TEMA 2: LEISHMANIOSIS (II)

GRUPO LEISHMANCERES®

POBLACIÓN CANINA EN RIESGO DE INFECCIÓN

GRUPO LEISHMANCERES®

11

MILLONES

LEISHMANIOSIS VISCERAL MEDITERRÁNEA

INTRODUCCIÓN

P. perniciosus, P. ariasi

CUENCA MEDITERRÁNEA GRUPO LEISHMANCERES® CONDICIONES ECOLÓGICAS APROPIADAS

Leishmania infantum

PERRO (Canis familiaris)

RESERVORIO MAYORITARIO

LEISHMANIOSIS CANINA VISCERAL POR Leishmania infantum

7-20%

NTRODUCCIÓN

O I R A T I N A S

A M E L B O R P LEISHMANIOSIS HUMANA E V A R G LEISHMANIOSIS CANINA

CUENCA MEDITERRÁNEA

ENFERMEDAD OPORTUNISTA EN ENFERMOS CON EL VIH PACIENTES CON ESTADOS DE INMUNOSUPRESIÓN

(Alvar y col., 1997)

SALUD Vs ENFERMEDAD LEISHMANIOSIS CANINA VISCERAL POR Leishmania infantum INFECCIÓN

GRUPO LEISHMANCERES® FORMAS LATENTESRESISTENCIA FORMAS REGRESIVAS

SUSCEPTIBILIDAD FORMAS EVOLUTIVAS PATENTES

NO EVOLUTIVAS OLIGOSINTOMÁTICO

¿CURACIÓN?

EVOLUTIVAS

EVOLUCIÓN CRÓNICA LANOTTE Y COL., 1979

POLISINTOMÁTICO

PRONÓSTICO DESFAVORABLE

PRONÓSTICO FAVORABLE

VARIABILIDAD EN LA EXPRESIÓN CLÍNICA Y ANALÍTICA

GRUPO LEISHMANCERES® INFECCIÓN: RESISTENCIA Y SUSCEPTIBILIDAD

SUSCEPTIBILIDAD FORMAS PRECLÍNICAS DE FUTURAS FORMAS PATENTES

FORMAS PATENTES

LANOTTE Y COL., 1979 PINELLI Y COL., 1994

PARASITOSIS

ENFERMEDAD

GRUPO LEISHMANCERES®

IgGs

RESPUESTA EXACERBADA Y POLICLONAL ………….

CAPACIDAD LINFOPROLIFERATIVA (INMUNIDAD CELULAR DEPRIMIDA) ………..

PRONÓSTICO DESFAVORABLE

RESISTENCIA FORMAS LENTAMENTE EVOLUTIVAS

FORMAS REGRESIVAS

GRUPO LEISHMANCERES® EVOLUCIÓN CRÓNICA

ESCASA O NULA SINTOMATOLOGÍA

PARASITISMO

HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO RETARDADO

SALUD

+ DTH …….

IgGs …….

PRONÓSTICO FAVORABLE

DIAGNÓSTICO

1. CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICO ENFERMEDAD EVOLUCIÓN LENTA DIAGNÓSTICO CLÁSICO BASADO EN LA SINTOMATOLOGÍA DE LOS PERROS ENFERMOS HÁBITAT DONDE SE DESENVUELVEN LOS PERROS ANTECEDENTES DE LEISHMANIOSIS CANINA

