UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ODONTOLOGÍA “EFECTO INHIBIDOR IN VITRO DEL ACIDO ACÉTICO AL 5% EN COMPARACIÓN AL CEPILLO COLGATE 360° ANTIBACTERIAL® FRENTE A MICROORGANISMOS Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. LIMA 2015-2016”

TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO DE CIRUJANO DENTISTA Presentado por:

Bachiller: DIAZ CAMPOSANO, GIOVANNA LISETT. LIMA – PERÚ

2016

Dedicatoria

A Dios, por permitirme haber podido llegar a este momento tan especial en mi vida. A mi madre, por ser la persona que me ha acompañado y brindado su apoyo infinito. A mi padre quien con sus consejos, ha sabido guiarme para culminar mi carrera profesional. A

mis

hermanos,

por

ser

mis

mejores amigos y mi más grande apoyo. Y a mis docentes de la Universidad, por sus enseñanzas y tiempo para lograr ser una buena profesional.

Agradecimiento

A mi asesora, la Mg. CD. María Paola Dalby Morla, por la paciencia en este tiempo de investigación, por la

amistad

brindada

y

por

su

incondicional apoyo. A mis lindas amistades que siempre estuvieron alentándome a seguir, porque aunque sea difícil el camino, no me pienso rendir.

Asesor de tesis

Mg. CD. María Paola, Dalby Morla.

Jurado

Presidente

Mg CD. Carlos Michell, Gálvez Ramírez.

Secretaria

Mg CD. Rosa Isabel, Mezarina García.

Vocal

CD. Cesarina Elisa, Gómez Coronado.

ÍNDICE

CAPITULO I: EL PROBLEMA .................................................................................. 13 1.1.

Planteamiento del problema ......................................................................... 13

1.2.

Formulación del problema ........................................................................... 15

1.3.

Justificación.................................................................................................. 15

1.4.

Objetivo ........................................................................................................ 16

1.4.1 General ...................................................................................................... 16 1.4.2. Específicos ............................................................................................... 16

CAPITULO II: MARCO TEÓRICO ............................................................................ 18 2.1. Antecedentes .................................................................................................. 18 2.2. Base teórica .................................................................................................... 28 2.3. Terminología básica ........................................................................................ 51 2.4. Hipótesis ......................................................................................................... 51 2.5. Variables ......................................................................................................... 52

CAPITULO III: DISEÑO Y MÉTODO ........................................................................ 54 3.1. Tipo y nivel de investigación ........................................................................... 54 3.2. Población y muestra ........................................................................................ 54 3.3. Técnicas e instrumentos de recolección de datos........................................... 54 3.5. Plan de procesamiento y análisis de datos ..................................................... 58 3.6. Aspectos éticos ............................................................................................... 58

CAPITULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIÓN......................................................... 59 4.1. Resultados ...................................................................................................... 59 4.2. Discusión ........................................................................................................ 69

CAPITULO V: CONCUSIONES Y RECOMENDACIONES ...................................... 72 5.1. Conclusiones................................................................................................... 72 5.2. Recomendaciones .......................................................................................... 73

REFERENCIAS ......................................................................................................... 74

ANEXOS ................................................................................................................... 82

ÍNDICE DE TABLAS

Pág.

Tabla N° 1: Efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% frente a microorganismos Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. 59

Tabla N° 2: Efecto inhibidor in vitro del cepillo Colgate 360° antibacterial® frente a microorganismos Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. 61

Tabla N° 3: Comparación del efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® frente al microorganismo Streptococcus mutans. 63

Tabla N° 4: Comparación del efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® frente al microorganismo Staphylococcus aureus. 65

Tabla N° 5: Comparación del efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® frente al microorganismo Cándida albicans. 67

ÍNDICE DE GRÁFICOS

Pág.

