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OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS

11 Número de publicación: 2 241 146

51 Int. Cl. : C07D 471/04, A61K 31/44

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A61K 31/505, C07D 487/04 // (C07D 471/04, C07D 235:00) C07D 221:00 (C07D 487/04, C07D 239:00) C07D 209:00

ESPAÑA

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TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA

T3

86 Número de solicitud europea: 98929573 .8

86 Fecha de presentación : 10.07.1998

87 Número de publicación de la solicitud: 1003744

87 Fecha de publicación de la solicitud: 31.05.2000

54 Título: 4-aminopirrol(3,2-d)pirimidinas como antagonistas del receptor del neuropéptido Y.

30 Prioridad: 05.08.1997 US 54734 P

73 Titular/es: Pfizer Products Inc.

Eastern Point Road Groton, Connecticut 06340, US

45 Fecha de publicación de la mención BOPI:

16.10.2005

72 Inventor/es: Dow, Robert, Lee y

Hammond, Marlys

45 Fecha de la publicación del folleto de la patente:

74 Agente: Carpintero López, Francisco

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16.10.2005

Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art. 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, 1 – 28036 Madrid

ES 2 241 146 T3 DESCRIPCIÓN 4-aminopirrol(3,2-d)pirimidinas como antagonistas del receptor del neuropéptido Y. 5

Antecedentes de la invención Campo de la invención

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Esta invención se refiere al uso de ciertos derivados de 4-aminopirrol(3,2-d)pirimidina sustituidos que se unen de forma selectiva a receptores de Neuropéptidos de mamíferos. Se refiere además al uso de tales compuestos y composiciones en el tratamiento de trastornos relacionados con un exceso de neuropéptido Y, tales como trastornos de la alimentación y ciertas enfermedades cardiovasculares. Descripción de la técnica relacionada

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El neuropéptido Y, un péptido aislado por primera vez en 1982, está ampliamente distribuido en las neuronas centrales y periféricas y es el responsable de una multitud de efectos biológicos en el cerebro y periferia. Diversos estudios en animales han demostrado que la activación de los receptores del neuropéptido Y está relacionada con la vasoconstricción, Wahlestedt et al., Regul. Peptides., 13:307-318 (1986), McCauley and Westfall, J. Pharmacol. Exp. Ther., 261: 863-868 (1992) y Grundemar et al. Br. J. Pharmacol. 105:45-50 (1992); y con la estimulación del comportamiento referente al consumo, Flood y Morley, Peptides, 10:963-966 (1989), Leibowitz y Alexander, Peptides, 12:1251-1260 (1991) y Stanley et al. Peptides, 13:581-587 (1992). Grundemar y Hakanson. TiPS, mayo de 1994 [vol 15], 153 - 159, concluyen que, en animales, el neuropéptido Y es un estímulo potente de la ingestión de alimentos, y un inductor de la vasoconstricción que conduce a hipertensión. Definen además que bajos niveles del neuropéptido Y (NPY) están asociados con una pérdida del apetito. Estos informes indican claramente que los compuestos que inhiben la actividad de esta proteína reducirán la hipertensión y el apetito en animales. El documento EP0759441 y el documento U.S. 5.576.337 informan que los trastornos fisiológicos relacionados con el neuropéptido Y incluyen: trastornos o enfermedades del corazón, vasos sanguíneos o del sistema renal, tales como angiospasmos, insuficiencia cardíaca, choque, hipertrofia cardíaca, aumento de la tensión arterial, angina, infarto de miocardio, muerte cardíaca súbita, arritmia, enfermedad vascular periférica y afecciones renales anómalas tal como un flujo de líquidos deficiente, transporte de masa anómalo o insuficiencia renal; trastornos relacionados con una mayor actividad del nervio simpático, por ejemplo, durante o después de cirugía de las arterias coronarias y operaciones y cirugía en el tracto gastrointestinal;

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enfermedades cerebrales y enfermedades relacionadas con el sistema nervioso central, tales como infarto cerebral, neurodegeneración, epilepsia, accidente cerebrovascular y afecciones relacionadas con el accidente cerebrovascular, angiospasmo cerebral y hemorragia, depresión, ansiedad, esquizofrenia y demencia; 45

afecciones relacionadas con el dolor o la nocicepción; enfermedades relacionadas con motilidad gastrointestinal y secreción anómalas, tales como formas diferentes de íleo, incontinencia urinaria y enfermedad de Crohn;

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trastornos por la ingestión anómala de bebidas y alimentos, tales como anorexia y trastornos metabólicos; enfermedades relacionadas con la disfunción sexual y trastornos reproductores; afecciones o trastornos asociadas con inflamación; enfermedades respiratorias, tales como asma y afecciones relacionadas con el asma y broncoconstricción; y enfermedades relacionadas con una liberación anómala de hormonas como hormona luteinizante, hormona del crecimiento, insulina y prolactina. El documento WO 96/14307 describe derivados de bencilamina sustituidos que se unen selectivamente a los receptores del neuropéptido Y1 humano.

