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˜ OFICINA ESPANOLA DE PATENTES Y MARCAS

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k kInt. Cl. : A61K 7/48

11 N´ umero de publicaci´on:

2 190 082

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˜ ESPANA

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TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA

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kN´umero de solicitud europea: 98925587.2 kFecha de presentaci´on: 04.05.1998 kN´umero de publicaci´on de la solicitud: 0 915 695 kFecha de publicaci´on de la solicitud: 19.05.1999

T3

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54 T´ıtulo: Concentrados estables de vitamina C.

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73 Titular/es: Cosmoferm B.V.

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72 Inventor/es: Noordam, Bertus y

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74 Agente: Lehmann Novo, Mar´ıa Isabel

30 Prioridad: 02.05.1997 EP 97201305

Wateringseweg 1 2611 XT Delft, NL

45 Fecha de la publicaci´ on de la menci´on BOPI:

16.07.2003

45 Fecha de la publicaci´ on del folleto de patente:

ES 2 190 082 T3

16.07.2003

Aviso:

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Edens, Luppo

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En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicaci´on en el Bolet´ın europeo de patentes, de la menci´on de concesi´on de la patente europea, cualquier persona podr´a oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposici´on deber´a formularse por escrito y estar motivada; s´olo se considerar´a como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposici´ on (art. 99.1 del Convenio sobre concesi´on de Patentes Europeas). Venta de fasc´ ıculos: Oficina Espa˜ nola de Patentes y Marcas. C/Panam´ a, 1 – 28036 Madrid

ES 2 190 082 T3 DESCRIPCION Concentrados estables de vitamina C. 5

Campo de la invenci´ on La presente invenci´on se refiere al campo de la aplicaci´ on t´ opica de vitamina C, en particular por el uso de un sistema de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples.

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Antecedentes de la invenci´ on La vitamina C (´ acido asc´orbico) ha demostrado poseer propiedades beneficiosas cuando se aplica en productos cosm´eticos para cuidado de la piel. Por ejemplo, la vitamina C estimula la s´ıntesis de col´ageno en la piel, produciendo con ello una reducci´ on de las arrugas; tiene un efecto blanqueador de la piel por interferir en la formaci´ on de melanina, y puede retardar el deterioro de la piel causado por exposici´ on a la luz UV. Dado que la mayor´ıa de los productos cosm´eticos son de base acuosa, el foco principal se ha localizado en el desarrollo de formulaciones acuosas de esta vitamina. Sin embargo, la deficiente estabilidad de la vitamina C en formulaciones acuosas se ha identificado como un problema importante a este respecto. Los intentos para estabilizar la vitamina C est´an bien documentados. La mayor´ıa de los esfuerzos para estabilizar composiciones de vitamina C se han dirigido a minimizar o prevenir la degradaci´on aerobia. Esto se puede hacer por adici´ on de agentes estabilizadores adecuados, tales como anti-oxidantes (para prevenir la oxidaci´ on) y/o formadores de quelatos (para complejar los iones met´alicos que catalizan la oxidaci´on) (Hajratwala (1985), Rev. Sc. Pharm. de 15 de marzo). Adem´ as, se ha encontrado que el pH de una composici´on de vitamina C juega cierto papel: se ha demostrado que un pH inferior a aproximadamente 3,5 mejora la estabilidad de la vitamina C (WO 90/12572). Adicionalmente, se ha encontrado que actividades de agua inferiores a 0,85 estabilizan la vitamina C (EP 755 674). La influencia perjudicial del ox´ıgeno puede contrarrestarse por aplicaci´ on de condiciones sustancialmente exentas de ox´ıgeno para la preparaci´ on y el almacenamiento de las composiciones de vitamina C. Aunque la degradaci´ on de la vitamina C en condiciones anaerobias est´a mucho menos investigada, se ha descrito que este tipo de degradaci´ on puede dar como resultado la formaci´ on de furfural y di´ oxido de carbono (Counsel y Hornig (1981), en: Vitamin C, pp 123-137, Applied Science Publishers). La fructosa y los derivados de fructosa parec´ıan estimular esta producci´ on de furfural/di´ oxido de carbono en dichas condiciones (ibid.). Durante el desarrollo por la Solicitante de composiciones concentradas de vitamina C adecuadas para uso en un sistema de distribuci´ on con c´amaras m´ ultiples y para empaquetado en condiciones sustancialmente exentas de ox´ıgeno, se encontr´o que se produc´ıa una formaci´ on extensa de gas durante la preparaci´ on y el almacenamiento de las composiciones de vitamina C. Por supuesto, la producci´ on de gas en un recipiente cerrado es una situaci´on indeseable. La formaci´ on de gas es especialmente indeseada en aquellos casos en que las composiciones de vitamina C se envasan en recipientes herm´eticos para minimizar el deterioro por oxidaci´ on. Por ejemplo, la formaci´ on de gas dar´ a como resultado en tales casos presi´on en el compartimiento que contiene el concentrado de vitamina C. En el caso en que se envasa un concentrado de vitamina C en un cartucho conectado con un sistema de distribuci´ on por bomba sin aire, la formaci´ on de gas puede dar como resultado una dosificaci´ on inexacta del concentrado de vitamina C. Y lo que es m´ as importante, si se forman cantidades de gas relativamente grandes, el pist´ on ser´a expulsado del cartucho y el concentrado de vitamina C se liberar´ a al compartimiento exterior del distribuidor o al ambiente. En formulaciones de vitamina C muy concentradas, la fase acuosa estar´a saturada con vitamina C disuelta y contendr´ a adicionalmente una porci´ on importante de cristales de vitamina C. Para garantizar una dosificaci´ on uniforme desde un distribuidor con compartimientos m´ ultiples, es esencial que estos cristales se suspendan homog´eneamente en la fase acuosa. Por esta raz´on, un concentrado estable de vitamina C no deber´ıa producir gas alguno, y al mismo tiempo cualesquiera cristales de vitamina C presentes no deber´ıan precipitar. La presente invenci´on proporciona varias soluciones para conseguir esto. Adem´as, la presente invenci´on utiliza ventajosamente la condici´on anaerobia del concentrado estable de vitamina C para proteger otros ingredientes activos propensos a la oxidaci´ on contra los efectos perjudiciales del ox´ıgeno. 2

