágenes con coloración de fondo uniforme a cualquier aumento, mientras que se Hoja respuesta Ref. 8

MICROSCOPÍA ÓPTICA Nuevos objetivos VC Plan APO - Corregidos en rango más amplio de longitudes de onda – hasta la línea h – obteniendo así imágenes más vívidas en imagen digital - Expansión de prestaciones ópticas en la periferia, mejora en la corrección de aberraciones y nuevo diseño especificado para aplicaciones críticas de imagen digital. - Imágenes más vividas y limpias a lo largo de un amplio rango de condiciones de observación. Expansibilidad - El más amplio rango de sistemas configurables por el usuario. - Desde el laboratorio básico de diagnósticos hasta la investigación de máximo nivel.

toria avanzada, ideal para aplicaciones que requieran un centraje profesional y giro de platina para orientaciones precisas de la muestra. Avances en ergonomía De creciente importancia son los aspectos de ergonomía y confort de usuario. El microscopio Eclipse 80i puede configurarse con el nuevo Portaoculares Telescópico-Basculante, inclinable y extensible, que asegura una óptima altura de oculares y una posición confortable de observación independientemente de las características físicas del usuario, resultando en una reducción del esfuerzo sobre nuca y hombros a lo largo de horas de observación. El mando de la platina del Eclipse 80i permanece

en posición fija durante su manejo, permitiendo a la mano y cuerpo quedar inmóviles y alineadas con el instrumento. Existen disponibles versiones de platina de mando a la izquierda o a la derecha, ambas construidas con recubrimiento ultraduro de Alumita para ofrecer una superficie resistente y de alta durabilidad.

Especificaciones Iluminación

Lámpara halógena 12V 100W Detección automática de alimentación 100 – 240V (Voltaje Universal) Iluminación optimizada para imagen digital “Ojo de Mosca”

Filtros encastrados

NCB11, ND8, ND32

Sistema óptico

Sistema Óptico Infinito CFI60

Aumentos Totales

10 - 1500X

Portaoculares

Cabezal de Imagen Digital DIH Trioculares UW “T” y “F” Nuevo Portaoculares Ergonómico con salida digital DSC (opcional)

El microscopio Eclipse 80i es también una plataforma versátil con el más amplio rango de expansión nunca conseguido, desde un laboratorio básico hasta el más alto nivel de investigación, incorporando todas las configuraciones y técnicas de microscopía. Existen dos modelos de estativos disponibles del Eclipse 80i: Uno, el estándar básico, incluye una subplatina estándar con su soporte de platina. El segundo, avanzado, posee otra subplatina centrable para ser utilizada junto con la platina gira-

Binocular Oculares

10X FN22; UW10X FN25; 15X FN14,5

Enfoque

Macrométrico 14 mm por vuelta Micrométrico 0,1 mm por vuelta Precisión de lectura 1 µm en mando izquierdo Dureza de giro en macrométrico ajustable Función de re-enfoque (limitador de desplazamiento)

Platina

Recubrimiento de Alumita extraduro Manejo de mando XY sin desplazamiento propio antero-posterior. Dimensiones 159 x 243 mm, con rango de desplazamiento 78 x 54 mm Posición seleccionable del mando XY Giro de platina centrable (opcional)

Revólver

Séxtuple o séxtuple con alojamientos para DIC

Accesorios

Iluminador de epi-fluorescencia (6 bloques; epi-fl y reflexión) Sistemas de co-observación Módulo de doble salida para cámaras. Módulo de aumentos intermedios.