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En Pharm. Chem. J. 22, 185 (1988); 8, 14 (1974); y 7, 19 (1973) se describe la síntesis de ciertas 4-aminopirrol (3,2-d)piridinas. Se describió que estos compuestos poseen actividad antibacteriana y antitumoral. Resumen de la invención 65

Esta invención proporciona un compuesto seleccionado entre el grupo constituido por: (S)-4-(2-metoximetil-pirrolidin-1-il)-2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina; 2

ES 2 241 146 T3 (RS)-2-metil-6-fenil-4-[2-(2-pirrolidin-1-il-etil)-piperidin-1-il]-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina; 1-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-decahidro-quinolina; 5

1’-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-[1,4’]bipiperidinilo; (R)-4-(2-metoximetil-pirrolidin-1-il)-2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina; (S)-2-metil-6-fenil-4-(2-pirrolidin-1-ilmetil-pirrolidin-1-il)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina; y

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(R)-dimetil-[1-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-pirrolidin-3-il]-amina.

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En otro aspecto, esta invención proporciona el uso de un compuesto como se ha descrito anteriormente para la fabricación de un medicamento para aliviar una afección patológica o trastorno fisiológico en un sujeto mamífero caracterizado por o asociado a un exceso de neuropéptido Y. Los compuestos de esta invención son básicos por naturaleza y pueden formar una amplia variedad de sales con diversos ácidos inorgánicos y orgánicos. Los ácidos que se pueden usar para preparar sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I son los que forman sales de adición de ácidos no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables, tales como el clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, isonicotinato, acetato, lactato, salicilato, citrato, citrato ácido, tartrato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, glucaronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato y p-toluenosulfonato.

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Los compuestos que interaccionan con los receptores de NPY e inhiben la actividad del neuropéptido Y en dichos receptores son útiles en el tratamiento de numerosos trastornos asociados al neuropéptido Y. Por tanto, esta invención proporciona el uso de compuestos de la invención, que se unen de forma selectiva a los receptores del neuropéptido Y, para la fabricación de un medicamento para tratar:

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trastornos de la alimentación tales como obesidad y bulimia así como trastornos o enfermedades del corazón, vasos sanguíneos o del sistema renal, como angiospasmos, insuficiencia cardíaca, choque, hipertrofia cardíaca, aumento de la tensión arterial, angina, infarto de miocardio, muerte cardíaca súbita, arritmia, enfermedad vascular periférica y afecciones renales anómalos tales como un flujo de líquidos deficiente, transporte de masa anómalo o insuficiencia renal;

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afecciones relacionadas con una mayor actividad del nervio simpático, por ejemplo, durante o después de cirugía de las arterias coronarias y operaciones y cirugía en el tracto gastrointestinal;

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enfermedades cerebrales y enfermedades relacionadas con el sistema nervioso central, como infarto cerebral, neurodegeneración, epilepsia, accidente cerebrovascular y afecciones relacionadas con el accidente cerebrovascular, angiospasmo cerebral y hemorragia, depresión, ansiedad, esquizofrenia y demencia; afecciones relacionadas con el dolor o la nocicepción;

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enfermedades relacionadas con motilidad gastrointestinal y secreción anómalas, tales como formas diferentes de íleo, incontinencia urinaria y enfermedad de Crohn; trastornos por la ingestión anómala de bebidas y alimentos, como anorexia y trastornos metabólicos; enfermedades relacionadas con la disfunción sexual y trastornos reproductores; trastornos o afecciones asociadas con inflamación;

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enfermedades respiratorias, tales como asma y afecciones relacionadas con el asma y broncoconstricción; y enfermedades relacionadas con una liberación anómala de hormonas como hormona luteinizante, hormona del crecimiento, insulina y prolactina. Esta invención se refiere además a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Esta invención se refiere además a composiciones útiles para tratar obesidad y afecciones relacionadas que comprenden cantidades eficaces de un compuesto de esta invención y un agente β3 -adrenérgico o un agente tiromimético.

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Un agente β3 -adrenérgico preferido es el ácido (4-(2-(2-(6-aminopiridin-3-il)-2(R)-hidroxietilamino)etoxi) fenil)acético y sus sales y profármacos. Descripción detallada de la invención

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Los compuestos de la invención se preparan por procedimientos que son conocidos en la bibliografía química. Los compuestos se pueden preparar por los procedimientos generales de Sokolova, et al., Pharm. Chem. J., 8, 14 (1974) e ibid, 7, 19 (1973) o Modnikova, et al., Pharm. Chem. J., 22, 185 (1988). Las referencias anteriores se incorporan en esta memoria descriptiva como referencia. 3

ES 2 241 146 T3 Los compuestos de la invención se pueden preparar por la siguiente secuencia de reacción.