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Sumario de la invenci´ on

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La presente invenci´on describe un concentrado acuoso de vitamina C adecuado para almacenamiento en condiciones anaerobias, que tiene un pH de al menos aproximadamente 5, preferiblemente al menos 6, y que comprende vitamina C, opcionalmente otros compuestos sensibles al ox´ıgeno, y un agente aumentador de la viscosidad. Preferiblemente, el agente aumentador de la viscosidad se selecciona del grupo de pol´ımeros acr´ılicos y metacr´ılicos (Carbomers) y xantanos. La concentraci´on de vitamina C en el concentrado de la invenci´ on puede variar desde 5 a 70 %, preferiblemente desde 10 a 60 %, y m´ as preferiblemente desde 20 a 60 %. La presente invenci´on describe adem´as un sistema de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples que comprende por separado una primera y una segunda composici´ on acuosa, siendo dicha primera composici´on una composici´ on que tiene un pH de al menos aproximadamente 5 y que comprende vitamina C y un agente aumentador de la viscosidad, generando dicha primera y dicha segunda composici´ on una composici´ on final cuando se mezclan en el momento de su distribuci´ on, y siendo dicha composici´ on final eficaz para aplicar vitamina C en una forma diluida. Descripci´ on detallada de la invenci´ on

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La presente invenci´on describe composiciones de vitamina C, en particular composiciones que contienen concentraciones altas de vitamina C, que se pueden almacenar en condiciones anaerobias durante un periodo de tiempo prolongado con una cantidad m´ınima o baja de formaci´ on de gas. 25

Por la presente invenci´on se demuestra que la formaci´ on de gas ocurre durante la preparaci´ on de un concentrado de vitamina C a una temperatura relativamente elevada, as´ı como durante su almacenamiento a la temperatura ambiente. Dicho fen´ omeno de formaci´on de gas se ha observado especialmente con composiciones que contienen una concentraci´on relativamente alta de vitamina C y un pH relativamente bajo, en combinaci´ on con ciertos agentes aumentadores de la viscosidad.

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A fin de minimizar la formaci´on de gas durante la preparaci´ on y/o el almacenamiento de un concentrado de vitamina C, la presente invenci´ on da a conocer que el pH del concentrado de vitamina C no deber´ıa ser demasiado bajo, a saber, no deber´ıa ser menor que aproximadamente 5. Preferiblemente, el pH de los concentrados de vitamina C deber´ıa estar comprendido entre 6 y 8. 35

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La presente invenci´on da a conocer adicionalmente que para minimizar la formaci´ on de gas durante la preparaci´ on del concentrado de vitamina C de la invenci´ on, dicho concentrado no deber´ıa exponerse a una temperatura elevada. Dicho de otro modo, el proceso para la preparaci´ on del concentrado de vitamina C deber´ıa llevarse a cabo a una temperatura moderada, preferiblemente una temperatura que no exceda as preferiblemente una temperatura que no exceda de 40◦ C. En particular, deber´ıan evitarse de 50◦ C, m´ temperaturas elevadas a fin de minimizar la degradaci´on u oxidaci´ on de la vitamina C o cualquiera de los otros ingredientes activos incorporados opcionalmente. La presente invenci´on da a conocer un concentrado de vitamina C que tiene una concentraci´ on de vitamina C que puede ser tan alta como aproximadamente 70 % en peso de la composici´ on total. Preferiblemente, la concentraci´on de vitamina C en el concentrado est´a comprendida entre 5 y 70 %, m´ as preferiblemente entre 10 y 60 %, y muy preferiblemente entre 20 y 60 %. Los concentrados de vitamina C de la presente invenci´on son particularmente adecuados para uso en un sistema de distribuci´ on de c´amaras m´ ultiples.