Gráfico N° 1: Efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% frente a microorganismos Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. 60

Gráfico N° 2: Efecto inhibidor in vitro del cepillo Colgate 360° antibacterial® frente a microorganismos Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. 62

Gráfico N° 3: Comparación del efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® frente al microorganismo Streptococcus mutans. 64

Gráfico N° 4: Comparación del efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® frente al microorganismo Staphylococcus aureus. 66

Gráfico N° 5: Comparación del efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® frente al microorganismo Cándida albicans. 68

RESUMEN

El objetivo de la presente investigación fue evaluar el efecto inhibidor in vitro del ácido acético al 5% en comparación al cepillo Colgate 360° antibacterial ® frente a microorganismos Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. Se utilizaron 45 cabezas de cepillos dentales que fueron inoculadas con cepas de los 3 microorganismos por separado; estas cabezas fueron divididas en tres grupos: 15 cabezas de cepillos convencionales tratadas con ácido acético al 5% por 10 minutos, 15 cabezas de cepillos Colgate 360° antibacterial® que contenían propiedades antibacterianas y 15 cepillos que fueron los controles que se trataron con solución salina. Posteriormente se realizó los recuentos de UFC/ml de los microorganismos residuales y se calculó el porcentaje de inhibición. Los datos se procesaron con la prueba Anova que mostró que existe diferencia estadísticamente significativa (p < 0,05). Los resultados mostraron que frente a Cándida albicans, el ácido acético al 5% mostró mejor efecto inhibidor que

el cepillo

Colgate

360° antibacterial®

(99.99%), al igual que

el

microorganismo Staphylococcus aureus donde el ácido acético al 5% obtuvo mejor efecto inhibidor a diferencia del cepillo Colgate 360° antibacterial® (76.21%). Para Streptococcus mutans, el mejor efecto inhibidor lo obtuvo el cepillo Colgate 360° antibacterial® (99.87%). Se concluyó que el ácido acético al 5% y el cepillo Colgate 360° antibacterial® poseen eficacia inhibitoria frente a los microorganismos Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. Palabras clave: Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Cándida albicans, ácido acético, cepillo antibacterial, efecto inhibidor.

SUMMARY

The aim of the present investigation was evaluated the inhibiting in vitro effect of the acetic acid to 5 % compared to the brush Colgate 360° antibacterial® against microorganisms Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus and Candida albicans. 45 heads of toothbrushes that were inoculated with strains of the 3 microorganisms were used separately; these heads were divided into three groups: 15 heads of conventional brushes treated with acetic acid at 5% for 10 minutes, 15 heads of brushes Colgate 360 ° antibacterial® containing antibacterial properties and 15 brushes were the controls treated with saline solution. Subsequently counts CFU / ml of residual microorganisms was performed and percentage inhibition was calculated. The data were processed with the Anova test showed that there is statistically significant difference (p 0,05); mientras que para C. albicans, el mejor efecto antimicrobiano lo obtuvo el ácido acético 5% (PI: 99,9%). Conclusión el vinagre blanco de uso casero y el cepillo Colgate 360° antibacterial® eliminan microorganismos que colonizan

cabezas

de

cepillos

dentales

como

Streptococcus

mutans,

Staphylococcus aureus y Cándida albicans, convirtiéndose en alternativas en diversas poblaciones para mantener el cepillo dental libre de microorganismos (8).

Martínez C et al. (2010) realizaron un estudio en Colombia, para determinar la actividad antimicrobiana de tres soluciones de uso común: hipoclorito de sodio al 5,25%, Clorox®, peróxido de hidrógeno al 4%, JGB® y ácido acético al 5% la Constancia®. Materiales y métodos: se realizó un estudio experimental In vitro. Se aislaron cepas de microorganismos que colonizaron 19 cabezas de cepillos dentales nuevos (Twister Fresh Colgate®) que habían sido usados por el mismo número de individuos. Para el aislamiento de los microorganismos, las muestras fueron sembradas en diversos agares. Para la prueba de desinfección se seleccionaron los microorganismos Cándida albicans, Klebsiella oxytoca, Staphylococcus epidermidis y Streptococcus mutans (ATCC 25175).

