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OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS

11 Número de publicación: 2 206 989

51 Int. Cl. : C07D 213/79

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C07D 213/80 C07D 405/12 A61K 31/44

ESPAÑA

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TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA

T3

86 Número de solicitud europea: 98945453 .3

86 Fecha de presentación: 07.10.1998

87 Número de publicación de la solicitud: 1023267

87 Fecha de publicación de la solicitud: 02.08.2000

54 Título: Compuestos de piridilo y composiciones farmacéuticas que los contienen.

30 Prioridad: 09.10.1997 CH 2364/97

73 Titular/es: CERMOL S.A.

CH-1902 Evionnaz, CH

45 Fecha de publicación de la mención BOPI:

16.05.2004

72 Inventor/es: Statkow, Pierre;

Straumann, Danielle; Chatterjee, Shyam, S.; Sunkel Letelier, Carlos; Fau de Casa-Juana Muñoz, Miguel; Álvarez-Builla Gomez, Julio y Minguez Ortega, José M.

45 Fecha de la publicación del folleto de la patente:

74 Agente: Curell Suñol, Marcelino

ES 2 206 989 T3

16.05.2004

Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art. 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, 1 – 28036 Madrid

ES 2 206 989 T3 DESCRIPCIÓN Compuestos de piridilo y composiciones farmacéuticas que los contienen. 5

La presente invención se refiere a una serie de nuevos derivados de piridina, a sus procedimientos de preparación, a su utilización como agentes cardioprotectores y a las composiciones farmacéuticas que contienen dichos derivados. Más particularmente, el objeto de la presente invención está constituido por derivados de piridina de fórmula general (I), en los que

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- X representa H, NO2 , OH, CN, F, Br, Cl, CF3 , -NH-CO-CH3 , 2,3-Cl2 , 2,3-(OCH3 )2 , 4-Cl-3-NO2 y 2-[CH=CHCOO-C(CH3 )3 ] y el ciclo fusionado 2,3-oxadiazol [2.3-(=N-O-N=)]; 30

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- Y representa un grupo alcoxicarbonilo R2 00C-, en el que R2 puede ser H, un grupo alquilo C1-C4, 2-metoxietilo, 2-tetrahidrofurfurilo o 5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosforinan-2-il; - R representa H, un grupo alquilo C1-C4 o, alternativamente, los grupos siguientes: 2-metoxietilo, 2-(bencil-metilamino)etilo, 2-tetrahidrofurfurilo, 5-oxotetrahidrofururilo, 3-[(4,4-difenil)-1-piperidinil]propilo, (R)-1-bencil-3-piperidinilo, 2-(N-bencil-(N-fenilamino)-etilo, (S)-1-bencil-3-pirrolidinilo, 2-[(4-difenilmetil)-1-piperaciniletilo, 3-fenil2-propenilo, 2-(N-morfolino)etilo o 1,3-di(N-morfalino)isopropilo; - R’ representa CH3 , CN o -CH2 -O-(CH2 )2 -NH2 , así como los correspondiente isómeros ópticos y las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos. Según la técnica anterior, se conocen compuestos relativamente similares, pero tienen un grupo dihidropiridina, por ejemplo en los documentos EP-A-0551663, EP-A-0636611, “Angewandte Chemie” 1991, 103(7), 1578-1665 y “The Merck Index”, 11ª ed. 1989, cit. 6441, pág. 1031, col. 2-página 1032, col. 1 (Nifidepina). Se conocen también otros derivados de fenil-piridina, pero tienen varios sustituyentes diferentes en el grupo fenil, piridina respectivamente, por ejemplo en los documentos EP-A-0387070, EP-A-0297613 y DE-A-4430639. Como ejemplos no limitativos, se pueden mencionar los siguientes compuestos que corresponden a la fórmula (1) de la presente invención:

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3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2,3-dicloro-fenil)-2,6-dimetil-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-fluorofenil)piridina-3,5-dicarboxílico

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3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-acetilaminofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-hidroxifenil) piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-piridina-3,5-dicarboxílico

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3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cianofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

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ES 2 206 989 T3 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 5

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(4-cloro-3-nitrofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3,5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

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3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-trifluorometilfenil)piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

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3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-trifluorometilfenil)piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2,3-dimetoxifenil)piridina-3,5-dicarboxílico

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3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(5-oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico 25

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (S)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (R)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 30

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3-isopropil éster 5-(2-metoxietil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-isobutil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

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3-etil éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico éster dimetílico del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 40

éster dietílico del ácido 4-[2-(-tert-butoxicarbonilvinil)-fenil]-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(N-metilbencilamino)etil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-etil éster 5-metil éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

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3-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico 50

3-etil éster 5-metil éster del ácido 2-(2-aminoetoxi)metil-4-(2-clorofinil)6-metil piridina-3,5-dicarboxílico 3-(2-metoxietil) éster 5-(3-fenil)propen-2-il éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico

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3-(2-dimetilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrobromuro) 3-(2-dietilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

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éster dimetílico del ácido 2,6-dimetil-4-fenilpiridina-3,5-dicarboxílico 3-(3-dimetilaminopropil) 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

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3-metil éster 5-(N-morfolino)etil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

3

ES 2 206 989 T3 3-metil éster 5-[1,3-di(N-morfolino)isopropil] éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico (trihidrocloruro) 5

Los compuestos correspondientes a la fórmula (Ia, ejemplos 1 a 30) podrían ser preparados, en un procedimiento general, por oxidación de 1,4-dihidropiridinas correspondientes a la fórmula (II). En algunos casos, cuando X=2-NO2 , muchas dihidropiridinas II podrían ser algo inestables, de modo que los productos se pueden obtener mediante Ib y III, (Esquema I), permitiendo la preparación de nuevos derivados Ic. En el esquema, X, R y R’ son como se han definido anteriormente, y R”, aunque diferenciado para claridad en el esquema, debería considerarse tal como se definió para R.

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Esquema I

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Los derivados de 1,4-dihidropiridina (II) bien son ya conocidos, o se podrían preparar por los procedimientos habituales descritos en la bibliografía. 45

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Como agentes de oxidación para la preparación de los compuestos (Ia) es posible utilizar todos los procedimientos descritos para oxidación estándar, como oxígeno, NaNO2 /HOAc, NaNO2 /HCl, HNO3 , Fe(NO3 )3 o Cu(NO3 )2 , Br2 + NaAcO, CrO3 , azufre, KMnO4 , cloranilo u o-cloranilo, 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ), Pd/C, clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina (PCC/Al2 O3 ), dicromato de piridinio, MnO2 , etc. La hidrólisis controlada del éster de Ia, para producir Ib, la activación mediante III y la esterificación a 1c se describen en el presente informe. Las sales farmacéuticamente aceptables obtenidas por adición de ácido a los compuestos (I) se preparan por procedimientos convencionales, por tratamiento de una solución o suspensión de la base libre (I) con 1 ó 2 equivalentes de un ácido farmacéuticamente aceptable, ya sea orgánico o inorgánico. Para poner algunos ejemplos, es posible mencionar los siguientes ácidos: clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, cítrico, oxálico, malónio, salicílico, málico, láctico, p-toluensulfónico, glucónico, fumárico, succínico, ascórbico, maleico, metansulfónico y bencenosulfónico. Las sales obtenidas pueden presentar algunas ventajas, particularmente en relación con la mayor solubilidad en disolventes polares como el agua. Esto puede facilitar la preparación de formas galénicas que requieren la administración del producto disuelto en agua. Las mezclas de diasteroisómeros o enantiómeros se pueden separar utilizando las diferencias de propiedades físico-químicas de los productos, por los procedimientos habituales como cristalización fraccionada, cromatografía, reacciones con inducción asimétrica o por la acción de enzimas o microorganismos. Los presentes inventores habían puesto en evidencia el hecho de que los compuestos de piridina de fórmula (I), según la presente invención, presentan una actividad cardioprotectora y por lo tanto, se pueden utilizar como agentes cardioprotectores. Además, otro objeto de la presente invención consiste en preparaciones farmacéuticas que contie-

