But11. Inst. Cat. Hist. Nat., 42 (Sec. Zool., 2): 107-118. 1978

CONTRIBUCION A LA SISTEMATICA DE VIPERA SEOANEI LATASTE, 1879 (REPTILIA, VIPERIDAE) 1. ULTRAESTRUCTURA DE LA CUTICULA DE LAS ESCAMAS Antonio Bea *

Rebut : agost 1978 Acceptat: octubre 1978

SUMMARY Contribution to the systematics of Vipera seoanei Lataste , 1879 (Reptilia, Viperidae). I. UI trastructure of the scales ' cuticle In this paper the results of a research work on the ultrastructural morphology of the scales' cuticle of four species of European Viperidae ( Vipera b . berus , V. seoanei, V. aspis and V. latastei ) are presented. The motivation of the study has been the enquiry about the transformation of the subspecies. V. berus seoanei in to the species V. Seoanei (LATASTE, 1879). Scanning microscopical techniques have been used (see HEYWOOD, 1971; COLE & VAN DEVENDER, 1976; GANS & BAIC, 1977). For each species, facial, labial, ventral and dorsal scales from several specimens, caught in different localities, have been studied. From the different observations, it has been possible to define the kind of cuticle growth, mainly the dorsal one. The cuticle base (which is the imbrication zone between two scales) presents several dented strias, more or less parallel. A differential process takes place, and dented series with anterior sharp points are originated. These points are driven in to the base of the anterior ones that originate long cords. Between each two points some other fibres are born which, on its turn, form nets or arcs. For each one of the four studied species the growth results are different. V. b. berus presents a uniform structure, formed by parallel fibres. In V. seoanei, the fibres form transversal arcs in a regular way. In V. aspis , fibres form thick fascicles, with transversal arcs between them. In V. latastei , the structure is more complex than that of V. aspis because there are several arcs between the fibrilar cords. All these structures are specifical and there are not variations among the different studied populations of each species. For each species the cuticular ultrastructure at the qnd of the growth period is the same for all the scales. The only exception are the ventral scales, that are very similar in all the species' It seems that they are stopped in a intermediate growth phase. As one can see, the cuticle ultrastructure of V. seoanei is intermediate between these of V. b. berus and V. aspis . It is possible to think that V. seoanei was originated by a hybrid of V. b. berus and V. aspis when the interspecific crossing was still possible. Anyway, the results agree with the conclusions of SAINT GIRONS & DUGUY (1976). The structure sequence would be: Vipera b . berus , V. seoanei, V. aspis and V. latastei . From V. b. berus to V. latastei the cuticle increases in thickness. The more meridional the species distribution, the thicker is the cuticle, and also more complex. I think * Departament de Zoologia (Vertebrats). Facultat de Biologia. Universitat de Barcelona. Gran Via, 585. Barcclona-7.

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this would be an adaptation to the evaporation. Although V. aspis can be found at the same latitude as V. seoanei , the former lives in higher places than the latter and its termopreferendum is lower.

RESUM Contribucio a la sistematica de Vipera seoanei Lataste , 1879 ( Reptilia , Viperidae ). I. UItrastructura de la cuticula de les escates L'objectiu del present treball es aportar noves dades sobre el coneixement de la morfologia ultrastructural de la cuticula de les escates de quatre viperids europeus, i contribuir a aclarir I'estat sistematic de Vipera seoanei . Recentment, la fins ara subspecie V. b. berus ha estat elevada a la categoria d'especie despres dels estudis realitzats per SAINT GIRONS & DUGUY (1976). Aquest primer estudi es basat en la descripcio de la ultrastructura de la cuticula de V. b. berus , V. seoanei , V. aspis i V. Iatastei. La metodologia de treball s'ha basat en la utilitzacio d'un microscopi d'escombratge, tecnica no utilitzada fins fa poc temps en I'estudi dels reptils (HEYWOOD, 1971) i encara subutilitzada en aquest camp atesa la seva aparicio recent com a mitja per a establir el valor sistematic de determinades estructures (COLE & VAN DEVENDER, 1976; GANS & BAIC, 1977).