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Dependiendo de ciertas caracter´ısticas del concentrado de vitamina C, tales como el pH, el tipo de formador de quelatos y/o agente aumentador de la viscosidad utilizados, y/o la concentraci´ on de vitamina C, se pueden presentar condiciones en las cuales (parte de) la vitamina C precipita en la composici´on. Como consecuencia, el concentrado de vitamina C se encuentra en forma de una suspensi´on. El car´ acter (parcialmente) cristalino de la vitamina C representa una ventaja m´ as bien que una desventaja, dado que los cristales exhiben t´ıpicamente una estabilidad mejorada. Por esta raz´on, de acuerdo con la invenci´on el concentrado de vitamina C comprende adicionalmente un agente aumentador de la viscosidad que no s´ olo minimiza la formaci´on de gas, sea inicialmente, como durante el proceso para preparar el concentrado de vitamina C, y durante el almacenamiento del concentrado, sino que es tambi´en capaz de prevenir la sedimentaci´on de materia constituida por part´ıculas tales como cristales de vitamina C. En otros t´erminos, para estabilizar una suspensi´ on de vitamina C, 3

ES 2 190 082 T3 se utiliza ventajosamente un agente aumentador de la viscosidad que es un agente de suspensi´ on que proporciona un ret´ıculo tridimensional, especialmente en el caso de que est´en presentes cristales grandes.

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El agente aumentador de la viscosidad a utilizar en el concentrado de vitamina C de la invenci´ on se selecciona preferiblemente del grupo de xantanos y pol´ımeros de ´acido acr´ılico y metacr´ılico (Carbomers), tales como Carbopol Ultrez 10, Carbopol ETD 2020 y Carbopol ETD 2050. De modo m´ as preferible, dicho agente aumentador de la viscosidad es un xantano y muy preferiblemente un xantano tolerante de la salmuera, tal como Keltrol BT. Debido a la presencia de un agente de suspensi´on formador de ret´ıculo, los cristales de vitamina C se mantienen suspendidos de manera estable en la composici´on.

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La concentraci´on en que se aplica el agente aumentador de la viscosidad en la composici´ on de la invenci´on depender´ a del tipo de agente aumentador de la viscosidad utilizado. T´ıpicamente, la concentraci´on puede variar desde aproximadamente 0,1 a aproximadamente 5 %.

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Los aumentadores de la viscosidad de la clase de los Carbomers, que son en cierto grado sensibles a las sales, se utilizan preferiblemente en una concentraci´on relativamente alta, v.g. aproximadamente 2 a aproximadamente 5 %. El xantano tolerante de la salmuera proporciona una viscosidad adecuada a una concentraci´on de aproximadamente 0,2-0,3 %. El concentrado de vitamina C de la invenci´ on puede contener adicionalmente uno o m´ as de un agente antioxidante y/o quelante para proteger la vitamina C contra los efectos perniciosos del ox´ıgeno durante el proceso de la preparaci´ on de la composici´on.

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Despu´es de su preparaci´ on, el concentrado de vitamina C de la invenci´ on se puede conservar en un recipiente herm´etico, a fin de prevenir la aparici´ on de degradaci´ on aerobia. Se puede garantizar una condici´on anaerobia llenando el recipiente bajo una atm´ osfera protectora de gas inerte (tal como nitr´ ogeno), o por almacenamiento a vac´ıo, o bien por inmersi´ on total del recipiente que contiene la vitamina C en otro l´ıquido. En la u ´ltima situaci´ on, la penetraci´ on de ox´ıgeno a trav´es de la pared del recipiente que contiene la vitamina C es m´ınima.

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Los concentrados de vitamina C de la presente invenci´ on son particularmente adecuados para uso en un sistema de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples. Dicho sistema de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples comprende una primera composici´ on, que es un concentrado de vitamina C de acuerdo con la invenci´on, en un compartimiento, y una segunda composici´ on adecuada en un compartimiento separado. En el momento del suministro, dichas composiciones primera y segunda se mezclan, sea in situ o en el sistema de distribuci´ on. La mezcla de ambas composiciones da como resultado una composici´on final que contiene vitamina C en una forma diluida y que es adicionalmente adecuada para aplicaci´ on directa, v.g. para uso t´ opico.

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La naturaleza de la segunda composici´on depender´ a de las caracter´ısticas deseadas de la composici´on final, es decir, de la aplicaci´on que se desee. As´ı pues, la segunda composici´ on deber´ıa permitir, una vez combinada con la primera composici´ on, es decir con el concentrado de vitamina C, la producci´ on de una composici´ on final que es adecuada para aplicaci´ on directa de vitamina C.

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La presente invenci´on contempla tambi´en la presencia de un segundo ingrediente activo en el concentrado de vitamina C. 50

Dependiendo de las caracter´ısticas de dicho segundo ingrediente activo, dicho ingrediente se puede formular en el concentrado de vitamina C por disoluci´ on en la fase acuosa, por preparaci´on de una suspensi´ on de materia no disuelta en el concentrado de vitamina C o por preparaci´ on de una emulsi´ on en el caso de un compuesto hidr´ ofobo.

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Ejemplos de segundos ingredientes activos que se formulan en la primera composici´on, es decir en el concentrado de vitamina C, son ingredientes activos propensos a la oxidaci´ on. Debido a la presencia de una elevada concentraci´on de vitamina C, la primera composici´ on est´a esencialmente exenta de ox´ıgeno. Ejemplos t´ıpicos de materiales sensibles al ox´ıgeno incluyen compuestos solubles en aceite tales como αtocoferol C (vitamina E), retinol (vitamina A), ´acidos grasos poliinsaturados (´ acido linoleico, γ-linol´enico o araquid´ onico) o triglic´eridos que incorporan niveles elevados de dichos ´acidos grasos tales como el aceite de primavera de la tarde, aceite de semilla de borraja, aceite de c´ artamo, aceite de semilla de girasol o ciertos aceites producidos microbialmente.

