Introducción (recuerdo inmunológico)

Inmunodeficiencia Combinada Severa (SCID)

Aspectos generales

Base genética

Diagnóstico

.

en caballos

Tratamiento

Bibliografía 1

Introducción Introducción (Recuerdo (Recuerdoinmunológico) inmunológico)

Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico)

ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS • Cadenas: • Ligera • Pesada • 110 Aminoácidos (Cadena ligera) • Dominio animoterminal Æ Muy variable • Dominio carboxiterminal Æ Bastante constante •Regiones (Cadena pesada): • Variable • Constante • Bisagra • Tipos de enlaces

Aspectos generales

Base genética

Diagnóstico

Tratamiento

Bibliografía 2

GENES DE LAS INMUNOGLOBULINAS • Cadena Ligera • Regiones V, J y C

Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) Aspectos generales

Base genética

• Cadena Pesada • Regiones V, D, J Æ Dominio variable • Región C Æ Dominio constante

Diagnóstico

Tratamiento • Hipermutación somática Bibliografía 3

RECOMBINACIÓN

V(D)J

• RAG 1 y 2 (Recombination Activating Gene) Æ Rotura de la doble cadena de DNA entre los fragmentos génicos a recombinar DNA - PK

• DNA-PK (DNA dependent Protein Kinasa) ÆEnlace de fragmentos del DNA codificante y circularización de los segmentos de DNA cortados Æ Reparación del DNA

Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) Aspectos generales

Base genética

Diagnóstico

Tratamiento

Bibliografía Subunidad catalítica

4

Aspectos Aspectos Generales Generales

Introducción (recuerdo inmunológico)

• Síndrome raro que provoca deficiencia en número y función de linfocitos T y B, y, en muchas ocasiones, también células NK

ASPECTOS Aspectos

• Incapacidad para generar una respuesta inmune

GENERALES generales

• Mortalidad 100% Base genética • Especies afectadas • Caballos (Árabes) • Perros (Jack Russel Terriers) • Ratones • Humanos

Diagnóstico

Tratamiento

Bibliografía 5

SCID EN CABALLOS

• Primera inmunodeficiencia con características de SCID observada , en caballos árabes, en 1960, en Australia • Descrito como síndrome en 1973 • Origen de la mutación desconocido • Animales afectados no producen anticuerpos tras la infección o inmunización • No viven más de 5 meses, suelen morir por: • Adenovirus equino • Pneumociystis carinii • Cryptosporidium parvum • Otras bacterias

Introducción (recuerdo inmunológico)

ASPECTOS Aspectos GENERALES generales

Base genética

Diagnóstico

Tratamiento • 8% de portadores aproximadamente • Suelen ser más propensos a desarrollar tumores Bibliografía 6

DEFECTO EN HUMANOS

%

HERENCIA

CR

• Deficiencia en la cadena γ común de los receptores de linfocitos T para factores de crecimiento

45

Recesiva ligada al cromosoma X

X

Bajo de linfocitos T Bajo de células NK Disminución función linfocitos B . (recuento normal)

• Deficiencia en Kinasa Janus 3 (Jak 3)

10

Autosómica recesiva

19

Similar al anterior

• Deficiencia de la cadena α del recpetor IL-7

5

Autosómica recesiva

5

Carencia de linfocitos T Mal funcionamiento de linfocito B

• Deficiencia de Adenosina Deaminasa (ADA)

15

Autosómica recesica

20

Bajo de linfocitos T y B Bajo de células NK

• Deficiencia de recombinasa activadora de genes (RAG)

25

Autosómica recesiva

11

Carencia de linfocitos T y B Normal de células NK

ESPECIE

TIPO HERENCIA

RECUENTOS

MUTACIÓN (en gen de la DNA-PK)

• Caballos

Autosómica recesiva

Delección de 5 bp en codón 9480 Æ cambio marco de lectura Ædelección aminoácido 967Æ PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE

• Perros

Autosómica recesiva

Codón stop en nucleótido 10828Æ terminación temprana en aminoácido 517 Æ ALELO FUNCIONALMENTE NULO