S'han estudiat diversos exemplars de cada especie, de diferents localitats, i ha estat presa la cuticula de les escates rostral, labials, dorsals i ventrals. Gracies a les successives observacions realitzades, hom arriba a determinar el tipus de creixement de la cuticula, sobretot de la cuticula de les dorsals. La base de la cuticula, zona d'imbricacio de dues escates, mostra unes estriacions dentades mes o menys paral•leles. Aquestes estriacions es diferencien i donen Iloc a unes series dentades molt pronunciades amb uns pics d'avenc que tendeixen a introduir-se a la base dels pics de la serie anterior. D'aquesta forma s'originen Ilargs cordons. Dels arcs situats enmig de dos pics sorgeixen altres fibres que, segons les especies, s'agrupen en arcs o be es continuen tot formant una xarxa uniforme. El resultat final del creixement to valor especific dins de les quatre especies estudiades. V. b. berus mostra una estructura uniforme de fibres paralleles. V. seoanei mostra les fibres agrupades en arcs transversals, disposats regularment. V. aspis mostra les fibres agrupades en feixos gruixuts, amb arcs transversals disposats enmig d'elles. V. Iatastei presenta un grau de complexitat mes gran al trobat en V. aspis , en mostrar diversos arcs enmig dels cordons fibrillars. Aquest tipus d'estructura to un caracter especific i no varia en les diferents poblacions de cada especie. Totes les escates del cos, excepte les ventrals, I'estructura de les quals correspon a una fase inicial del creixement i que s'assembla en totes les especies, mostren el mateix tipus d'ultrastructura cuticular. L'examen de la ultrastructura de la cuticula de les escates de V. seoanei confirma les conclusions de SAINT GIRONS & DUGUY (1976) sobre la categoria especifica d'aquesta forma. Dita ultrastructura mostra un caracter intermedi entre V. b. berus i V. aspis. Cal pensar en el possible origen de V. seoanei a partir de formes hibrides de V. b. berus i V. aspis , quan les dues especies encara no eren gaire diferenciades i el seu encreuament era viable. Es posa de manifest el gradient de la ultrastructura de la cuticula de les escates, amb casos extrems de complexitat en V. b . berus i V. Iatastei , i formes intermedies en V. seoanei i V. aspis . La cuticula es va fent cada vegada mes gruixuda. Aquest fet pot esser explicat com una adaptaci6, no a la temperatura, sing a I'evaporacio. Com mes meridional es ('especie, mes gruixuda es la seva cuticula i, per tant, mes complexa. Cal dir que, si be V. seoanei i V. aspis poden conviure dins una mateixa latitud, la complexitat trobada en V. aspis pot esser explicada tenint en compte els requeriments altimontans i de termopreferendum baix d'aquesta especie (SAINT GIRONS, 1975). 108

INTRODUCCION El motivo del presente trabajo es aportar nuevos datos al conocimiento de la morfologia ultraestructural de la cuticula de las escamas de cuatro viperidos europeos, y contribuir a esclarecer el status sistematico de Vipera seoanei en la peninsula Iberica. El estudio ha sido realizado con la avuda de un microscopio electronico de barrido y se ha trabajado con las cuticulas de numerosas escamas de cada •uno de los ejemplares analizados, tomando individuos de diferentes localidades para cada especie. Dentro de la fauna iberica, la subespecie Vipera bertis seoanei ha sido elevada recientemente a la categoria de especie, bajo la denominacion de Vipera seoanei LATASTE, 1879, a raiz de las conclusiones obtenidas tras un estudio descriptivo de su morfologia, etologia y del analisis de su cariotipo (SAINT GIRONS & DUGUY, 1976). Hasta hace muy poco tiempo la microscopia de barrido no se habia aplicado al estudio de la estructura cuticular de los reptiles (HEYWOOD, 1971), por lo que la bibliografia referente a esta nueva etapa de estudio de los ejemplares es reciente (COLE & VAN DEVENDER, 1976; GANS & BAIL, 1977), no habiendo uniformidad de criterio respecto a la utilidad e interpretacion de los resultados obtenidos (BuRSTEIN, LARSEN & SMITH, 1974, citado por COLE & VAN DEVENDER, 1976: 510).