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Para incorporar homog´eneamente estos materiales en una soluci´on altamente concentrada de vitamina C, tiene que prepararse una emulsi´ on de aceite en agua utilizando emulsionantes adecuados, en combinaci´on con un aumentador de la viscosidad de xantano o de tipo Carbomer. Emulsionantes tales como ciertos ´esteres de ´acidos grasos de poliglicerilo son extremadamente u ´ tiles para este prop´ osito. Deben tomarse precauciones a fin de preparar las emulsiones a una temperatura moderada, v.g. 25 a 50◦ C. La presencia de un agente aumentador de la viscosidad en el concentrado de vitamina C de acuerdo con la invenci´on estabiliza adem´ as ventajosamente la emulsi´on en el sentido de que previene la aparici´ on de separaci´ on de fases.

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Aparte de los compuestos solubles en aceite mencionados anteriormente, la soluci´on estable de vitamina C se puede utilizar tambi´en para proteger compuestos sensibles a la oxidaci´on solubles en agua, tales como glutati´on o tiotaurina. 15

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El sistema de distribuci´ on a utilizar para el suministro de vitamina C no es cr´ıtico. Se puede utilizar cualquier sistema que permita el confinamiento separado del concentrado de vitamina C y la segunda composici´ on. El uso de un sistema de distribuci´on con compartimientos m´ ultiples proporciona adicionalmente la opci´on de envasar el concentrado de vitamina C en un compartimiento hecho de un material no transl´ ucido con tasas de permeaci´on por el ox´ıgeno muy bajas incluso en condiciones de humedad elevada, a fin de minimizar el efecto de la luz y la entrada de ox´ıgeno. Materiales de envasado preferidos incluyen PVdC, EVOH y pol´ımeros recubiertos de al´ umina (v´ease Food Manufacture, junio 1991, pp 49-53). Sin embargo, el uso de dichos pl´ asticos de barrera para minimizar la oxidaci´ on de la vitamina C y por consiguiente de cualquier compuesto adicional sensible al ox´ıgeno no es esencial. Los concentrados de vitamina C de acuerdo con la invenci´on, una vez incorporados en un compartimiento hecho de pl´ asticos que no constituyen barrera tales como polietileno, polipropileno, poli(cloruro de vinilo), y an´ alogos, son sorprendentemente estables. La inmersi´ on total del compartimiento que contiene la vitamina C en la segunda composici´on proporciona una protecci´ on tan satisfactoria que pueden prevenirse las alteraciones del color del concentrado de vitamina C. Si se aplica en distribuidores de mayor volumen, es ventajoso el uso de una bomba de lociones sin aire para distribuir el compuesto biol´ ogicamente eficaz.

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Un sistema de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples preferido es un distribuidor que contiene dos compartimientos de tama˜ no diferente. Un distribuidor de este tipo permite la distribuci´ on de cantidades desiguales de dos composiciones diferentes. Preferiblemente, el concentrado de vitamina C de la invenci´on se pone en el compartimiento m´as peque˜ no, y una segunda composici´ on adecuada en el compartimiento mayor de dicho distribuidor. Un sistema preferido de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples de un solo uso es un envase flexible en el cual el termosellado que separa las dos c´ amaras puede romperse por aplicaci´on de presi´ on a una cualquiera de las dos c´amaras. Inmediatamente antes de su utilizaci´ on, se rompe el sello y las composiciones presentes en las dos c´amaras se mezclan. Para su aplicaci´on, el envase tiene que abrirse, v.g., por desgarro, y vaciarse por estrujamiento. Dependiendo de la aplicaci´ on deseada, la concentraci´ on de vitamina C deseada en la composici´on final puede variar desde aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 15 %. La concentraci´ on de vitamina C de un concentrado de vitamina C para uso en un distribuidor de c´ amaras m´ ultiples depende, as´ı pues, tanto de la concentraci´on de vitamina C que se desea en la composici´on final como de la relaci´ on en la que se distribuyen el concentrado de vitamina C y la segunda composici´ on adecuada. Por ejemplo, cuando la concentraci´on deseada de vitamina C en la composici´ on final es 5 % y la relaci´ on de distribuci´ on es 1 parte de concentrado de vitamina C para 10 partes de composici´ on cosm´etica, la concentraci´on de vitamina C en la primera composici´on de acuerdo con la invenci´ on es 50 %. La relaci´on entre el concentrado de vitamina C y la segunda composici´ on puede variar desde 1:1 a 1:50 (v/v), m´ as preferiblemente de 1:2 a 1:20, siendo muy preferiblemente la relaci´on 1:4 a 1:10.

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Una forma cristalina de (parte de) de la vitamina C puede aplicarse ventajosamente en un sistema de distribuci´ on de c´ amaras m´ ultiples, dado que los cristales se solubilizan r´apidamente en la composici´on final que resulta despu´es de la mezcladura del concentrado de vitamina C con una segunda composici´on 5

ES 2 190 082 T3 adecuada, especialmente cuando el concentrado de vitamina C se diluye m´as de una vez en la segunda composici´ on.