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Los compuestos (a) y (b) también se pueden preparar por los procedimientos descritos en Chem. Pharm. Bull. (Tokio) 12, 1024 (1964) y J. Am. Chem. Soc., 74, 4897 (1952) u otros procedimientos de síntesis convencionales. El químico medio experto en la técnica reconocerá que pueden ser necesarios cambios en las condiciones de reacción cuando estén presentes grupos R diferentes. Por ejemplo, pueden ser necesarios grupos protectores cuando uno de los grupos R contenga un grupo funcional adicional. El compuesto (c) se prepara convenientemente a partir del compuesto (b) con un agente de cloración como oxicloruro de fósforo. La utilidad farmacológica de los compuestos de esta invención se indica por el siguiente ensayo de la actividad del receptor NPY1 humano. Ensayo de la actividad de unión al receptor NYP1 humano

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El procedimiento usado es similar al que se describe por Gordon et al. (J. Neurochem. 55:506-513, 1990). Se adquirieron células SK-N-MC de la ATCC (Rockville, MD). Las células se mantuvieron a 37ºC y 5% de CO2 en medio esencial modificado de Dulbecco (DMEM) con L-glutamina y 110 mg/l de piruvato sódico, que se suplementó con suero bovino fetal al 10% y HEPES 25 mM (pH 7,3). El ensayo de unión se realizó en placas de 24 pocillos (Falcon) cuando las células fueron confluentes. Con cuidado de no alterar las células sobre el fondo de los pocillos, se aspiraron los medios y se añadieron a cada pocillo 0,5 ml de solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) con calcio y magnesio. Se aspiró la DPBS y se añadió una alícuota adicional de DPBS y aspiró. Para iniciar el ensayo, se añadió a cada pocillo tampón de unión constituido por DMEM exento de suero que contenía albúmina sérica bovina al 0,5%, bacitracina al 0,1% y fluoruro de fenilmetilsulfonilo 0,1 mM. Se realizó una incubación previa de las células y el tampón de unión durante 30 minutos a temperatura ambiente, momento en el cual se añadieron la dilución de fármaco y [125 I]PYY (NEN-DuPont: 50.000-75.000 cpm, aproximadamente 50 pM) proporcionando un volumen final de 250 µl. La unión no específica se definió con NPY 1 mM (porcino o humano, Bachem California). Después de una incubación de 3 horas a temperatura ambiente, se colocaron las placas en hielo y se aspiraron los pocillos. Las células se lavaron 4 a 6 veces con 0,5 ml de DPBS enfriada en hielo. Se añadió entonces una solución diluida de Triton X-100 (1%) a cada pocillo. Después de aproximadamente 1 hora a temperatura ambiente, se traspasó una alícuota de cada pocillo a un tubo de ensayo de 12 x 75 mm, y se cuantificó la cantidad de [125 I] en un contador gamma con una eficacia del 80 al 85% (Genesys 5000, Laboratory Technologies). Se calcularon los valores de CI50 con un programa de ajuste de curvas no lineal RS/1 (BBN Software Products Corp. Cambridge, MA).

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ES 2 241 146 T3 Unión de [125 I]PYY en los Receptores de NPY Humano Expresado en Células Sf9

