INFORME ESTUDIO DE RESIDUOS DE MEDICAMENTOS VETERINARIOS EN ALIMENTOS

Subsecretaria de Salud Pública- Ministerio de Salud Instituto de Salud Pública de Chile SEREMIs de Salud de O’Higgins, Valparaíso, Araucanía, Los Lagos y Metropolitano. AŇO 2011

Informe preparado por:

Q. A Gabriela Rocco Rosales, Laboratorios Residuos de Medicamentos Veterinarios, Instituto de Salud Pública de Chile.

ANTECEDENTES En su responsabilidad por el cuidado de la salud pública del país y orientados a lograr la máxima calidad e inocuidad alimentaria, el Instituto de Salud Pública de Chile en conjunto con el MINSAL y las SEREMIs de las Regiones de Valparaíso, O´Higgins, Metropolitana, Araucanía y Los Lagos elaboraron un estudio de la presencia de residuos de medicamentos veterinarios en alimentos. La administración de productos farmacológicos en la industria productiva de animales cuyos productos y/o subproductos son destinados a la alimentación humana persigue fines terapéuticos o zootécnicos. La mayoría de estas sustancias son susceptibles de dejar residuos en los alimentos, tanto en la forma original del principio activo o como metabolitos de los mismos, especialmente cuando no se respetan los períodos de carencia. Con el objeto de proteger la salud de la población es de gran relevancia la realización de este estudio y verificar el cumplimiento de los “Límites Máximos de Residuos (LMR) de Medicamentos Veterinarios” contenidos en la “Resolución Exenta N° 1462 de 1999” del Ministerio de Salud.

Estos límites regulan la concentración máxima de residuos para los

medicamentos de uso veterinario en los alimentos destinados al consumo humano. Este año el estudio consideró una ampliación en relación al que se realizó el año 2010, cuya principal característica es la incorporación del huevo y la leche a las matrices estudiadas. Se analizaron 102 muestras de tejido muscular divididas entre especies animales de bovino, cerdo, salmón y ave (pollo y pavo), sumándose 40 muestras divididas en

huevos provenientes de gallinas y leche proveniente de bovino, en síntesis el

programa comprendió el análisis de 142 muestras. Los análisis consideraron la determinación analítica de 40 analitos bajo la responsabilidad del Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios del Instituto de Salud Pública, cuyas metodologías cuentan con procedimientos acreditados para la preparación y análisis cuantitativo de las muestras, con el fin de asegurar la obtención de resultados

confiables, de acuerdo a los criterios generales establecidos en la norma ISO 17025, la acreditación del laboratorio se obtiene mediante un organismo independiente y de este modo se garantiza la competencia del laboratorio para realizar los análisis.

ESTUDIO DE RESIDUOS DE MEDICAMENTOS VETERINARIOS EN ALIMENTOS MINSAL – INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE – SEREMI VALPARAÍSO – SEREMI RM – SEREMI O´HIGGINS – SEREMI ARAUCANÍA – SEREMI LOS LAGOS 1. Generalidades 1.1.

Muestreo

Cuando se administra un medicamento de uso veterinario éste o sus metabolitos se distribuyen por los diferentes tejidos del animal y se pueden excretar a la leche o llegar a los huevos en los animales de producción. En base a esto, este estudio consideró el análisis de 142 muestras de cuatro especies animales correspondientes a porcino, salmón, pollo (músculo y huevo) y bovino (músculo y leche). En la Tabla N° 1 se observa la distribución de muestras según especies por cada una de las SEREMIs de las regiones de Valparaíso, Metropolitana, O´Higgins, Araucanía y de Los Lagos. realizó

El muestreo se

de acuerdo a las pautas y recomendaciones establecidas en el Codex

Alimentarius, las muestras se tomaron desde plantas faenadoras en los casos de músculo de bovino, cerdo y pollo; y desde terminal pesquero en el caso de salmones. A su vez, las muestras de leche de bovino se tomaron desde establecimientos de venta al detalle y las muestras de huevos de gallina desde establecimientos productores o a nivel de venta al público consumidor. En general, las muestras se tomaron entre agosto y octubre del año 2011. Tabla N° 1 Distribución de muestras por especie. SEREMI

MATRIZ

TOTAL

VALPARAÍSO

RM

O´HIGGINS

ARAUCANÍA

LOS LAGOS

PORCINO

0

0

25

0

0

25

SALMÓN

0

25

0

0

0

25

POLLO (músculo)

7

5

15

0

0

27

POLLO (huevo)

0

13

0

0

0

13

BOVINO (músculo)

0

10

0

8

7

25

BOVINO (leche)

0

27

0

0

0

27

TOTAL MUESTRAS Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

142

1.2.