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El sistema de distribuci´ on de c´ amaras m´ ultiples que comprende un concentrado de vitamina C de acuerdo con al invenci´on es especialmente adecuado para aplicaci´on t´ opica de vitamina C en las ´areas farmac´eutica y/o cosm´etica, por ejemplo en las ´areas de blanqueamiento de la piel, protecci´ on UV y/o mejora de la piel, v.g. contra las arrugas. Ejemplo 1

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Producci´ on de gas en diferentes composiciones de vitamina C

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Se han preparado composiciones de vitamina C (50 % p/p) que contienen diferentes aumentadores de la viscosidad (0,6 % de hidroxietilcelulosa (Natrosol, Hercules), 2,2 % de Carbopol Ultrez 10 (BF Goodrich) o 0,4 % de Magnafloc LT26 (Allied Colloids)) y formadores de quelatos (0,2 % de Dequest 2010 (Boucquillon, B´elgica) o EDTA 2 mM). Todas las composiciones conten´ıan una concentraci´ on final de bisulfito 5 mM. Las composiciones se prepararon por agitaci´ on de todos los componentes en la fase acuosa durante aproximadamente 1 hora a una temperatura de 65◦ C para disolver los aumentadores de la viscosidad.

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Durante la preparaci´ on de las muestras 3, 5, 6, 10 y 13 se form´ o un precipitado.

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Se llenaron a vac´ıo recipientes peque˜ nos con el material de muestra y se cerraron con un tap´ on. Las muestras se guardaron a la temperatura ambiente (RT) o a 40◦ C. Las muestras se inspeccionaron visualmente en cuanto a producci´ on de gas. Los resultados se presentan en la Tabla 1. Los resultados de producci´ on de gas indican claramente que el tipo de aumentador de la viscosidad as´ı como el pH tienen un efecto espectacular sobre la producci´ on de gas. Se observ´ o una producci´ on de gas excesiva indeseable durante la preparaci´ on de la muestra cuando se aplic´ o Natrosol como aumentador de la viscosidad. No se observ´ o pr´ acticamente producci´on alguna de gas o no se observ´ o producci´ on de gas en absoluto durante la preparaci´ on de la muestra cuando se utiliz´ o Carbopol Ultrez 10. Las muestras que conten´ıan Carbopol dieron tambi´en los resultados ´optimos, es decir la producci´ on m´ınima de gas, durante el almacenamiento. Qued´ o claro tambi´en por todos los experimentos que la producci´ on de gas disminu´ıa con el pH creciente.

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Sobre la base de estos experimentos, puede llegarse a la conclusi´on de que Carbopol es un aumentador adecuado de la viscosidad para minimizar la producci´ on de gas y por consiguiente la degradaci´on de la vitamina C. Para resultados o´ptimos, dicha composici´on que contiene Carbopol deber´ıa tener un valor de pH de 6,0 como m´ınimo. Adicionalmente, ser´ıa ventajoso que la composici´on pudiera prepararse sin un calentamiento significativo.

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ES 2 190 082 T3 TABLA 1 Producci´ on de gas 5

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0 → ++++ Desde producci´ on de gas nula a producci´ on de gas elevada 40

Ejemplo 2 Origen y naturaleza de la producci´ on de gas Se prepararon tres soluciones:

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1. 40 % vitamina C, pH 3,6. 2. 40 % vitamina C con inclusi´ on de 0,4 % de hidroxietilcelulosa, pH 3,6. 50

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3. 0,4 % de hidroxietilcelulosa, pH 3,6. on que pod´ıa desplazarse en el Las soluciones se guardaron a 40◦ C en envases cerrados con un pist´ caso de que se produjera producci´ on de gas durante el almacenamiento. Las muestras se inspeccionaron visualmente y en el caso de que hubiera tenido lugar producci´ on de gas, se analiz´o el gas por cromatograf´ıa de gases. El resultado fue que las soluciones 1 y 2 demostraron producci´ on de gas y la tercera no lo hizo. El an´ alisis por cromatograf´ıa de gases demostr´o que el gas producido era di´oxido de carbono (CO2 ). As´ı pues, puede llegarse a la conclusi´ on de que al menos parte de la vitamina C se ve sometida a descarboxilaci´on en las condiciones de almacenamiento aplicadas.

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ES 2 190 082 T3 Ejemplo 3 Estabilidad de las suspensiones de vitamina C con aumentadores de la viscosidad seleccionados 5

Por los datos consignados en el Ejemplo 1 puede deducirse que: - Natrosol y, en menor proporci´ on, Magnafloc estimulan la producci´ on de gas y por consiguiente la degradaci´on de la vitamina C;

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- a valores de pH neutros o incluso alcalinos la producci´ on de gas ser´a m´ınima; - el calentamiento de las muestras a 65◦ C para facilitar la disoluci´on del aumentador de la viscosidad conduce a producci´ on de gas y por consiguiente a degradaci´ on de la vitamina C;