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La actividad antimicrobiana de las soluciones desinfectantes se evaluó en diversos tiempos por el método de contacto directo, como control de crecimiento se utilizó solución salina estéril al 0,85%. Los resultados fueron expresados como crecimiento positivo o negativo de acuerdo a la presencia o ausencia de turbidez. Se calcularon medidas de resumen para los datos cualitativos y para los cuantitativos, medidas de dispersión y tendencia central. Se usó la prueba t de Student y Chi2 con un nivel de significancia α = 0,05. Resultados: La prueba de poder desinfectante permitió establecer que todas las soluciones evaluadas fueron efectivas en la inhibición del crecimiento de Cándida albicans, Klebsiella oxytoca, Staphylococcus epidermidis y Streptococcus mutans (ATCC 25175) luego de 10, 20 y 30 minutos de contacto directo. Conclusiones: Las soluciones utilizadas comúnmente como desinfectantes en el hogar fueron efectivas en la eliminación de microorganismos aislados de cepillos dentales; el ácido acético al 5% se consideró como un excelente candidato para ser utilizado como agente químico en protocolos de desinfección de cepillos dentales debido a su fácil aplicación, disponibilidad, su capacidad para inhibir microorganismos como Staphylococcus

epidermidis,

Klebsiella

oxytoca,

Cándida

albicans,

y

Streptococcus mutans, sus características químicas y biológicas y su bajo costo (12).

Komiyama E et al. (2010) realizaron un estudio en Brasil, donde se evaluó los métodos alternativos para la desinfección de los cepillos de dientes. Doscientos cepillos de dientes de dimensiones normalizadas y cerdas fueron incluidos en el

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estudio. Los cepillos de dientes se dividieron en 20 grupos experimentales (n = 10), de acuerdo con microorganismo considerado y el agente químico utilizado. Los cepillos de dientes fueron contaminados in vitro por suspensiones estandarizadas

de

Streptococcus

mutans,

Streptococcus

pyogenes,

Staphylococcus aureus o Cándida albicans. Los siguientes desinfectantes se probaron: 0,12% de gluconato de clorhexidina, vinagre blanco 50%, una solución de dentífrico que contiene triclosan y una solución a base de perborato de sodio. El método de desinfección fue la inmersión en el desinfectante durante 10 min. Después del procedimiento de desinfección, se evaluó el número de células microbianas restantes. Los valores de UFC / cepillo de dientes de cada grupo de microorganismo después de la desinfección se compararon mediante ANOVA de Kruskal-Wallis y la prueba de Dunn para comparaciones múltiples (5%). La solución de digluconato de clorhexidina fue el desinfectante más eficaz. La solución de dentífrico a base de triclosan promovió una reducción significativa de los recuentos de todos los microorganismos en relación con el grupo control. En cuanto a la desinfección con vinagre 50%, se observó una reducción significativa para todos los microorganismos, a excepción de C. albicans. La solución de perborato de sodio fue la menos eficaz contra los microorganismos ensayados. Las soluciones basadas en dentífricos que contienen triclosán puede considerarse eficaz, no tóxico, rentables y una alternativa de fácil aplicación para la desinfección de los cepillos de dientes. La solución de vinagre reduce la presencia de S. aureus, S. mutans y S. pyogenes en cepillos de dientes (13).

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Al A et al. (2010) realizaron un estudio en Alemania, donde se realizaron comparaciones con 62 cabezas de cepillo de dientes antimicrobianos y 62 cabezas de cepillo de dientes convencionales; que fueron contaminados por diferentes

suspensiones

microbianas

estandarizadas.

Los

siguientes

microorganismos se investigaron: Streptococcus oralis, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Actinomyces viscosus, Lactobacillus casei y Cándida albicans. Para el cultivo de los microorganismos, así como para la posterior determinación de las unidades formadoras de colonias (UFC), se utilizaron placas de agar Columbia sangre o agar Sabouraud. El ciclo de cepillado dental diario fue imitado por el lavado de cepillos con un volumen total de 200 ml de agua estéril para reducir el número de microorganismos de los cepillos .Después se colocan en posición vertical para permitir el secado durante la noche. Los recuentos de colonias se realizaron inicialmente (tiempo 0) y de nuevo a las 20 horas. El líquido de lavado también se examinó con el fin de determinar la disminución de microorganismos debido a este paso. Todos los experimentos se realizaron dos veces, se calcularon las medias y fueron evaluados estadísticamente. Resultados: no hubo una reducción significativa en las UFC por los cepillos de dientes antimicrobianos (P> 0,05) para todos los microorganismos ensayados. Por el contrario, los recuentos de colonias de S. sanguis (P = 0,02) y C. albicans (P = 0,01) fueron significativamente mayores en los cepillos de dientes antimicrobianos en comparación con los controles. Los cepillos antimicrobianos no mejoraron los efectos contra las bacterias residuales presentes en la cabeza del cepillo (14).