ANÁLISIS COMPLEMENTARIOS

ANEMIA

GRUPO LEISHMANCERES®

PANCITOPENIA CREATINEMIA AUMENTADA, PROTEINURIA, HEMOGLOBINURIA Y CILINDROS PROTEINURIA

DIAGNÓSTICO TARDÍO PRONÓSTICO DESFAVORABLE

ANÁLISIS COMPLEMENTARIOS

PT

ALBÚMINA

TRAZADO ELECTROFORÉTICO

DISPROTEINEMIA CON HIPERPROTEINEMIA

GAMMAGLUBULINAS

GRUPO LEISHMANCERES®

HIPOALBUMINEMIA CON HIPERGAMMAGLUBULINEMIA

GRUPO LEISHMANCERES®

ANÁLISIS COMPLEMENTARIOS

DISPROTEINEMIA CON HIPERPROTEINEMIA

ALBÚMINA

TRAZADO ELECTROFORÉTICO

GAMMAGLUBULINAS

GRUPO LEISHMANCERES®

HIPOALBUMINEMIA CON HIPERGAMMAGLUBULINEMIA

DIAGNÓSTICO

1. CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICO

PENÍNSULA IBÉRICA ENDÉMICA CON FOCOS DE ALTO RIESGO

GRUPO LEISHMANCERES®

7-20%

DIAGNÓSTICO

2. PARASITOLÓGICO BASADO EN LA OBSERVACIÓN DEL PARÁSITO

GRUPO LEISHMANCERES®

BIOPSIA POR ASPIRACIÓN

DIAGNÓSTICO POCO SENSIBLE (40-60%) FASES DE INFECCIÓN ESTABLECIDA

Métodos cualitativos

BIOPSIA GANGLIONAR

GANGLIO Y BAZO

GRUPO LEISHMANCERES®

C- 1

FORMAS AMASTIGOTE EXTENSIÓN O IMPRONTA, TINCIÓN Y OBSERVACIÓN AL M. O. +

+

Métodos cualitativos

BIOPSIA GANGLIONAR

GANGLIO Y BAZO

GRUPO LEISHMANCERES®

FORMAS PROMASTIGOTE PROCESADO DEL MATERIAL OBTENIDO EN MEDIOS DE CULTIVO SEMIDEFINIDOS

SCHNEIDER`S

RPMI-1640

DIAGNÓSTICO

2. PARASITOLÓGICO

PCR

BASADO EN LA OBSERVACIÓN DEL PARÁSITO

MUESTRAS ADN GENÓMICO CEBADORES

¿

MUY SENSIBLE MUY ESPECÍFICO

CICLOS DE AMPLIFICACIÓN

GRUPO LEISHMANCERES® SANGRE ENTERA CON ANTICOAGULANTE LÍNEA BLANCA (PBMC) BIOPSIA POR ASPIRACIÓN DE GANGLIO LINFÁTICO GANGLIO LINFÁTICO, BAZO, PIEL, HÍGADO, ETC.

?

DIAGNÓSTICO

2. PARASITOLÓGICO

PCR

MUY SENSIBLE ¿ MUY ? ESPECÍFICO

GRUPO LEISHMANCERES®

GELES DE AGAROSA

DIAGNÓSTICO

2. PARASITOLÓGICO

MUY SENSIBLE ¿ MUY ? ESPECÍFICO

PCR-ELISA 4μl

6μl DNA Leishmania infantum (4C)

GRUPO LEISHMANCERES®

MUESTRAS

Control Negativo PCR (Agua bidestilada)

Control Negativo PCR-ELISA (Agua bidestilada)

Control positivo PCR (DNA humano)

Control positivo PCR-ELISA

DIAGNÓSTICO

2. PARASITOLÓGICO

¿

MUY SENSIBLE MUY ESPECÍFICO

?

PCR-ELECTROFORESIS CAPILAR PRIMERS MARCADOS CON FLUOROCROMO

GRUPO LEISHMANCERES®

DIAGNÓSTICO

3. INMUNOLÓGICO BASADO EN LA DETECCIÓN DE RESPUESTA INMUNOLÓGICA FRENTE AL PARÁSIRO

DIAGNÓSTICO PRECOZ

GRUPO LEISHMANCERES®

IgGs INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI) INMUNOENZIMÁTICA (ELISA) INMUNOCROMATOGRAFÍA (KITS DE DIAGNÓSTICO RÁPIDO) DTH (TEST DE MONTENEGRO) WESTERN BLOTTING (INMUNOBLOT) INMUNOHISTOQUÍMICO

ALTA SENSIBILIDAD

ALTA ESPECIFICIDAD

MAYOR EFECTIVIDAD TERAPEÚTICA

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

RIH

REACCIONES SEROLÓGICAS INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA, ELISA DOBLES ANTICUERPOS, INMUNOCROMATOGRÁFICOS, WB, ETC Ag