El presente estudio se basa en la descripcion de la cuticula de las escamas, fundamentalmente de las dorsales, y en la comparacion de sus diferentes tipos de estructura en las especies estudiadas.

MATERIAL Se ha trabajado con material procedente de las colecciones del Departamento de Zoologia (Vertebrados) de Barcelona, del Centro Pirenaico de Biologia Experimental (C.P.B.E.) de Jaca (Huesca), del Museo de Zoologia, seccion de Herpetologia, de Barcelona, de la Sociedad de Ciencias Naturales Aranzadi, de San Sebastian, y con material propio. Los ejemplares pertenecen a cuatro especies: Vipera berus berus L. 1758, Vipera

seoanei LATASTE 1789, Vipera aspis L. 1758, y Vipera latastei BoscA 1878. De cada uno de ellos se han estudiado cuatro tipos de escamas: rostrales, labialcs, ventrales y dorsales. Como norma se han estudiado las tablas 4.a y 5.a superior, las dorsales del centro del cuerpo del animal y de las partes superior y lateral del dorso, y las ventrales de la zona media. De estas ultimas solo sc ha tomado una parte de la cuticula de la escama, debido a que su considerable tamafio impide la colocacion de una de c1las completa en el portaobjetos especial (Stub) utilizado en el tipo de microscopio empleado.

RELACION DE MATERIAL Vipera berus berus: n.° 2860-E, d, Suiza: rostral, labial y dorsales. N.° 3875-E, C31 Suiza: rostra], labial, ventrales y dorsales. Depositados en la coleccion del C.P.B.E. Vipera seoanei: n ° B-1, y, Zaldivia (Guipuzcoa): rostral, labial y dorsales. N°' B11 y B-8, 5 C3, Zaldivia: dorsales. Pertenecientes a la coleccion del autor. NOmero 77090401, ? , San Sebastian: rostral, labial, ventrales y dorsales. Depositado en la coleccion de Aranzadi. N.° R-2, d, La Maragatcria (Leon): rostral, labial, ventrales y dorsales. N° B-4, joven, San Sebastian (Guipuzcoa): dorsales. Depositados en ]a coleccion del Departamento de Zoologia (Vertebrados) de Barcelona. Vipera aspis: N° 449-VA 760800142, Baraguas (Huesca): rostral, labial y dorsales. Depositado en la coleccion del Museo de Zoologia de Barcelona. N.° R-3, Sant Segimon (Barcelona): rostral, labial, ventrales y dorsales. Depositado en la coleccion del Departamento de Zoologia (Vertebrados) de Barcelona. N.° 77040701, Salinas de Oro (Navarra): rostral, labial, ventrales y dorsales. Depositado en la coleccion de Aranzadi. N° 77051501, joven, Vidra (Girona): dorsales. Perteneciente a la coleccion del autor. Vipera latastei: N° 1616, Puertolas (Huesca): rostral, labial y dorsales. Depositado en la coleccion del C.P.B.E. N° R-8, Candelario (Salamanca): dorsales. Depositado en la coleccion del Departamento de Zoologia (Vertebrados) de Barcelona. Numero 235-45. Huesca: rostral, labial, ventrales y dorsales. Perteneciente a la coleccion del Museo de Zoologia de Barcelona. 109

METODOLOGIA Para realizar el presente estudio se ha extraido la cuticula superficial que recubre las escamas epidermicas (la extraccion de las cuticulas no presenta problemas, pues, debido al tiempo que llevan en el liquido conservante, se desprenden con suma facilidad). Las cuticulas se guardan sumergidas en liquido fijador, debidamente orientadas y aisladas, en tubos numerados. La preparacion de las cuticulas se ha realizado mediante dos metodos diferentes. Unas han sido preparadas por el proceso de desecacion simple al aire, y otras por deshidratacion mediante una serie alcoholica convencional y secadas por el metodo de punto critico (Critical Point Drying Apparatus, Polaron E-3000), utilizando acetato de amilo como liquido intermediario y CO2 como fluido de transicion (Co}IEN, 1974.)