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Se recogen a las 48 horas células Sf9 infectadas con baculovirus que expresan el subtipo H17 humano recombinante de receptores NPY. En el momento de la recogida, se resuspenden los sedimentos celulares en tampón de lisis (TrisHCl 20 mM, pH 7,4, EDTA 5 mM, leupeptina 0,5 µg/ml, aprotonina 2 µg/ml y PMSF 200 µM) y se homogeneiza usando un Polytron (posición 3, 25 a 30 segundos). Los homogeneizados se centrifugan a 4ºC durante 5 minutos a 200 x g (aproximadamente 1500 rpm) para sedimentar los núcleos. El sobrenadante se recoge en un tubo nuevo y se centrifuga a 48.000 x g durante 10 minutos. Los sedimentos se lavan una vez en tampón de lisis y centrifugan. El sedimento final se resuspende en PBS y se almacena en alícuotas a -80ºC. Las membranas purificadas se lavan usando PBS y se resuspenden en tampón de unión (Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, KCl 5 mM, NaCl 120 mM, CaCl2 2 mM, MgCl2 1 mM, albúmina sérica bovina (BSA) al 0,1%). Las membranas (20 µg/tubo de reacción) se añaden a tubos de polipropileno que contienen [125 I]PYY (porcino), desplazadores que varían de 10−12 M a 10−5 M, y tampón para proporcionar un volumen final de 0,250 ml. Se determina la unión no específica en presencia de NPY (humano) 1 µM y constituye un 10% de la unión total. Después de unas 2 horas de incubación a temperatura ambiente, se interrumpe la reacción por filtración rápida a vacío. Las muestras se filtran sobre filtros Whatman GF/C previamente empapados (polietilenamina al 1,0%) y se enjuagan dos veces con 5 ml de tampón de unión frío sin BSA. Se usa un contador gamma para realizar el recuento de los filtros con una eficacia del 85%. Los valores CI50 se calcularon con un programa de ajuste de curvas no lineal RS/1 (BBN Software Products Corp. Cambridge, MA). Ensayo Funcional de Receptores NPY Expresado en Oocitos Los experimentos se realizaron en oocitos de Xenopus. Los oocitos se prepararon y mantuvieron usando protocolos convencionales (Dascal y Lotan, en Methods in Molecular Biology; Protocols in Molecular Neurobiology, eds. Longstaff & Revest, Humana, Clifton, N.J., 13: 1992). Para los presentes experimentos, los oocitos se obtuvieron de 6 ranas. Los oocitos se evaluaron de 2 a 7 días después de una inyección conjunta de ARNm de GIRKI y del subtipo H17 de NPY-1 o NPY-5 (25 ng de cada uno, 50 nl de volumen total). Se llevaron a cabo dos medidas de corrección de la tensión con electrodos usando un corrector de Warner Instruments Oocyte OC 725B. Los datos se recogieron en un microordenador Macintosh y se analizaron usando software Superscope. Los electrodos de tensión y corriente se retiraron del tubo de vidrio (D.O. 1,5 mM) en una micropipeta extractora Brown/Flaming (Sutter Instruments, modelo P-87). Los electrodos contenían KCl 3 M y tuvieron una resistencia de 0,5 - 2 MOhmios. Los oocitos se lavaron en solución externa normal que contenía; NaCl 90 mM, KCl 1 mM, MgCl2 1 mM, CaCl2 1 mM, HEPES 5 mM, pH 7,4. Antes de introducir los agonistas o antagonistas de NPY, se aplicó una solución con elevada cantidad de K+ que contenía; NaCl 1 mM, KCl 90 mM, MgCl2 1 mM, CaCl2 1 mM, HEPES 5 mM para permitir el registro de la corriente de K+ rectificada de entrada. Los fármacos se aplicaron diluidos en el medio de elevada cantidad de K+ . Se prepararon soluciones madre 100 µM de NPY, PP o fragmentos de péptido NPY o fragmentos de péptido PYY en agua y se congelaron hasta que fueron necesarias.

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La tensión de los oocitos se corrigió a -80 mV con dos electrodos. Los oocitos inicialmente estaban superfusionados con medio externo normal (aproximadamente un caudal de 4 ml/min). Antes de aplicar los fármacos, las células se superfusionaron con solución con elevada cantidad de K+ para permitir la activación de la corriente de K+ rectificada de entrada. En los oocitos coinyectados con receptor NPY y ARNm de GIRK1, los agonistas de NPY indujeron una corriente de entrada adicional sobre la corriente en reposo de K+ provocada por el medio de alta cantidad de K+ . Debido a las respuestas desensibilizadas a velocidades lentas pero variables, se administraron aplicaciones de dosis acumuladas para generar curvas de respuesta a la concentración. Se aplicaron de dos a cuatro dosis de agonistas a cada célula. Las respuestas a la dosis de agonistas en cada célula se normalizaron frente a la respuesta a una concentración máxima de NPY humano. Las curvas de respuesta a la dosis se ajustaron con una ecuación logística usando software Kaleidagraph (Abelbeck software, Reading, PA). Los compuestos de esta invención y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos (los compuestos activos) se pueden administrar por vía oral, tópica, parenteral, por inhalación o en aerosol, o por vía rectal en formulaciones de dosis unitarias que contienen vehículos, adyuvantes y excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos convencionales. El término parenteral, tal como se usa en esta memoria descriptiva, incluye inyecciones subcutáneas, intravenosas, intramusculares, intraesternales o técnicas de infusión. Además, se proporciona una formulación farmacéutica que contiene un compuesto de la invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Uno o más compuestos activos pueden estar presentes asociados con uno o más vehículos y/o diluyentes y/o adyuvantes farmacéuticamente aceptables no tóxicos y, si se desea, otros ingredientes activos. Las composiciones farmacéuticas que contienen compuestos activos pueden estar en una forma adecuada para uso oral, por ejemplo, como comprimidos, trociscos, tabletas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o granulados dispersables, emulsiones, cápsulas de gelatina duras y blandas o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral se pueden preparar conforme a cualquier procedimiento conocido en la técnica de fabricación de composiciones farmacéuticas y, tales composiciones, pueden contener uno o más agentes seleccionados entre el grupo formado por agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes, a fin de proporcionar preparaciones farmacéuticamente elegantes y apetitosas. Los comprimidos contienen el ingrediente activo mezclado con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos que son adecuados 5