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ES 2 206 989 T3 nen al menos, un compuesto de fórmula (I), como se definió anteriormente o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. 5

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Los compuestos de fórmula (I) según la invención se pueden administrar solos pero, en general se deberían administrar en forma de mezcla con un excipiente farmacéutico seleccionado, dependiendo de la vía de administración y de la práctica habitual farmacéutica. Como ejemplo, se pueden administrar por vía oral, bien en forma de comprimidos, que contienen excipientes como almidón o lactosa, o en cápsulas, bien solos o mezclados con excipientes, o en forma de jarabes o suspensiones, que contienen sustancias colorantes o aromáticas. Se pueden inyectar también por vía parenteral, como por ejemplo, por vía intramuscular, intravenosa o subcutánea. Cuando se administren por vía parenteral, se utilizarán preferentemente en forma de solución acuosa estéril, que puede contener otros solutos, como por ejemplo, sal o glucosa, para dar la solución isotónica. Las composiciones farmacéuticas según la invención podrían contener una cantidad de cualquiera de los productos de fórmula general (I) de modo que la concentración de la dosis administrada esté comprendida entre 0,01 y 20 mg/kg. La dosis diaria del principio activo depende de la vía de administración. En general, se utilizará una dosis oral entre 5 y 1.000 mg/día. En la medida en que cuando se administra por vía intramuscular, el producto se puede administrar bien en una dosis o dividido hasta en tres dosis, cuando se administre por vía intravenosa el producto puede estar incluido en un sistema por goteo, para administración continua. Existirán necesariamente variaciones dependiendo del peso y de las condiciones del paciente, además de la vía de administración seleccionada. De esta forma, las composiciones farmacéuticas según la presente invención, se pueden utilizar como nuevos fármacos para la prevención o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, como cardiomiopatías, infarto de miocardio, angina de pecho, insuficiencia cardíaca, vasoespasmo coronario, valvulopatía, etc. La presente invención se ilustrará con relación a algunos ejemplos de preparación de compuestos según la invención, así como a los resultados de las pruebas de toxicidad y de actividad farmacológica.

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Ejemplo 1 Éster dimetílico del ácido 2,6-dimetil-4-fenil piridina-3,5-dicarboxílico

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Se añadieron en partes con agitación 10 g (0,033 mol) de éster dimetílico del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico sobre una suspensión de 119 g (0,1 mol) de clorocromato de piridinio absorbido sobre alúmina en 330 ml de CH2 Cl2 . La mezcla se mantuvo en agitación a temperatura ambiente durante 8 horas. El sólido restante se eliminó por filtracción y el líquido se lavó con agua (3 x 500 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, a sequedad. Se obtuvo el producto en forma sólida. (p.f. 133-5ºC, MeOH) con un rendimiento del 75%.

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Análisis calculado para C17 H17 NO4

Calc. Obs.

%C

%H

%N

68,22 68,09

5,72 5,63

4,68 4,64

65

5

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 2 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-piridina-3,5-dicarboxílico 5

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A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico Se calentó a reflujo con agitación durante 24 horas una solución de 20 g (0,10 mol) de bencilidenacetoacetato de metilo y 18,14 g (0,10 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 100 ml de 2-propanol. Se evaporó el disolvente a presión reducida y el residuo obtenido se cristalizó en 15 ml de éter diisopropílico. Se obtuvo un sólido blanco (p.f. 117-9ºC, éter diisopropílico) con un rendimiento del 82%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-piridina-3,5-dicarboxílico

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Una mezcla de 8 g (0,022 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-1,4dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido como se describe en A), y 2,15 g (0,025 mol) de MnO2 en suspensión en 15 ml de metilisobutilcetona se calentó a reflujo en agitación durante 14 horas. Se filtró el sólido restante y se concentró la solución restante a presión reducida. Se disolvió a continuación el residuo obtenido en 15 ml de HCl acuoso al 15%, se lavó con EtAcO (20 ml) y se llevó la fase acuosa a pH 8 con K2 CO3 acuoso al 20%. A continuación, se extrajo la fase acuosa con EtAcO (2 x 50 ml), se secaron los extractos acuosos (Na2 SO4 anh.) y se concentró a sequedad al vacío. Se obtuvo un aceite, que cristalizó en éter diisopropílico (2 ml), produciendo un sólido blanco (45,7ºC, éter diisopropílico) con un rendimiento del 59%. Análisis calculado para C21 H23 NO5

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Calc. Obs.

%C

%H

%N

68,28 68,03

6,28 6,26

3,79 3,85

Ejemplo 3 50

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-fluorofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

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ES 2 206 989 T3 A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-fluorofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5dicarboxílico 5

Se calentó a reflujo con agitación durante 8 horas una solución de 25 g (0,11 mol) de 3-fluoro-bencilidenacetoacetato de metilo y 20,84 g (0,11 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 110 ml de etanol abs. A continuación, se evaporó el disolvente al vacío hasta 60 ml y se enfrió la mezcla a -10ºC; se obtuvo un precipitado y por filtración, se obtuvo el producto en forma de un sólido amarillo claro, con un p.f. 118-20ºC (EtOH) y con un rendimiento del 88%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-fluorofenil)-piridina-3,5-dicarboxíli-

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co

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A una solución de 8 g (0,021 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3fluorofenil) 1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido como se indicó anteriormente en 20 ml de ácido acético y en agitación, se añadió lentamente 2,06 g (0,215 mol) de CrCO3 en agitación. Una vez finalizó la adición, se mantuvo el reflujo en agitación durante una hora. A continuación, se enfrió la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se añadió a una mezcla de 50 ml de NH4 OH y hielo. La solución resultante se extrajo a continuación con CH2 Cl2 (3 x 100 ml), se lavaron los extractos orgánicos con (250 ml) y se secaron con Na2 SO4 anh. Por último, se evaporó el disolvente a presión reducida y se obtuvo un aceite que cristalizó en 5 ml de pentano. Se obtuvo el producto en forma de un sólido blanco, de p.f. 66-8ºC (EtOH) con un rendimiento del 65%. Análisis calculado para C21 H22 NFO5

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Calc. Obs.

%C

%H

%N

65,11 65,23

5,72 5,95

3,62 3,45

30

Ejemplo 4 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 35

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A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-clorofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5dicarboxílico

55

Se calentó a reflujo con agitación en ausencia de luz, durante 18 horas una solución de 15 g (0,06 mol) de 2clorobencilidenacetoacetato de metilo y 11,64 g (0,06 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 65 ml de etanol abs. A continuación, se evaporaron 30 ml de disolvente y se enfrió la solución restante a -10ºC. De esta forma, se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 165-7ºC, EtOH) con un rendimiento del 86%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

60

Una mezcla de 8 g (0,02 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-clorofenil)-2,6dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según A) y 71 g (0,059 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 200 ml de CH2 Cl2 y la mezcla total se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración, se lavó el líquido con agua (3 x 250 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de un aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 66%.

65

7

ES 2 206 989 T3 Análisis calculado para C21 H22 ClNO5

5

10

Calc. Obs.

%C

%H

%N

62,46 62,43

5,49 5,57

3,47 3,59

Ejemplo 5 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

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A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-clorofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5dicarboxílico 30

35

40

Se calentó a reflujo con agitación y en ausencia de luz, durante 8 horas una solución de 15 g (0,06 mol) de 3clorobencilidenacetoacetato de metilo y 11,64 g (0,06 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 65 ml de etanol abs. A continuación, se enfrió la mezcla de reacción a -10ºC y precipitó un sólido blanco (137-9ºC, MeOH) con un rendimiento del 87%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico Una mezcla de 8 g (0,02 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-clorofenil)-2,6dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según A) y 71 g (0,059 mol) de clorocromato de piridinio absorbido en alúmina, se puso en suspensión en 200 ml de CH2 Cl2 . A continuación, la mezcla total se mantuvo en agitación a temperatura ambiente durante 8 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración, se lavó el líquido restante con agua (3 x 250 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de un aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 70%.

45

Análisis calculado para C21 H22 ClNO5

50

Calc. Obs.

%C

%H

%N

62,46 62,40

5,49 5,68

3,47 3,30

55

60

65

8

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 6 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 5

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15

A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina3,5-dicarboxílico 20

Se calentó a reflujo con agitación durante 8 horas, en ausencia de luz una solución de 20 g (0,07 mol) de 2,3diclorobencilidenacetoacetato de metilo y 13,56 g (0,07 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 75 ml de etanol abs. A continuación, se enfrió la mezcla de reacción a -10ºC y filtró el precipitado resultante. Se obtuvo el producto, con un p. f. de 172-3ºC (EtOH), con un rendimiento del 79%. 25

B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 30

Se añadieron 10 g (0,023 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-2,6dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico a una suspensión de 82 g (0,068 mol) de clorocromato de piridinio en alúmina en 230 ml de CH2 Cl2 y se mantuvo la mezcla en fuerte agitación durante 7 horas. Se filtró el sólido insoluble y se lavó el líquido restante con agua (3 x 250 ml), se secó con Na2 SO4 anh. y se concentró a baja presión. Por último, se obtuvo el producto en forma de un aceite, con un rendimiento del 87%.

35

40

Análisis calculado para C21 H21 Cl2 NO5

Calc. Obs.

%C

%H

%N

57,55 57,32

4,83 5,05

3,20 3,08

Ejemplo 7 45

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

50

55

60

A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-bromofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5dicarboxílico 65

Se calentó a reflujo en ausencia de luz, durante 10 horas una solución de 15 g (0,05 mol) de 2-bromobencilidenacetoacetato de metilo y 9,82 g (0,05 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 55 ml de etanol. A

9

ES 2 206 989 T3 continuación, se enfrió la mezcla a -10ºC y se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 170-2ºC, EtOH) con un rendimiento del 85%. 5

B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

10

Una mezcla de 10 g (0,022 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-bromofenil)2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según A) y 80 g (0,067 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 220 ml de CH2 Cl2 y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 6 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración, se lavó el líquido con agua (3 x 150 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 66%.

15

Análisis calculado para C21 H22 BrNO5

20

25

Calc. Obs.

%C

%H

%N

56,26 56,21

4,95 5,17

3,12 3,08

Ejemplo 8 3-metil 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

30

35

40

A) 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-bromofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico 45

Se calentó a reflujo con agitación, en ausencia de luz, durante 10 horas una solución de 15 g (0,05 mol) de 3bromobencilidenacetoacetato de metilo y 9,81 g (0,05 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 55 ml de etanol abs. A continuación, se enfrió la mezcla de reacción a -10ºC, dando un sólido blanco (138-40ºC, EtOH) con un rendimiento del 85%. 50

B) 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

55

Una mezcla de 10 g (0,022 mol) de 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cbromofenil)-2,6-dimetil1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según se describe en A) y se puso en suspensión 80 g (0,067 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, en 220 ml de CH2 Cl2 y se agitó la suspensión a temperatura ambiente durante 5 horas. Se eliminó el sólido insoluble por filtración, se lavó el líquido con agua (3 x 200 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 74%.

60

Análisis calculado para C21 H22 BrNO5

65

Calc. Obs.

%C

%H

%N

56,26 56,62

4,95 4,88

3,12 3,38

10

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 9 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-trifluorometilfenil) piridina-3,5-dicarboxílico 5

10

15

20

25

A) 3-metil 5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-trifluorometilfenil)-1,4-dihidropiridina-3,5dicarboxílico Se calentó a reflujo una solución de 90 ml (118,8 g: 0,68 mol) de 2-trifluorometil-benzaldehído, 75 ml (79,23 g: 0,68 mol) de acetoacetato de metilo y 126,38 g (0,68 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 700 ml de 2-propanol. A continuación, se destilaron 400 ml de disolvente a presión reducida y se enfrió la solución restante a -10ºC. De este modo, se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 147-9ºC, MeOH) con un rendimiento del 69%.

30

35

40

B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-trifluorometilfenil)piridina-3,5-dicarboxílico Una mezcla de 7 g (0,016 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2trifluorometilfenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según A) y 57,35 g (0,048 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 150 ml de CH2 Cl2 , a continuación se mantuvo la mezcla total en agitación durante 5 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración y se lavó el líquido con agua (3 x 150 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 69%. Análisis calculado para C22 H22 F3 NO5 %C

%H

%N

60,41 60,11

5,07 5,31

3,20 3,29

45

Calc. Obs. 50

Ejemplo 10 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-trifluorometilfenil) piridina-3,5-dicarboxílico

55

60

65

11

ES 2 206 989 T3 A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-trifluorometilfenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico 5

10

15

Se calentó a reflujo una solución de 13,21 g (0,05 mol) de 3-trifluorometilbencil-acetoacetato de metilo y 8,99 g (0,05 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 50 ml de etanol abs. y se protegió de la luz, durante 10 horas. A continuación se evaporó el disolvente a presión reducida y se cristalizó el residuo en EtAcO (15 ml). Se obtuvo el producto en forma de un sólido blanco (p.f. 118-10ºC, EtOH) con un rendimiento del 88%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-trifluorometilfenil)piridina-3,5-dicarboxílico Una mezcla de 12 g (0,027 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3trifluorometilfenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según se describe en A) y 98 g (0,082 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 270 ml de CH2 Cl2 , se mantuvo la suspensión en agitación durante 6 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración y se lavó el líquido con agua (3 x 300 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 65%. Análisis calculado para C22 H22 F3 NO5

20

Calc. Obs.

25

%C

%H

%N

60,41 60,02

5,07 5,01

3,20 3,51

Ejemplo 11 30

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cianofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

35

40

45

A) 3-metil éster 5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cianofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina3,5-dicarboxílico 50

Se calentó a reflujo con agitación, en ausencia de luz, durante 8 horas una solución de 30 g (0,13 mol) de 3cianobencilidenacetoacetato de metilo y 24,24 g (0,13 mol) de (tetrahidrofuran-2-ilmetil)-3-aminocrotonato en 130 ml de etanol abs. A continuación, se enfrió la mezcla de reacción a -10ºC y se obtuvo el producto en forma de un sólido amarillo (p.f. 127-9ºC, EtOH) con un rendimiento del 79%.

55

co

B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cianofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxíli-

60

Una mezcla de 10 g (0,025 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cianofenil)-2,6dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según se describe en A) y 91 g (0,076 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 250 ml de CH2 Cl2 y se agitó la suspensión a temperatura ambiente durante 5 horas. El sólido restante se separó por filtración, se lavó la solución con agua (3 x 150 ml), se secó con Na2 SO4 anh. y se concentró a presión reducida, hasta sequedad. Se obtuvo el producto en forma de un aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 78%.

65

12

ES 2 206 989 T3 Análisis calculado para C22 H22 N2 O5

5

10

Calc. Obs.

%C

%H

%N

66,99 66,84

5,62 5,92

7,10 7,14

Ejemplo 12 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

15

20

25

30

A una solución de 30 g (0,07 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4(2-nitrofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico en 72 ml de ácido acético, calentado a reflujo, se añadieron en porciones 7,2 g (0,007 mol) de CrO3 . Después de finalizar la adición, se mantuvo a reflujo durante una hora más. La mezcla de reacción se vertió a continuación lentamente en NH4 OH acuoso enfriado con hielo (150 ml). Se separó la mezcla en dos fases y se extrajo con CH2 Cl2 (3x100 ml). Se secó el extracto orgánico con Na2 SO4 anh. y se concentró a sequedad a presión reducida. El aceite resultante se cristalizó en EtAcO-éter dietílico, dando un sólido blanco (p.f. 69-70ºC, EtOH) con un rendimiento del 79%.

35

Análisis calculado para C21 H22 N2 O7

40

45

Calc. Obs.

%C

%H

%N

60,86 60,63

5,35 5,26

6,76 6,52

Ejemplo 13 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (S)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

50

55

60

65

Sobre una solución agitada de 1,183 g (2,84 mmol) de 3-metil éster 5-(S-tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (RIS)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico en 4 ml de ácido acético, se añadieron en porciones, a temperatura ambiente, 588 mg (8,53 mmol) de nitrito de sodio. Una vez finalizada la adición, la mezcla de reacción se mantuvo en agitación a 50ºC durante 90 min. A continuación, la mezcla de reacción se vertió lentamente sobre 20 ml de hielo/agua y a continuación se neutralizó (a pH 5) con NaOH acuoso al 20%, y a continuación a pH 7 con NaHCO3 . Se extrajo a continuación la solución con CH2 Cl2 (2x25 ml), y se lavó el extracto orgánico con una 13

ES 2 206 989 T3 solución saturada de NaCl, se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a sequedad a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 1:1). De este modo, se obtuvieron 879 mg del producto (rendimiento: 74%). El hidrobromuro se preparó tratando una solución etanólica del producto con HBr al 48%, obteniéndose un sólido blanco (121-4ºC, EtOH). 5

Espectros de masas:

10

M/e: 384(4); 368(20); 331(19); 315(25); 284(25); 270(15); 267(27); 253(34); 236(42); 235(25); 209(25); 180(20); 153(28); 152(38); 140(33); 139(38); 128(35); 127(43); 126(30); 114(33); 102(23); 101(25); 85(156); 84(543); 77(33); 76(26); 71(1000); 67(35); 55(38). Ejemplo 14 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (R)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

15

20

25

30

35

40

Sobre una solución de 0,89 g (2,13 mmol) de 3-metil éster 5-(R-tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (RIS)2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico en 4 ml de ácido acético, agitada y calentada a 60ºC, se añadieron en porciones, 442 mg (6,41 mmol) de nitrito de sodio. Una vez finalizada la adición, se mantuvieron la agitación y el calentamiento durante 90 min más. A continuación, se vertió la mezcla de reacción sobre 20 ml de hielo/agua y a continuación se neutralizó (a pH 5) con NaOH acuoso al 20%, y a continuación (a pH 7) con NaHCO3 . Se extrajo a continuación la solución con CH2 Cl2 (2x25 ml), y se lavó el extracto orgánico con una solución saturada de NaCl, se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a sequedad a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 6:4). De este modo, se obtuvieron 334 mg del producto (rendimiento: 38%). El hidrobromuro se preparó tratando una solución etanólica del producto con HBr al 48%, obteniéndose un sólido blanco (114-6ºC, EtOH). Espectros de masas:

45

M/e: 383(3); 368(16); 331(13); 315(20); 284(21); 270(14); 253(27); 236(34); 235(20); 209(20); 180(19); 153(25); 152(33); 140(33); 139(33); 128(33); 127(37); 126(27); 102(22); 101(23); 85(149); 84(514); 77(29); 76(27); 71(1000); 55(46). Ejemplo 15

50

3-metil éster 5-(5-oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

55

60

65

14

ES 2 206 989 T3 A) 3-metil éster 5-(oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-1,4-dihidropiridina3,5-dicarboxílico 5

Se calentó a reflujo con agitación, en ausencia de luz, durante 10 horas una solución de 10 g (0,03 mol) de 2nitrobencilidenacetoacetato de 5-(oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) y 3,5 g (0,03 mol) de 3-aminocrotonato de metilo en 30 ml de etanol abs. Se destiló a continuación el disolvente a presión reducida, y el residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, tolueno:EtAcO, 1:1). De este modo, se aisló el producto en forma de aceite, que cristalizó en éter diisopropílico (5 ml), dando un sólido amarillo (p.f. 86-8ºC, éter diisopropílico) con un rendimiento del 68%.

10

B) 3-metil éster 5-(5-oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 15

Sobre una solución de 15 g (0,035 mol) de 3-metil éster 5-(5-oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6dimetil-4-(2-nitrofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según A), en 35 ml de ácido acético, se añadió en agitación 3,5 de CrO3 . Una vez concluida la adición, se mantuvieron el reflujo y la agitación durante una hora adicional. A continuación, se vertió la mezcla de reacción sobre 375 ml de NH4 OH conc. con hielo y se dejó la mezcla toda la noche a 5ºC. De este modo se obtuvo un sólido (p.f. 132-4ºC, MeOH) con un rendimiento del 69%.

20

25

Análisis calculado para C21 H20 N2 O8

Calc. Obs.

%C

%H

%N

55,88 59,04

4,71 4,84

6,54 6,59

Ejemplo 16 30

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

35

40

45

50

Una mezcla de 15 g (0,036 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3nitrofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico y 130 g (0,108 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 360 ml de CH2 Cl2 y se mantuvo en agitación durante 8 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración y se lavó la solución orgánica con agua (3 x 300 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a sequedad, a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de un aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 72%.

55

Análisis calculado para C21 H22 N2 O7

60

Calc. Obs.

%C

%H

%N

60,86 60,58

5,35 5,45

6,76 7,01

65

15

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 17 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro) 5

10

15

20

25

A) 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico Se calentó a reflujo con agitación, en ausencia de luz, durante 8 horas una solución de 15 g (0,05 mol) de 3nitrobencilidenacetoacetato de tetrahidrofuran-2-ilmetil y 8,7 g (0,05 mol) de 3-aminocrotonato de tetrahidrofuran-2ilmetil en 50 ml de etanol abs. Se enfrió la mezcla de reacción a -10ºC. Se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 122-3ºC, EtAcO) con un rendimiento del 80%. B) 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

30

35

Una mezcla de 8 g (0,016 mol) de 3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-1,4dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según se describe en A) y 60 g (0,049 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se puso en suspensión en 160 ml de CH2 Cl2 y se mantuvo la mezcla a temperatura ambiente en agitación durante 6 horas. Se separó el sólido restante por filtración y se lavó el líquido con agua (3 x 200 ml), se secó (Na2 SO4 anh.) y se concentró a presión reducida. El residuo obtenido en forma de un aceite, se transformó en hidrocloruro disolviéndolo en etanol (10 ml) y a continuación, añadiendo éter etílico (20 ml) saturado con HCl. El producto precipitó en forma de un sólido blanco (p.f. 75-77ºC, EtOH) con un rendimiento del 67%. Análisis calculado para C25 H28 N2 O8 ·HCl

40

Calc. Obs.

%C

%H

%N

57,64 57,75

5,61 5,65

5,38 5,27

45

Ejemplo 18 50

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(4-cloro-3-nitrofenil)-2,6-dimetil-piridina-3,5-dicarboxílico A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(4-cloro-3-nitrofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico

55

60

65

16

ES 2 206 989 T3 Se calentó a reflujo con agitación, en ausencia de luz, durante 8 horas una solución de 20 g (0,07 mol) de 4-cloro3-nitrobencilidenacetoacetato de metilo y 13,06 g (0,07 mol) de 3-aminocrotonato de tetrahidrofuran-2-ilmetil en 70 ml de etanol abs. La solución se concentró a continuación a sequedad a presión reducida y el residuo se cristalizó en EtAcO. Se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 148-50ºC, EtAcO) con un rendimiento del 85%. 5

B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(4-cloro-3-nitrofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 10

15

Una mezcla de 9 g (0,020 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(4-cloro-3-nitrofenil)2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según se describe en A) y 72 g (0,060 mol) de clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina, se pusieron a continuación en suspensión en 200 ml de CH2 Cl2 , se mantuvo la mezcla a temperatura ambiente en agitación durante 9 horas. Se filtró el sólido restante y se lavó el filtrado con agua (3 x 200 ml), se secó (Na2 SO4 anh.) y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se aisló el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 69%. Análisis calculado para C21 H21 ClN2 O7

20

Calc. Obs.

%C

%H

%N

56,19 56,17

4,72 4,78

6,24 6,59

25

Ejemplo 19 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-acetilaminofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro) 30

35

40

45

50

55

60

65

A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-acetilaminofenil)-2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico Se calentó a reflujo con agitación, en agitación, durante 8 horas protegida de la luz una solución de 30 g (0,115 mol) de 3-acetilaminobencilidenacetoacetato de metilo y 21,27 g (0,115 mol) de 3-aminocrotonato de tetrahidrofuran2-ilmetil en 120 ml de isopropanol. Se evaporó el disolvente al vacío y se cristalizó el residuo en acetato de etilo. Se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 158-60ºC, MeOH) con un rendimiento del 76%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-acetilaminofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico Una mezcla de 12 g (0,03 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-acetilaminofenil)2,6-dimetil-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, según se indica en A), y 4,87 g (0,056 mol) de MnO2 en suspensión en 60 ml de metilisobutilcetona se calentó a reflujo en agitación durante 24 horas. Se filtró inmediatamente el sólido restante y se concentró la solución a baja presión. El residuo obtenido se disolvió en 250 ml de HCl acuoso al 5%, la solución se extrajo con EtAcO (3x10 ml) y a continuación, se ajustó a 8 el pH de la capa acuosa con K2 CO3 al 20%. A continuación se extrajo la fase acuosa con CH2 Cl2 (3x100 ml), se secaron los extractos orgánicos sobre Na2 SO4 anh., se concentró a presión reducida y se obtuvo un aceite amarillo, que se transformó en hidrocloruro disolviéndolo en etanol (10 ml) y añadiendo éter dietílico (20 ml) saturado con HCl. De este modo, se obtuvo un sólido blanco (p.f. 196-8ºC, MeOH) con un rendimiento del 59%.

17

ES 2 206 989 T3 Análisis calculado para C23 H26 N2 O6 ·HCl

5

10

Calc. Obs.

%C

%H

%N

59,67 59,56

5,88 6,12

6,05 5,92

Ejemplo 20 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-hidroxifenil)-piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro)

15

20

25

30

A) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-hidroxifenil)-1,4-dihidropiridina3,5-dicarboxílico

35

Se calentó a reflujo en agitación, durante 8 horas en ausencia de luz, una solución de 15 g (0,07 mol) de 3hidroxibencilidenacetoacetato de metilo y 12,62 g (0,07 mol) de 3-aminocrotonato de tetrahidrofuran-2-ilmetil en 70 ml de etanol abs. Se evaporó el disolvente a presión reducida y el residuo se cristalizó en acetato de EtAcO. De este modo, se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 170-2ºC, EtAcO) con un rendimiento del 82%. B) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-hidroxifenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

40

45

Una mezcla de 10 g (0,026 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3hidroxifenil) 1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico, obtenido según se indicó en A) y 2,6 g (0,030 mol) de MnO2 en 50 ml de metilisobutilcetona, se calentaron a reflujo en agitación durante 14 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración y el líquido se concentró a sequedad a presión reducida. El residuo obtenido se disolvió en 15 ml de HCl acuoso al 5%, la solución se extrajo con EtAcO (3x10 ml) y a continuación, se ajustó el pH de HCl acuoso al 15%, a continuación se lavó la solución con acetato de etilo (10 ml), se ajustó el pH a 8 con K2 CO3 acuoso al 20%. Por último, se extrajo la solución con CH2 Cl2 (2x50 ml), se secaron los extractos orgánicos sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a sequedad a presión reducida. El residuo apareció como un aceite amarillo que cristalizó en 2 ml de metanol y se transformó en hidrocloruro por disolución en etanol (10 ml) y adición de éter dietílico (20 ml) saturado con HCl. Se obtuvo un sólido amarillo (p.f. 95-7ºC, MeOH) con un rendimiento del 64%.

50

Análisis calculado para C21 H23 NO6 ·HCl

55

Calc. Obs.