En algunos casos las cuticulas de las escamas han sido limpiadas mediante ultrasonidos para eliminar las particulas que dificultan la vision de su ultraestructura. La cuticula de las escamas ha sido colocada, en cada caso, sobre discos de cobre de 11 mm de diametro y 0,2 mm de espesor, debidamente numerados y orientados. Las cuticulas de las escamas dorsales y ventrales han sido adheridas a los discos mediante una fina capa de pegamento especial (cinta adhesiva disuelta en eter) y las cuticulas de las labiales y rostral mediante un pegamento a base de plata coloidal. Los discos con las muestras van colocados sobre los stubs numerados, pegados con plata coloidal. En cada caso las muestras fueron recubiertas con una capa de carbon de unos 50 A, y posteriormente con otra de oro de 200 A de espesor, utilizando un evaporador Edwards 12 EG. Las muestras se conservan al vacio hasta el momento de la observacion. Las observaciones se han Ilevado a Cabo con un microscopio de Scanning Stereoscan S-4 (Cambridge Scientific Instruments Ltd.), trabajando a tensiones de aceleracion entre 10 y 20 Kv, dependiendo del aumento requerido on cada momento.' 1. Este estudio ha sido realizado en el Departamento de Microscopia de la Facultad de Biologia de la Universidad de Barcelona, con la ayuda especial del Dr. R. Fontarnau.

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Las muestras estudiadas pertenecen a la coleccion del autor.

RESULTADOS REFERENTES AL CRECIMIENTO DE LA ESCAMA Estructura general de las escamas dorsales La cuticula de la escama presenta una morfologia especial, ya que una parte de ella, la basal, se halla recubierta por el extremo posterior de la escama anterior. Toda ella se halla recorrida en su zona media por una quilla de unas 40 micras de altura. La cuticula se halla surcada por unas fibras que van en haces mas o menos compactos con puentes que los conectan, a lo largo de toda la superficie de la cuticula. Dependiendo de la zona estudiada en cada momento hay variaciones en la morfologia de las fibras y los haces, como se vera seguidamente. Este modelo general de las cuticulas se repite en las cuatro especies estudiadas (fig. 1). Tipo de crecimiento La formacion de la cuticula de la escama presenta un patron de crecimiento que se repite en todas las escamas del cuerpo. Este tipo de crecimiento es el mismo para todas las especies, si bien la diferenciacion final de la estructura es especifica. Para dar una idea de la diferenciacion que sigue la cuticula en su crecimiento se da a continuacion la descripcion de las fases que se nueden encontrar, ]as cuales se pueden denominar fases de crecimiento. Segun el grado de complejidad de la estructura final se encuentra que hay fases que no se forman. En primer lugar se va a describir el modelo mas general de estructura complicada que corresponde a las especies V. aspis y V. latastei. Posteriormente se senalaran las Eases que no se presentan en ]as otras dos especies, V. h. berus y V. seoanei. La base de la cuticula presenta una serie de estrias dispuestas en haces mas o mends paralelos con los hordes anteriores dentados. Asimismo, se observa en toda la region una fina trama reticular, formada por unos hoyos o poros de disposicion irregular (fig. 2). Posteriormente se comprobara que dichos poros correspon-