+

Ac

ANTI ANTICUERPO MARCADO

GRUPO LEISHMANCERES®

DETECCIÓN ESPECÍFICA DE ANTICUERPOS

RIH

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

REACCIONES SEROLÓGICAS

Técnica inmunoenzimática ELISA de dobles anticuerpos

ANTÍGENOS

GRUPO LEISHMANCERES® CONJUGADOS

DILUCIÓN SUERO

SUBSTRATO ABSORBANCIA (λ)

RIH

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

REACCIONES SEROLÓGICAS

ELISA DOBLES ANTICUERPOS GRUPO LEISHMANCERES® ANTIANTÍGENO ANTICUERPO ANTICUERPO INMUNOCOMPLEJO ESPECÍFICO

UNIÓN ESPECÍFICA

LECTURA

Técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI)

ANTIGENO

107

(L. infantum, M/CAN/ES/96/BCN 150 MON-1) promastigotes/ml.

GRUPO LEISHMANCERES® CUT-OFF

1/80

DILUCIÓN DE SUERO

CONJUGADO

RABBIT fluorescein labeled anti-Dog IgG [RAD/IgG (H+L)] (Nordic Immunol. Lab.)

1/160

1/40-1/640

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

RIH

REACCIONES SEROLÓGICAS IFI

GRUPO LEISHMANCERES® ANTÍGENO

ANTIANTICUERPO ANTICUERPO ESPECÍFICO

SENSIBILIDAD TODOS LOS ANTÍGENOS (superficie) ESPECIFICIDAD

RIH

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

REACCIONES SEROLÓGICAS

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA

IFI

GRUPO LEISHMANCERES® ANTÍGENO

ANTIANTICUERPO ANTICUERPO ESPECÍFICO

LECTURA

RIH

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

REACCIONES SEROLÓGICAS

KITS DE DIAGNÓSTICO RÁPIDO BASADOS EN TÉCNICAS INMUNOCROMATOGRÁFICAS

GRUPO LEISHMANCERES®

RIH

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO EN PARASITOLOGÍA

REACCIONES SEROLÓGICAS INMUNOCROMATOGRÁFICOS

GRUPO LEISHMANCERES® ANTÍGENO

ANTIANTICUERPO ANTICUERPO ESPECÍFICO

EFICACIA: VACUNA PQ

WB

IgGT

RESULTADOS INMUNOLÓGICOS

PERIODO DE INFECCIÓN

A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 150 300 150 300 150 300 150 300 150 300 150 300 150 300

GRUPO LEISHMANCERES®

1ªDosis

2ªDosis

3ªDosis

GRUPO A (PBS)

C+

C-

B

B

FIABILIDAD DIAGNÓSTICA

TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS GRUPO LEISHMANCERES® SENSIBILIDAD

³

ESPECIFICIDAD

Anticuerpos específicos o Antígeno Cross-reaction Muestras

DIAGNÓSTICO

4. DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL

IMPORTANCIA MUCHAS AFECCIONES SÍNTOMAS CURSAN CON CLÍNICOS COMPATIBLES CON LVC

GRUPO LEISHMANCERES® POSIBILIDAD DE FALSOS DIAGNÓSTICOS POSITIVOS 1. CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICO

2. PARASITOLÓGICO

3. INMUNOLÓGICO

FALSOS DIAGNÓSTICOS POSITIVOS

DIAGNÓSTICO 1. CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICO

2. PARASITOLÓGICO

3. INMUNOLÓGICO

¿DISCRIMINACIÓN? SUSCEPTIBLES

RESISTENTES GRUPO LEISHMANCERES®

VARIABILIDAD EN LA EXPRESIÓN CLÍNICA Y ANALÍTICA

GRUPO LEISHMANCERES® INFECCIÓN: RESISTENCIA Y SUSCEPTIBILIDAD

¿DIAGNÓSTICO?

1. CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICO ¿PRONÓSTICO ENFERMEDAD EVOLUCIÓN LENTADESFAVORABLE? DIAGNÓSTICO TARDÍO PRONÓSTICO DESFAVORABLE

2. PARASITOLÓGICO GRUPO LEISHMANCERES® DIAGNÓSTICO POCO SENSIBLE (40-60%) FASES DE INFECCIÓN ESTABLECIDA

¿PCR? ¿PRONÓSTICO FAVORABLE?

VALOR PRONÓSTICO GRUPO LEISHMANCERES®

INFECCIÓN

SALUD / ENFERMEDAD

DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO

DIAGNÓSTICO

INMUNOLÓGICO ALTA SENSIBILIDAD ALTA ESPECIFICIDAD DIAGNÓSTICO PRECOZ

MAYOR EFECTIVIDAD TERAPEÚTICA

GRUPO LEISHMANCERES®

DISCRIMINACIÓN SUSCEPTIBLES

RESISTENTES

SALUD Vs ENFERMEDAD LEISHMANIOSIS CANINA VISCERAL POR Leishmania infantum

GRUPO LEISHMANCERES®

SALUD Vs ENFERMEDAD LEISHMANIOSIS CANINA VISCERAL POR Leishmania infantum INFECCIÓN

FORMAS EVOLUTIVAS PATENTES ENFERMEDAD

FORMAS LATENTES SALUDFORMAS REGRESIVAS

GRUPO LEISHMANCERES® NO EVOLUTIVAS

OLIGOSINTOMÁTICO

¿CURACIÓN?

EVOLUTIVAS

EVOLUCIÓN CRÓNICA LANOTTE Y COL., 1979

POLISINTOMÁTICO

DTH o TEST DE MONTENEGRO

LEISHMANINA

ID

LECTURA

100 μl 107 promastigotes L. infantum /ml

72 y 96 horas

GRUPO LEISHMANCERES®

INDURACIÓN

≥ 5 mm POSITIV0

DIAGNÓSTICO

IFI

MÉTODO DE REFERENCIA ALTA ESPECIFICIDAD ALTA SENSIBILIDAD

TITULACIÓN SEROCONVERSIÓN TRAS TRATAMIENTO

GRUPO LEISHMANCERES® MARCADOR CON VALOR PRONÓSTICO EFICACIA TERAPEÚTICA

Técnica inmunoenzimática ELISA de dobles anticuerpos

PQ

LiP2a, LiP2b

LiP0

H2A, H3

Kmp11

ALTA ESPECIFICIDAD ALTA SENSIBILIDAD RESPUESTA PRECOZ SEROCONVERSIÓN TRAS TRATAMIENTO

MARCADOR CON VALOR PRONÓSTICO EFICACIA TERAPEÚTICA

rK39Hsp70

Hsp83

DIAGNÓSTICO

PARASITOLÓGICO

¿

MUY SENSIBLE MUY ESPECÍFICO

?

PCR-ELECTROFORESIS CAPILAR GRUPO LEISHMANCERES®

³

VALOR PRONÓSTICO

DIAGNÓSTICO

SEGURIDAD

PRECOCIDAD Y EFICACIA GRUPODIAGNÓSTICA LEISHMANCERES® INFECCIÓN

VALOR PRONÓSTICO SALUD/ENFERMEDAD

Biopatológicos

Parasitológicos

Inmunológicos

EXPLORACIÓN CLÍNICA

CULTIVO

ELISA PQ, IFI, WB

ANALÍTICOS

DILUCIÓN LÍMITE

DTH

PCR

Diferencial

VALOR PRONÓSTICO

PARÁMETROS DE SALUD/ENFERMEDAD EN INFECCIONES NATURALES

PARÁMETROS/DIAGNÓSTICO EXPLORATORIOS

SALUD

ENFERMEDAD

RESISTENCIA

SUSCEPTIBILIDAD

-

-/+

-/+

-

ANALÍTICOS

++

+

GRUPO LEISHMANCERES® PARÁSITOS (BIOPSIA Y CULTIVO)

- -/+

CARGA PARASITARIA (CUANTIFICACIÓN)

