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Introducción (recuerdo inmunológico)
Inmunodeficiencia Combinada Severa (SCID)
Aspectos generales
Base genética
Diagnóstico
.
en caballos
Tratamiento
Bibliografía 1
Introducción Introducción (Recuerdo (Recuerdoinmunológico) inmunológico)
Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico)
ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS • Cadenas: • Ligera • Pesada • 110 Aminoácidos (Cadena ligera) • Dominio animoterminal Æ Muy variable • Dominio carboxiterminal Æ Bastante constante •Regiones (Cadena pesada): • Variable • Constante • Bisagra • Tipos de enlaces
Aspectos generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía 2
GENES DE LAS INMUNOGLOBULINAS • Cadena Ligera • Regiones V, J y C
Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) Aspectos generales
Base genética
• Cadena Pesada • Regiones V, D, J Æ Dominio variable • Región C Æ Dominio constante
Diagnóstico
Tratamiento • Hipermutación somática Bibliografía 3
RECOMBINACIÓN
V(D)J
• RAG 1 y 2 (Recombination Activating Gene) Æ Rotura de la doble cadena de DNA entre los fragmentos génicos a recombinar DNA - PK
• DNA-PK (DNA dependent Protein Kinasa) ÆEnlace de fragmentos del DNA codificante y circularización de los segmentos de DNA cortados Æ Reparación del DNA
Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) Aspectos generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía Subunidad catalítica
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Aspectos Aspectos Generales Generales
Introducción (recuerdo inmunológico)
• Síndrome raro que provoca deficiencia en número y función de linfocitos T y B, y, en muchas ocasiones, también células NK
ASPECTOS Aspectos
• Incapacidad para generar una respuesta inmune
GENERALES generales
• Mortalidad 100% Base genética • Especies afectadas • Caballos (Árabes) • Perros (Jack Russel Terriers) • Ratones • Humanos
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía 5
SCID EN CABALLOS
• Primera inmunodeficiencia con características de SCID observada , en caballos árabes, en 1960, en Australia • Descrito como síndrome en 1973 • Origen de la mutación desconocido • Animales afectados no producen anticuerpos tras la infección o inmunización • No viven más de 5 meses, suelen morir por: • Adenovirus equino • Pneumociystis carinii • Cryptosporidium parvum • Otras bacterias
Introducción (recuerdo inmunológico)
ASPECTOS Aspectos GENERALES generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento • 8% de portadores aproximadamente • Suelen ser más propensos a desarrollar tumores Bibliografía 6
DEFECTO EN HUMANOS
%
HERENCIA
CR
• Deficiencia en la cadena γ común de los receptores de linfocitos T para factores de crecimiento
45
Recesiva ligada al cromosoma X
X
Bajo de linfocitos T Bajo de células NK Disminución función linfocitos B . (recuento normal)
• Deficiencia en Kinasa Janus 3 (Jak 3)
10
Autosómica recesiva
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Similar al anterior
• Deficiencia de la cadena α del recpetor IL-7
5
Autosómica recesiva
5
Carencia de linfocitos T Mal funcionamiento de linfocito B
• Deficiencia de Adenosina Deaminasa (ADA)
15
Autosómica recesica
20
Bajo de linfocitos T y B Bajo de células NK
• Deficiencia de recombinasa activadora de genes (RAG)
25
Autosómica recesiva
11
Carencia de linfocitos T y B Normal de células NK
ESPECIE
TIPO HERENCIA
RECUENTOS
MUTACIÓN (en gen de la DNA-PK)
• Caballos
Autosómica recesiva
Delección de 5 bp en codón 9480 Æ cambio marco de lectura Ædelección aminoácido 967Æ PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE
• Perros
Autosómica recesiva
Codón stop en nucleótido 10828Æ terminación temprana en aminoácido 517 Æ ALELO FUNCIONALMENTE NULO
• Ratones
Autosómica recesiva
Mutación en una base Æ Codón Stop prematuro Æ PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales BASE
Base genética GENÉTICA Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía 7
Base Base Genética Genética Fallo en precursores de linfocitos
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales
Incapaces de diferenciarse en maduros (incapaces para completar la señal de transducción por fallos en sus receptores para IL)