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para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, como carbonato de calcio, carbonato sódico, lactosa, fosfato de calcio o fosfato sódico; agentes de granulación y disgregación, por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico; agentes ligantes, por ejemplo, almidón, gelatina o goma arábiga y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden estar sin recubrir o pueden estar recubiertos por técnicas conocidas para retardar la disgregación y absorción en el tracto gastrointestinal y, proporcionar así una acción sostenida durante un período mayor. Por ejemplo, puede emplearse un material de retardo como monoestearato de glicerilo o distearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral también pueden presentarse como cápsulas de gelatina duras, en las que el ingrediente activo está mezclado con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas, en las que el ingrediente activo está mezclado con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete o parafina líquida o aceite de oliva. Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos mezclados con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidropropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma arábiga; agentes dispersantes o humectantes pueden ser un fosfátido de origen natural, por ejemplo, lecitina, o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo, estearato de poli(óxido de etileno), o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenooxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de polietilensorbitano. Las suspensiones acuosas pueden contener también uno o más conservantes, por ejemplo, etil, o n-propil p-hidroxibenzoato, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes aromatizantes, y uno o más agentes edulcorantes, como sacarosa o sacarina.

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Las suspensiones oleosas pueden formularse suspendiendo los ingredientes activos en un aceite vegetal, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo, cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Pueden añadirse agentes edulcorantes, como los descritos anteriormente, y agentes aromatizantes, para proporcionar preparaciones orales apetitosas. Estas composiciones pueden conservarse mediante la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico. Los polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua proporcionan el ingrediente activo mezclado con un agente dispersante o humectante, agente de suspensión y uno o más conservantes. Agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión adecuados se ejemplifican por los ya citados anteriormente. Pueden estar presentes excipientes adicionales, por ejemplo, edulcorantes, aromatizantes y colorantes. Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en forma de emulsiones aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo, aceite de oliva o aceite de cacahuete, o un aceite mineral, por ejemplo, parafina líquida o mezclas de los mismos. Agentes de emulsión adecuados pueden ser gomas naturales, por ejemplo, goma arábiga, o goma tragacanto, fosfátidos naturales, por ejemplo, soja, lecitina y ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol, anhídridos, por ejemplo monooleato de sorbitano o productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo, pueden estar presentes también edulcorantes, aromatizantes y colorantes. Los jarabes y elixires pueden formularse con agentes edulcorantes, por ejemplo, glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Tales formulaciones pueden contener además un emoliente, un conservante y agentes aromatizantes y colorantes. Las composiciones farmacéuticas pueden estar en forma de una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión puede formularse conforme a la técnica conocida usando los agentes humectantes y de dispersión y los agentes de suspensión adecuados que se han citado anteriormente. La preparación inyectable estéril puede ser también una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear se encuentran agua, solución de Ringer y solución de cloruro sódico isotónica. Además, convencionalmente se emplean aceites estériles, no volátiles como disolvente o medio de suspensión. A estos efectos, puede emplearse cualquier aceite no volátil suave incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Además, pueden usarse ácidos grasos como el ácido oleico en preparaciones para inyectables. Los compuestos activos pueden administrarse además en forma de supositorios para administración rectal del fármaco. Estas composiciones se pueden preparar mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperaturas normales, pero líquido a la temperatura del recto y que por tanto se funda en el recto liberando el fármaco. Tales materiales son manteca de cacao y polietilenglicoles. Los compuestos activos se pueden administrar parenteralmente en un medio estéril. El fármaco, dependiendo del vehículo y concentración usados puede suspenderse o disolverse en el vehículo. De forma ventajosa, pueden disolverse en el vehículo adyuvantes como anestésicos locales, conservantes y agentes tamponantes. Son útiles niveles de dosificación del orden de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 15 mg de compuesto 6

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activo por kilogramo de peso corporal por día en el tratamiento de los trastornos anteriormente indicados (aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 7 g por paciente y día). La cantidad de compuesto activo que se puede combinar con materiales vehículo para producir una forma de dosificación individual varían dependiendo del huésped tratado y el modo particular de administración. Las formas de dosis unitaria contendrán por lo general de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 500 mg de compuesto activo.

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Sin embargo, se entenderá que el nivel de dosis específico para un paciente particular dependerá de una serie de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, momento de la administración, ruta de administración y velocidad de excreción, combinación de fármacos y la intensidad de la enfermedad particular que se somete a tratamiento. Esta invención se refiere además a composiciones útiles para tratar obesidad y trastornos relacionados, que comprenden cantidades eficaces de un compuesto de esta invención y un agente β3 -adrenérgico o un agente tiromimético.