den al espacio interfibrilar de faces de crecimiento superiores. A mcdida que se prospera en el desarrollo de la cuticula, los dientes se alargan formando unos picos de avance. A la vez, los valles situados entre dos picos se hacen mas profundos. Toda la region esta perforada por pequenos poros bien visibles. En la siguiente fase de crecimiento se observa que los picos de avance crecen y se introducen ligeramente en la base de los picos de la banda siguiente. A continuacion se ve que el contacto entre los picos de avance de las bandas de crecimiento ya se ha realizado. Asi-

mismo, queda patente que los poros iniciales corresponden al espacio interfibrilar. Tambien se insinda lo que sera la estructura definitiva de la cuticula, al observar las fibras o filamentos y las uniones o puentes establecidos entre ellos (fig. 3). Una fase mas avanzada muestra la tendencia a la desaparicion de las bandas, patentizandose una estructura continuada. Por ultimo se alcanza la fase final del crecimiento, en la que se observa como los picos de avance, al it soldandose gradualmente, originan largos cordones fibrilares, y que de los valles surgen las fibras que, o bien se continuan unas con otras, o bien

V. lata stci Ftc. 1. Diferentes modelos ultraestructurales de la cuticula de las escamas dorsales en las cuatro especies de viperidos estudiadas. La zona rayada es la de imbricacion con la escama anterior. (Dibujo de Miguel Alonso.) Different ultrastructural patterns of the cuticle of dorsal scales in the four species studied. The hatched area means the zone of overlapping with the anterior scale. (Drawing by Miguel Alonso.)

Ill

ttu. 2. Detalic do la cuticula dc uua cscanta dorsal de Vipera seoanei ( B-1), que muestra las bandas de crecimiento . x 5.400.

h G. 3. Detallc tic la cuticula dc uua cscanta dorsal de Vipera b. berus (3875- E), que muestra una fase avanzada de su crecimiento . x 5.700.

Dented grooves of cuticle growth of Vipera seoanei ( B-t). x 5.400.

Another phase in the cuticle growth : Vipera b . berus ( 3875 - E). x 5.700.

in

the facial

scale

se diferencian en arcos transversales, configurando diferentes estructuras definitivas segdn las especies (fig. 4). Aunque la transicion de una fase a otra no es brusca sino paulatina, se puede encontrar la escama muy avanzada en su formacion y unicamente con una transicion brusca entre ambas. En V. b. berus se pasa de una primera fase a una segunda muy avanzada que ya se puede interpretar como la fase definitiva o el primer estadio de esta. En V. seoanei de la primera fase se pasa a una segunda que es ya practicamente la estructura definitiva (fig. 6). Se pueden encontrar, en las cuatro especies estudiadas, celulas situadas en la base de la escama y entre dos de ellas, que no estan completamente queratinizadas (fig. 5). La diferencia de fases encontrada en el crecimiento de ]a cuticula en estas especies se puede explicar al observar la fase final de la formacion de la cuticula. Asi, se ve que son necesarias todas las fases en V. aspis y V. latastei, pero que no lo son en V. b. berus y V. seoanei, al carecer estas dos ttltimas de cordones de fibras, gruesos y longitudinales. Al observar la estructura de la cuticula 112

dorsal

scale

of

se puede apreciar que, en algt n caso, esta es uniforme en toda su superficie, pero en otros se presentan en la misma cuticula los estadios de las distintas fases de desarrollo antes mencionados. Esto ultimo se observa en la parte proximal de la cuticula. En el caso de la cuticula de ]as escamas dorsales la estructura definitiva es practicamente constante en toda su superficie, si bien hay que hacer constar que no todas las cuticulas presentan, en el tiempo, la misma fase de desarrollo. Este tema sera objeto de un posterior estudio sobre ]a variacion de la estructura cuticular a lo largo de un ciclo de muda. Esto implica que para una correcta interpretacion de los resultados se ha de toner en cuenta la fase de crecimiento. A efectos de comparacion solo pueden utilizarse cuticulas que presentee ]a estructura definitiva. Caracteristicas del crecimiento La estructura general de la cuticula sufre modificaciones morfologicas en las zonas que corresponden a la quilla y a los border de aquella. La quilla se forma por agrupacion progresiva de las fibras de la zona media, llegando a constituir una

estructura uniforme y compacta en la que se pierde la configuracion tipica de la cuticula. En los hordes, la trama fibrilar sufre un proceso parecido, lo que da como resultado un limite de la cuticula compacto y liso. En general, se observa un crecimiento direccional de la cuticula que esV. b. berus