BASE
Base genética GENÉTICA
Severa linfopenia y hipogammaglobulinemia
Diagnóstico
Fallo a nivel de la recombinación V(D)J • RAG Æ no hay descritos fallos a este nivel • DNA-PK Æ fallo a nivel de la DNA-PKcs (delección de 5 bp)
Tratamiento
Bibliografía 8
MUTACIÓN: MUTACIÓN delección de 5 bp en el gen que codifica para la DNA-PKcs, en el cromosoma 9
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales Cambio en el marco de lectura del codón 3155 de transcripción
BASE
Delección del aminoácido 967 en C-terminal
Base genética GENÉTICA
Proteína inactiva
Diagnóstico
Bloqueo de la recombinación V(D)J
Tratamiento
Bloqueo de la diferenciación de linfocitos T y B INMUNODEFICIENCIA SEVERA
Bibliografía 9
Otra consecuencia que se ha observado en los caballos heterocigotos para esta mutación, es que, al intervenir la DNA-PK en los procesos de reparación del DNA, estos animales son más propensos a padecer tumores Ejemplo de fibroblastos sometidos a radiaciones ionizantes. Diferencias entre una animal normal y un animal con SCID Æ Indican fallos en la reparación del DNA (y, por tanto, explican la propensión a padecer tumores)
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales BASE
Base genética GENÉTICA Diagnóstico
Tratamiento Los tumores que se presentan con mayor frecuencia son los sarcomas
Bibliografía 10
Diagnóstico Diagnóstico
Introducción (recuerdo inmunológico)
• Antecedentes familiares
Aspectos
• Recuentos de células sanguíneas de la serie blanca Æ Bajos (y bajos niveles de Ig)
generales
• Pruebas de funcionalidad de los linfocitos (para diferenciar de otras causas de linfopenia
Base genética
• Histopatología: hipoplasia severa de timo y tejidos linfoides periféricos
DIAGNÓSTICO Diagnóstico
• Diagnóstico “in utero” (más común en medicina humana) por amniocentésis (células fetales) o análisis de las células de la placenta
Tratamiento
Bibliografía 11
DIAGNÓSTICO
CLÍNICO:
• Signos clínicos (1º-2º mes de vida): • Normal al nacimiento • Fiebre • Taquicardia – taquipnea • Retraso del crecimiento • Letargia • Secreción nasal bilateral, tos y disnea (Infección respiratoria) • Diarrea crónica • Alopecia y dermatitis • Gran cantidad de infecciones, de diversa consideración, entre las más graves destacan: • Neumonías • Meningitis • Infecciones septicémicas • Hepatitis • Infecciones por hongos en boca y periné • Mala respuesta a los tratamientos frente a infecciones
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales
Base genética
DIAGNÓSTICO Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía 12
MÉTODOS DIAGNÓSTICOS CON BASE MOLECULAR Æ P.C.R. • Solo se realiza en laboratorios muy especializados
Introducción (recuerdo inmunológico)
• Sirve para amplificar la región alterada. • Los primers que se utilizan son:
Aspectos
Foward primer Gen normal Gen SCID
5’- TGTTGCAAAAGGAGACAGAAT – 3’ … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT…. … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT…
generales
Base genética Reverse primer normal 3’ - AGAGTTTAAGGGAATTCTCTG - 5’ Gen normal … AATTTATCATCTCAAATTCCCTTAAGAGACTTCTAA…
DIAGNÓSTICO Diagnóstico Gen SCID … AATTTATCA ( ----- ) AATTCCCTTAAGAGACTTCTAA… Reverse primer SCID 3’ – TAGT TTAAGGGAATTCTCTGAA – 5’
• Revelado por electroforesis en un gel PAGE al 6%, con un voltaje constante de 110 V durante 40 minutos • Visualizado con luz ultravioleta
Tratamiento
Bibliografía 13
Æ Pool con los 3 primers:
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales Æ PCR alelo específico (primers por separado): Base genética Prueba normal DIAGNÓSTICO Diagnóstico
Prueba SCID
Tratamiento
Bibliografía 14
Tratamiento Tratamiento
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos CONSEJO GENÉTICO A CRIADORES Y PROPIETARIOS: Detección de portadores por PCR y excluirlos de los programas de reproducción, o, en caso de tener que utilizarlos, asegurarnos de no cruzarlos con otros heterocigotos Aún así, es mejor no utilizarlos ya que, además de seguir transmitiendo la enfermedad a la siguiente generación, los portadores tienen más probabilidades de padecer ciertos tipos de tumores.