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El ácido (4-(2-(2-(6-aminopiridin-3-il)-2(R)-hidroxietilamino)etoxi)fenil)acético se describe en la solicitud de patente internacional, número de publicación WO 96/35671, de cesión común, cuya descripción se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia, como un agente β-adrenérgico. Por consiguiente, el ácido (4-(2-(2-(6-aminopiridin-3-il)-2(R)-hidroxietilamino)etoxi)fenil)-acético tiene utilidad en el tratamiento de la obesidad. Los agentes β-adrenérgicos se han clasificado en los subtipos β1 , β2 y β3 . Los agonistas de los receptores β1 promueven la activación de la adenilciclasa. La activación de los receptores β2 induce la relajación del tejido muscular liso, lo que produce una disminución de la tensión arterial y el inicio de temblores en el músculo esquelético. La activación de los receptores β3 es conocida por estimular la lipolisis, que es la descomposición de los triglicéridos del tejido adiposo en glicerol y ácidos grasos. La activación de los receptores β3 también estimula la velocidad metabólica, aumentando de esta forma el gasto energético. Por consiguiente, la activación de los receptores β3 promueve la pérdida de masa grasa. Los compuestos que estimulan los receptores β3 son por tanto útiles como agentes antiobesidad. Se ha descrito que ciertos compuestos tiromiméticos poseen la capacidad para inducir la pérdida de peso por mecanismos ajenos a la supresión del apetito, por ejemplo, mediante la estimulación de la velocidad metabólica periférica del tejido adiposo. Por ejemplo, las patentes de Estados Unidos números 4,451,465, 4,772,631, 4,977,148, 4,999,377 y 5,284,971 describen compuestos que poseen propiedades termógenas en dosis que provocan pocos o nulos efectos secundarios, como estimulación cardíaca. Es bien conocido por los expertos en la técnica que la selectividad del efecto termógeno es un requisito importante para un agente terapéutico útil en el tratamiento, por ejemplo, de la obesidad y trastornos relacionados.

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Cuando se trata la obesidad, se obtienen generalmente resultados satisfactorios cuando la combinación de la presente invención, es decir, un compuesto de esta invención combinado con ácido (4-(2-(2-(6-aminopiridin-3-il)-2(R)hidroxietilamino)etoxi)fenil)acético, profármacos o sales farmacéuticamente aceptables del mismo (denominados en lo sucesivo “ingredientes o compuestos activos”) se administran a animales, incluyendo seres humanos, o por vía oral o parenteral. Se prefiere la administración por vía oral, siendo más conveniente y evitando el posible dolor e irritación de la inyección. Sin embargo, en circunstancias en las que el sujeto no pueda tragar la medicación, o la absorción después de la administración oral esté limitada, ya sea por enfermedad u otra anomalía, es fundamental que el fármaco pueda administrarse por vía parenteral. Por cualquiera de las rutas, la dosificación del compuesto de Fórmula I varía en el intervalo de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal del sujeto/día, preferiblemente de aproximadamente 0,3 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal por día, y, lo más preferible, de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal por día, administrados en una o en dosis divididas. La dosificación del compuesto que modifica el comportamiento de la alimentación varía en el intervalo de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 15 mg/kg de peso corporal por día, preferiblemente de aproximadamente 0,1 mg/kg de peso corporal por día a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal por día, administrados en una o en dosis divididas. Como consecuencia de su acción en el tratamiento de afecciones patológicas, los compuestos de la presente invención poseen utilidad para tratar animales ungulados como ganado porcino, bovino, ovino y caprino. Los compuestos activos de la invención se pueden usar adicionalmente para el tratamiento de mascotas domésticas, por ejemplo, animales de compañía como perros y gatos. La administración de un compuesto activo de la invención puede efectuarse por vía oral o parenteral. Se administra una cantidad de un compuesto activo de la invención de forma que se reciba una dosis eficaz, generalmente una dosis diaria que, cuando se administra oralmente a un animal varía normalmente de 0,01 a 20 mg/kg de peso corporal, preferiblemente de 0,05 a 10 mg/kg de peso corporal. Por conveniencia, la medicación se puede llevar a cabo en el agua de bebida de forma que la dosis terapéutica del agente se ingiera con el suministro de agua diaria. El agente puede dosificarse directamente en el agua de bebida, preferiblemente en forma de un concentrado líquido soluble en agua (como una solución acuosa de una sal soluble en agua). Por conveniencia, el compuesto activo también puede añadirse directamente en el alimento, como, o en forma de un suplemento alimenticio del animal, también denominado preparado concentrado o premezcla. Se emplea más corrientemente un preparado concentrado o premezcla del agente terapéutico en un vehículo para la inclusión del agente en el alimento. Vehículos adecuados son líquidos o sólidos, según se desee, como agua, diferentes harinas como harina de alfalfa, harina de soja, harina de aceite de algodón, harina de aceite de linaza, harina de mazorca de maíz y harina de maíz, melazas, urea, harina de huesos y mezclas minerales como las empleadas corrientemente en 7