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- las soluciones concentradas de vitamina C tienen a formar suspensiones de ascorbato (de sodio) durante el aumento del valor de pH de las soluciones hasta 7. Esto sugiere que la estabilidad m´ axima de la vitamina C puede obtenerse a valores de pH neutros, a concentraciones elevadas de vitamina C (y por consiguiente con parte de la vitamina C precipitada) y en combinaci´on con un proceso de producci´ on que implique s´olo un calentamiento m´ınimo. Se ensayaron otros aumentadores de la viscosidad en lo referente a su utilidad en composiciones concentradas de vitamina C, y se seleccionaron dos categor´ıas de productos para ensayos finales, a saber xantanos y Carbomers. Para una comparaci´ on m´ as detallada, se ensayaron un xantano (tolerante a la salmuera, Keltrol BT, Kelco) y dos Carbomers (Carbopol Ultrez 10 y ETD 2050 (ambos de BF Goodrich) con la composici´on de vitamina C siguiente. Ascorbato de sodio (Roche), micronizado hasta un tama˜ no de part´ıcula de aproximadamente 5 micr´ ometros en un molino de chorro: 56 % (p/p), glicerol puro 20 % (p/p), bisulfito de sodio 0,1 % (p/p), EDTA 0,1 % (p/p), agua desmineralizada. Para a˜ nadir Keltrol BT, el producto seco se disolvi´ o en la suspensi´on de ascorbato por homogeneizaci´on a la temperatura ambiente hasta alcanzar una concentraci´ on final de 0,25 % (p/p).

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Para a˜ nadir Carbopol Ultrez 10 o ED 2050, se prepararon soluciones stock al 2 % (p/p) en glicerol al 50 % en agua. Estos stocks se diluyeron y homogeneizaron a la temperatura ambiente para dar una concentraci´on final de 0,8 % (p/p) de Carbopol (y 20 % de glicerol). Despu´es de la adici´on del aumentador de la viscosidad, el valor de pH de la suspensi´ on se ajust´ o a pH 7,0 por adici´ on de hidr´ oxido de sodio 8N. Las viscosidades Brookfield de las tres suspensiones (25◦ C, 50 rpm, husillo SC4-29) eran aproximadamente 10.000 cP para el material Carbopol, y aprox. 6.000 cP para el material Keltrol. Formaci´ on de gas y sedimentaci´ on de part´ıcula

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Los concentrados de vitamina C estabilizados se vertieron en recipientes de vidrio, se cerraron herm´eticamente y se guardaron a 40◦ C en la oscuridad. Despu´es de 1 mes de almacenamiento, no se observ´o formaci´on alguna de gas en ninguna de las tres preparaciones. Pudo observarse una sedimentaci´ on muy ligera en el concentrado estabilizado con Carbopol Ultrez 10 y ETD 2050. El concentrado que conten´ıa Keltrol BT no exhib´ıa sedimentaci´on alguna. Estabilidad de la vitamina C

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Para medir la estabilidad de las dos suspensiones de vitamina C, se introdujeron ambos productos en peque˜ nos cilindros (contenido 4,5 ml) (“cartuchos”) hechos de polietileno de alta densidad (HDPE, espesor de pared 1 mm) y cerrados con un pist´ on de polietileno. Despu´es del cierre, no exist´ıa burbuja alguna de aire residual en el peque˜ no cilindro. Algunos de estos cilindros llenos con vitamina C se mantuvieron o a 40◦C en la oscuridad. congelados a -20◦C, y el resto se guard´ Despu´es de 6 semanas de almacenamiento, todas las muestras se analizaron en cuanto a niveles residuales de a´cido L-asc´orbico. El an´ alisis se llev´o a cabo utilizando el ensayo de a´cido L-asc´orbico de Boehringer. 8

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De acuerdo con los datos obtenidos (Tabla 2), los niveles de vitamina C despu´es de 6 semanas a 40◦C eran casi id´enticos a los niveles de vitamina C determinados en las muestras que se mantuvieron congeladas. Sorprendentemente, esta notable estabilidad puede obtenerse con un aumentador de viscosidad basado en carbohidratos tal como xantano, sin crear problemas de gas como los que se observan para el aumentador de viscosidad de Natrosol basado en carbohidratos, que se utiliz´ o en el Ejemplo 1. TABLA 2

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Ejemplo 4 30

Estabilidad de la vitamina C en envases de polietileno

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Se prepar´o un concentrado de vitamina C estabilizado con Carbopol Ultrez 10 de acuerdo con el m´etodo descrito en el Ejemplo 3. El concentrado se llen´o sin burbuja residual de aire alguna presente en los cartuchos semi-transparentes descritos tambi´ en en el Ejemplo 3 y se cerr´ o con un pist´ on de polietileno de tal manera que todo el aire entre la superficie del concentrado y el pist´ on se expuls´o. De estos concentrados reci´en preparados y envasados, 2 cartuchos se guardaron a -20◦C en la oscuridad, 2 cartuchos se guardaron a 20◦ C en la oscuridad, 2 cartuchos se guardaron a 40◦ C en la oscuridad, y 2 cartuchos se guardaron a 45◦C en la oscuridad.

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Los dos u ´ltimos cartuchos se introdujeron en un peque˜ no vaso de precipitados lleno con una crema est´andar para la piel, disponible comercialmente. Ambos cartuchos se sumergieron completamente en la crema. Despu´es de introducir los cartuchos, el vaso de precipitado se cerr´ o con una tapa herm´etica que ten´ıa un orificio de aproximadamente 1 mm de di´ ametro. Esta disposici´ on asegura el contacto directo con la atm´ osfera pero limita la evaporaci´ on de agua de la crema. El vaso de precipitados con la crema y los cartuchos se dej´o tambi´en a 40◦ C en la oscuridad. Despu´es de 16 semanas de almacenamiento a las diversas temperaturas, se juzg´ o el contenido de todos los cartuchos en t´erminos de desarrollo de color y contenido de a´cido L-asc´orbico. Los niveles de ´acido L-asc´orbico medidos con el ensayo Boehringer muestran un contenido residual de a´cido L-asc´orbico en todas las muestras mejor que el 95 % de los niveles de ´acido L-asc´orbico medidos en los cartuchos que se mantuvieron congelados durante 16 semanas. A pesar de estas diferencias m´ınimas en contenido de vitamina C, las diferencias en desarrollo de color de los concentrados envasados eran evidentes (Tabla 3).