• Ratones

Autosómica recesiva

Mutación en una base Æ Codón Stop prematuro Æ PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales BASE

Base genética GENÉTICA Diagnóstico

Tratamiento

Bibliografía 7

Base Base Genética Genética Fallo en precursores de linfocitos

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales

Incapaces de diferenciarse en maduros (incapaces para completar la señal de transducción por fallos en sus receptores para IL)

BASE

Base genética GENÉTICA

Severa linfopenia y hipogammaglobulinemia

Diagnóstico

Fallo a nivel de la recombinación V(D)J • RAG Æ no hay descritos fallos a este nivel • DNA-PK Æ fallo a nivel de la DNA-PKcs (delección de 5 bp)

Tratamiento

Bibliografía 8

MUTACIÓN: MUTACIÓN delección de 5 bp en el gen que codifica para la DNA-PKcs, en el cromosoma 9

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales Cambio en el marco de lectura del codón 3155 de transcripción

BASE

Delección del aminoácido 967 en C-terminal

Base genética GENÉTICA

Proteína inactiva

Diagnóstico

Bloqueo de la recombinación V(D)J

Tratamiento

Bloqueo de la diferenciación de linfocitos T y B INMUNODEFICIENCIA SEVERA

Bibliografía 9

Otra consecuencia que se ha observado en los caballos heterocigotos para esta mutación, es que, al intervenir la DNA-PK en los procesos de reparación del DNA, estos animales son más propensos a padecer tumores Ejemplo de fibroblastos sometidos a radiaciones ionizantes. Diferencias entre una animal normal y un animal con SCID Æ Indican fallos en la reparación del DNA (y, por tanto, explican la propensión a padecer tumores)

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales BASE

Base genética GENÉTICA Diagnóstico

Tratamiento Los tumores que se presentan con mayor frecuencia son los sarcomas

Bibliografía 10

Diagnóstico Diagnóstico

Introducción (recuerdo inmunológico)

• Antecedentes familiares

Aspectos

• Recuentos de células sanguíneas de la serie blanca Æ Bajos (y bajos niveles de Ig)

generales

• Pruebas de funcionalidad de los linfocitos (para diferenciar de otras causas de linfopenia

Base genética

• Histopatología: hipoplasia severa de timo y tejidos linfoides periféricos

DIAGNÓSTICO Diagnóstico

• Diagnóstico “in utero” (más común en medicina humana) por amniocentésis (células fetales) o análisis de las células de la placenta

Tratamiento

Bibliografía 11

DIAGNÓSTICO

CLÍNICO:

• Signos clínicos (1º-2º mes de vida): • Normal al nacimiento • Fiebre • Taquicardia – taquipnea • Retraso del crecimiento • Letargia • Secreción nasal bilateral, tos y disnea (Infección respiratoria) • Diarrea crónica • Alopecia y dermatitis • Gran cantidad de infecciones, de diversa consideración, entre las más graves destacan: • Neumonías • Meningitis • Infecciones septicémicas • Hepatitis • Infecciones por hongos en boca y periné • Mala respuesta a los tratamientos frente a infecciones

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales

Base genética

DIAGNÓSTICO Diagnóstico

Tratamiento

Bibliografía 12

MÉTODOS DIAGNÓSTICOS CON BASE MOLECULAR Æ P.C.R. • Solo se realiza en laboratorios muy especializados

Introducción (recuerdo inmunológico)

• Sirve para amplificar la región alterada. • Los primers que se utilizan son:

Aspectos

Foward primer Gen normal Gen SCID

5’- TGTTGCAAAAGGAGACAGAAT – 3’ … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT…. … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT…

generales

Base genética Reverse primer normal 3’ - AGAGTTTAAGGGAATTCTCTG - 5’ Gen normal … AATTTATCATCTCAAATTCCCTTAAGAGACTTCTAA…

DIAGNÓSTICO Diagnóstico Gen SCID … AATTTATCA ( ----- ) AATTCCCTTAAGAGACTTCTAA… Reverse primer SCID 3’ – TAGT TTAAGGGAATTCTCTGAA – 5’