ES 2 241 146 T3

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alimentos para aves. Un vehículo particularmente eficaz es el propio alimento del animal respectivo; es decir, una pequeña porción de dicho alimento. El vehículo facilita una distribución uniforme de los materiales activos en el alimento final con el que se mezcla el concentrado. Es importante que el compuesto se mezcle de forma homogénea en el concentrado y, posteriormente, en el alimento. En este sentido, el agente puede dispersarse o disolverse en un vehículo oleoso adecuado como aceite de soja, aceite de maíz, aceite de algodón y similares, o en un disolvente orgánico volátil y mezclarse a continuación con el vehículo. Se apreciará que las proporciones de material activo en el concentrado pueden variar ampliamente dado que la cantidad de agente en el alimento final puede ajustarse mezclando la proporción apropiada de concentrado con el alimento para obtener un nivel deseado de agente terapéutico. Los concentrados de alta potencia pueden mezclarse por el fabricante del alimento con un vehículo proteínico como harina de soja y otras harinas, como las descritas anteriormente, produciendo suplementos concentrados que son adecuados para la alimentación directa de animales. En tales casos, se permite que los animales consuman la dieta usual. Como alternativa, tales suplementos concentrados pueden añadirse directamente al alimento y producir un alimento acabado nutricionalmente equilibrado que contiene un nivel terapéuticamente eficaz de un compuesto conforme a la invención. Las mezclas se homogeneizan a conciencia por procedimientos convencionales, como en un mezclador de doble cuerpo, a fin de asegurar la homogeneidad. Si el suplemento se usa como aliño superficial para el alimento, ayuda igualmente el asegurar la uniformidad de la distribución del material activo en toda la superficie superior del alimento aliñado.

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En general, el agua de bebida y alimento eficaces para el tratamiento de animales domésticos se preparan mezclando un compuesto de la invención con una cantidad suficiente de alimento animal, proporcionando de aproximadamente 10−3 a 500 ppm del compuesto en el alimento o agua. 25

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Los alimentos medicados preferidos para el ganado porcino, bovino, ovino y caprino contienen de 1 a 400 gramos de compuesto activo por tonelada de alimento, siendo la cantidad óptima para estos animales normalmente de 50 a 300 gramos por tonelada de alimento. Los alimentos para aves y animales domésticos preferidos contienen normalmente de aproximadamente 1 a aproximadamente 400 gramos y, preferiblemente de 10 a 400 gramos de compuesto activo por tonelada de alimento. Para administración parenteral a animales, los compuestos de la presente invención pueden prepararse en forma de pasta o un gránulo y administrarse en forma de implante, normalmente bajo la piel de la cabeza u oído del animal en el que se pretende aumentar la deposición de carne magra y mejorar la proporción de carne magra a grasa.

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En general, la administración parenteral implica la inyección de una cantidad suficiente de los compuestos de la presente invención para proporcionar al animal de 0,01 a 20 mg/kg de peso corporal/día de ingrediente activo. La dosis preferida para aves, ganado bovino, ovino, caprino y mascotas domésticas varía en el intervalo de 0,05 a 10 mg/kg de peso corporal por día de ingrediente activo. 40

Los siguientes ejemplos y preparaciones ilustran la preparación de los compuestos de la invención. Preparación 1 45

2-Metil-4-cloro-6-fenilpirrolo[3,2-d]pirimidina

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Se calienta una mezcla de 9 g de Compuesto (b) y 170 ml de oxicloruro de fósforo a ebullición durante 21 horas. Después de la evaporación del exceso de oxicloruro de fósforo, se diluye la masa de reacción con agua helada. El precipitado, es decir, el clorhidrato de (c), se mezcla con 50 ml de agua, se añaden 100 ml de acetato de etilo y se neutraliza la mezcla bajo agitación intensa y enfriamiento, con agua amoniacal hasta que se obtiene una reacción alcalina (con fenolftaleína). Después de separar las capas, se extrae la capa de agua inferior dos veces con acetato de etilo (50 ml cada vez). Los extractos de acetato de etilo se combinan y evaporan a vacío. El sedimento (c) se separa por filtrado. Rendimiento 7,43 g (76,2%), p.f. 184-185ºC (en acetato de etilo).

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Ejemplo de referencia I

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ES 2 241 146 T3 2-Metil-4-isopropilamino-6-fenilpirrolo[3,2-d]pirimidina

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Se calentó una mezcla de 1,22 g del compuesto de la Preparación 1, 0,6 g de isopropilamina, 1 g de potasa y 35 ml de agua en un autoclave a 150ºC (temperatura del baño) durante 5 horas. El precipitado se separó por filtrado, se lavó con agua y acetato de etilo y recristalizó en una solución de etanol al 75-85%. Ejemplo 1

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(S)-4-(2-Metoximetil-pirrolidin-1-il)-2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2- d]pirimidina 20

El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo de referencia 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM). Ejemplo 2

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(RS)-2-Metil-6-fenil-4-[2-(2-pirrolidin-1-il-etil)-piperidin-1-il]-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidina 35

El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo de referencia 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM). Ejemplo 3 40

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1-(2-Metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-decahidro-quinolina El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM).