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ES 2 190 082 T3 TABLA 3

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Este ejemplo demuestra que una exposici´on prolongada al aire da como resultado una alteraci´ on homog´enea del color del concentrado de vitamina C envasado en los cartuchos de HPDE. Cuanto mayor es la temperatura de almacenamiento, tanto m´ as fuerte es la alteraci´on del color. Esta alteraci´on del color es evidentemente el efecto de una difusi´on lenta de ox´ıgeno a trav´es de la pared de pl´astico del cartucho, dado que las concentraciones confinadas herm´eticamente en vidrio no desarrollan dicha alteraci´ on del color. Es notable que un simple inmersi´on en una crema cosm´etica es adecuada para minimizar este fen´ omeno de difusi´ on.

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Ejemplo 5 La vitamina C estabiliza la vitamina A y la vitamina E

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El experimento siguiente ilustra que el concentrado de vitamina C de acuerdo con la invenci´ on es un veh´ıculo excelente para otros compuestos sensibles a la oxidaci´on tales como vitamina E y vitamina A. Se prepar´ o un concentrado de vitamina C por mezcla de los ingredientes siguientes: agua desmineralizada 200 gramos, glicerol 188 gramos, ascorbato de sodio (Roche) 152 gramos, Dequest 2010 (Monsanto) 1,3 ml, Keltrol BT (Kelco) 3,6 gramos y bisulfito de sodio 0,6 gramos. Despu´es de la disoluci´on completa de los diversos ingredientes, de a˜ nadi´ o m´as agua a fin de obtener un peso final de 600 gramos. Por adici´ on de hidr´ oxido de sodio 8N, el valor de pH de la soluci´ on se ajust´ o a 7,0. Debido a la concentraci´on relativamente baja de ascorbato de sodio, se obtuvo una soluci´ on clara.

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Como material de referencia, se prepar´ o exactamente la misma formulaci´on pero sin adici´ on de ascorbato de sodio, en lugar del cual se a˜ nadi´ o agua desmineralizada. Dado que tanto la vitamina E como la vitamina A son compuestos solubles en aceite, tienen que a˜ nadirse emulsionantes para incorporar homog´eneamente estas vitaminas en el concentrado acuoso de vitamina C y el l´ıquido de referencia sin vitamina C. A este fin, 100 gramos de vitamina E (DL-α-tocoferol, BASF) y 100 gramos de vitamina A (Retinol 10 CM, que contiene aprox. 10 % de ingrediente activo, BASF) se homogeneizaron cada uno con 3 gramos 10

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de Tween 80 (ICI) y 2 gramos de monoestearato de sorbit´an (ICI) a una temperatura de 45◦ C y bajo una atm´ osfera protectora de nitr´ ogeno gaseoso, y utilizando luz amarilla. Se a˜ nadieron luego 20 gramos de cada mezcla emulsionante-aceite a 180 gramos del concentrado acuoso de vitamina C as´ı como al l´ıquido de referencia calentado tambi´en a 45◦ C y se homogeneiz´o concienzudamente. Las emulsiones de aceite en agua resultantes se introdujeron en tubos de reactivos (cerrados pero con un espacio de cabeza considerable) o en los cartuchos de HDPE descritos en el Ejemplo 3 (cerrados y sin espacio de cabeza alguno). Los tubos de reactivos y los cartuchos se incubaron como tales a 22◦C o a 40◦C en la oscuridad. Despu´es de 0, 7 y 18 d´ıas de incubaci´ on, se midieron los niveles de vitamina E y vitamina A en las diversas muestras. Los an´alisis se llevaron a cabo por HPLC esencialmente como ha sido descrito por E. Doughty et al. (Food Beverage, Vol. 15, No. 5, p 4 y 5). Las emulsiones se retiraron de sus envases y se homogeneizaron antes de la toma de muestras. Se introdujeron muestras de aprox. 400 mg en un matraz aforado de 100 ml, despu´es de lo cual se a˜ nadieron 10 ml de agua. Subsiguientemente, se a˜ nadieron 60 ml de etanol y la mezcla se homogeneiz´ o cuidadosamente durante 10 minutos. Por u ´ltimo, se a˜ nadi´ o etanol hasta 100 ml, seguido por otra homogeneizaci´on. Parte del l´ıquido resultante se centrifug´ o y una muestra del l´ıquido claro se inyect´o en el equipo de HPLC con una columna Beckman Ultrasphere ODS, de 5 micr´ ometros, y 250 x 4,6 mm. El eluyente utilizado era una mezcla metanol-agua (98 + 2 v/v); la vitamina A se detect´o a 325 nm y la vitamina E a 290 nm de longitud de onda. La concentraci´ on a t = 0 d´ıas representa valores medios de todas las muestras, las otras cifras representan los valores medios de todas las muestras, y las otras cifras representan el valor medio de dos medidas. Los datos presentados en la Tabla 4 indican claramente los efectos protectores del concentrado de vitamina C en el cartucho sobre la degradaci´ on tanto de la vitamina E como de la vitamina A. TABLA 4

