PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS. Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición 1.

PRT-711.02-159

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OBJETIVO

Cuantificación de hierro en harinas y alimentos sólidos por espectrofotometría de absorción atómica y vía seca. 2.

CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE

Aplicar este procedimiento a muestras de harinas o alimentos sólidos con bajo contenido graso recepcionadas en la Sección Química de Alimentos y Nutrición. 3.

FUNDAMENTO

La determinación del contenido de iones metálicos totales, tales como hierro, calcio, cobre, magnesio y zinc se realiza por espectrofotometría de absorción atómica con aspiración en llama aire/ acetileno, tratando previamente la muestra para reducir la materia orgánica vía seca y convertir el metal unido orgánica o inorgánicamente, así como disuelto o particulado a su forma de metal libre. 4. REFERENCIAS 4.1. Official methods of analysis AOAC 15 th edition, vol 2, pág 1106,1107, año 1990 5.

TERMINOLOGÍA Vía seca: Tratamiento de muestras a altas temperaturas en una mufla para destrucción de materia orgánica.

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MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

6.1. Materiales 6.1.1 Cápsulas de porcelana para digestión de 25cm de diámetro 6.1.2 Matraces aforados de 50 mL 6.1.3 Piseta 6.1.4 Espátula, toalla absorbente, plumón permanente 6.1.5 Elementos de seguridad como guantes y anteojos 6.1.6 Balanza analítica sensibilidad 0.1 mg 6.1.7 Campana de extracción de gases 6.1.8 Espectrofotómetro de absorción atómica con llama 6.1.9 Homogeneizador de muestras 6.1.10 Plancha calefactora 6.1.11 Agua para análisis, desionizada 6.1.12 Ácido clorhídrico 37 % p.a. 6.1.13 Ácido nítrico 65% p.a 6.1.14 Estándar de Hierro. 6.1.15 Lámpara de hierro 6.1.16 Micropipeta de 100ul a 1000 ul 7.

DESARROLLO

El ingreso de la muestra para su análisis debe cumplir con el Instructivo de Aceptación o Rechazo de muestras IT 711-02-065. Profesional del laboratorio es el encargado de realizar el análisis HPLC, realiza los cálculos e informa resultados. Técnico del laboratorio efectúa el resto del procedimiento. 7.1. 7.1.1 7.1.2 7.1.3 7.1.4 7.1.5

Preparación de la Muestra Homogeneizar la muestra y pesar + 3 g de la muestra en cápsula de porcelana. Tapar la cápsula con vidrio reloj. Colocar y precalcinar en la placa calefactora a una temperatura inicial de + 100°C Luego incrementar la T° a 250°C, hasta que la muestra se encuentre carbonizada. Llevar la cápsula con la muestra precalcinada a la mufla y someterla por 8 horas a T° 550°C hasta cenizas blancas.

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7.1.6 Retirar de la mufla, enfriar y agregar 5 mL de ácido clorhídrico 1+1 a la cápsula con cenizas blancas y poner en baño Maria hasta casi sequedad. 7.1.7 Luego redisolver el residuo con 5mL de ácido clorhídrico 1+1 y dejar 5 min., enseguida adicionar agua desionizada, enfriar y aforar a 50 mL. 7.1.8 La solución de la muestra esta lista para medir. 7.2. Curva de calibración de estándares 7.2.1 Estándares de hierro solución concentrada de 1000 mg/L. 7.2.2 Estándar de 5 mg/L: tomar 0,5 mL del estándar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada. 7.2.3 Estándar de 2 mg/L: tomar 0,2 mL del estándar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada. 7.2.4 Estándar de 1 mg/L: tomar 0,1 mL del estándar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada. 7.3 Determinación por espectrofotómetro de llama Condiciones espectrofotométricas 7.3.1 Tipo de llama aire/acetileno 7.3.2 Longitud de onda 248,3 nm 7.3.3 Ancho de slite 0.2 nm 7.3.4 T° de ignición 800°C 7.3.5 T° de atomización 2300 °C 7.3.6 Corrector de background on Realizar la curva de calibración utilizando el método de cálculo con estándar externo integrado en el equipo. 7.4

Cuantificación de Hierro en muestras

Ingresar al equipo de Absorción Atómica en método Hierro en harinas que contiene la curva de calibración obtenida de concentración (C) en ug/mL, calcular el coeficiente de correlación lineal e intercepto e interpolar la muestra para cuantificar el resultado de la absorbancia vs concentración. Valor C (ug/mL). 7.4.1

Leer en triplicado cada muestra y cada punto de los estándares y promediar las lecturas.

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Cálculo e informe de resultados

cxv Hierro mg /Kg = -------------a Donde: c = concentración en ug/mL obtenidos por la interpolación en la curva de calibración de la muestra. v = volumen de la muestra final

a = masa de la muestra en gramos Limite de detección: 0,11 ug/mL Limite de cuantificación: 0,38 ug/mL Informar mg/Kg de Hierro sin decimal. Control de Calidad Se efectuarán controles sistemáticos y periódicos para comprobar la validez de los ensayos realizados con el método analítico recogido en este procedimiento. a) Nivel I:

Ensayos de intercomparación, utilización de materiales de referencia certificados y patrones de referencia certificados, según disponibilidad.

b) Nivel III. Durante el desarrollo de la serie de trabajo se incluye: - Ajuste del cero del equipo - Control de blanco al inicio de las lecturas - Control de estándar de concentración conocida - Lectura del estándar como control por cada diez muestras inyectadas

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REGISTROS

Identificación del registro

Almacenamiento Protección

Recuperación Tiempo retención y disposición Libro de Registro de En estante del Acceso Restringido Papel 5 años análisis Vitaminas Laboratorio Técnico y Profesional RG-711.00-037 Nutrientes, de Laboratorio Aditivos y Nutrientes, Aditivos y Contaminantes. Contaminantes Archivador de En estante Acceso Restringido Papel 5 años Registro análisis de Laboratorio Técnico y Profesional hierro Nutrientes, Laboratorio Nutrientes, Aditivos y Aditivos y Contaminantes Contaminantes Laboratorio Nutriente Registro de En estante Acceso Restringido Papel 5 años temperatura Laboratorio Técnico y Profesional estufas/baños Nutrientes, Laboratorio Nutrientes, termorregulados Aditivos y Aditivos y RG-711.00-045 Contaminantes Contaminantes Base datos En computador Acceso a Técnico y computacional del Laboratorio Profesional Laboratorio Programa Ministerial de Nutrientes, de Nutrientes, Aditivos Harinas Aditivos y y Contaminantes Contaminantes Registro de En Estante del Acceso a Técnico y temperaturas Laboratorio de Profesional Laboratorio refrigeradores RG- Nutrientes, de Nutrientes, Aditivos 711.00-001 Aditivos y y Contaminantes Contaminantes Registro preparación En estante del Acceso a Técnico y de soluciones de Laboratorio de Profesional Laboratorio estándares puros Nutrientes, de Nutrientes, Aditivos RGG-700.00-034 Aditivos y y Contaminantes Contaminantes

Papel

5 años

Papel

5 años

Papel

5 años

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Recuperación Tiempo retención y disposición Registro preparación En estante del Acceso a Técnico y Papel 5 años de mezclas de Laboratorio de Profesional Laboratorio soluciones Nutrientes, de Nutrientes, Aditivos estándares RGG- Aditivos y y Contaminantes 700.00-035 Contaminantes y Jefatura de sección 9.

Almacenamiento Protección

TABLA DE MODIFICACIONES

Revisión Nº

Pág. Modificada

10. ANEXOS No Aplica

Motivo del cambio

Fecha Aprobación