Métodos de Análisis

Desde el punto de vista analítico cada vez se hace más difícil alcanzar los niveles de detección necesarios a consecuencia de los LMRs que tienden a ser cada vez más restrictivos para los diferentes residuos de medicamentos veterinarios, así mismo por la complejidad de las matrices abordadas (efecto matriz). Es imprescindible desarrollar métodos de análisis a partir de técnicas analíticas avanzadas, de gran sensibilidad y especificidad, y por consiguiente, la tendencia mundial ha recogido el gran potencial del uso del acoplamiento Cromatografia - Espectrometría de masas, donde se tiene una gran versatilidad dada por la eficiente separación en el sistema de cromatografía líquida (LC) y posterior confirmación inequívoca de una materia activa mediante el establecimiento de su composición elemental y su ruta de fragmentación en el sistema de espectrometría de masas (MSMS). Es así que en este programa la determinación instrumental se realizó básicamente mediante el sistema LCMSMS (3200QTRAP) y los resultados que se entregan en este informe son de un alto nivel de confianza. La confirmación de los analitos se realizó bajo las guías de la comisión Europea “Decisión de la Comisión 2002/657/CE” donde se establecen los parámetros a evaluar para la correcta identificación y posterior cuantificación de una determinada materia activa. Además, para un análisis en particular se utilizó cromatografía líquida de alta eficiencia acoplada a un detector de arreglo de diodos (LC-DAD). La legislación expresa los LMRs para los diferentes medicamentos en término de concentración en µg/Kg (peso del analito en µg por kilógramo de muestra), por tal motivo, los resultados se expresan en estas unidades de concentración. Las referencias más importantes utilizadas en el montaje de las técnicas analíticas empleadas para la determinación de los resultados se listan a continuación: 

Determination of chloramphenicol residues in shirimps tissues by liquid chromatography–mass spectrometry. P. Muñoz,, M. Ramos, A. Aranda, I. Rodriguez, R. Diaz, J. Blanca. Journal of Chromatography B 791 (2003) 31-38.



Simultaneous determination of residual hormonal chemicals in meat, kidney, live tissues and milk by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. B. Shao, R. Zhao, J. Meng, Y. Xue, G. Wu, J. Hu. X, Tu. Analityca Chimica Acta 548 (2003) 41-50.



Multiresidues determination of triarylmethane and phenothiazine dyes in fish tissues by LC-MS/MS. J Tarbin, D .Chan, G. Stubbings, M. Sharman, G. Analytica Chimica Acta 625 (2008) 188-194



Validation of a liquid chromatography–tandem mass spectrometric method for the quantification of eight quinolones in bovine muscle, milk and aquacultured products. N. Van Hoof, K. De Wasch, L. Okerman, W. Reybroeck, S. Poelmans, H. Noppe., H. De Brabander. Analytica Chimica Acta 529 (2005) 265-272.B 791 (2003) 31-38.



Efficient HPLC method for the determination of nicarbazin, as dinitrocarbanilide in broler liver. E, Capurro, M. Danaher, A. Anastasio, ML, Cortesi, M, O´keeffe. Journal of Chromatography B 822 (2005) 154-159.



Quantitative multi-residue analysis of teteracyclines and their 4-epimers in pig tissues by high-performance iquid chromatography combined with positive-ion electrospray ionization mass spectrometry. M. Cherlet, M. Schelkens, S. Croubles, P. De Backer. Analytica Chimica Acta 492 (2003) 199-213.



Aplication of ion-exchange catrigde clean-up in food analysis V. Simultaneous determination of sulfonamide antibacterials in animal liver and kidney using highperformance liquid chromatography with ultraviolet and mass spectrometric detection. Y. Ito, H. Oka, Y. Ikai, H. Matsumoto, Y. Miyazaki, H. Nagase. Journal Chromatography A 898 (2000) 95-102.

En la tabla N° 2 se recoge información relevante en términos de las determinaciones analíticas:

Tabla N° 2 Método instrumental utilizado y límites de detección para los distintos analitos determinados en este estudio. Analito

Familia de medicamento veterinario

Matriz

Límite de detección (µg/Kg)

Método

Cloranfenicol

Cloranfenicol

Tejidos/Leche-huevo

0.05

LC-MSMS

Enrofloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Ciprofloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Acido oxolinico

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Flumequina

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Difloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Danofloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Sarafloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Acido Nalidixico

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Norfloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Marbofloxacino

Quinolonas

Tejidos/Leche-huevo

2.5/5.0

LC-MSMS

Trembolona

Hormonas

Tejidos

0.2

LC-MSMS

α-Zeranol

Hormonas

Tejidos

0.2

LC-MSMS

β-Zeranol

Hormonas

Tejidos

0.2

LC-MSMS

Nicarbazina

Antiparasitario

Tejidos

20

LC-DAD

Tetraciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Oxitetraciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Clortetraciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Epi-tetraciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Epi-oxiteraciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Epiclortetraciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Doxiciclina

Tetraciclinas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfaclorpiridazina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfadiazina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfadimetoxina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfametazina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfamerazina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfametizol

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfametoxazol

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfapiridina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfaquinoxalina

Sulfonamidas

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Sulfatiazol

Tejidos

2.5

LC-MSMS

Tejidos

0.1

LC-MSMS

Tejidos

1.0

LC-MSMS

Verde Malaquita Verde Leucomalaquita

Sulfonamidas Colorantes Triarilmetanos Colorantes Triarilmetanos Colorantes Triarilmetanos Colorantes Triarilmetanos

Tejidos

0.1

LC-MSMS

Tejidos

0.1

LC-MSMS

Salbutamol

Beta agonista

Tejidos

0.25

LC-MSMS

Terbutalin

Beta agonista

Tejidos

1.0

LC-MSMS

Clenbuterol

Beta agonista

Tejidos

0.25

LC-MSMS

Ractopamina

Beta agonista

Tejidos

0.25

LC-MSMS

Cristal Violeta Leucocristal Violeta

Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

2. Resultados El estudio de vigilancia de residuos de medicamentos veterinarios del año 2011 comprendió 2445 análisis, cifra que aumentó en relación a la vigilancia de años precedentes. Los análisis realizados según las diferentes especies abordadas en este estudio se detallan en el gráfico 1.

Gráfico N° 1 Cantidad de análisis realizados según especie. 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0 PORCINO

SALMÓN

POLLO (músculo)

POLLO (huevo)

BOVINO (músculo)

BOVINO (leche)

N° de muestras

25

25

27

13

25

27

N° de analitos

14

15

15

11

35

11

N° de análisis

350

375

405

143

875

297

Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

2.1 Muestras con Residuos de Medicamentos Veterinarios Detectados. La realización de este estudio persigue la vigilancia de residuos de medicamentos veterinarios en relación al cumplimiento de los límites máximos establecidos en la “Resolución Exenta N° 1462 de 1999”. Bajo este parámetro la totalidad de las muestras se encontraron en conformidad con la normativa vigente. Para visualizar esta tendencia se muestra el gráfico N° 2.

Gráfico N° 2 Cantidad de muestras con residuos detectados según origen. LOS LAGOS

NO DETECTABLES DETECTABLES NO CONFORME

SEREMI

CONFORME

ARAUCANÍA

O´HIGGINS

RM

VALPARAÍSO

0

10

20

30

40

50

60

70

80

N° de muestras Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

Se puede observar en el gráfico N° 2 que predominan fuertemente los resultados negativos y más aún, ninguna de las muestras analizadas excedió los límites de concentración de referencia dados por la legislación vigente. En el caso de las muestras con sustancias detectadas se encontraron en su mayor porcentaje en la zona central, concentrándose en las muestras procedentes desde la SEREMIs Metropolitana (4 muestras) y de O Higgins (6 muestras), mientras que muestras provenientes de la

SEREMI de la Araucanía (1 muestra) también arrojó resultado positivo para la presencia de residuos. Por consiguiente, en un 7.8% (11 de un total de 142 muestras) de las muestras analizadas se detectaron residuos de medicamentos veterinarios. Para conocer las sustancias detectadas y las especies donde se detectaron residuos se presentan las tablas N° 3 y N° 4.

Tabla N° 3 Residuos de medicamentos veterinarios detectados según origen. SEREMI VALPARAÍSO

RM

O´HIGGINS

ARAUCANÍA

LOS LAGOS

TOTAL

Ciprofloxacino

0

2

0

0

0

2

Norfloxacino

0

1

5

1

0

7

Ácido Nalidíxico

0

0

1

0

0

1

Sulfapiridina

0

1

0

0

0

1

Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

Tabla N° 4 Residuos de medicamentos veterinarios detectados según matriz. MATRIZ

TOTAL

Bovino

Cerdo

Pollo

Salmón

Leche

Huevo

Ciprofloxacino

2

0

0

0

0

0

2

Norfloxacino

2

5

0

0

0

0

7

Ácido Nalidíxico

0

1

0

0

0

0

1

Sulfapiridina

1

0

0

0

0

0

1

Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

Los resultados indican que el grupo de las quinolonas fueron las sustancias principalmente encontradas en tejidos musculares de cerdo y de bovino. Se detectó Norfloxacino en 5 muestras de cerdo, en todos los casos a nivel de trazas, así mismo, en una muestra de músculo de porcino se detectó Ácido Nalidíxico también a nivel de trazas. En muestras de bovino se detectó residuos de Ciprofloxacino (2 muestras) y de Norfloxacino (2 muestras), sólo uno de los análisis reportó para Ciprofloxacino 6,29 µg/Kg, el resto de los análisis detectó las sustancias a nivel de trazas.

Las trazas se encuentran en el rango de concentraciones sobre el límite de detección de la técnica analítica (tabla N°2) y bajo el límite de cuantificación para la misma, para el caso del análisis de residuos de quinolonas este límite de cuantificación es de 5 µg/Kg, por lo tanto, 9 de las 10 muestras que resultaron positivas para la presencia de residuos de quinolonas se encontraron a nivel de trazas y sólo una muestra resultó positiva sobre el límite de cuantificación de la metodología analítica. Tanto para residuos de quinolonas como para la suma de sulfonamidas el límite máximo de residuos regulado se encuentra alrededor de 100 µg/Kg, por tal motivo, las muestras que resultaron positivas para estas materias activas, se encontraron a niveles de concentración muy por debajo al establecido como límite de riesgo para la salud de las personas y de todas maneras la performance analítica permite asegurar eficientemente el cumplimiento de esta normativa. Para analizar la tendencia de los resultados en términos de la presencia de residuos de medicamentos veterinarios durante los años en que se han desarrollado los estudios de vigilancia se presenta el gráfico N° 3. Gráfico N° 3 Estudio de Residuos de Medicamentos Veterinarios años 2008-2011.

2011

2010 No detectables Detectables No conformes

2009

Conformes

2008

0

20

40

60

80

100

% Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.

Durante los años 2009 y 2010 se encontraron mayor cantidad de residuos, esta tendencia se observa en disminución. Del gráfico N°3 se desprende que el año 2011 se redujo de manera importante el porcentaje de muestras con residuos de medicamentos detectados en relación a los años anteriores, situación que se debe seguir estudiando y con este propósito se proyecta aumentar la cobertura de análisis para el estudio del año 2012.

CONCLUSIONES

1. La totalidad de las muestras analizadas se encuentran en conformidad con el “Reglamento Sanitario de los Alimentos Decreto Supremo N° 977/96”, los límites máximos de Residuos de Medicamentos Veterinarios en alimentos destinados al consumo humano se recogen en la Resolución Exenta N° 1462 de 1999. 2. Se detectó la presencia de residuos de medicamentos veterinarios en un 7.8% de las muestras analizadas, en todos los casos la concentración de las sustancia se encontró muy por debajo de los límites establecidos en la normativa vigente. 3. En relación a los residuos monitoreados se encontraron residuos de quinolonas y sulfonamidas en muestras de músculo de cerdo y de bovino. El resto de las matrices estudiadas no arrojó presencia de residuos de medicamentos veterinarios. 4. El número de muestras con residuos de medicamentos veterinarios detectados descendió de manera importante en relación a los años anteriores y para interpretar este comportamiento se podría suponer que este escenario surge producto de las eficientes medidas de control orientadas a la administración responsable de medicamentos a los animales productores con las dosis y tiempos de carencia adecuados. PROYECCIONES

Ampliar el número de análisis y matrices sometidos a vigilancia en el estudio de residuos de medicamentos veterinarios del año 2012.