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ES 2 190 082 T3 Ejemplo 6 Preparaci´ on de una emulsi´ on que contiene vitamina C y otro agente de aclaramiento de la piel 5

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Se reivindica que el ´acido linoleico o compuestos poliinsaturados afines tales como ´esteres de ´acido linoleico o triglic´eridos que incorporan niveles elevados de ´estos ´acidos grasos poliinsaturados, como la vitamina C, son eficaces en el aclaramiento de la piel (v´ease, por ejemplo, JO5194176). Por consiguiente, ser´ıa ventajoso combinar el concentrado de vitamina C de acuerdo con la invenci´on con estos compuestos insaturados de aclaramiento de la piel. No s´ olo debido al efecto estabilizador ejercido por la vitamina C (v´ease, por ejemplo, J. Biol. Chem. 259, 4177-4182, 1984) sino tambi´en por el efecto sin´ergico de aclaramiento de la piel. Para incorporar a´cido linoleico en el concentrado de vitamina C, tiene que prepararse una emulsi´ on estable de aceite en agua. Para minimizar cualesquiera reacciones de oxidaci´on, dicha emulsi´ on se prepara preferiblemente sin calentamiento excesivo. Aumentadores adecuados de la viscosidad se seleccionan preferiblemente del grupo de ´esteres de poliglicerilo de a´cidos grasos, tales como la gama de productos Decaglyn de Nikkol (Jap´on). Para preparar una emulsi´ on estable, se prepar´ o en primer lugar una soluci´on que conten´ıa 25 % (p/p) de ascorbato de sodio, de pH 7. Esta soluci´ on se mezcl´o a la temperatura ambiente con el xantano Keltrol BT para alcanzar una concentraci´ on final de 0,7 % de xantano. A continuaci´ on, se mezclaron 5 ml de monoisoestearato de decaglicerilo (Decaglyn 1-IS) con 20 ml de a´cido ´ltimo, se mezclaron en´ergicamente 80 ml de la linoleico (Edenor SB, Henkel, Alemania) a 35◦ C. Por u soluci´on ascorbato de sodio/Keltrol y 20 ml de la mezcla a´cido linoleico/emulsionante, durante unos on estable. cuantos minutos a 35◦C. Esto produjo una emulsi´

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ES 2 190 082 T3 REIVINDICACIONES

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1. Una composici´on acuosa de vitamina C que tiene un pH de al menos aproximadamente 5 y que comprende vitamina C y un agente aumentador de la viscosidad que se selecciona del grupo de pol´ımeros de ´acido acr´ılico y metacr´ılico y xantanos. 2. La composici´ on de la reivindicaci´ on 1, en la cual el agente aumentador de la viscosidad es un xantano, preferiblemente un xantano tolerante de la salmuera.

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3. La composici´ on de la reivindicaci´ on 1, en la cual la vitamina C tiene una concentraci´ on de 5 a 70 % (p/p), preferiblemente 10 a 60 %, m´ as preferiblemente 20 a 60 % de vitamina C. 4. La composici´ on de la reivindicaci´ on 1 que comprende adicionalmente un segundo ingrediente activo.

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5. La composici´ on de la reivindicaci´ on 4, en la cual el segundo ingrediente activo es vitamina E o vitamina A o una mezcla de las mismas. 6. La composici´ on de la reivindicaci´ on 4, en la cual el segundo ingrediente activo es a´cido linoleico o un ´ester del mismo, o un triglic´erido que incorpora el mismo. 7. La composici´ on de la reivindicaci´ on 5 o´ 6, que es una emulsi´ on.

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8. Un proceso para la preparaci´ on de la composici´on de vitamina C de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende el uso de una temperatura moderada, preferiblemente una temperatura as preferiblemente una temperatura que no excede de 40◦C. que no excede de 50◦ C, m´ 9. Un sistema de distribuci´ on con compartimientos m´ ultiples que contiene por separado una primera y una segunda composici´ on acuosa,

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siendo dicha primera composici´ on una composici´ on de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, generando dicha primera y dicha segunda composici´ on una composici´ on final cuando se mezclan en el momento de su distribuci´ on, y siendo dicha composici´on final eficaz para aplicar vitamina C en una forma diluida. 10. El sistema de distribuci´ on de la reivindicaci´ on 9, en el cual la primera composici´ on se envasa en condiciones anaerobias.

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11. El sistema de distribuci´ on de la reivindicaci´ on 9, en el cual el compartimiento que contiene la primera composici´on est´a sumergido en la segunda composici´on. 12. Uso del sistema de distribuci´ on de una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11 para preparaci´on de una composici´on para la aplicaci´ on t´ opica de vitamina C.

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NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposici´ on Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicaci´ on del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a Espa˜ na y solicitadas antes del 7-10-1992, no producir´ an ning´ un efecto en Espa˜ na en la medida en que confieran protecci´ on a productos qu´ımicos y farmac´euticos como tales. Esta informaci´ on no prejuzga que la patente est´e o no inclu´ıda en la mencionada reserva.

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