↓ pp

↑ pp

+

+

PCR

IFI

ELISA

WB

SLA, PQ, Kmp11, otras

DTH

IFI

↓ ELISA PQSLA, Kmp11 DTH +

+ ++

IFI

↑ ELISA PQSLA, Kmp11 DTH +

TRATAMIENTO

VARIAS SEMANAS DE APLICACIÓN Y DOSIS DE RECUERDO ANUALES RECIDIVAS CONTINUO SEGUIMIENTO Y CONTROL CON ANALÍTICAS PERIÓDICAS

1. ETIOLÓGICO ( I )

¿HÍGADO RIÑÓN? GRUPO LEISHMANCERES®

GLUCANTIME (antimoniato de meglumine) - Vía SC - Dosis de 75-100 mg/Kg de peso vivo ( no exceder de 2,5gr/día)

ZYLORIC o alopurinol - Vía oral - Dosis de 8-20 mg/Kg de peso vivo

TRATAMIENTO 2 DÍAS

GC

1/2 dosis

19 DÍAS

15 DÍAS

1 dosis/12 horas

ZY

DESCANSO

21 DÍAS

1 dosis/12 horas

1 dosis/12 horas

GRUPO LEISHMANCERES® ¿ANÁLSIS INMUNOLÓGICO?

PARÁMETROS DE SALUD EXPLORACIÓN CLÍNICA

BIOQUÍMICA

+ HEMATOLOGÍA ORINA

RENAL

HEPÁTICO

SEGUIMIENTO/MONITORIZACIÓN

60 DÍAS

PARÁMETROS DE SALUD EXPLORACIÓN CLÍNICA

BIOQUÍMICA

PROTEÍNAS EN SUERO

+ HEMATOLOGÍA ORINA

RENAL

HEPÁTICO

GRUPO LEISHMANCERES®

ANÁLSIS INMUNOLÓGICOS

IFI

ELISA

TRATAMIENTO

1. ETIOLÓGICO ( II )

MITELFORÁN (VIRBAC) GRUPO LEISHMANCERES® MITELFOSINA 2% SOLUCIÓN ORAL (20 mg/ml)

2 mg/Kg/día (1 ml./10 Kg) EN COMIDAS

4 semanas

TRATAMIENTO

2. SINTOMÁTICO INFECCIONES SECUNDARIAS

PARASITOSIS MIXTAS

GRUPO LEISHMANCERES® SÍNDROME ANÉMICO - Vitamina B y Ác. Fólico, Hierro, Transfusiones - Oximetalona

LESIONES OCULARES (Iridociclitis, queratitis y glucoma) - Diuréticos - Corticoides - Antibióticos - Timolol

ESTRATEGIAS DE CONTROL

1 MEDIDAS DE LUCHA CONTRA EL INSECTO VECTOR

2 DIAGNÓSTICOS PRECOCES Y FIABLES DE LOS PERROS INFECTADOS LATENTES Y PATENTES

GRUPO LEISHMANCERES®

3

DESARROLLO DE FÁRMACOS MÁS EFICACES

4

DESARROLLO DE VACUNAS

VACUNA ¿Control de la infección?

INFECCIÓN

³GRUPO LEISHMANCERES® FORMAS EVOLUTIVAS PATENTES

OLIGOSINTOMÁTICO

³

³

EVOLUTIVAS

FORMAS REGRESIVAS

NO EVOLUTIVAS

Control de la proliferación

PARASITOSIS POLISINTOMÁTICO

FORMAS LATENTES

PARASITISMO

INMUNOPROFILAXIS DE LALEISHMANIOSIS: TIPOS VACUNAS

VACUNAS RECOMBINANTES H2A LiP2b PQ

PQ GRUPO LEISHMANCERES® LiP2a

LiP0

Proteína multicomponente Quimera (PQ) de L. infantum ( Soto y col., 1995; Soto y col., 1998)

PLANETA TIERRA

MUERTES POR ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y PARASITARIAS

MUERTES POR LEISHMANIOSIS

MUERTES POR ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y PARASITARIAS

59 % POBLACIÓN MUNDIAL SUFRE INFECCIONES POR PARÁSITOS (COMITÉ EXPERTOS WHO)

HIGIA PECORIS SALUS POPULI

SCIENCE RESEARCH

¿DUDAS?