Técnicas

Campo claro Campo oscuro Contraste de fases Epi-fluorescencia Nomarski DIC Polarización simple Epi-DIC Epi-campo oscuro

Hoja respuesta Ref. 8

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MICROSCOPÍA ÓPTICA Imagine la Microscopía en perfecto Confort… Los nuevos microscopios Nikon Eclipse 50i/55i representan lo último en ergonomía. La nueva serie de microscopios Nikon Eclipse 50i/55i incorpora toda una serie de características que hacen que el manejo de los mismos sea realmente muy confortable. La platina ha sido rediseñada totalmente. Su mando XY permanece en una posición fija durante su manejo permitiendo a la mano y cuerpo del usuario quedar inmóviles cuando se maneja el microscopio. El nuevo portaoculares telescópico/basculante, inclinable y extensible, permite que cualquier usuario, independientemente de sus características físicas, pueda adoptar una posición confortable de observación. Si a todo esto añadimos el hecho que los microscopios Nikon Eclipse 50i/55i están equipados con la afamada óptica Nikon CFI60, significa que usted no solamente podrá obtener el mejor rendimiento óptico de su microscopio sino que además tendrá la libertad de configurar el microscopio con todos aquellos accesorios que mejor se adecuen a sus necesidades. Ambos microscopios van asimismo equipados con un revólver séxtuple lo que aumenta en gran manera su flexibilidad al poderse disponer en un solo microscopio de diferentes

objetivos de muy diversos aumentos. Microscopio Nikon Eclipse 55i A diferencia del microscopio Nikon Eclipse 50i que dispone de un sistema de iluminación tradicional mediante lámpara de halógeno de 6V 30W, el microscopio Eclipse 55i dispone de un novedoso sistema de iluminación por luz fría mediante LED. Este sistema de iluminación, totalmente blanco, no genera calor y mantiene constante la temperatura de color lo que le hace perfecto para ver muestras en campo claro. Asimismo el consumo energético de los sistemas de iluminación LED es mínimo lo que convierte al Eclipse 55i en un microscopio portátil al poder ser éste alimentado mediante baterías, independientemente de la red eléctrica. Ergoview Este nuevo sistema de citodiagnóstico es adaptable a los modelos Eclipse 50i y 55i. Permite cambiar entre los objetivos 10x y 40x automáticamente mediante un pulsador. Permite asimismo el marcaje de la muestra al mismo tiempo que se observa a través de los oculares.

Microscopio Nikon Eclipse 55i equipado con el sistema de citodiagnóstico “Ergoview”

señal/ruido cinco veces superior a los sistemas de fluorescencia previos. Pensados para la era digital Ambos microscopios (Eclipse 50i/55i) han sido diseñados pensando en la era de la fotomicrografía digital. El nuevo puerto triocular para el portaoculares telescópico/basculante le permitirá documentar digitalmente sus imágenes mientras las observa confortablemente a través de los oculares.

Nueva epi-fluorescencia

Microscopio Nikon Eclipse 50i con portaoculares ergonómico triocular y la cámara digital Nikon DS-5M-L1

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Los microscopios Nikon Eclipse 50i/55i pueden ser también equipados con un nuevo epiiluminador de fluorescencia que incorpora un novedoso dispositivo “Noise Terminador” que permite la obtención de imágenes con menos fondo y con una relación

Microscopio Nikon Eclipse 50i/55i equipado con epifluorescencia

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CIENCIAS DE LA VIDA

aliQuot dispensador automático en Microplaca para pequeños volúmenes de GENETIX El aliQuot es un sistema de dispensación de alta precisión para volúmenes pequeños de líquido. Llena dos placas de 1536 por minuto. Puede dispensar líquidos, células, bolas, etc... y es fácil de limpiar con partes autoclavables.

El sistema incluye un cabezal de 16 puntas para placas de 384 pocillos, una botella de 500ml y un juego de tubos resistentes al DMSO.

Precisión • Resultados al dispensar 1 ul de PBS en una placa de 1536 pocillos - Volumen Dispensación: 1.018

Opcionalmente se puede instalar dos stackers con capacidad para 40 placas. Este sistema de stackers es el único que incluye la retirada de las tapas de las microplacas de forma automática.

- CV pocillo a pocillo: 6.19% - Precisión: 1,9% - Variación Placa a Placa: