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˜ OFICINA ESPANOLA DE PATENTES Y MARCAS
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11 N´ umero de publicaci´on:
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˜ ESPANA
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TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA
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kN´umero de solicitud europea: 97938069.8 kFecha de presentaci´on: 05.08.1997 kN´umero de publicaci´on de la solicitud: 0 967 898 kFecha de publicaci´on de la solicitud: 05.01.2000
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54 T´ıtulo: Procedimiento de tratamiento del tabaco para reducir el contenido de nitrosamina y pro-
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ductos producidos.
30 Prioridad: 05.08.1996 US 23205 P
23.09.1996 30.10.1996 02.12.1996 20.06.1997
US US US US
725691 739942 757104 879905
No.1 Starwood Lane Manakin-Sabot, VA 23103, US
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72 Inventor/es: Williams, Jonnie R.
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74 Agente: Ponti Sales, Adelaida
45 Fecha de la publicaci´ on de la menci´on BOPI:
16.12.2003
45 Fecha de la publicaci´ on del folleto de patente:
16.12.2003
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73 Titular/es: Jonnie R. Williams
Aviso:
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En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicaci´on en el Bolet´ın europeo de patentes, de la menci´on de concesi´on de la patente europea, cualquier persona podr´a oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposici´on deber´a formularse por escrito y estar motivada; s´olo se considerar´a como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposici´ on (art. 99.1 del Convenio sobre concesi´on de Patentes Europeas). Venta de fasc´ ıculos: Oficina Espa˜ nola de Patentes y Marcas. C/Panam´ a, 1 – 28036 Madrid
ES 2 196 359 T3 DESCRIPCION Procedimiento de tratamiento del tabaco para reducir el contenido de nitrosamina y productos producidos. 5
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Campo de la invenci´ on La presente invenci´on est´a relacionada con un procedimiento de tratamiento del tabaco para reducir el contenido o para evitar la formaci´ on de nitrosaminas da˜ ninas, las cuales son habitualmente encontradas en el tabaco. Antecedentes de la invenci´ on
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La utilizaci´on de energ´ıa en forma de microondas para secado de productos agr´ıcolas ha sido descrita por otros. La utilizaci´on de energ´ıa en forma de microondas para curar tabaco se describe en la patente USA 4.430.806, concedida a Hopkins. En la patente USA 4.898.189, Wochnowsky, describe la utilizaci´ on de microondas para el tratamiento del tabaco verde, con vistas a controlar el contenido en humedad en la preparaci´ on para el almacenaje o transporte. En la patente USA 3.699.976 se describe la utilizaci´ on de energ´ıa en forma de microondas para eliminar plagas de insectos en el tabaco. Adem´as, se han descrito t´ecnicas que utilizan la impregnaci´ on de tabaco con l´ıquidos org´ anicos inertes (patente USA N◦ . 4.821.747), para la extracci´on de materiales org´anicos expandidos, por medio de arrastre con agua, en las cuales la mezcla es expuesta a energ´ıa en forma de microondas. En otra realizaci´ on, se describe la energ´ıa en forma de microondas como el mecanismo de secado de material extruido que contiene tabaco (patente on de microondas USA N◦ . 4.874.000). En la patente USA N◦ . 3.773.055, Stungis describe la utilizaci´ para el secado y la expansi´ on de cigarrillos preparados con tabaco h´ umedo. Tentativas anteriores para reducir el alquitr´ an y las nitrosaminas carcinog´enicas da˜ ninas han incluido inicialmente la utilizaci´on de filtros en el tabaco para fumar. Adem´ as, se han llevado a cabo intentos para utilizar aditivos dirigidos a bloquear los efectos de sustancias carcin´ogenos da˜ ninas en el tabaco. Estos esfuerzos han fracasado a la hora de reducir la morbilidad oncol´ ogica asociada con la utilizaci´ on del tabaco. Es sabido que el tabaco verde reci´en cortado no presenta virtualmente carcin´ogenos de nitrosamina. Ver, por ejemplo, Wiernik et al., “Effect of Air-Curing on the Chemical Composition of Tobacco”, Recent Advances in Tobacco Sciences, Vol.21, pp. 39 y sig., Symposium Proceedings 49th Meeting Tobacco Chemists’ Research Conference, Sept. 24-27, 1995, Lexington, Kentucky (en adelante 2wiernik et al.”). No obstante, se sabe que el tabaco curado contiene un determinado n´ umero de nitrosaminas, incluyendo los carcin´ogenos da˜ ninos N’-nitrosonornicotina (NNN) y 4-(N-nitrosometilamino)-1-(3-piridil)-1-butanona (NNK). Est´ a ampliamente aceptado que las citadas nitrosaminas se forman con posterioridad a la recolecci´on, durante la fase de curaci´ on, tal como se describe en la presente m´as adelante. Desgraciadamente, el tabaco verde reci´en cortado resulta inadecuado para fumar o para otro tipo de consumo. En 1993 y 1994, Burton et al, en la Universidad de Kentucky, llevaron a cabo determinados experimentos relacionados con nitrosaminas espec´ıficas del tabaco (TSNA), tal como se recoge en el Abstract, “Reduction of Nitrite-Nitrogen and Tobacco N’-Specific Nitrosamines In Air-Cured Tobacco By Elevating Drying Temperatures”, Agronomy & Phytophatology Joint Meeting, CORESTA, Oxford 1995. Burton et al informaron acerca de que el secado de las hojas de tabaco recolectadas por espacio de 24 horas a on por aire, incluyendo la finalizaci´ on de amarilleamiento (EOY), 71◦C, en diversos estadios de curaci´ EOY +3, EOY +5, etc., daba como resultado alguna reducci´ on en los niveles de nitrosaminas. Se hace tambi´en referencia a la liofilizaci´ on y a la aplicaci´on de microondas sobre determinadas muestras, sin detalle de resultados. El solicitante ha confirmado que en trabajo real subyacente en relaci´on con este Abstrac, llevado a cabo por Burton et al., en la Universidad de Kentucky, la aplicaci´ on de microondas fue considerada como no exitosa. Determinados aspectos del estudio de Burton et al de 1993-94 se recogen en el de Wiernik et al, mencionado anteriormente, entre las p´ aginas 54 y 57, bajo el t´ıtulo “Modified Air-Curing”. EL articulo de Wiernik et al postula que el sometimiento de muestras de hojas de tabaco, tomadas en diversos estadios de la curaci´on con aire, a secado r´apido a 70◦C por espacio de 24 horas, eliminar´ıa el exceso de agua y reducir´ıa el exceso de microorganismos, por consiguiente, se evitar´ıa la acumulaci´on de nitritos y de nitrosamina espec´ıfica del tabaco ((TSNA). En la Tabla II de la p´agina 56, Wiernik et al incluye algunos de los datos de Burton et al resumidos sobre nitritos en l´ amina y en nervio central y sobre contenido en TSNA en las muestras KY160 y KY 171. Se incluyen datos procedentes de las pruebas de liofilizado y de secado r´ apido, pero no se hace menci´ on a las muestras sometidas a la acci´on de microondas. El art´ıculo contiene la siguiente conclusi´on: A partir de este estudio puede concluirse que la reducci´ on de niveles de nitrito y la acumulaci´ on de TSNA en l´amina y en nervio central puede resultar posible, mediante la aplicaci´ on de calor (70◦C) 2
ES 2 196 359 T3 al tabaco oscuro despu´es de la p´erdida de la integridad celular en la hoja. El secado r´ apido de la hoja de tabaco en este estadio de curaci´ on reduce la actividad microbiana que se desarrolla durante la curaci´ on lenta a temperatura ambiente. No obstante, debe a˜ nadirse que el citado tratamiento reduce la calidad de la hoja de tabaco. 5
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agina 56. El art´ıculo de Wiernik et al discute tambi´en el procedimiento tradicional de curaci´on Id, en la p´ del tabaco Skroniowsky en Polonia, como un ejemplo de procedimiento de curaci´ on de 2 pasos. Este art´ıculo manifiesta que el tabaco es primeramente curado con aire y, cuando la l´ amina alcanza el color amarillo o marronuzco, se calienta el tabaco a 65◦C por espacio de dos d´ıas, con vistas a curar el tallo. Un an´ alisis del tabaco obtenido de esta manera mostraba que tanto los valores de nitrito como los de TSNA eran bajos, a saber, por debajo de los 10 microgramos por gramo y entre 0,6 y 2,1 microgramos, respectivamente. Wiernik et al teorizaron que estos resultados resultaban explicables como consecuencia del r´ apido calentamiento que no permite nuevo crecimiento bacteriano. Wiernik et al indicaron tambi´en, no obstante, que se obtuvieron valores bajos de nitrito y de TSNA, por debajo de 15 microgramos por gramo en lo que hace referencia a nitrito y 0,2 microgramos por gramo en lo concerniente a TSNA, para el tabaco sometido a curaci´ on con aire en Polonia. Resumen de la invenci´ on
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Constituye un objetivo de la presente invenci´ on el de eliminar o reducir sustancialmente el contenido en nitrosaminas del tabaco destinado a fumadores o para consumo a trav´es de otros medios. Otro objetivo de la presente invenci´ on es el de reducir el potencial carcinog´enico de los productos del tabaco, incluyendo cigarrillos, cigarros, tabaco de mascar, rap´e, gomas conteniendo tabaco y pastillas.
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Constituye tambi´en otro objetivo de la presente invenci´on el de eliminar de manera sustancial o reducir de modo significativo la cantidad de nitrosaminas espec´ıficas del tabaco, incluyendo N’nitrosonornicotina (NNN), 4-(N-nitrosometilamino)-1-(3-piridil)-1-butanona (NNK), N’-nitrosoanatabina (NAT) y N’-nitrosoanabasina (NAB), en los citados productos del tabaco.
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Otro objetivo de la presente invenci´ on es el de tratar el tabaco no curado en un momento determinado despu´es de la recolecci´on, con vistas a detener el proceso de curaci´on sin afectar de manera adversa a la idoneidad del tabaco para el consumo humano.
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Los anteriores y otros objetivos y ventajas de la presente invenci´on pueden ser logrados a trav´es de un procedimiento para reducir la cantidad de nitrosaminas o para evitar su formaci´ on en una planta de tabaco recolectado, que comprende el someter al menos una parte de la planta a radiaci´ on de microondas, mientras la citada porci´on permanece no curada y en un estado susceptible de presentar una reducci´ on en la cantidad de nitrosaminas, durante un per´ıodo de tiempo suficiente para reducir la cantidad de nitrosamina o evitar sustancialmente le formaci´on de al menos una nitrosamina. Resulta preferido el que en el procedimiento de la invenci´ on, el paso de sometimiento a la acci´ on de radiaci´on por microondas se lleve a cabo sobre una hoja de tabaco o sobre una porci´ on de la misma, despu´es del inicio del amarilleamiento en la hoja y con anterioridad a la sustancial acumulaci´on en las hojas de las nitrosaminas espec´ıficas del tabaco. Resulta tambi´en preferido que en el procedimiento de la invenci´on, el paso de sometimiento a la radiaci´on por microondas sea llevado a cabo con anterioridad a la p´erdida sustancia de la integridad celular de la hoja.
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En realizaciones adicionales preferidas del procedimiento, el tabaco es tabaco curado en estufa y el paso de sometimiento a la acci´on de la radiaci´on por microondas se lleva a cabo dentro del plazo de aproximadamente 24 a aproximadamente 72 horas subsiguientes a la recolecci´ on, incluso de manera m´ as preferida dentro de aproximadamente las 24 a aproximadamente 36 horas subsiguientes a la recolecci´on.
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En todav´ıa otras realizaciones del procedimiento, el tabaco recolectado es mantenido en un entorno controlado, bajo las condiciones de temperatura ambiente mencionadas anteriormente, con anterioridad al paso de sometimiento a la acci´on de la radiaci´ on por microondas.
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Entre los aspectos preferidos del procedimiento se incluye un paso, anterior al sometimiento de la hoja de tabaco que incluye preferiblemente el tallo a la acci´on de la radicaci´on por microondas, consistente en la compresi´on f´ısica de la hoja para exprimir el exceso de humedad de la misma y asegurar un secado m´as uniforme de la misma a trav´es de la unidad de microondas. Este paso puede ser convenientemente 3
ES 2 196 359 T3 llevado a cabo haciendo pasar la hoja a trav´es de un par de rodillos cil´ındricos rotatorios espaciados de manera adecuada, con anterioridad a la entrada en la cavidad de microondas.
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En todav´ıa realizaciones adicionales preferidas de la invenci´on, la radiaci´ on por microondas presenta una frecuencia comprendida entre aproximadamente 900 y 2500 MHz y es aplicada a la planta durante un per´ıodo de tiempo de al menos aproximadamente 1 segundo y preferiblemente entre aproximadamente 10 segundos y aproximadamente 5 minutos, a un determinado nivel de potencia. El nivel de potencia utilizado determina generalmente la duraci´on del periodo de tiempo de sometimiento del tabaco a la acci´on de la radiaci´on por microondas y puede oscilar desde entre aproximadamente 600 y aproximadamente 1000 vatios cuando se utilizan hornos microondas del tipo usado en las cocinas y hasta entre aproximadamente 2 y aproximadamente 75 kilovatios, m´as preferiblemente entre aproximadamente 5 y aproximadamente 50 kilovatios, los cual permite que el tratamiento se lleve a cabo de una manera r´ apida.
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Resulta tambi´en preferido, de acuerdo con la presente invenci´on, que la radicaci´on de microondas sea aplicada a la hoja o a una parte de la misma durante un periodo de tiempo suficiente para secar la hoja de una manera efectiva sin llega a carbonizarla, con vistas a que la misma resulte adecuada para el consumo humano.
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La presente invenci´on pretende tambi´en someter las hojas de tabaco a radiaci´on de microondas con vistas a evitar la acumulaci´ on normal de al menos una nitrosamina espec´ıfica del tabaco, tal como la N’-nitrosonornicotina, la 4-(N-nitrosometilamino)-1-(3-piridil)-1-butanona, la N’-nitrosoanatabina y la N’-nitrosoanabasina.
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El producto de tabaco no verde presenta un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT) situado por debajo de los 2 µg/g, m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 15 µg/g, e incluso m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 1 µg/g; un contenido en NNN por debajo de aproximadamente 15 µg/g, m´as preferiblemente por debajo de aproximadamente 10 µg/g, e incluso m´ as preferiblemente por debajo de 0,5 µg/g y un contenido en NNK por debajo de aproximadamente 0,002 µg/g, m´as preferiblemente por debajo de aproximadamente 0,001 µg/g e incluso m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 0,0005 µg/g. Un producto de tabaco que comprende tabaco amarillo secado resulta adecuado para el consumo humano y presenta un contenido m´ as bajo de al menos una de las nitrosaminas espec´ıficas del tabaco que el tabaco curado de manera convencional. El producto de tabaco de color amarillo presenta un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT), un contenido en NNN y un contenido en NNK situado dentro de las bandas preferidas indicadas anteriormente. El producto de tabaco no verde de color amarillo comprende tabaco no verde o de color amarillo adecuado para el consumo humano y presenta un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT) situado dentro de aproximadamente el 25 % en peso del contenido del citado TSNA en la cosecha de tabaco verde reci´en recolectado, a partir de la cual se obtiene el producto. Resulta m´ as preferible que el producto de tabaco no verde o de color amarillo tenga un contenido en TSNA situado dentro de aproximadamente el 10 % en peso, m´as preferiblemente situado dentro de aproximadamente el 5 % en peso y muy preferiblemente aproxim´ andose (por ejemplo, dentro de una cantidad de hasta varios porcentajes en peso) al contenido del citado TSNA en la cosecha de tabaco reci´en recolectada a partir de la cual se obtiene el producto. Resulta tambi´en preferido que el producto de tabaco no verde o de color amarillo comprenda tabaco no verde o de color amarillo adecuado para el consumo humano y con un contenido en al menos una TSNA seleccionada de entre NNN, NNK, NAB y NAT, que est´e situado dentro de aproximadamente el 25 % en peso, preferiblemente dentro de aproximadamente el 10 % en peso, m´as preferiblemente dentro de aproximadamente el 5 % en peso y muy preferiblemente aproxim´ andose esencialmente (por ejemplo, dentro de una cantidad de hasta varios porcentajes en peso) al contenido del correspondiente TSNA o TSNAs en la cosecha de tabaco verde reci´en recolectado a partir del cual se obtiene el producto. El producto de tabaco no verde o amarillo comprende tabaco no verde o amarillo adecuado para el consumo, teniendo un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT) que es de al menos aproximadamente el 75 % en peso, preferiblemente al menos aproximadamente el 90 % en peso, m´as preferiblemente al menos aproximadamente el 95 %, en peso y muy preferiblemente al menos aproximadamente el 99 % en peso m´as bajo que el contenido en el citado TSNA en un producto de tabaco del mismo tipo, obtenido a partir de la misma cosecha que el producto de la invenci´on, pero que sea curado en ausencia de radiaci´ on por microondas o a trav´es de otras t´ecnicas dise˜ nadas para reducir el contenido en TSNA. Resulta tambi´en preferido que el producto tabaco no verde o de color amarillo comprenda tabaco no verde o amarillo adecuado para el consumo i humano, teniendo un contenido de al menos una TNSA seleccionada de entre 4
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NNN, NNK, NAB y NAT, que sea de al menos aproximadamente el 75 % en peso, preferiblemente de al menos aproximadamente el 90 % en peso, m´as preferiblemente de al menos aproximadamente el 90 % en peso y muy preferiblemente de al menos aproximadamente el 99 % en peso m´ as bajo que el contenido en la correspondiente TNSA o TNSAs en un producto de tabaco del mismo tipo, preparado a partir de la misma cosecha de tabaco que el producto de la invenci´on, pero curado en ausencia de radiaci´ on por microondas o a trav´es de otras t´ecnicas dise˜ nadas para reducir el contenido de TSNA. Un producto de tabaco preferido comprende tabaco que tiene un reducido contenido en al menos una nitrosamina espec´ıfica del tabaco, producido a trav´es de un procedimiento que comprende el someter al tabaco, mientras el mismo permanece no curado y susceptible de presentar la formaci´on de al menos una nitrosamina espec´ıfica el tabaco detenida, a radiaci´ on por microondas. Un procedimiento para la fabricaci´ on de un producto de tabaco, comprende:
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- someter hojas de tabaco recolectadas a radicaci´on de microondas, mientras las citadas hojas permanecen no curadas y en un estado susceptible de presentar la cantidad de nitrosaminas espec´ıficas del tabaco reducida o la formaci´ on de nitrosaminas espec´ıficas del tabaco detenida, durante un per´ıodo de tiempo suficiente para reducir la cantidad de o sustancialmente evitar la formaci´ on de al menos una nitrosamina espec´ıfica del tabaco en las hojas, y
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- formar el producto de tabaco que comprende las hojas sometidas a microondas, siendo el producto tabaco seleccionado de entre cigarrillos, cigarros, tabaco de mascar, rap´e y goma y pastillas conteniendo tabaco.
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Breve descripci´ on de los dibujos La Fig 1 es una fotograf´ıa que ilustra tabaco Virginia para secado en estufa “amarillo”, una vez transcurridas entre 24 y 72 horas desde su recolecci´ on.
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La Fig 2 es una fotograf´ıa que ilustra tabaco Virginia para secado en estufa “amarillo”, bajo en nitrosamina, sometido a microondas, seg´ un la presente invenci´ on. Descripci´ on detallada de la invenci´ on
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Se ha dicho que la pr´ actica de la curaci´on del tabaco constituye m´ as un arte que una ciencia, debido al hecho de que las condiciones de curaci´ on, a lo largo de un proceso de curaci´ on deben ser ajustadas para tomar en consideraci´ on factores tales como diferencias en variedades, diferencias en hojas recolectadas a partir de diversas posiciones del tallo, diferencias entre trojes para curaci´ on, donde se utilizan, y variaciones medioambientales durante una sesi´ on u ´ nica o a lo largo de varias sesiones, especialmente fluctuaciones del tiempo durante la curaci´on con aire. Por ejemplo, la pr´ actica de curaci´on por medio de estufa resulta emp´ırica en cierto grado, y se lleva a cabo de manera ´optima por individuos que han acumulado experiencia en esta t´ecnica a lo largo de un per´ıodo de tiempo significativo. Ver, por ejemplo, Peele et al., “Chemical and Biochemical Changes During the Flue Curing Of Tobacco”, Recent Advances in Tobacco Science, Vol 21, pp 81 y sig., Symposium Proceedings 49th Meeting Chemists’ Research Conference, September 24-27, 1995, Lexington, Kentucky (en adelante “Peele et al”). Por consiguiente, una persona con una pr´ actica normal en la t´ecnica de la curaci´on del tabaco entender´ıa que los par´ ametros externos de la presente invenci´on, en sus formas m´as amplias, son variables en cierta medida, en funci´ on de la confluencia precisa de los factores mencionados anteriormente para cualquier tipo de recolecci´ on. En una realizaci´ on preferida, la presente invenci´ on se fundamenta en el descubrimiento de que durante el transcurso del ciclo de curaci´ on del tabaco existe una ventana en la cual el tabaco puede ser tratado de manera que permitir´ a sustancialmente evitar la formaci´ on de TSNA. Naturalmente, la ventana precisa durante la cual puede ser eliminada o reducida sustancialmente de una manera efectiva la formaci´on de TSNA depende del tipo de tabaco, del procedimiento de curaci´ on y de un n´ umero de otras variables que incluyen aquellas mencionadas anteriormente. De acuerdo con esta realizaci´ on preferida de la presente invenci´on, la ventana corresponde con el marco temporal post-recolecci´on, cuando la hoja se encuentra en un estadio m´ as avanzado que el “verde” o reci´en cortada, pero anterior al momento en el cual las TSANs y/o los nitritos se acumulan de manera sustancial en la hoja, este marco temporal corresponde habitualmente al per´ıodo de tiempo en el cual la hoja est´a sufriendo el proceso de amarilleamiento o en la fase de color amarillo, antes de que la hoja comience a adquirir el color marr´ on y antes de la p´erdida sustancial de la integridad celular. A menos que se desprenda claramente del contexto, los t´erminos “sustancial” y “significante”, tal como se utilizan en la presente, se refieren generalmente a predominantes o mayoritarios sobre una escala relativa, dar o tomar. Durante este marco temporal, las hojas son susceptibles de evitar 5
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sustancialmente la formaci´ on de TSNAs o de reducir el contenido de alguna TSNA ya formada, mediante la exposici´on del tabaco a radiaci´ on por microondas a un nivel de energ´ıa predeterminado durante un per´ıodo de tiempo predeterminado, tal como se discute m´ as adelante. Este tratamiento con microondas detiene en esencia la formaci´on natural de TSNAs y proporciona una hoja dorada, seca, adecuada para el consumo humano. Si las TSNAs han comenzado a acumularse de una manera significativa, habitualmente hacia el final de la fase amarilla, la aplicaci´on a la hoja de energ´ıa por microondas de acuerdo con la presente invenci´on detiene de manera significativa el ciclo natural de formaci´ on de TNSAs, evitando de este modo cualquier nueva formaci´on sustancial de TSNA. Cuando el tabaco amarillo o amarilleante es tratado de esta forma en el momento m´ as adecuado del per´ıodo de tiempo de curaci´ on, el producto tabaco resultante presenta niveles de TSNA que se aproximan sustancialmente a los del tabaco verde reci´en recolectado, al tiempo que mantiene su aroma y sabor. La presente invenci´on resulta aplicable al tratamiento del tabaco que se intenta destinar al consumo humano. Sobre el tabaco se ha desarrollado mucha investigaci´ on, con particular referencia en lo que concierne a las nitrosaminas espec´ıficas del tabaco. A las hojas de tabaco reci´en recolectadas se las denomina “tabaco verde” y no contienen carcin´ ogenos conocidos, pero el tabaco verde no resulta adecuado para el consumo humano. El procedimiento de curaci´ on del tabaco verde depende del tipo de tabaco recolectado. Por ejemplo, el tabaco (claro) Virginia secado en estufa es habitualmente objeto de curaci´ on en estufa, mientras que el Burley y determinadas variedades oscuras son habitualmente curados al aire. La curaci´ on el tabaco en estufa tiene lugar habitualmente durante un periodo de tiempo de entre cinco a siete d´ıas, en comparaci´on con el per´ıodo de tiempo de entre uno y dos meses que dura la curaci´ on en aire. Seg´ un Peele et al, la curaci´on en aire ha sido dividida en tres fases: amarilleamiento (35-40◦C) que dura aproximadamente entre 36 y 72 horas (si bien otros autores informan que el amarilleamiento se inicia antes de las 36 horas, por ejemplo, a aproximadamente las 24 horas para determinadas variedades de Virginia para secado en estufa); secado de la hoja (40-57◦C) por espacio de 48 horas; y secado del nervio central (tallo) (57-75◦C) por espacio de 48 horas. Durante la fase de amarilleamiento se inician muchas modificaciones qu´ımicas y bioqu´ımicas importantes, las cuales contin´ uan durante las primeras fases del secado de la hoja. En un procedimiento habitual de curaci´ on por medio de estufa, la fase de amarilleamiento se lleva a cabo en un troje. Durante esta fase, las hojas verdes pierden color gradualmente como consecuencia de la degradaci´on de la clorofila, con la correspondiente aparici´ on de los pigmentos carotinoides de color amarillo. Seg´ un la revisi´on de Peele et al, la fase de amarilleamiento del tabaco curado en estufa se consigue cerrando las entradas externas de aire en el troje y manteniendo la temperatura a entre aproximadamente 35-37◦C. Este procedimiento utiliza un entorno controlado, mantiene la humedad relativa en el troje a aproximadamente el 85 %, limita la p´erdida de humedad por parte de las hojas y permite que la hoja contin´ ue adelante con los procesos metab´olicos iniciados en el campo de cultivo. El operador monitoriza constantemente el avance de la curaci´ on, observando inicialmente la p´erdida de clorofila y de color verde por parte de las hojas y la aparici´ on el deseado color entre lim´on y naranja dorado.
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Con una variedad particular de tabaco Virginia para secado en estufa, sobre el cual se han efectuado pruebas, seg´ un se describe en la presente, se coloca tabaco verde reci´en recolectado en un troje por espacio de entre aproximadamente 24 y 48 horas, a una temperatura aproximada de entre 100 y 110◦ F, hasta que las hojas se vuelven m´as o menos completamente amarillas (ver Figura 1). El tabaco amarillo presenta un reducido contenido en humedad, a saber de entre aproximadamente el 90 % en peso cuando es verde, frente al 70-40 % cuando es de color amarillo. En esta fase, el tabaco amarillo no contiene esencialmente sustancias cancer´ıgenas conocidas y el contenido en TSNA es esencialmente el mismo que el del tabaco verde reci´en cortado. Este tabaco Virginia para secado en estufa permanece en estado amarillo por espacio de entre aproximadamente 6-7 d´ıas, transcurridos los cuales las hojas empiezan a modificar el color amarillo por un color marr´ on. El tabaco Virginia de color marr´ on para secado en estufa presenta un contenido de humedad situado entre aproximadamente el 11 y el 15 por ciento en peso. La conversi´on del tabaco amarillo en marr´on da como resultado la formaci´ on y la sustancial acumulaci´ on de nitrosaminas y un incremento en el contenido microbiano. El mecanismo exacto a trav´es del cual se formar. las nitrosaminas espec´ıficas del tabaco no est´a claro, pero se cree que est´a reforzado por la actividad microbiana, implicando a reductasas de nitrato microbianas en la generaci´ on de nitrito durante el procedimiento de curaci´ on. Se considera que las nitrosaminas espec´ıficas del tabaco se forman por medio de la reacci´on de aminas con especies nitrosantes derivadas de nitritos, tales como NO2 , N2 O3 y N2 O4 , en condiciones ´acidas. Weirnik et al discute la formaci´ on postulada de TSNAs en las p´ aginas 43-45; acerca de la cual se expone una breve sinopsis m´ as adelante.
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Las hojas del tabaco contienen una abundancia de aminas en forma de amino´ acidos, prote´ınas y alcaloides. La amina terciaria nicotina (referenciada como (1) en el diagrama que se muestra m´ as adelante) constituye el alcaloide m´ as importante el tabaco, mientras que otros alcaloides de tipo nicotina son la amina secundaria nornicotina (2), la anatabina (3) y la anabasina (4). El tabaco contiene tambi´en generalmente hasta un 5 % de nitrato y trazas de nitrito. La nitrosaci´ on de la nornicotina (2), de la anatabina (3) y de la anabasina (4) proporciona las correspondientes nitrosaminas: N’-nitrosonornicotina (NNN,5); N’-nitrosoanatabina (NAT,6); y N’nitrosoanabasina (NAB,7). La nitrosaci´on de la nicotina (1) en soluci´on acuosa permite obtener una mezcla de 4-(N-nitrosometilamino)-1-(3-piridil)-1-butanona (NNK,8), (NNN,5) y 4-(N-nitrosometilamino)-4(3-piridil)-1-butanol (NNA,9). Entre las TNSAs encontradas menos habitualmente se incluyen la NNAL (4-N-nitrosometilamino)-1-(3-piridil)-1-butanol, 10), iso-NNAL (4-N-nitrosometilamino)-4-(3-piridil)-1butanol, 11) y la iso-NNAC (´ acido 4-(N-nitrosometilamino)-4-(3-piridil)-butanoico, 12). La formaci´ on de estas TSNAs a partir de los alcaloides correspondientes del tabaco es mostrada m´as delante de manera esquem´atica, utilizando las designaciones 1-12 indicadas anteriormente (reproducido de Weirnik et al, supra p. 44).
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Se acepta ahora generalmente que el tabaco verde reci´en recolectado no contiene virtualmente nitritos o TSNA y que estos compuestos son generados durante la fase de curaci´on y almacenado del tabaco. Durante el transcurso de la pasada d´ecada se han llevado a cabo estudios para tratar de determinar los acontecimientos relacionados con la formaci´on de TSNA durante la curaci´on del tabaco y se han identificado diversos factores de importancia. Entre los mismos se incluyen el genotipo de la planta, la madurez de la planta en el momento de la recolecci´on, las condiciones de curaci´ on y la actividad microbiana. Los estudios han demostrado que el nitrito y la TSNA se acumulan durante la curaci´ on por medio de aire a intervalos de tiempo que se inician despu´es de la finalizaci´on del amarilleamiento y que terminan cuando la hoja se vuelve completamente marr´ on, por ejemplo entre las 2-3 semanas subsiguientes a la recolecci´on para determinadas variedades curadas en aire y aproximadamente una semana o per´ıodo de tiempo similar despu´es de la recolecci´on para las variedades secadas en estufa. Este es el momento en el cual tiene lugar la p´erdida de la integridad celular, debido a la p´erdida de humedad y a las fugas en el contenido de las c´elulas hacia los espacios intercelulares. Por consiguiente, existe una determinada ventana en el tiempo durante la curaci´ on por aire, cuando las c´elulas se desintegran, posibilitando la nutrici´ on por parte de microorganismos. Weirnik et al han sugerido que el nitrito puede entonces acumularse se una manera sustancial como resultado de la reducci´ on de nitratos disimilatoria, haciendo posible la formaci´ on de TSNA.
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Se han publicado algunos informes en relaci´ on con los efectos de la flora microbiana sobre la hoja de tabaco durante el crecimiento y la curaci´on y sobre el tabaco curado, tal como se menciona en Weirnik et al. No obstante, se presume la intervenci´on de reductasas de nitrito microbianas en la generaci´ on de nitrato durante la curaci´ on. Cuando la estructura celular se descompone despu´es de la fase amarilla y los nutrientes se han hecho accesibles a los microorganismos, estos pueden producir nitrito en condiciones favorables, por ejemplo, humedad elevada, temperatura o´ptima y anoxia. Existe normalmente una “ventana” bastante corta en cuanto a su duraci´ on cuando la actividad del agua es todav´ıa lo suficientemente elevada y la estructura celular se ha desintegrado. Seg´ un la presente invenci´ on, la formaci´ on de TNSAs en el tabaco puede ser sustancialmente evitada o detenida sometiendo las hojas recolectadas a radiaci´ on de microondas, bajo las condiciones descritas en la presente. En una realizaci´ on preferida, las hojas de tabaco son expuestas a la energ´ıa de microondas en un per´ıodo de tiempo situado entre la aparici´ on del amarilleamiento y la p´erdida sustancial de la integridad celular. Para obtener resultados o´ptimos, resulta preferido pasar las hojas recolectadas a trav´es del campo de microondas en forma de hojas sencillas, es decir, lo contrario de en forma de pilas o montones. El tratamiento de las hojas de esta manera ha sido determinado para evitar completa o sustancialmente la formaci´ on de nitrosaminas espec´ıficas del tabaco, incluyendo los conocidos carcin´ ogenos NNN y NNK. Seg´ un realizaciones preferidas de la presente invenci´ on, pueden obtenerse productos de tabaco no verde y/o productos de tabaco amarillo los cuales resultan adecuados para el consumo humano y que presenten un contenido m´ as bajo en al menos una de las nitrosaminas espec´ıficas del tabaco que el tabaco curado de modo convencional. El tabaco verde o reci´en cortado resulta generalmente no adecuado para el consumo humano, tal como se ha indicado anteriormente; la expresi´ on “no verde”, tal como se utiliza en la presente, significa que el tabaco ha perdido por lo menos la mayor parte de la clorofila e incluye, sin limitaci´on, hojas parcialmente amarillas, hojas completamente amarillas y hojas que han empezado a volverse de color marr´on en determinados puntos. El producto de tabaco no verde presenta un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT) por debajo de 2µg/g, m´as preferiblemente por debajo de aproximadamente 15µg/g, e incluso m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 1µg/g y un contenido en NNN por debajo de aproximadamente 15µg/g, m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 0,10µg/g, e incluso m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 0,05µg/g y un contenido en NNK por debajo de aproximadamente 0,002 µg/g, m´as preferiblemente por debajo de aproximadamente 0,001µg/g e incluso m´ as preferiblemente por debajo de aproximadamente 0,0005µg/g. Tal como se ha mencionado anteriormente, una persona con pr´ actica ordinaria en la t´ecnica entender´ıa que esto n´ umeros no son absolutos, sino m´ as bien bandas preferidas.
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Un producto de tabaco que comprende tabaco amarillo secado adecuado para el consumo humano, presenta un contenido m´as bajo en al menos una nitrosamina espec´ıfica del tabaco que el tabaco curado de manera convencional. El producto de tabaco amarillo presenta un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT), un contenido en NNN y un contenido en NNK dentro de las bandas preferidas indicadas anteriormente. El producto de tabaco no verde o amarillo comprende tabaco amarillo o no verde adecuado para el consumo humano y presenta un contenido en TSNA (NNN; NNK, NAB y NAT) situado dentro del 25 % en peso del contenido en la citada TSNA en la cosecha de tabaco verde reci´en recolectada, a partir de la cual se obtuvo el producto. Resulta m´ as preferido que el producto de tabaco no verde o amarillo tenga un contenido en TSNA dentro e aproximadamente el 10 % en peso, m´ as preferiblemente dentro e aproximadamente el 5 % en peso y muy preferiblemente aproxim´andose esencialmente (por ejemplo, dentro de una cantidad de hasta varios porcentajes en peso) al contenido de la citada TSNA en la cosecha de tabaco reci´en recolectada a partir de la cual se prepara el producto. Por ejemplo, la presente invenci´ on permite obtener productos de tabaco que tienen un contenido en TSNA dentro de las bandas descritas anteriormente en lo que se refiere a las cantidades, mientras que el tabaco curado por el procedimiento normal procedente de la misma cosecha generar´ıa habitualmente varias veces la cantidad de TSNA existente en el tabaco reci´en cortado. La presente invenci´on puede bloquear de una manera efectiva las bajas cantidades de nitrosaminas encontradas en el tabaco verde reci´en cortado. Resulta tambi´en preferido que el producto de tabaco no verde o amarillo comprenda tabaco no verde o amarillo adecuado para el consumo humano, con un contenido en al menos una de las TSNA seleccionado de entre NNN, NNK, NAB y NAT que se encuentra dentro de aproximadamente el 25 % en peso de, preferiblemente dentro de aproximadamente el 10 % en peso, o m´ as preferiblemente dentro de aproximadamente el 5 % en peso de, o muy preferiblemente esencialmente aproxim´ andose (por ejemplo, una cantidad de hasta varios porcentajes en peso) al contenido de la correspondiente TSNA o TNSAs en la cosecha de tabaco verde reci´en recolectado, a partir de la cual se obtiene el producto. En otras palabras, el contenido de, por ejemplo, NNN en el tabaco de la invenci´ on cae dentro de las bandas indicadas anteriormente frente a la cantidad 8
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de NNN en el tabaco verde reci´en cortado, o a la cantidad de NNN+NNK en el tabaco de la invenci´ on cae dentro de las bandas indicadas anteriormente frente a la cantidad de NNN+NNK en el tabaco verde reci´en cortado, etc. A la hora de efectuar estas comparaciones, el tabaco verde reci´en cortado es preferiblemente analizado en lo que se refiere al contenido en TSNA dentro de aproximadamente las 24 horas subsiguientes a su recolecci´on. El producto de tabaco no verde o amarillo comprende tabaco no verde o amarillo adecuado para el consumo humano y presenta un contenido en TSNA (NNN, NNK, NAB y NAT) que es de al menos aproximadamente el 75 % en peso, preferiblemente al menos de aproximadamente el 90 %, en peso, m´as preferiblemente de al menos aproximadamente el 95 % en peso y muy preferiblemente al menos el 99 % en peso inferior al contenido en la citada TSNA en un producto de tabaco del mismo tipo obtenido a partir de la misma cosecha que el producto de la invenci´on, pero curado en ausencia de radiaci´ on por microondas o mediante otros pasos espec´ıficamente dise˜ nados a reducir el contenido en TSNA. Resulta tambi´en preferido que el producto de tabaco no verde o amarillo comprenda tabaco no verde o amarillo adecuado para el consumo humano, teniendo un contenido en al menos una TSNA seleccionada de entre NNN, NNK, NAB y NAT que es de al menos el 75 % en peso, preferiblemente de al menos el 90 % en peso, m´as preferiblemente de al menos el 95 % en peso y muy preferiblemente de al menos aproximadamente el 99 % en peso inferior al contenido en TSNA o TSNAs en un producto tabaco del mismo tipo (por ejemplo, comparando un cigarrillo con otro cigarrillo) obtenido a partir de la misma cosecha de tabaco que el producto de la invenci´on, pero curado en ausencia de radiaci´ on por microondas o a trav´es de otras t´ecnicas dirigidas a reducir el contenido en TSNA. Las comparaciones en porcentajes en peso de TSNA pueden ser efectuadas tomando, por ejemplo, un cigarrillo preparado utilizando tabaco amarillo secado seg´ un la presente invenci´ on y tomando un cigarrillo preparado a partir de tabaco procedente de la misma cosecha que la que se utiliz´o para preparar el tabaco amarillo, pero curado a trav´es del procedimiento convencional sin sometimiento del mismo a radiaci´on por microondas. La fase amarilla, aquella en la cual se lleva a cabo preferiblemente el paso de sometimiento de la hoja de tabaco a la radiaci´on por microondas, puede ser ampliamente definida de cualquiera de los siguientes modos: (a) examinando el color de la hoja, cuando el color verde ha dado paso a un color amarillento; (b) determinando el porcentaje de conversi´on de clorofila en az´ ucares; (c) observando la aparici´ on de o bien formaci´ on de nitrito o generaci´ on de nitrosamina, lo cual coincide habitualmente con la finalizaci´ on de la fase amarilla; o (d) midiendo el contenido en humedad de las hojas, por ejemplo, cuando las mismas presentan un contenido en humedad comprendido entre aproximadamente el 40 y el 70 por ciento en peso. Si la radiaci´ on por microondas es aplicada a tabaco verde, no se observa paralizaci´on o prevenci´ on en la formaci´ on de nitrosaminas. No obstante, cuando se aplica energ´ıa por microondas despu´es del inicio del amarilleamiento y con anterioridad a la p´erdida de la integridad celular o de la sustancial acumulaci´ on de TSNAs en la hoja, la reducci´ on observada en la cantidad de o la prevenci´ on de la formaci´ on de nitrosaminas resulta muy acusada e inesperada, tal como se observa a trav´es de los datos mostrados m´as adelante.
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El momento m´ as adecuado en el cual someter el tabaco recolectado a la radiaci´ on de microondas durante la fase amarilla depende de un n´ umero de factores, que incluyen diferencias de variedades, variaciones medioambientales, etc. Por consiguiente, dentro del marco temporal que se inicia con el amarilleamiento (definido, por ejemplo, por la p´erdida de la mayor parte del color verde en la hoja) hasta el momento en el cual la hoja pierde sustancialmente la integridad celular (volvi´endose de color marr´ on) una persona con una pr´ actica ordinaria en la materia podr´ıa determinar el momento ´optimo para llevar a cabo el tratamiento con microondas para cualquier variedad de tabaco en particular. Por ejemplo, para un determinado genotipo, podr´ıan someterse a valoraci´on muestras de hojas a trav´es de los procedimientos descritos en la presente, para determinar para determinar ya sea el contenido de nitrito o de TSNA, para identificar el tiempo relativo en un ciclo curativo determinado en el cual se inicia la acumulaci´on significativa de TSNA, o para identificar la fase de transici´ on en la cual se produce la p´erdida de la identidad celular. Si bien el sometimiento de las hojas a la radiaci´ on de microondas con anterioridad a la acumulaci´ on significativa de TSNA constituye la forma m´ as preferida del procedimiento de la presente invenci´on, los principios de la misma pueden ser tambi´en aplicados a hojas de tabaco las cuales se encuentran en el proceso de formaci´on y que han acumulado ya cantidades significativas de TNSAs. Cuando el sometimiento a la radiaci´on por microondas se lleva a cabo en este estadio m´ as avanzado, puede detenerse de manera efectiva la formaci´ on adicional de TSNAs. No obstante, una vez las hojas han sido completamente curadas, los niveles de TSNA se estabilizan y la aplicaci´on de radiaci´ on por microondas resulta ineficaz a la hora de reducir el contenido en TSNAs, excepto bajos las condiciones de rehidrataci´on descritas m´as adelante. Una vez ha sido sometida a la radiaci´ on por microondas seg´ un la presente invenci´ on, la hoja de tabaco 9
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presenta, por lo general, un contenido reducido de humedad, a saber, situado por debajo de aproximadamente el 10 % en peso, y a menudo aproximadamente del 5 %. Si se desea, la hoja puede ser rehidratada de nuevo hasta alcanzar la banda de humedad habitual para el tabaco curado marr´ on (por ejemplo, aproximadamente entre el 11 y el 15 % para el Virginia de secado en estufa) antes de ser transformados en productos de tabaco, tales como cigarrillos. La presente invenci´on resulta aplicable a cualquier tipo de variedad de tabaco, incluyendo las variedades de secados en estufa o las variedades claras, las variedades Burley, las variedades oscuras, las variedades oriental/turca, etc. Dentro de las gu´ıas establecidas en el presente documento, una persona con un nivel de conocimientos normal en la t´ecnica ser´ıa capaz de determinar el momento m´as adecuado en el ciclo de curaci´on para llevar a cabo el paso de sometimiento a la acci´on de microondas, con vistas a lograr los objetivos y las ventajas de la presente invenci´on. Entre los aspectos preferidos del procedimiento se incluye un paso, anterior al sometimiento a la radiaci´on oye microondas de una hoja de tabaco que incluye preferiblemente el tallo, de compresi´ on f´ısica de la hoja para exprimir la humedad que contiene la misma, con vistas a asegurar un secado m´ as uniforme a trav´es de la unidad de microondas. Este paso puede ser llevado a cabo de una manera conveniente haciendo pasar la hoja a trav´es de un par de rodillos cil´ındricos rotatorios, espaciados de una manera adecuada, con anterioridad a la entrada en la cavidad de aplicaci´ on de microondas. La citada etapa de compresi´on contribuir´ a a arrancar y reducir la humedad del tallo y, en menor medida, la del nervio central y la de las venas m´as grandes y conducir´ a a lograr un producto secado de manera m´ as uniforme. Los rodillos pueden ser fabricados de caucho endurecido, de pl´ astico o de acero y ser de cualquier longitud deseada, disponi´endose preferiblemente con un espaciamiento de entre aproximadamente un octavo a aproximadamente un cuarto de pulgada, si bien la distancia es seleccionada preferiblemente con vistas a acomodar el grosor de una hoja sencilla, el cual puede resultar variable. Los rodillos pueden ser impulsados por medio de una cinta o de una cadena, a trav´es de un motor seleccionado de manera adecuada. Si se desea, adem´as de rodillos rotatorios, se pueden utilizar otros tipos de medios para exprimir o comprimir, tal como considerar´ıa evidente una persona con conocimientos normales en la materia. La realizaci´on preferida descrita anteriormente, consistente en presionar las hojas permite llevar a cabo una producci´ on a mayor velocidad, dado que los tallos ya no tienen que se cortados y apartados y puede reducirse el per´ıodo de tiempo de sometimiento a la acci´on de las microondas. Esta realizaci´ on resulta particularmente ventajosa para las hojas de tabaco que est´ an destinadas< a ser utilizadas para cigarrillos, las cuales contienen habitualmente algunos tallos de tabaco como parte de una mezcla. De manera alternativa, el paso de compresi´ on puede ser omitido si as´ı se desea, en aquellas aplicaciones en las cuales el tallo es recortado de las hojas y descartado. El t´ermino “radiaci´on de microondas”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a energ´ıa electromagn´etica en forma de microondas que tiene una frecuencia de longitud de onda caracterizada habitualmente por caer dentro del dominio de las microondas. El t´ermino “microonda” se refiere generalmente a aquella parte del espectro electromagn´etico ubicado entre la regi´on del infrarrojo lejano y el espectro de radiofrecuencia convencional. La banda de microondas se extiende desde una longitud de ondas de aproximadamente 1 mil´ımetro y una frecuencia de aproximadamente 300.000 MHz hasta una longitud de onda de 30 cent´ımetros y una frecuencia situada ligeramente por debajo de aproximadamente 1000 MHz. La presente invenci´on utiliza preferiblemente aplicaciones de microondas de elevada potencia, habitualmente en la zona m´ as baja de esta banda de frecuencia. Dentro de esta banda de frecuencias preferidas, existe una diferencia fundamental entre un procedimiento de calentamiento por medio de microondas y a trav´es de un m´etodo cl´asico, tal como a trav´es de infrarrojos (por ejemplo, al cocinar), debido a la superior capacidad de penetraci´ on, las microondas calientan, por regla general, de una manera r´ apida hasta una profundidad de varios cent´ımetros, mientras que el calentamiento a trav´es de infrarrojos es mucho m´as superficial. En Estados Unidos se encuentran disponibles aparatos de microondas comerciales, tales como hornos de microondas para cocinas, a frecuencias est´andar de aproximadamente 915 MHz y 2450 MHz, respectivamente. Estas frecuencias constituyen bandas industriales estandarizadas. En Europa, se utilizan habitualmente frecuencias de microondas de 2450 y 896 MHz. No obstante, bajo condiciones adecuadamente equilibradas, para alcanzar los objetivos y ventajas de la presente invenci´on, resultar´ıan adecuadas microondas de otras frecuencias y longitudes de onda. La energ´ıa de microondas puede ser generada a una diversidad de niveles de potencia, en funci´ on de la aplicaci´on que pretenda d´ arsele. Las microondas son habitualmente generadas por magnetrones, a niveles de potencia de entre 600 y 1000 vatios para aparatos de microondas a nivel de cocina convencional (habitualmente en torno a 800 MHz), pero las unidades comerciales son capaces de generar potencias de hasta varios centenares de kilovatios, habitualmente mediante la adici´ on de fuentes modulares de apro10
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El aplicador (u horno) constituye un enlace necesario entre el generador de potencia de microondas y el material que tiene que ser calentado. A los efectos de la presente invenci´on puede utilizarse cualquier tipo de aplicador, en la medida en la que el mismo se encuentre adaptado a los efectos de permitir que cualquier parte de la planta de tabaco quede sometida, de una manera efectiva, a la radiaci´on. Para optimizar la transmisi´ on de potencia, el aplicador debe ser adaptado al generador de microondas, debi´endose evitar las fugas de energ´ıa hacia el exterior. En caso necesario, resultan u ´tiles, para muestras grandes, las cavidades multimodo (hornos de microondas), las dimensiones de las cuales pueden ser m´ as grandes que varias longitudes de onda. Para asegurar un calentamiento uniforme en las hojas, el aplicador puede estar equipado con un agitador modal (un dispositivo met´ alico m´ ovil que modifica de manera continua la distribuci´ on del campo) y con una superficie m´ ovil en forma de tabla, tal como una cinta transportadora. Los mejores resultados se alcanzan a trav´es de exposici´on a la radiaci´on de microondas del grosor de una simple hoja, como contraposici´on a pilas o montones de hojas. En realizaciones preferidas de la invenci´on, las condiciones de aplicaci´ on de microondas comprenden frecuencias de entre aproximadamente 900 MHz a aproximadamente 2500 MHz, m´as preferiblemente de aproximadamente 915 MHz y aproximadamente 2450 MHz, niveles de potencia de entre aproximadamente 600 vatios hasta un m´ aximo de 300 kilovatios, m´as preferiblemente de entre aproximadamente 600 hasta aproximadamente 1000 vatios para aplicadores de tipo cocina y de entre aproximadamente 2 y hasta aproximadamente 75 kilovatios, m´as preferiblemente de entre aproximadamente 5 y aproximadamente 50 kilovatios, para aplicadores comerciales multimodo. El tiempo de calentamiento oscila generalmente entre al menos aproximadamente 1 segundo y m´ as generalmente entre aproximadamente 10 segundos y hasta aproximadamente 5 minutos. A niveles de potencia de entre aproximadamente 800-1000 vatios, el tiempo de calentamiento est´a comprendido entre aproximadamente 1 minuto y aproximadamente 2 minutos y medio, cuando se traten hojas sencillas, en contraposici´ on a montones o pilas. Para aplicadores a escala comercial que utilizan niveles elevados de potencia en la banda de entre, por ejemplo, 2 y 75 kilovatios, los tiempos de calentamiento ser´ıan inferiores, oscilando entre aproximadamente 5 segundos y hasta aproximadamente 60 segundos y, por regla general, en la banda de entre 10 y 30 segundos a, digamos, 50 kilovatios, de nuevo para hojas individuales en contraposici´ on a pilas o montones de hojas. Naturalmente, un experto en la materia entender´ıa que para un determinado aplacador, podr´ıa determinarse una densidad o´ptima en el campo de microondas en base al volumen de la cavidad, el nivel de potencia utilizado y la cantidad de humedad en las hojas. Hablando en general, la utilizaci´ on de niveles de potencia m´ as elevados requerir´a menos tiempo de sometimiento de la hoja a la radiaci´on de microondas. No obstante, las condiciones descritas anteriormente no son absolutas y, teniendo en cuenta las descripciones de la presente invenci´on, una persona con una experiencia normal en la materia ser´ıa capaz de determinar los par´ ametros de microondas adecuados. La radiaci´on de microondas es preferiblemente aplicada a la hoja o a una parte de la misma durante un per´ıodo de tiempo suficiente para secar la misma de una manera efectiva, sin carbonizar, a los efectos de que resulte adecuada para el consumo humano. Resulta tambi´en preferido aplicar la radiaci´on de microondas a la hoja o a una parte de la misma durante un periodo de tiempo y a un nivel de potencia suficientes como para reducir el contenido en humedad hasta por debajo de aproximadamente el 10 % en peso.
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Tal como se describe en la Fig 2, el tratamiento por microondas del tabaco amarillo seg´ un la presente invenci´on da como resultado, preferiblemente, un producto de tabaco seco, de color dorado. Los datos presentados en la presente establecen que el citado tabaco secado, en su forma no ahumada, ha reducido su contenido en nitrosaminas de una manera dr´ astica, particularmente en lo que hace referencia a la NNN y a la NNK, lo contrario de lo que ocurre con el tabaco curado normalmente. En el presente documento se demuestra que el sometimiento del tabaco no curado a radiaci´ on de microondas resulta efectivo para obtener un tabaco que presenta un contenido en nitrosamina sorprendentemente bajo. La t´ecnica de aplicaci´on de microondas puede verse facilitada pelando y desechando el tallo hasta entre una tercera parte y la mitad de la longitud de la hoja, especialmente en aquellos casos en los cuales el tallo tiene que ser descartado en la etapa de extracci´on de humedad descrita anteriormente. Cuando el tallo se elimina de esta manera, la hoja de tabaco sometida a microondas resultante no requiere la utilizaci´on de una m´ aquina trilladora, dado que la parte no deseable del tallo ya ha sido eliminada. Como resultado, se elimina la habitual p´erdida de producto de tabaco asociada con el trillado, reduciendo las p´erdidas de tabaco entre aproximadamente un 10 y un 30 %. El tabaco mejorado de la presente invenci´ on puede ser sustituido en todo o en parte por tabaco curado 11
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mediante el sistema tradicional en cualquier producto de tabaco, incluyendo cigarrillos, cigarros, tabaco para mascar, chicles de tabaco, pastillas de tabaco, bolsas de tabaco, rap´e o aromatizantes para tabaco y aditivos alimenticios. A los efectos de fumar, la presente invenci´ on proporciona un olor menos nocivo al tiempo que mantiene buenas caracter´ısticas para fumar y un aroma completo con un contenido normal en nicotina. A los efectos de aditivos para mascar, rap´e, bolsas y aditivos alimenticios, el tabaco de la presente invenci´on proporciona un aroma rico y placentero. La presente invenci´on se ilustra ahora en relaci´on con los siguientes ejemplos, los cuales no pretenden limitar el campo de protecci´ on de la invenci´ on en modo alguno.