V. seoanei

quematicamente queda represcntado en la figura 7. Otro proceso que se deriva de este tipo dc crecimiento es la paulatina transformacion de los poros en espacios interfibrilares, como ya se ha descrito anteriormente.

V. aspis

V. latastei

Ftc. 4. Esquema del crecimiento de la cuticula en ]as cuatro especies estudiadas. (Dibujo de Miguel Alonso.) Scheme of the pattern of cuticle growth in the four species studied. (Drawing by Miguel Alonso.)

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VARIABILIDAD DE LA CUTICULA DENTRO DE UN MISMO EJEMPLAR En las diferentes escamas estudiadas se observa to siguiente con respecto a la variabilidad dentro de un mismo individuo: Labiales y ventrales: no hay diferencias entre las cuticulas en un mismo ejemplar. Dorsales: aunque se encuentran cuticulas en distintas faces de crecimiento no se observan diferencias respecto a la estructura final. Esto se puede comprobar comparando cuticulas de escamas alejadas, como pueden ser las del centro del dorso y las que contactan con las ventrales. No obstante, se observa que, cuanto mas laterales son las escamas, mas se atenUa la quilla, hasta Ilegar a ser practicamente inexistente.

DESCRIPCION DE LAS ESTRUCTURAS A continuacion se describe la fase final de la estructura de la cuticula en las cuatro especies estudiadas y en los diferentes tipos de escamas. Vipera b. berus Rostral: presenta un fino reticulado de

flip.

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Viperi seoanei Rostral: aunque la estructura no esta muy marcada se ve que la similitud con la de las dorsales es total. Labiales: estan mas o menos gastadas, pero su estructura coincide con la de las dorsales.

I.i

base v eutr_ dos cscanrts dot sales, del cjcutplai 449-VA770800142 de Vipera aspis. x 2.100. Unkeratinized cells at the base and between two dorsal scales in the specimen 449-VA770800142 of Vipera aspic. x 2.100.

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pequenos hoyos, pero no se ha podido observar la fase definitiva de formacion de la cuticula. Labiales: la estructura se asemeja a la de las dorsales, observandose que esta formada por haces paralelos de fibras. Las zonas en contacto con otras escamas responden at modelo de la primera fase de formacion. Ventrales: la estructura responde a una de las primeras fases. La cuticula esta recorrida por haces de fibras y pequenos picos y valles que son paralelos entre si y que van en el sentido del desplazamiento del animal. No se ha observado la presencia de hoyos. Dorsales: su estructura responde a un conjunto de fibras paralelas con escasos puentes de union entre ellas. No se observa que vayan en haces, sino que presentan una continuidad muy marcada (figura 8).

Ftc. 6. Detalle de una Ease del crecimiento de la escama dorsal, proxima a la definitiva, de Vipera seoanei (B-11). x 1.000. Another phase in the cuticle growth: dorsal cuticle scale of Vipera seoanei (B-11). x 1.000.

ejemplar (n.° B-4) la estructura difiere de la simetria hallada en los otros ejemplares estudiados, ya que se agrupan varios arcos en formaciones irregulares. Ademas, en este ejemplar se observa la presencia de fibras mas gruesas (fig. 11). Vipera aspis

I FIG. 7. Esquema que muestra el crecimiento direccional de la cuticula de las escamas dorsales. (Dibujo de Miguel Alonso.) Pattern of directional growth of the dorsal cuticle scales. (Drawing by Miguel Alonso.)