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Ejemplo 4

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ES 2 241 146 T3 1’-(2-Metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-[1,4’]bipiperidinilo El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo de referencia 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM). 5

Ejemplo 5

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(R)-4-(2-Metoximetil-pirrolidin-1-il)-2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2- d]pirimidina 20

El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo de referencia 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM). Ejemplo 6

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(S)-2-Metil-6-fenil-4-(2-pirrolidin-1-ilmetil-pirrolidin-1-il)-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidina El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo de referencia 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM).

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Ejemplo 7

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(R)-Dimetil-[1-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)- pirrolidin-3-il]-amina 55

El compuesto del título se preparó por el procedimiento del ejemplo de referencia 1. La estructura se confirmó por espectrometría de masas (EM).

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ES 2 241 146 T3 REIVINDICACIONES 1. Un compuesto seleccionado entre el grupo constituido por 5

(S)-4-(2-metoximetil-pirrolidin-1-il)-2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina; (RS)-2-metil-6-fenil-4-[2-(2-pirrolidin-1-il-etil)-piperidin-1-il]-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina;

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1-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-decahidro-quinolina; 1’-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-[1,4’]bipiperidinilo; (R)-4-(2-metoximetil-pirrolidin-1-il)-2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina;

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(S)-2-metil-6-fenil-4-(2-pirrolidin-1-ilmetil-pirrolidin-1-il)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina; y (R)-dimetil-[1-(2-metil-6-fenil-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-il)-pirrolidin-3-il]-amina;

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y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. 2. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

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3. Un compuesto según la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como un medicamento. 4. El uso de un compuesto según como se ha definido en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para inhibir o aliviar una afección patológica o trastorno fisiológico en un mamífero caracterizado o asociado a un exceso de neuropéptido Y. 5. El uso de la reivindicación 4 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es un trastorno de la alimentación.

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6. El uso de la reivindicación 4 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico se selecciona entre el grupo constituido por (1) trastornos o enfermedades del corazón, vasos sanguíneos o del sistema renal; (2) afecciones relacionadas con una mayor actividad del nervio simpático; (3) enfermedades cerebrales y enfermedades relacionadas con el sistema nervioso central; (4) afecciones relacionadas con el dolor o la nocicepción; (5) enfermedades relacionadas con motilidad gastrointestinal y secreción anómalas; (6) trastornos por la ingestión anómala de bebidas y alimentos; (7) enfermedades relacionadas con disfunción sexual y trastornos reproductivos; (8) afecciones o trastornos asociados a inflamación; (9) enfermedades respiratorias; y (10) enfermedades relacionadas con una liberación anómala de hormonas. 7. El uso de la reivindicación 5 en el que el trastorno de alimentación es obesidad.

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8. El uso de la reivindicación 5 en el que el trastorno de alimentación es bulimia. 9. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es un trastorno o enfermedad del corazón o vasos sanguíneos seleccionados entre el grupo constituido por angiospasmos, insuficiencia cardíaca, choque, hipertrofia cardíaca, aumento de la tensión arterial, angina, infarto de miocardio, muerte cardíaca súbita, arritmia, y enfermedad vascular periférica. 10. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es un trastorno o enfermedad del sistema renal seleccionado entre le grupo constituido por flujo de líquidos deficiente, transporte de masa anómalo e insuficiencia renal. 11. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es una afección relacionada con una mayor actividad del nervio simpático durante o después de cirugía de las arterias coronarias o una operación o cirugía en el tracto gastrointestinal.

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12. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es enfermedad cerebral o una enfermedad relacionada con el sistema nervioso central seleccionada entre el grupo constituido por como infarto cerebral, neurodegeneración, epilepsia, accidente cerebrovascular, angiospasmo cerebral, hemorragia cerebral, depresión, ansiedad, esquizofrenia y demencia. 13. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es una enfermedad relacionada con motilidad gastrointestinal y secreción anómalas seleccionada entre el grupo constituido por íleo, incontinencia urinaria y enfermedad de Crohn. 11

ES 2 241 146 T3 14. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es un trastorno por la ingestión anómala de bebidas y alimentos seleccionado entre el grupo constituido por anorexia y trastornos metabólicos. 5

15. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es una enfermedad respiratoria seleccionada entre el grupo constituido por asma y afecciones relacionadas con el asma o broncoconstricción. 16. El uso de la reivindicación 6 en el que la afección patológica o trastorno fisiológico es una enfermedad relacionada con la liberación anómala de una hormona seleccionada entre el grupo constituido por hormona luteinizante, hormona del crecimiento, insulina y prolactina.

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17. Una formulación farmacéutica para tratar la obesidad que comprende cantidades eficaces de (a) un compuesto como se ha definido en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (b) un agente β3 adrenérgico o un agente tiromimético. 15

18. Una formulación farmacéutica según la reivindicación 17 en la que dicho agente β3 -adrenérgico es el ácido (4-(2-(2-(6-aminopirid-3-il)-2-(R)hidroxietilamino)etoxi)fenil)acético, un profármaco del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

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