%C

%H

%N

59,79 59,64

5,73 5,66

3,32 3,23

60

65

18

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 21 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2,3-dimetoxifenil)piridina-3,5-dicarboxílico 5

10

15

20

25

Se calentó a reflujo con agitación, en ausencia de luz, durante 10 horas una mezcla de 11 g (0,025 mol) de 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2,3-dimetoxifenil)-1,4-dihidropiridina-3,5-dicarboxílico y 92 g (0,076 mol) de clorocromato de piridinio absorbido en alúmina, se puso en suspensión en 250 ml de CH2 Cl2 y la mezcla total se mantuvo en agitación a temperatura ambiente durante 6 horas. Se eliminó el sólido restante por filtración y se lavó el líquido con agua (3 x 300 ml), se secó sobre Na2 SO4 anh. y se concentró a sequedad, a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, nhexano:EtAcO, 8:2) con un rendimiento del 79%. Análisis calculado para C23 H27 NO7

30

Calc. Obs. 35

%C

%H

%N

64,32 64,34

6,34 6,36

3,26 3,28

Los compuestos descritos en los ejemplos 22 a 30 se han obtenido como se describió anteriormente en la bibliografía. Ejemplo 22

40

3-isopropil éster 5-(2-metoxietil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico

45

50

55

60

65

19

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 23 3-metil éster 5-isobutil éster 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico 5

10

15

Ejemplo 24 20

3-etil éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico

25

30

35

Ejemplo 25 Dimetil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico

40

45

50

55

60

65

20

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 26 Dietil éster del ácido 4-[(2-tert-butoxicarbonilvinil)-fenil]-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 5

10

15

20

Ejemplo 27 3-metil éster 5-(N-metilbencilamino)etil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico

25

30

35

Ejemplo 28 40

3-etil éster 5-metil éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-6-metil-piridina-3,5-dicarboxílico

45

50

55

60

65

21

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 29 3-etil éster 5-metil éster del ácido 2-(2-aminoetoxi)metil-4-(2-clorofenil)-6-metil-piridina-3,5-dicarboxílico 5

10

15

Ejemplo 30 20

3-(2-metoxietil) éster 5-(3-fenil)propen-2-il éster del ácido 2,6-dimetil 4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

25

30

35

Ejemplo 31 3-metil éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico 40

45

50

55

60

65

A) 3,5-dimetil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico Sobre una solución a ebullición de 3 kg (8,7 mol) de 3,5-dimetil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-1,4dihidropiridina-3,5-dicarboxílico en 8,25 l de ácido acético, se añadieron en porciones en agitación 870 g (8,7 mol) de CrO3 . Cuando se terminó la adición, se calentó a reflujo la mezcla de reacción en agitación durante una hora adicional. Cuando la mezcla alcanzó la temperatura ambiente, se vertió lentamente, en agitación, sobre 22,5 l de una mezcla de NH4 OH acuoso al 25% y hielo (2:1) y el producto precipitó. Se aisló el sólido por filtración, se lavó con agua hasta pH neutro y se cristalizó (p.f. 99-101ºC, MeOH) con un rendimiento del 83%. B) 3-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)- piridina-3,5-dicarboxílico Una solución de 500 g de 3,5-dimetil del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-3,5-dicarboxílico(1,5 mol) y 87,5 g de KOH (1,32 mol) en 5 l de metanol y 1,5 l de agua, se calentó a reflujo durante 4 horas. A continuación, se eliminó el 22

ES 2 206 989 T3

5

disolvente a presión reducida y se disgregó el residuo restante con 1 l de agua. Se eliminó el sólido (la mayor parte material de partida sin reaccionar) por filtración y el filtrado se trató, a 0ºC, lentamente y en agitación con 100 ml de HCL acuoso al 35% y la mezcla se mantuvo en agitación durante una hora adicional, a temperatura ambiente. Se formó un sólido, que se lavó con agua (250 ml) y etanol (250 ml), dando un sólido amarillento (p.f. 232-3ºC, etanol) con un rendimiento del 70%. Un pequeño porcentaje (12%) del diácido correspondiente al ejemplo 32, se aisló de las soluciones madre. Análisis calculado para C16 H14 N2 O5

10

Calc. Obs.

%C

%H

%N

58,18 58,30

4,27 4,49

8,48 8,62

15

Ejemplo 32 Ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)- piridina-3,5-dicarboxílico 20

25

30

35

Ejemplo 33 3-(2-dimetilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrobromuro)

40

45

50

A) Síntesis del éster metílico del ácido 5-clorocarbonil-2,6-dimetil-4-(2-nitro-fenil)piridina-3-carboxílico 55

60

Sobre una mezcla de 2,5 g (7,5 mmol) de 3-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico y 0,7 g (3,8 mmol) de cloruro de cianurilo, en 20 m l de acetona anh. en atmósfera de argón, se añadieron 1,1 ml de trietilamina. La mezcla resultante se mantuvo en agitación a temperatura ambiente durante 7 horas. A continuación, se concentró la mezcla a sequedad a presión reducida y se purificó el residuo por cromatografía en columna (gel de sílice, n-hexano:EtAcO 1:1) con un rendimiento del 80%. B) 3-(2-dimetilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrobromuro)

65

Sobre una mezcla de 0,169 (1,8 mmol) de N-dimetilaminoetanol y 0,20 ml de trietilamina en 8 ml de CH2 Cl2 enfriado a 0ºC y en atmósfera de argón, se añadió 0,5 g (1,5 mmol) de éster metílico del ácido 5-clorocarbonil-2,6dimetil-4-(2-nitro-fenil)piridina-3-carboxílico descrito en A), disuelto en 4 ml de CH2 Cl2 . La mezcla de reacción se agitó toda la noche a temperatura ambiente. A continuación, se lavó la mezcla con agua, se secó sobre Na2 SO4 y se 23

ES 2 206 989 T3 concentró a sequedad a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se transformó en dihidrobromuro por tratamiento con EtOH (10 ml) y HBr conc. (1 ml). Se obtuvo un sólido blanco (85-8ºC, EtOH) con un rendimiento del 73%. 5

10

Análisis calculado para C20 H23 N3 O6 ·HBr

Calc. Obs.

%C

%H

%N

49,89 49,62

5,03 5,47

8,73 9,02

Ejemplo 34 15

3-(2-dietilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 20

25

30

35

Sobre una mezcla de 0,37 g (3,1 mmol) de N-dietilaminoetanol y 0,29 g (2,86 mmol) de trietilamina en 10 ml de CH2 Cl2 , enfriada a 0ºC y en atmósfera de nitrógeno, se añadió 1 g (2,86 mmol) de éster metílico del ácido 5clorocarbonil-2,6-dimetil-4-(2-nitro-fenil)piridina-3-carboxílico descrito en A) del ejemplo 33, disuelto en 8 ml de CH2 Cl2 . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas; a continuación, se lavó con agua (10 ml), se secó sobre Na2 SO4 y se concentró a sequedad, a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, EtAcO) y se transformó en dihidrocloruro por tratamiento con EtOH (10 ml) y HCl conc. (1 ml). Se obtuvo un sólido blanco (186-7ºC, EtOH) con un rendimiento del 71%.

40

Análisis calculado para C22 H27 N3 O6 ·2HCl 45

50

Calc. Obs.