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Ejemplo 1
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa y se colocaron las hojas en un troje para curaci´on a on de secado una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦ F para dar inicio al proceso de curaci´ en estufa. Las muestras 1 a 3 fueron obtenidas del troje una vez las hojas se hab´ıan vuelto amarillas, aproximadamente al cabo de transcurridas 24-36 horas desde el momento de haber sido recolectadas. La muestra 1 ten´ıa forma de l´ amina, desprovista del nervio central y cocida en un horno de convecci´on de aire a una temperatura de aproximadamente entre 400 y 500◦ C, durante un per´ıodo de tiempo aproximado de una hora, lo cual hizo que la l´ amina adquiriese un color de tonalidad marr´ on. La muestra 2 era una hoja de color amarillo colocada en un horno de microondas Goldstar Modelo MA-1572M (2450 MHz) y se calent´o de acuerdo con el programa de alta potencia (1.000 vatios), mientras daba vueltas en sentido rotatorio por espacio de 2 minutos y medio. La muestra 3 era una hoja de color amarillo, no tratada, utilizada como control. Las muestras 4 y 5 permanecieron en el troje de curaci´on a una temperatura elevada de aproximadamente 180◦F. La muestra 4 comenz´o a secarse fuera de los bastidores y la muestra 5 dentro de los bastidores. La muestra 6 era una hoja de tabaco de color marr´ on, curada, que hab´ıa sido sometida al procedimiento normal de curaci´ on. Se llevaron a cabo an´ alisis sobre cada una de las muestras para determinar los contenidos en NNN, NAT, NAB y NNK. En este y en los siguientes ejemplos, “TSNA” representa la suma de estas cuatro nitrosaminas espec´ıficas del tabaco (ver, por ejemplo, Burton et al, “Distribution of Tobacco Constituents in Tobacco Leaf Tissue. 1. Tobacco-Specific Nitrosamines, Nitrate, Nitrite and Alkaloids”, J. Agric. Food Chem.. Volume 40, N◦ . 6, 1992) y se cuantificaron las TSNAs individuales en un analizador de energ´ıa t´ermica TEA Model 543, Thermedics Inc, acoplado a un cromat´ografo de gases Hewlett-Packard Model 5890A. Los resultados se muestran en la Tabla 1 que se muestra m´as adelante. La totalidad de los datos en la tabla en cuesti´on se presentan en microgramos de nitrosamina por gramo de muestra (a saber, partes por mill´ on o µg/g). TABLA 1
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa. La muestra 7 era una hoja verde, reci´en cortada, utilizada como control, mientras que la muestra 8 era una hoja de color verde, reci´en cortada, que fue sometida a radiaci´ on de microondas en un aplicador de microondas multimodo, fabricado por MicroDry de Louisville, Kentucky, operando a 2450 MHz, a 2,5 kilovatios, por espacio de aproximadamente 20 segundos. Las muestras 9-12 fueron obtenidas a partir de tabaco de color marr´ on, curado en estufa por el procedimiento normal. La muestra 9 era tabaco obtenido a partir de un cigarrillo formado; la muestra 10 era tabaco suelto, desmenuzado, destinado a la fabricaci´ on de cigarrillos; las muestras 11 y 12 eran iguales a la muestra 9 (cigarrillo) y 10 (suelto), respectivamente, con la excepci´ on de que cada una de ellas fue sometida a las mismas condiciones de microondas que la muestra 8. Se analizaron los contenidos en TSNA de la misma manera que en el Ejemplo 1. Los resultados se muestran en la siguiente Tabla 2: TABLA 2
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Ejemplo 3 Las siguientes marcas de cigarrillos fueron adquiridas de manera aleatoria en diversos minoristas de Lexington, Kentucky y fueron sometidas a an´ alisis a los efectos de determinar el contenido en TSNA, utilizando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1.
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa y se colocaron las hojas en un troje de curaci´ on a on una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦F, para dar inicio al procedimiento de curaci´ mediante estufa. Una vez las hojas adquirieron el color amarillo, aproximadamente entre 24 y 36 horas subsiguientes a la recolecci´on, las mismas fueron retiradas del troje y sometidas a microondas en un horno de microondas Goldstar Modelo MA-1572M (2450 MHz), programa de alta potencia (1000 vatios), por espacio de 2 minutos y medio, mientras permanec´ıan en rotaci´ on. Las hojas fueron secadas de manera efectiva a trav´es de este procedimiento, si bien las mismas no se volvieron de color marr´on, sino que conservaron su color amarillo-dorado. Las hojas fueron desmenuzadas y convertidas en cigarrillos. Las muestras 29-33 fueron obtenidas a partir de un lote etiquetado como Red Full Flavor, mientras que las muestras 34-38 fueron obtenidas a partir de un lote etiquetado como Blue Light. Las muestras 39-42 eran cigarrillos adquiridos en una tienda de alimentos naturales, bajo la marca Natural American Spirit. Las muestras 29-42 fueron analizadas para averiguar el contenido en TSNA utilizando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, y los resultados se muestran en la Tabla 4 que sigue a continuaci´on: 14
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STD en el presente documento representa la desviaci´on t´ıpica para el promedio de las muestras mostradas. Ejemplo 5
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa y se colocaron las hojas en un troje de curaci´ on on en a una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦ F para iniciar el procedimiento de curaci´ estufa. Las muestras 43 y 44 fueron tomadas del troje una vez las hojas se hab´ıan vuelto amarillas, transcurridas aproximadamente 24-36 horas desde la recolecci´ on y se sometieron a radiaci´on por microondas en el aplicador multimodo MicroDry descrito anteriormente, durante un per´ıodo de tiempo de entre 20 y 30 segundos, respectivamente, a un nivel de potencia de aproximadamente 6 kilovatios. Las muestras 43 y 44 se convirtieron en hojas secadas, de un color amarillo dorado, una vez finalizada la etapa de sometimiento a la radiaci´on de microondas. Las muestras 45-51 fueron obtenidas a partir de hojas curadas de color marr´ on que hab´ıan sido sometidas al procedimiento de secado en estufa convencional. La muestra 45 era un control. Las muestras 46 y 47 fueron cocidas en un horno de convecci´ on, precalentado hasta 15
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aproximadamente 400-500◦F durante un per´ıodo de tiempo de entre 1 y aproximadamente 3 minutos, respectivamente, y las muestras 48 y 49 fueron sometidas a radiaci´on de microondas (915 MHz) en un aplicador Waveguide Modelo WR-975, un gran horno multimodo fabricado por MicroDry (programa de potencias entre 0 y 75 Kw) a 50 kilovatios, por espacio de 10 y 40 segundos, respectivamente. Las muestras 50 y 51 eran de tabaco cortado (hoja reconstituida) obtenido a partir de hojas curadas en estufa. La muestra 50 fue sometida a radiaci´ on de microondas en un horno de microondas Waveguide durante un per´ıodo de tiempo de aproximadamente 1,5 minutos, mientras que la muestra 51 fue cocida en un horno de convecci´on precalentado a entre aproximadamente 400 y 500◦F, por espacio de aproximadamente 3 minutos. Estas muestras fueron analizadas a los efectos de determinar el contenido de TSNA en las mismas, utilizando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 y los resultados se muestran en la Tabla 5 que sigue a continuaci´on TABLA 5
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Ejemplo 6 50
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa y se colocaron las hojas en un troje para curaci´on a una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦ C, para dar inicio al procedimiento de curaci´on mediante estufa. Las muestras 52-55 eran de cigarrillos elaborados a partir de tabaco de color amarillo, el cual hab´ıa sido retirado del troje despu´es de transcurridas aproximadamente 24-36 horas y sometido a radiaci´on de microondas en un horno de microondas Goldstar, modelo MA-1572M (2450 MHz), por espacio de aproximadamente 2 minutos, en el programa de alta potencia (1000 vatios). A efectos comparativos, las muestras 61 y 62 eran cigarrillos elaborados a partir de hojas que hab´ıan sufrido el procedimiento de curaci´ on con estufa convencional, sin tratamiento con microondas. La muestra 56 era una hoja curada, la muestra 57 era de color amarillo, no curada del todo, la muestra 58 era una l´ amina curada, mientras que las muestras 59 y 60 eran nervios centrales curados. Los contenidos en TSNA se determinaron tal como en el Ejemplo 1, y los resultados se muestran en la Tabla 6 que sigue a continuaci´on:
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ES 2 196 359 T3 TABLA 6
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Ejemplo 7 30
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa. Las muestras 63 y 66 eran de tabaco verde reci´en cortado no curado, si bien transcurri´ o mas de una semana antes de que se efectuaran las mediciones para determinar el contenido en TSNA, no se hab´ıa producido curaci´ on mediante aire. Las restantes hojas fueron colocadas en un troje de curaci´ on a una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦F, para dar inicio al procedimiento de curaci´ on mediante estufa. La muestra 68 era una hoja tomada del troje una vez la misma hab´ıa adquirido el color amarillo, transcurridas aproximadamente 24-36 horas desde la recolecci´on y fue sometida a radiaci´ on de microondas en el aplacador multimodo Waveguide descrito anteriormente, por espacio de 40 segundos a 25 kilovatios. Las muestras 64/65 (hojas) y 67/70 (tabaco en hoja reconstituido o tabaco “cortado”) demuestran los efectos de la presente invenci´on cuando el tabaco curado es rehidratado y sometido despu´es a radiaci´on de microondas. Las muestras 64 y 65 eran muestras de hojas que hab´ıan sido sometidas al procedimiento de curado en estufa convencional; no obstante, la muestra 64 fue rehidratada mediante su colocaci´ on debajo de una espita durante un per´ıodo de tiempo de entre aproximadamente 5 y 10 segundos. La hoja absorbi´ o una humedad significativa. Cada una de las muestras 64 y 65 fue sometida posteriormente a radiaci´ on de microondas en el aplacador multimodo Waveguide, durante un per´ıodo de tiempo aproximado de 40 segundos, a 25 Kilovatios. Las muestras 67 y 70 eran muestras de tabaco en hoja reconstituido, preparado a partir de hojas curadas. La muestra 67 fue hidratada mediante la adici´ on de agua a los efectos de que se absorbiera una cantidad significativa y sometida despu´es a radiaci´on de microondas, de acuerdo con las condiciones descritas para la muestra 64. La muestra 70 no recibi´ o radiaci´ on de microondas. Las muestras 69,71 y 72 son muestras de hojas curadas adicionalmente, utilizadas como control. Los contenidos en TSNA fueron determinados seg´ un el Ejemplo 1, y los resultados se muestran en la Tabla 7 que sigue a continuaci´on:
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ES 2 196 359 T3 TABLA 7
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Ejemplo 8
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Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa y las hojas fueron colocadas en un troje de curaci´ on on mediante a una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦ F, para dar inicio al proceso de curaci´ estufa. La muestra 73 era una hoja tomada del troje una vez hubo adquirido el color amarillo, transcurridas aproximadamente 24-36 horas desde la recolecci´ on y sometida a radiaci´on de microondas en un aparato Goldstar Modelo MA-1572M, por espacio de aproximadamente 2 minutos en el programa alto. Las muestras 74-76 fueron curadas en estufa mediante el procedimiento normal. La muestra 74 era un control curado. Las muestras 75 y 76 fueron rehidratadas tal como se indica en el Ejemplo 7 (muestra 64), seguidamente cada una de las muestras fue sometida a radiaci´ on de microondas en el aplacador MicroDry (2450 MHz) por espacio de aproximadamente 20 segundos (muestra 75) y aproximadamente 40 segundos (muestra 76), respectivamente, a niveles de potencia de aproximadamente 6 kilovatios. Las muestras 77-79 eran de tabaco en hoja reconstituido, elaborado a partir de hojas curadas en estufa. La muestra 77 era un control, mientras que las muestras 78 y 79 fueron rehidratadas, tal como se indica en el Ejemplo 7 (muestra 67). Las muestras 78 y 79 recibieron radiaci´ on de microondas en el aplicador MicroDry por espacio de aproximadamente 30 segundos cada una de ellas. La muestra 78 permaneci´o en la parte el fondo del horno, mientras que la muestra 79 fue levantada diversas pulgadas mediante el apoyo de la muestra de hoja sobre una taza de espuma de estireno, la cual permit´ıa un calentamiento m´as uniforme. Los contenidos en TSNA fueron medidos tal como en el Ejemplo 1 y los resultados se muestran en la tabla 8 que sigue a continuaci´ on:
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ES 2 196 359 T3 TABLA 8
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Ejemplo 9
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Las muestras 80-81 eran de tabaco de mascar adquirido al por menor. La muestra 80 era un control mientras que la muestra 81 fue sometida a radiaci´on de microondas en un aparato Goldstar Modelo MA1572M, por espacio de entre 1 y 2 minutos, bajo un programa de potencia elevada. Las muestras 82-83 eran de rap´e SOCAL, adquirido al por menor. La muestra 82 era un control, mientras que la muestra 83 fue sometida a radiaci´on de microondas de la misma manera que para el caso de la muestra 81. Se determinaron los contenidos en TSNA y los resultados se muestran en la Tabla 9 que sigue a continuaci´ on: TABLA 9
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Ejemplo 10 Para comprobar si las TSNAs se acumulan a lo largo del tiempo, incluso despu´es de que el tabaco de color amarillo es sometido a la acci´on de microondas seg´ un la presente invenci´ on, se volvieron a someter a comprobaci´ on muestras adicionales (designadas -A-) de los cigarrillos objeto de comprobaci´ on en el Ejemplo 4; las muestras 29,35 y 39 (control), con vistas a determinar el contenido en TSNA, transcurridos m´as de siete meses desde que fueron objeto de primera comprobaci´ on los contenidos en TSNA, tal como se informa en el Ejemplo 4. Los resultados se muestran en la Tabla 10, que sigue a continuaci´on: TABLA 10
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Ejemplo 11 Se recolect´o tabaco Virginia para secado en estufa y se colocaron las hojas en un troje de curaci´ on a on mediante una temperatura de entre aproximadamente 100 y 110◦F, para dar inicio al proceso de curaci´ estufa. Una vez las hojas adquirieron el color amarillo, transcurridas entre aproximadamente 24 y 36 horas desde la recolecci´on, las mismas fueron tomadas del troje y sometidas a radiaci´ on de microondas en un horno de microondas Goldstar Modelo MA-1572M, durante un periodo de tiempo aproximado de entre 2 y 2 minutos y medio, en un programa de elevada potencia. Cada una de las hojas ten´ıa un color amarillo dorado y fueron secadas de una manera efectiva. Determinadas muestras, identificadas como “molidas” fueron molidas posteriormente en forma de una sustancia parecida a la harina, la cual resultar´ıa de utilidad como, por ejemplo, goma, pastilla y aditivo para alimentaci´on. Una vez transcurridos mas de seis meses desde que las hojas fueron sometidas a la acci´on de microondas se determin´ o el contenido en TSNA de las siguientes muestras, utilizando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1. Los resultados se muestran en la Tabla 11 que sigue a continuaci´on: TABLA 11
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ES 2 196 359 T3
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ES 2 196 359 T3 REIVINDICACIONES 1. Procedimiento para reducir la cantidad de o para prevenir la formaci´on de nitrosaminas en plantas de tabaco recolectadas, que comprende 5
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someter al menos una parte de la planta a radiaci´ on de microondas, mientras dicha parte est´a no curada y en un estado susceptible de tener reducida la cantidad de nitrosaminas o detenida la formaci´ on de nitrosaminas, durante un tiempo suficiente para reducir la cantidad de, o prevenir sustancialmente la formaci´ on de al menos una nitrosamina. 2. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 1, en donde dicho sometimiento a la radiaci´ on de microondas se lleva a cabo sobre una hoja de tabaco o una parte de la misma, despu´es de la aparici´on de amarilleamiento en la hoja y con anterioridad a la acumulaci´on sustancial de nitrosaminas espec´ıficas del tabaco en la hoja. 3. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on l, en donde dicho sometimiento a la radiaci´on de microondas se lleva a cabo con anterioridad a la p´erdida sustancial de la integridad celular de la planta. 4. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 2, en donde el tabaco es tabaco secado en estufa y dicho sometimiento a la radiaci´on de microondas se lleva a cabo dentro de aproximadamente las 24 a aproximadamente 72 horas posteriores a la recolecci´on. 5. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 4, en donde el tabaco recolectado se mantiene en condiciones de temperatura superiores a las ambientales, en un entorno controlado, con anterioridad a dicho sometimiento a la radiaci´on de microondas. 6. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 1, en donde dicha radiaci´ on de microondas tiene una frecuencia de aproximadamente 900 a aproximadamente 2500 MHz.
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7. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 1, en donde dicha radiaci´ on de microondas se aplica a la planta durante un per´ıodo de tiempo de al menos aproximadamente un segundo, a un nivel de potencia predeterminado. 8. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 7, en donde dicha radiaci´ on de microondas se aplica a la hoja o a una parte de la misma durante un per´ıodo de tiempo de aproximadamente 10 segundos a aproximadamente 5 minutos, a un nivel de potencia predeterminado. 9. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 7, en donde dicho nivel de potencia est´ a comprendido entre aproximadamente 600 vatios y aproximadamente 300 kilovatios.
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10. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 9, en donde dicho nivel de potencia est´a comprendido entre aproximadamente 2 y aproximadamente 75 kilovatios. 11. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 9, en donde dicha radiaci´ on de microondas tiene una frecuencia de entre aproximadamente 900 y aproximadamente 2500 MHz. 12. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 2, en donde dicha radiaci´ on de microondas se aplica a la hoja o a una parte de la misma durante un tiempo suficiente para secar la hoja de una manera efectiva, sin carbonizaci´ on, de tal manera que resulte adecuada para el consumo humano.
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13. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 12, en donde dicho sometimiento a la radiaci´ on de microondas evita la acumulaci´on normal en la hoja de al menos una nitrosamina espec´ıfica del tabaco. 14. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 13, en donde dicha por lo menos nitrosamina espec´ıfica del tabaco se selecciona de entre el grupo que consiste en N’-nitrosonornicotina, 4-(N-nitrosometilamino)-1(3-piridil)-1-butanona, N’-nitrosoanatabina y N’-nitrosoanabasina. 15. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 2, en donde dicho sometimiento a la radiaci´on de microondas se lleva a cabo sobre hojas de tabaco dispuestas con un grosor de una hoja u ´nica, sin amontonar ni apilar las hojas.
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ES 2 196 359 T3 16. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 15, que comprende, adem´as, con anterioridad a dicho sometimiento a la radiaci´on de microondas, una etapa de prensado de las hojas de tabaco para eliminar el exceso de humedad. 5
17. Procedimiento seg´ un la reivindicaci´ on 16, en donde dichas hojas de tabaco contienen tallos.
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NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposici´ on Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicaci´ on del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a Espa˜ na y solicitadas antes del 7-10-1992, no producir´ an ning´ un efecto en Espa˜ na en la medida en que confieran protecci´ on a productos qu´ımicos y farmac´euticos como tales. Esta informaci´ on no prejuzga que la patente est´e o no inclu´ıda en la mencionada reserva.
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