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Ryssel H et al. (2009) realizaron un estudio en Alemania, con el objetivo de demostrar la idoneidad de ácido acético en baja concentración (3%), como agente antiséptico local, especialmente para su uso en procedimientos de salvamento en las infecciones causadas por organismos tales como Proteus vulgaris, Acinetobacter baumannii o Pseudomonas aeruginosa. Este estudio fue diseñado para comparar el efecto antimicrobiano in vitro de ácido acético con los de antisépticos locales comunes tales como yodopovidona 11% (Betaisodona ®), polihexanida 0,04% (Lavasept ®), mafenida 5% y gluconato de clorhexidina al 1,5% de cetrimida 15% (Hibicet ®). Antiguos estudios sugieren el efecto bactericida de ácido acético, pero estos datos son muy heterogéneos; por lo tanto, un estándar en el estudio in vitro se llevó a cabo. Para cubrir el espectro bacteriano típico de una unidad de quemados, las siguientes cepas bacterianas Gram-negativas y Gram-positivas fueron probadas: Escherichia coli, P. vulgaris, P. aeruginosa, A. baumannii, Enterococcus faecalis, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus resistente a la meticilina aureus (MRSA) y Streptococcus grupo beta-hemolíticos A y B. Las pruebas mostraron excelente efecto bactericida de ácido acético, en particular con bacterias Gram-negativas patógenas tales como P. vulgaris, P. aeruginosa y A. baumannii. El espectro microbiológico de ácido acético es amplio, incluso cuando se probó en una baja concentración de 3%. En comparación con nuestras soluciones antisépticas actualmente utilizadas, se mostró similitud en algunas bacterias, incluso mejores propiedades bactericidas. Se puede concluir que el ácido acético en una concentración de 3% tiene un excelente efecto bactericida y, por lo tanto, parece ser adecuado como un agente antiséptico local, pero otros estudios clínicos son necesarios (15).

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Efstratiou M et al. (2007) realizaron un estudio en Grecia, con el objetivo de examinar la contaminación y la tasa de supervivencia de las especies periodontopáticas y cariogénicos en nuevos cepillos de dientes con propiedades antibacterianas (cerdas recubiertas con triclosán), después de un solo uso en pacientes con periodontitis. Se evaluó el efecto de descontaminación de la utilización de pasta de dientes. Diez pacientes, que consultaron al Departamento de Periodoncia, para el tratamiento de la periodontitis crónica, fueron seleccionados. En cada paciente se utilizaron cuatro cepillos de dientes diferentes. Dos cuadrantes, seleccionados al azar, fueron cada cepillado utilizando un cepillo de dientes antibacterial diferente. En uno de estos dos cuadrantes se utilizó pasta de dientes. Lo mismo ocurrió con los cuadrantes restantes, solamente con cepillos de dientes regulares. Después del cepillado, los cepillos de dientes se aclararon y se almacenan en la temperatura ambiente y un ambiente seco. Después de 0, 4 y 24 horas, cuatro mechones, de cada cepillo de dientes, se cortaron y se procesaron para técnicas de cultivo selectivo y no selectivo, seguida de la identificación y cuantificación de todas las especies encontradas. Inmediatamente después de cepillarse, los cepillos de dientes albergaban un número significativo de microorganismos, sin diferencias estadísticamente significativas entre los dos tipos de cepillos (regulares y antibacterianas). La reducción de microorganismos de 0 a 4 h después del cepillado fue estadísticamente significativa (p