Ventrales: se repite el modelo que se observa en Vipera b. berus. Dorsales: se observa con gran regularidad la presencia de unos arcos transversales simetricos en los que se instalan las fibras que, a su vez, contactan entre si por numerosos puentes (figs. 9 y 10). En un

Fl(;. 8. Detalle de la estructura final de la cuticula de Vipera b. berus (3875-E). x 2.200. Definitive ultrastructure of cuticle scales of Vipera b. berus (3875-E). x 2.200.

Rostral: no se ha observado la fase definitiva de formacion de la cuticula. Labiales: su estructura, algo gastada, coincide con la de sus dorsales, si bien esta poco marcada en los hordes. Ventrales: se observa lo mismo que en Vipera b. berus. Dorsales: se ve que toda la cuticula esta recorrida por gruesas fibras, en haces paralelos, que se forman a, partir de la union por solapamiento de numerosas fibras procedentes de los picos correspondientes a fases anteriores. Entre estos haces se establecen unas uniones o puentes tambien algo gruesos, de los que salen los filamentos que se agrupan irregularmente en arcos mas o menos grandes (fig. 12). Vipera latastei Rostral: no se ha observado la fase definitiva de su formacion.

FIG. 9. Detalle de la estructura final de la cuticula de Vipera seoanei (B-1). x 1.100. Definitive ultrastructure of cuticle scales of Vipera seoanei (B-1). x 1.100.

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Labiales: la zona que contacta con las cuticulas vecinas presenta una estructura que corresponde a una fase inicial de erecimiento. La zona central muestra claramente la similitud con la estructura de las cuticulas dorsales. Ventrales: se observa lo mismo que en Vipera b. berus. Dorsales: se ve como los haces de fibras son muy gruesos y surcan irregularmente la escama; van muy separados entre si. Entre ellos hay puentes mas o menos irregulares en los que se situan uno o varios arcos transversales (fig. 13). En el ejemplar n.° R-8, si bien la estructura de la cuticula sigue el esquema general de la especie, se observa una patente irregularidad en la agrupacion de los arcos. ESTRUCTURA DE LA CUTICULA Y DISTRIBUCI6N GEOGRAFICA Respecto a la variacion de la estructura de la cuticula, atendiendo a ejemplares de poblaciones diferentes e incluso de la misma poblacion, se puede decir que hay una clara identidad respecto a dichas estructuras dentro de cada especie. La variacion no es significativa, similar a la observada en ]as cuticulas de un mismo ejemplar.

FIG. 10. Detalle de la fig . 9, x 5.800. Detail of fig. 9, x 5.800.

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Hay estructuras que presentan un elevado grado de semejanza (caso de las ventrales) para todas las especies, hecho que corrobora las conclusiones obtenidas por GANS & BAIC (1977). En Vipera seoanei ]a estructura de la cuticula del ejemplar n.° B-4 no responde totalmente a la descrita para la especie, si bien, a pesar de la variacion observada, cabe identificar a dicha estructura como perteneciente a Vipera seoanei. En la especie Vipera aspis se presenta tambien una gran uniformidad en la estructura, aunque en dos ejemplares, el m mero 77051501 y el R-3, se observa que los haces de fibras estan dispuestos algo irregularmente, aunque paralelos entre si. En ]a especie Vipera latastei se presenta un caso parecido al de V. seoanei. El ejemplar n.° R-8 no tiene una estructura regular como se ha visto en esta especie, sino que presenta agrupaciones irregulares de arcos transversales, a pesar de lo cual la similitud con el modelo de estructura de la especie es clara. DISCUSI6N Y CONCLUSIONES Dado que las cuticulas observadas se han tornado de ejemplares de diferentes

I o,. II. Detalle do la .,tiuctuia do la cuticula de Vipera seoanei ( B-4), mostrando la falta de regularidad respecto a la de la especie . x 2.000 Irregular ultrastructure of the cuticle scales of Vipera seoanei (B-4). x 2.000.