• Revelado por electroforesis en un gel PAGE al 6%, con un voltaje constante de 110 V durante 40 minutos • Visualizado con luz ultravioleta

Tratamiento

Bibliografía 13

Æ Pool con los 3 primers:

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales Æ PCR alelo específico (primers por separado): Base genética Prueba normal DIAGNÓSTICO Diagnóstico

Prueba SCID

Tratamiento

Bibliografía 14

Tratamiento Tratamiento

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos CONSEJO GENÉTICO A CRIADORES Y PROPIETARIOS: Detección de portadores por PCR y excluirlos de los programas de reproducción, o, en caso de tener que utilizarlos, asegurarnos de no cruzarlos con otros heterocigotos Aún así, es mejor no utilizarlos ya que, además de seguir transmitiendo la enfermedad a la siguiente generación, los portadores tienen más probabilidades de padecer ciertos tipos de tumores.

generales

Base genética

Diagnóstico TRATAMIENTO Tratamiento

Bibliografía 15

TRATAMIENTO EN MEDICINA HUMANA • Tratamiento específico: • Transplantes de médula ósea • Inyecciones que ayuden a mejorar el sistema inmunológico del paciente Æ reemplazo de inmunoglobulina intravenosa (IVIG)

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales

• Terapia génica • Tratamiento inespecífico:

Base genética

•Tratamiento rápido y adecuado de todas las infecciones

Diagnóstico • Recomendaciones: • Aislar al niño con SCID de niños • Vigilar la nutrición • Prevenir infecciones por Pneumocystis carinii mediante trimethoprima-sulfamethoxazole • No vacunar con vacunas vivas • Transfusiones de sangre irradiadas y negativas a Citomegalovirus

TRATAMIENTO Tratamiento

Bibliografía 16

Bibliografía Bibliografía

Introducción (recuerdo inmunológico)

Æ Chapter V: Severe Combinated Inmunodeficiency Æ “DNA-PKcs mutations in dogs and horses: allele frequency and association with neoplasia” Qi Ding, Lori Bramble, Vilma Yuzbasiyan-gurkan, Thomas Bell, Katheryn Meek Gene (2001) Æ “Molecular Pathology of Severe Combined Immunodeficiency in mice, horse and dogs” – Animal models L.E. Perryman Veterinary Pathology (2004) Æ “Genetic Monitoring for severe immunodeficiency carriers in horse in Slovenia” Jana Zavratanik, Matjaž Mesarič, Gregor Majdič Slov Vet Res (2005) Æ “Frequency of the SCID gene among Arabian horses in the USA” D. Bernoco, E. Bailey Animal genetics (1998)

Aspectos generales

Base genética

Diagnóstico

Tratamiento BIBLIOGRAFÍA

Bibliografía

17

Æ “Equine severe combined immunodeficiency: a defect in V(D)J recombination and DNA-dependent protein kinase activity” Rhonda Wiler, Ray Leber, Bethany B. Moore, Linda F. VanDyk, Lance E. Perryman & Katheryn Meek Proc. Natl. Acad. Sci. (1995)

Introducción (recuerdo inmunológico)

Æ www.poloargentino.com/nota_16_aguilar.html

Aspectos

Æ www.healthsystem.virginia.edu/UVAHealth/peds_allergy_sp/scid.cfm

generales

Æ www.veterinariargentina.com/res/resumenes186.htm#Inmunodeficiencia %20combinada %20severa%20del%20potrillo%20%E1rabe%20(SCID)

Base genética

Æ www.sanidadanimal.info/cursos/inmuno2/ca041.htm Æ “Conceptos y técnicas hematológicas para técnicos veterinarios” Gregg L. Voigt (2003) Æ “Inmunología clínica veterinaria” Richard E. W. Halliwell y Neil T. Gorman (1992) Æ “Inmunología veterinaria” Ian R. Tizard (2002)

Diagnóstico

Tratamiento BIBLIOGRAFÍA

Bibliografía

18

MUCHAS GRACIAS

Introducción (recuerdo inmunológico)

Aspectos generales

Base genética

Diagnóstico

Tratamiento

Beatriz CatalánBibliografía Catalán 19