%C

%H

%N

52,68 52,96

5,83 5,56

8,38 8,07

Ejemplo 35 5-(3-dimetilaminopropil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

55

60

65

24

ES 2 206 989 T3

5

Sobre una solución de 0,146 g (1,4 mmol) de 3-dimetilamino-1-propanol y 0,13 g (1,29 mmol) de trietilamina en 6 ml de CH2 Cl2 , enfriada a 0ºC y en atmósfera de nitrógeno, se añadió 0,45 g (1,29 mmol) de éster metílico del ácido 5-clorocarbonil-2,6-dimetil-4-(2-nitro-fenil)piridina-3-carboxílico, obtenido como se describió en A) del ejemplo 33, disuelto en 5 ml de CH2 Cl2 . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas; a continuación, se lavó con agua (10 ml), se secó sobre Na2 SO4 y se concentró a sequedad, a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, acetona) y se transformó en dihidrocloruro por tratamiento con EtOH (10 ml) y HCl conc. (1 ml). Se obtuvo un sólido blanco (164-6ºC, EtOH) con un rendimiento del 75%.

10

15

Análisis calculado para C21 H25 N3 O6 ·2HCl

Calc. Obs.

%C

%H

%N

51,73 51,50

5,59 5,82

8,62 8,43

Ejemplo 36 20

3-metil éster 5-(N-morfolino)etil éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 25

30

35

40

Sobre una solución de 0,21 g (1,57 mmol) de N-(2-hidroxietil)-4-morfolina y 0,15 g de trietilamina en 5 ml de CH2 Cl2 , enfriada a 0ºC y en atmósfera de argón, se añadió 0,5 g (1,43 mmol) de éster metílico del ácido 5-clorocarbonil-2,6-dimetil-4-(2-nitro-fenil)piridina-3-carboxílico, obtenido como se describió en A) del ejemplo 33, disuelto en 4 ml de CH2 Cl2 . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas; a continuación, se lavó con agua (10 ml), se secó sobre Na2 SO4 y se concentró a sequedad, a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, EtAcO) y se transformó en dihidrocloruro por tratamiento con EtOH (10 ml) y HCl conc. (1 ml). Se obtuvo un sólido blanco (p.f. 96-8ºC, EtOH) con un rendimiento del 51%.

45

Análisis calculado para C22 H25 N3 O7 ·2HCl 50

Calc. Obs.

%C

%H

%N

51,25 51,48

5,28 5,11

8,16 8,00

55

60

65

25

ES 2 206 989 T3 Ejemplo 37 Trihidrocloruro de 3-metil éster 5-[1,3-di(N-morfolina)isopropil] éster del ácido 2,6-dimetil 4-(2-nitrofenil) piridina3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 5

10

15

20

25

Una mezcla de 0,34 g (0,86 mmol) de éster metílico del ácido 5-clorocarbonil-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)piridina3-carboxílico, obtenido como se describió en A) del ejemplo 33, 0,22 g (0,95 mmol) de 1,3-dimorfolin-4-il-propan2-ol y 96 mg (0,86 mmol) de trietilamina, se agitaron a temperatura ambiente durante 12 horas. A continuación, se lavó la mezcla con agua (10 ml), se secó sobre Na2 SO4 y se concentró a sequedad, a presión reducida. Se obtuvo el producto en forma de aceite, que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, EtAcO) y se transformó en trihidrocloruro por tratamiento con EtOH (10 ml) y HCl conc. (1 ml). Se obtuvo un sólido blanco (p.f. 187-92ºC, EtOH) con un rendimiento del 24%.

30

Análisis calculado para C27 H34 N4 O8 ·3HCl %C

%H

%N

49,83 49,48

5,74 5,61

8,61 8,95

35

Calc. Obs. 40

Pruebas farmacológicas y toxicológicas Se sometieron a pruebas farmacológicas los compuestos más activos de fórmula (I) de la presente invención para poner en evidencia sus efectos cardioprotectores in vitro e in vivo, así como sus propiedades hemodinámicas y su toxicidad.

45

Los procedimientos utilizados fueron los siguientes: Efecto cardioprotector in vitro 50

55

Se obtuvieron miocitos ventriculares aislados de cerdo de Guinea siguiendo el procedimiento descrito por Powell et al. (J. Physiol. 1980, 102: 131) modificados por Levy et al. (J. Physiol. 1990, 425:9P). La hipercontractura y muerte celular se obtuvieron ambas por incubación en atmósfera de N2 o por incubación con voratridina que provocó cambios importantes en la homeostasis iónica de los cardiomiocitos (Hiroko Hashizume et al., European Journal of Pharmacology, 1974, 271: 1-8). Los resultados expresados en porcentaje de células protegidas de la hipercontractura, es decir, que mantienen su morfología de forma de varilla con respecto a las células tratadas con vehículo se dan en las tablas I y II a continuación.

60

65

Con el fin de confirmar la cardioprotección, se hicieron pruebas de actividad de uno de los compuestos más interesantes (ejemplo 31 según la invención) sobre el potencial de acción (AP) de los cardiomiocitos ventriculares del cerdo de Guinea en presencia de veratridina o en condiciones anóxicas. Se midieron los transcursos de tiempo en el potencial de acción (AP) de los cardiomiocitos ventriculares del cerdo de Guinea tratados con veratridina o convertidos en anóxicos por incubación en atmósfera de N2 (técnica de las pinzas de parche) en ausencia y presencia del compuesto del ejemplo 31 según la invención. Este compuesto no influye significativamente en la potencial acción normal pero impide (100 a 300 nM) la prolongación de la duración del potencial de acción de los cardiomiocitos provocada por la veratridina. En condiciones anóxicas, existe una reducción de la duración del potencial de acción de los cardiomiocitos 26

ES 2 206 989 T3 relacionada principalmente con una activación de K+-ATP dependiente de la corriente. Este efecto está inhibido en función de la dosis y de forma acusada por el compuesto del ejemplo 31 según la invención (100 a 300 nM). TABLA I 5

Porcentaje de células protegidas de hipercontractura obtenidas por incubación en atmósfera de N2 Compuestos (30 nM) según los ejemplos:

% Protección

12 22 23 24 25 31

80 63 50 60 50 58

10

15

TABLA II

20

Porcentaje de células protegidas de hipercontractura obtenidas por incubación con veratridina 25

Compuestos (1 µM) según los ejemplos:

% Protección

12 22 23 24 25 31

57 37,5 41,3 37,5 34 64

30

35

40

45

Efecto cardioprotector in vivo La muerte cardíaca y las arritmias fueron provocadas por oclusión coronaria y el procedimiento de reperfusión en ratas anestesiadas según el procedimiento de Seyle et al., (Angiology, 1960, 11, 398-407) modificada por Krzeminski T. (“proceedings of 7th Freiburg Focus of Biomeasurement”, Estrasburgo, 16-19 Sept. 1991) Cardiovascular and Respiratory in vivo Studies, Biomesstechnik, Verlag March GmbH. Alemania) y según las convenciones LAMBETH (Walker M.J. A. et al., Cardiovasc. Re., 1988, 22, 447-455). Los productos se han administrado por vía oral (un día y una hora antes del experimento). La tabla III a continuación presenta los resultados obtenidos. Éstos se dan en porcentaje de protección frente a la mortalidad y las arritmias (fibrilaciones vetriculares). TABLA III

50

55

60

Efecto protector in vivo Compuesto (2x20 mg/kg) Según el ejemplo nº:

% protección frente a la muerte

% de protección frente a fibrilaciones ventriculares

12 22 23 24 25 31

100 100 100 100 100 85,7

100 50 75 37,5 50 73,4

65

27

ES 2 206 989 T3 Efecto hemodinámico Se han probado los compuestos más activos según la invención con el fin analizar su actividad hemodinámica. 5

10

En la administración intravenosa de diferentes dosis en la rata anestesiada (30, 100, 300 y 1.000 mg/kg) de los compuestos mencionados no influyen significativamente los siguientes parámetros: presión sanguínea arterial sistólica, diastólica y media, frecuencia cardíaca, periodo de rechazo, presión sistólica ventricular izquierda, presión diastólica final ventricular izquierda, dP/dTm´ax y dP/dTmín , índice de contractabilidad y periodo de relajación. Toxicidad Los compuestos más activos según la invención presentan una toxicidad baja por vía oral con LD50 mayor de 2.000 mg/kg en la rata.