localidades para cada especie, y que todas presentan la misma estructura, se puede deducir que esta esta determinada geneticamente, aunque puede existir un cierto grado de variabilidad. Por lo tanto se considera que este caracter presenta valor sistematico para la diferenciacion entre estas especies. El primer resultado importante que deriva del examen de las cuticulas es la peculiaridad de la ultraestructura epidermica en Vipera seoanei, circunstancia que confirma las conclusiones de SAINT GIRONS & DUGUY (1976) sobre el valor especifico de esta forma. Puede observarse que, en lo que respecta a dicha ultraestructura, esta especie muestra un caracter intermedio entre el de V. berus berus y el de V. aspis. Segt n MARTINEZ-RICA este detalle puede sugerir el origen de V. seoanei a partir de una forma hibrida, estabilizada en la periferia del area de distribucion de ambas especies, y surgida tiempo atras, cuando las dos estirpes se hallaban menos diferenciadas y su cruzamiento era viable. Aunque en la actualidad V. berus y V. aspis no se hibridan (SAINT GIRONS & Ducuy, 1976), ambas especies lo hacen con V. ammodrtes, L. 1758 (Martinez-Rica, comunicacion verbal, 1978), lo que sugiere que su diferenciacion no es muy remota.

FIG. 12. Detalle de la estructura final de la cuticula de Vipera aspis (R-3). x 1.000. Definitive ultrastructure aspis (R-3). x 1.000.

of

cuticle

scales

of

Vipera

Otro detalle que merece ser resaltado es ]a aparente existencia de un gradiente en las ultraestructuras de la cuticula de ]as escamas, que tendria sus extremos en V. b. berus y V. latastei, pasando por formas intermedias como V. seoanei y V. aspis. En la primera de aquellas especies, los resaltes y crestas longitudinales de la cuticula son poco pronunciados, apenas visibles. En V. seoanei se aprecian facilmente aunque no se unen formando lineas engrosadas. Estas aparecen ya en V. aspis y son todavia mas pronunciadas en V. latastei. Parece tentador deducir de ello el valor adaptativo que la cuticula epidermica puede tener para las viboras. El aparente engrosamiento de la cuticula que se da en las formas meridionales puede estar relacionado, no con la temperatura, ya que V. aspis, con cuticula engrosada por las crestas antedichas, es una especie de termopreferendo bajo (SAINT GIRONS, 1975), sino mas bien con el deficit de satuacion. Las especies que viven en ambientes secos, ya sea por su caracter meridional (V. latastei), o por sus condiciones altimontanas (V. aspis), presentarian una cuticula mas gruesa, que reduciria la evaporacion. Este rasgo afectaria especialmente a las escamas del dorso, mas expuestas a la nerdida de agua, mientras que para las

FIG. 13. Detalle de la estructura final de la cuticula de Vipera latastei (235-45). x 1.900. Definitive ultrastructure of cuticle scales of Vipera latastei (235-45). x 1.900.

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escamas ventrales el factor determinante de la estructura seria, en todas las especies, la friccion con el suelo. La cuticula se conformaria en este caso de tal forma que la friccion en el desplazamiento quedase reducida. Un dato que reafirma la anterior hipotesis es el tipo de crecimiento que se observa en la cuticula de las escamas dorsales, al iniciarse por una estructura fina e it haciendose mas compacta a medida que se aleja de la base de la escama, es decir al estar en la zona mas expuesta de la escama. Este tipo de crecimiento de la cuticula queda claro al haber sido descritas las diferentes faces que ocurren en el. AGRADECIMIENTOS El autor quiere expresar su agradecimiento a los doctores J. Nadal (Barcelona), J. P. Martinez-Rica (Jaca), J. Gosalna), A. Casinos (Barcelona) y a los senores M. Alonso y D. Gonzalez (Barcelona). Asimismo, a la seccion de Herpetologia del Museo de Zoologia de Barcelona y a la

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Sociedad de Ciencias Aranzadi de San Sebastian.

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