generales
Base genética
Diagnóstico TRATAMIENTO Tratamiento
Bibliografía 15
TRATAMIENTO EN MEDICINA HUMANA • Tratamiento específico: • Transplantes de médula ósea • Inyecciones que ayuden a mejorar el sistema inmunológico del paciente Æ reemplazo de inmunoglobulina intravenosa (IVIG)
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales
• Terapia génica • Tratamiento inespecífico:
Base genética
•Tratamiento rápido y adecuado de todas las infecciones
Diagnóstico • Recomendaciones: • Aislar al niño con SCID de niños • Vigilar la nutrición • Prevenir infecciones por Pneumocystis carinii mediante trimethoprima-sulfamethoxazole • No vacunar con vacunas vivas • Transfusiones de sangre irradiadas y negativas a Citomegalovirus
TRATAMIENTO Tratamiento
Bibliografía 16
Bibliografía Bibliografía
Introducción (recuerdo inmunológico)
Æ Chapter V: Severe Combinated Inmunodeficiency Æ “DNA-PKcs mutations in dogs and horses: allele frequency and association with neoplasia” Qi Ding, Lori Bramble, Vilma Yuzbasiyan-gurkan, Thomas Bell, Katheryn Meek Gene (2001) Æ “Molecular Pathology of Severe Combined Immunodeficiency in mice, horse and dogs” – Animal models L.E. Perryman Veterinary Pathology (2004) Æ “Genetic Monitoring for severe immunodeficiency carriers in horse in Slovenia” Jana Zavratanik, Matjaž Mesarič, Gregor Majdič Slov Vet Res (2005) Æ “Frequency of the SCID gene among Arabian horses in the USA” D. Bernoco, E. Bailey Animal genetics (1998)
Aspectos generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento BIBLIOGRAFÍA
Bibliografía
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Æ “Equine severe combined immunodeficiency: a defect in V(D)J recombination and DNA-dependent protein kinase activity” Rhonda Wiler, Ray Leber, Bethany B. Moore, Linda F. VanDyk, Lance E. Perryman & Katheryn Meek Proc. Natl. Acad. Sci. (1995)
Introducción (recuerdo inmunológico)
Æ www.poloargentino.com/nota_16_aguilar.html
Aspectos
Æ www.healthsystem.virginia.edu/UVAHealth/peds_allergy_sp/scid.cfm
generales
Æ www.veterinariargentina.com/res/resumenes186.htm#Inmunodeficiencia %20combinada %20severa%20del%20potrillo%20%E1rabe%20(SCID)
Base genética
Æ www.sanidadanimal.info/cursos/inmuno2/ca041.htm Æ “Conceptos y técnicas hematológicas para técnicos veterinarios” Gregg L. Voigt (2003) Æ “Inmunología clínica veterinaria” Richard E. W. Halliwell y Neil T. Gorman (1992) Æ “Inmunología veterinaria” Ian R. Tizard (2002)
Diagnóstico
Tratamiento BIBLIOGRAFÍA
Bibliografía
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MUCHAS GRACIAS
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Beatriz CatalánBibliografía Catalán 19