15

Conclusión

20

Los compuestos de piridilo de fórmula (I) según la invención son capaces de proteger los cardiomiocitos frente a los daños provocados por modificaciones iónicas (responsables de la mayoría de las patologías cardíacas) y de esta forma, son capaces de proteger los animales tratados (ratas) frente a la muerte en relación con la disfunción cardíaca y la arritmia. Por consiguiente, son agentes potencialmente cardioprotectores en diferentes enfermedades cardíacas humanas (por ejemplo cardiomiopatías, infarto de miocardio, angina de pecho, insuficiencias cardíacas, vasoespasmo coronario, valvulopatía, etc.). Además, presentan una baja toxicidad por vía oral y en dosis terapéuticas no presentan una actividad hemodinámica perjudicial.

25

30

35

40

45

50

55

60

65

28

ES 2 206 989 T3 REIVINDICACIONES 1. Compuestos de piridilo de fórmula general (I), en la que 5

10

15

20

- X representa H, NO2 , OH, CN, F, Br, Cl, CF3 , -NH-CO-CH3 , 2,3-Cl2 , 2,3-(OCH3 )2 , 4-Cl-3-NO2 y 2-[CH=CHCOO-C(CH3 )3 ] y el ciclo fusionado 2,3-oxadiazol [2.3-(=N-O-N=)]; 25

30

- Y representa un grupo alcoxicarbonilo R2 OOC-, en el que R2 puede ser H, un grupo alquilo C1-C4, 2-metoxietilo, 2-tetrahidrofurfurilo o 5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosforinan-2-il; - R representa H, un grupo alquilo C1-C4 o, alternativamente, los grupos siguientes: 2-metoxietilo, 2-(bencil-metilamino)etilo, 2-tetrahidrofurfurilo, 5-oxotetrahidrofururilo, 3-[(4,4-difenil)-1-piperidinil]propilo, (R)-1-bencil-3-piperidinilo, 2-(N-bencil-(N-fenilamino)-etilo, (S)-1-bencil-3-pirrolidinilo, 2-[(4-difenilmetil)-1-piperaciniletilo, 3-fenil2-propenilo, 2-(N-morfolino)etilo o 1,3-di(N-morfalino)isopropilo; - R’ representa CH3 , CN o -CH2 -O-(CH2 )2 -NH2 , así como los correspondiente isómeros ópticos y las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos.

35

2. Los siguientes compuestos de fórmula (I), según la reivindicación 1: 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2,3-dicloro-fenil)-2,6-dimetil-piridina-3,5-dicarboxílico 40

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-fluorofenil)piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-acetilaminofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro) 45

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-hidroxifenil)piridina-3,5-dicarboxílico (hidrocloruro) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-fenil-piridina-3,5-dicarboxílico 50

3,5-di(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-cianofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 55

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 60

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(4-cloro-3-nitrofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3,5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

65

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-trifluorometilfenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 29

ES 2 206 989 T3 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-trifluorometilfenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 5

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2,3-dimetoxifenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(3-clorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico

10

3-metil éster 5-(5-oxotetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (S)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido (R)-2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

15

3-metil éster 5-(tetrahidrofuran-2-ilmetil) éster del ácido 4-(2-bromofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3-isopropil éster 5-(2-metoxietil) éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 20

3-metil éster 5-isobutil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 3-etil éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico éster dimetílico del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

25

éster dietílico del ácido 4-[2-(-tert-butoxicarbonilvinil)-fenil]-2,6-dimetil piridina-3,5- dicarboxílico 3-metil éster 5-(N-metilbencilamino)etil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico 30

3-etil éster 5-metil éster del ácido 4-(2,3-diclorofenil)-2,6-dimetil piridina-3,5-dicarboxílico 3-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)-piridina-3,5-dicarboxílico

35

3-etil éster 5-metil éster del ácido 2-(2-aminoetoxi)metil-4-(2-clorofinil)6-metil piridina-3,5-dicarboxílico 3-(2-metoxietil) éster 5-(3-fenil)propen-2-il éster del ácido 2,6-dimetil-4-(3-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico 40

3-(2-dimetilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrobromuro) 3-(2-dietilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

45

éster dimetílico del ácido 2,6-dimetil-4-fenilpiridina-3,5-dicarboxílico 3-(3-dimetilaminopropil) 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 50

3-metil éster 5-(N-morfolino)etil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro) 55

3-metil éster 5-[1,3-di(N-morfolino)isopropil] éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil)piridina-3,5-dicarboxílico (trihidrocloruro) 3. Compuestos de piridilo con las siguientes denominaciones:

60

3-(2-dietilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrobromuro) 3-(2-dietilaminoetil) éster 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

65

3-(3-dimetilaminopropil) 5-metil éster del ácido 2,6-dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxílico (dihidrocloruro)

30

ES 2 206 989 T3 4. Procedimiento para la preparación de los compuestos según la reivindicación 1, por oxidación de una 1,4dihidropiridina de fórmula (II) 5

10

15

en la que X, Y, R y R’ son tal como se definieron en la reivindicación 1. 20

5. Procedimiento según la reivindicación 4, en el que una 1,4-dihidropiridina (II) es oxidada por un oxidante seleccionado de entre oxígeno, NaNO2 /AcOH, NaNO2 /HCl, HNO3 , Fe(NO3 )3 , Cu(NO3 )2 , Br2 + NaOAc, CrO3 , azufre, KMnO4 , cloranilo u O-cloranilo, 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ), Pd/C, clorocromato de piridinio adsorbido en alúmina (PCC/Al2 O3 ), dicromato de piridinio, MnO2 .

25

6. Compuestos de piridilo según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, para su utilización como agentes cardioprotectores. 7. Composiciones farmacéuticas que contienen por lo menos un compuesto de piridilo según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

30

8. Composición farmacéutica según la reivindicación 7, en la que la cantidad de compuesto de fórmula (I) es adecuada para producir dosis administradas entre 0,01 y 20 mg/kg. 35

40

45

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55

60

65

NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a España y solicitadas antes del 7-10-1992, no producirán ningún efecto en España en la medida en que confieran protección a productos químicos y farmacéuticos como tales. Esta información no prejuzga que la patente esté o no incluida en la mencionada reserva. 31